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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：王红宁周生黄勇柳萍陈萍李晓英唐梦君潘盛白天四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室

本研究成功构建了禽传染性支气管炎病毒中国肾型分离株S1、M、N基因的真核表达质粒,并将真核表达质粒经肌肉注射途径免疫雏鸡,免疫后用间接ELISA检测特异性抗体。结果表明IBV S1、M、N基因真核表达质粒单独或混合免疫均可诱导鸡特异性... 详细信息

本研究成功构建了禽传染性支气管炎病毒中国肾型分离株S1、M、N基因的真核表达质粒,并将真核表达质粒经肌肉注射途径免疫雏鸡,免疫后用间接ELISA检测特异性抗体。结果表明IBV S1、M、N基因真核表达质粒单独或混合免疫均可诱导鸡特异性抗体产生。S1、M、N三基因质粒混合免疫比单基因质粒的免疫效果好,三基因质粒混合免疫攻毒保护率高于单基因质粒免疫。

关键词：禽传染性支气管炎病毒真核表达质粒间接ELISA检测免疫原性

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IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

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四川省畜牧兽医学会2010年学术年会

作者：郭自成王红宁阳泰汪雪李玉玲管中斌四川大学生命科学学院，动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室，生物资源与生态环境教育部重点实验室，“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台四川，成都 610064

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotein基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应，本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvAxl—N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫，并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫。测... 详细信息

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotein基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应，本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvAxl—N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫，并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫。测定特异性IgG抗体，血清中和抗体，CD4+，cD8+T细胞含量为免疫指标，并进行攻毒实验。结果表明，采用DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫，在加强免疫后4周CD4+、CD8+T细胞含量显著升高(P<0．05)，特异性IgG抗体，血清中和抗体与灭活疫苗组无显著差异(P>0．05)。用剂量为103EID∞的IBV M4l株病毒攻毒，保护率达86．7％，高于单独免疫灭活疫苗组(80％)和单独免疫DNA疫苗组(66．7％)。可见，采用IBV N基因DNA疫苗首免，灭活疫苗加强免疫具免疫增强效果。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫

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鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究

鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研...

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四川省畜牧兽医学会2010年学术年会

作者：张毅王红宁樊汶樵张安云曹海鹏郭自成丁梦蝶四川农业大学动物科技学院动物遗传育种研究所四川，雅安 625014

根据Genbank中的鸡IL—1β和IL—16序列设计两对引物，采用RT—PCR的方法从山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL—1β和IL-16基因，与真核表达质粒pcDNA3．1(+)连接构建了pDNAIL—1B和pDNAIL—16，为了研究两种重组质粒对lBV DNA疫... 详细信息

根据Genbank中的鸡IL—1β和IL—16序列设计两对引物，采用RT—PCR的方法从山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL—1β和IL-16基因，与真核表达质粒pcDNA3．1(+)连接构建了pDNAIL—1B和pDNAIL—16，为了研究两种重组质粒对lBV DNA疫苗的免疫增强效果，与IBV DNA联合免疫雏鸡并进行攻毒试验。结果表明，pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(P<0．05)，增强IBV DNA疫苗对同型强毒的攻击保护，与pDNAIL-16相比，pDNAIL-1β能够更持久的提高DNA疫苗的抗体水平，但攻毒保护率仍略低于常规的灭活疫苗和弱毒疫苗。由此可见，鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。

关键词：禽传染性支气管炎病毒鸡IL-1β 鸡IL-16 免疫增强作用

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羊驼禽传染性支气管炎样病毒的分子流行病学分析

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中国兽医杂志 2008年第1期44卷 14-15页

作者：张俊珍董常生范瑞文山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

传染性支气管炎病毒为新增病毒目一套式目冠状病毒科的成员,基因组为不分节段的单链(+)RNA,全长为27.6kb。在感染细胞内产生6种亚基因组mRNA,其中mRNA2、mRNA4和mRNA6,这些mRNA具有相同的3'末端,形成套式结构,分别编码IBV3个主要的... 详细信息

