检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：付雪娇长江大学

学位级别：硕士

传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)属于冠状病毒科(Coronaviridae),γ冠状病毒属,是一种具囊膜的正单链RNA病毒。其引起的鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)给家禽养殖业造成了巨大的经济损失。对该病的... 详细信息

传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)属于冠状病毒科(Coronaviridae),γ冠状病毒属,是一种具囊膜的正单链RNA病毒。其引起的鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)给家禽养殖业造成了巨大的经济损失。对该病的防控至今尚无防效显著的化学药物,在生产上主要依赖于疫苗的使用。但不同基因型或血清型毒株的存在和新变异毒株的不断出现,会导致免疫效果差甚至完全无效,因此,探寻经济、安全有效的防控方法尤为重要。许多药用植物被证明具有抗病毒作用,众多中药配方已被用于许多病毒病的预防和防治,但对其抗病毒的机理研究甚少。本试验通过对10种植物的抗IBV活性进行检测,筛选出3种抗病毒作用较强的植物,利用现代分子生物学技术研究并初步揭示了海金沙提取物抗IBV的分子机理。研究结果为进一步阐明海金沙的抗病毒机理打下了基础,也为开发利用药用植物来有效防控病毒病提供了理论依据。实验结果总结如下:1.对海金沙等10中植物进行了抗IBV活性检测,发现丹皮、千里光、龙葵、皂荚和海金沙植物提取物在不同程度上均能抑制IBV的增殖,其中海金沙、蛇麻子和皂荚植物的效果更为显著;***-PCR检测结果显示在海金沙甲醇提取物处理过的H1299细胞中,IBV RNA的合成量明显减少;Western blot检测结果表明在海金沙甲醇提取物处理过的H1299细胞中,IBV N蛋白的表达量也明显减少。这些结果表明,海金沙甲醇提取物可诱导H1299细胞产生抗IBV的作用;3.用荧光定量RT-PCR和Western blot的方法分析海金沙提取物对细胞因子等的调控作用,结果表明:在IBV感染海金沙甲醇提取物处理过的H1299细胞中,β干扰素的表达量增加,而细胞因子IL-6、IL-8的表达量没有明显的变化。

关键词：禽传染性支气管炎病毒海金沙抗病毒活性

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黄芩苷体外抗禽传染性支气管炎病毒的初步研究

黄芩苷体外抗禽传染性支气管炎病毒的初步研究

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作者：郭霄慧河北科技师范学院

学位级别：硕士

禽传染性支气管炎（Infectious bronchitis,IB）是一种常见呼吸道疾病,由传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）引起,该病呈急性并且传染性强,使全球家禽养殖场经济损失严重。IB主要侵害10周龄以内的雏鸡,呼吸道病症... 详细信息

禽传染性支气管炎（Infectious bronchitis,IB）是一种常见呼吸道疾病,由传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）引起,该病呈急性并且传染性强,使全球家禽养殖场经济损失严重。IB主要侵害10周龄以内的雏鸡,呼吸道病症最为常见,同时成年蛋鸡染病后会出现蛋产量和品质下降的现象。目前疫苗免疫仍是防控IB的主要手段,而中药单体成分与抗病毒西药相比有无污染、不良反应小、安全性高和毒性低等优势,逐渐受到人们的关注。本研究选择河北地区的IBV流行毒株（QX株）,初期选择黄芩苷、红景天苷、甘草酸和连翘酯苷A四种中药单体成分,在体外以原代CEK细胞为宿主进行抗IBV的研究,筛选有效抗IBV的中药单体成分,并初步探索其作用机制。具体研究内容和结果如下: ***（QX株）先在9～11日龄的SPF鸡胚尿囊腔中复壮和扩繁,再以原代CEK细胞为宿主进行纯化培养,计算其TCID。结果IBV成功在SPF鸡胚中扩繁,产生“侏儒胚”等症状,同时收集的尿囊液在CEK细胞中盲传7代后CPE明显,计算其TCID为1×10/0.1 m L。 2.通过观察CPE和CCK-8测定细胞病变率可知,黄芩苷、连翘酯苷A、甘草酸和红景天苷的MNTC分别为9.75 mg/L、6.25 mg/L、312.5 mg/L和62.5 mg/L。通过观察CPE、计算对IBV的有效抑制率和对CEK细胞内IBV N基因相对表达量的影响,结果显示:黄芩苷、连翘酯苷A和甘草酸均有较好的体外抗IBV作用,并且在MNTC时的作用效果最好。 3.通过对吸附阻断、直接杀伤和复制阻断中CPE的观察、有效抑制率的计算和对CEK细胞内IBV N基因相对表达量的影响,发现三种作用方式下黄芩苷和连翘酯苷A对IBV都有较好的作用效果,最佳的作用方式均为直接杀伤。同时,在MNTC时连翘酯苷A对IBV是吸附阻断优于复制阻断作用,而黄芩苷则是复制阻断高于吸附阻断,且优于连翘酯苷A。选择黄芩苷对IBV的复制阻断作用方式进行后续试验。 ***-PCR测定NF-κB和MDA5/IRF7信号通路中相关基因的相对表达量。可知黄芩苷通过下调NF-κB信号通路,极显著抑制NF-κB、IL-1β和IL-6的转录（****P<0.0001）,也抑制TRAF6、TAB1和TNF-α的转录（在9.75 mg/L时抑制作用均极显著,****P<0.0001）,促进IL-10的相对表达;通过上调MDA5/IRF7信号通路,极显著促进MDA5、MAVS、IRF7、STING、IFN-α和IFN-β的转录（****P<0.0001）,但对TRAF3和TBK1转录的促进作用并不显