传染性支气管炎病毒为新增病毒目一套式目冠状病毒科的成员,基因组为不分节段的单链(+)RNA,全长为27.6kb。在感染细胞内产生6种亚基因组mRNA,其中mRNA2、mRNA4和mRNA6,这些mRNA具有相同的3'末端,形成套式结构,分别编码IBV3个主要的结构蛋白:纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)。禽传染性支气管炎病毒是由传染性支气管炎病毒引起的一种急性高度接触性传染病,该病毒的特点是变异频繁,血清型复杂,所致疾病的临床表现差异很大。[第一段]

关键词：禽传染性支气管炎病毒冠状病毒科流行病学分析分子羊驼接触性传染病 mRNA 结构蛋白

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因与猪IgGFc基因在HeLa细胞中的融合表达

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中国兽医学报 2008年第10期28卷 1145-1149页

作者：张明富陈汉阳彭博佟铁俦陈焕春郭爱珍华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学湖北省预防兽医学重点实验室湖北武汉430070

根据GenBank中发表的猪的IgG Fc段基因及鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模板扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41S基因的质粒为模板扩增出IBVS1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV... 详细信息

根据GenBank中发表的猪的IgG Fc段基因及鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模板扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41S基因的质粒为模板扩增出IBVS1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5kb,IgG Fc大小为1kb,序列正确。将IBVS1与IgG Fc基因串连,插入含有人组织型纤维蛋白溶酶原激活物分泌信号肽序列(tPA)的真核表达载体pcD-NA3.1-tPA上,在HeLa细胞上进行瞬时融合表达。经免疫光和斑点杂交检测,表达产物同时具有IBV S1蛋白和IgG Fc活性。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 S1基因猪IgG Fc基因真核表达融合表达

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禽传染性支气管炎病毒S基因的研究进展

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动物医学进展 2004年第5期25卷 15-17页

作者：刘美丽张兴晓杨灵芝王秀云山东滨州博莱威生物技术研究所山东滨州256618

作为严重危害养禽业的禽传染性支气管炎病毒(IBV),正受到兽医界的普遍关注。文章就人们在分子生物学领域对IBV S基因的结构特征、免疫活性、与病毒血清的关系、基因工程疫苗等方面的研究概况作了综述,并且根据病毒与热休克蛋白(HSPS)之... 详细信息

作为严重危害养禽业的禽传染性支气管炎病毒(IBV),正受到兽医界的普遍关注。文章就人们在分子生物学领域对IBV S基因的结构特征、免疫活性、与病毒血清的关系、基因工程疫苗等方面的研究概况作了综述,并且根据病毒与热休克蛋白(HSPS)之阃相互作用,设想使IBV的S基因与HSPS结合,开发出一种新型高效的IBV疫苗。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 S基因热休克蛋白结构免疫学活性血清型基因工程疫苗热休克蛋白

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禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组的克隆与序列测定

禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组的克隆与序列测定

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：周生王红宁胡慧琼黄勇柳萍四川农业大学动物科技学院(四川雅安)

根据国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列,经多重比较后设计20对引物,用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB株全基因组进行了分段扩增,并将扩增产物分别插入到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109.用PCR方法鉴定带有... 详细信息

根据国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列,经多重比较后设计20对引物,用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组进行了分段扩增,并将扩增产物分别插入到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109.用PCR方法鉴定带有阳性重组质粒的菌落,并对阳性重组质粒中插入的片段进行序列测定.测序结果表明:禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组被成功的分段克隆到pMD18-T载体中;分离株SAIB<,K>株基因组序列全长27,395bp,与国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列Beaudette(NC001451)、BJ(AY319651)、LX4(AY217750)进行同源性比较分析,同源率在85﹪-90﹪之间.

关键词：禽传染性支气管炎病毒 SAIB 全基因组克隆 PCR方法序列测定全基因组序列

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禽传染性支气管炎病毒分离株S1、M、N基因的克隆与序列分析

禽传染性支气管炎病毒分离株S1、M、N基因的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：周生王红宁胡慧琼黄勇李春柳萍四川农业大学动物科技学院(四川雅安)

本研究对8株禽传染性支气管炎病毒(IBV)分离株SAIB、SAIB、SAIB、SAIB、SAIB、SAIB、SAIB和SAIB用RT-PCR进行了S1、M、N基因的克隆及序列分析.根据国际基因库(GenBank)已公布的IBV基因序列设计三对引物,分别对IBV分离株的S1、M、N基因用... 详细信息

本研究对8株禽传染性支气管炎病毒(IBV)分离株SAIB<,4>、SAIB<,6>、SAIB<,9>、SAIB<,14>、SAIB<,20>、SAIB<,WJ>、SAIB<,RC>和SAIB<,RCH>用RT-PCR进行了S1、M、N基因的克隆及序列分析.根据国际基因库(GenBank)已公布的IBV基因序列设计三对引物,分别对IBV分离株的S1、M、N基因用RT-PCR进行了扩增.SAIB<,4>、SAIB<,14>和SAIB<,WJ>获得了长约1.72kb的S1基因扩增产物;SAIB<,4>、SAIB<,6>、SAIB<,9>、SAIB<,14>、SAIB<,20>、SAIB<,WJ>、SAIBRC和SAIBRCH获得了长约0.7kb的M基因扩增产物;SAIB<,14>、SAIB<,20>、SAIB<,WJ>获得了长约1.2kb的N基因扩增产物.将S1、M、N基因扩增产物分别插入到pUC18克隆载体中,转化大肠杆菌DH5α,并对克隆的基因片段进行序列测定.将本研究获得的基因序列在国际基因库GenBank上登录,3条S1基因的注册号分别为AF397527-AF397529,8条M基因的注册号分别为AY302742-AY302749,3条N基因的注册号分别为AY167729-AY167731.

关键词：禽传染性支气管炎病毒 S1基因 M基因 N基因克隆测序

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禽传染性支气管炎病毒分离株SAIBK株全基因组的克隆与序列测定

禽传染性支气管炎病毒分离株SAIBK株全基因组的克隆与序列测定

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中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：周生王红宁胡慧琼黄勇柳萍四川农业大学动物科技学院四川农业大学动物科技学院四川农业大学动物科技学院四川农业大学动物科技学院四川农业大学动物科技学院

根据国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列,经多重比较后设计20对引物,用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒分离株SAIBK株全基因组进行了分段扩增,并将扩增产物分别插入到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109。用PCR方法鉴定带... 详细信息

根据国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列,经多重比较后设计20对引物,用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒分离株SAIBK株全基因组进行了分段扩增,并将扩增产物分别插入到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109。用PCR方法鉴定带有阳性重组质粒的菌落,并对阳性重组质粒中插入的片段进行序列测定。测序结果表明:禽传染性支气管炎病毒分离株SAIBK株全基因组被成功的分段克隆到pMD18-T载体中;分离株SAIBK株基因组序列全长27,395bp,与国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列Beaudette(NC001451)、BJ(AY319651)、LX4(AY217750)进行同源性比较分析,同源率在85%-90%之间。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 SAIBK 全基因组克隆测序

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IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：郭自成王红宁阳泰高荣汪雪李玉玲管中斌四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotetin基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应,本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvax1-N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫,并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫.测定... 详细信息

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotetin基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应,本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvax1-N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫,并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫.测定特异性IgG抗体,血清中和抗体,CD4+,CD8+T细胞含量为免疫指标,并进行攻毒实验.结果表明,采用DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫,在加强免疫后4周CD4+、CD8+T细胞含量显著升高(P<0.05),特异性IgG抗体,血清中和抗体与灭活疫苗组无显著差异(P>0.05).用剂量为103EID50的IBV M41株病毒攻毒,保护率达86.7%,高于单独免疫灭活疫苗组(80%)和单独免疫DNA疫苗组(66.7%).可见,采用IBV N基因DNA疫苗首免,灭活疫苗加强免疫具免疫增强效果.

关键词：禽传染性支气管炎病毒 DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫

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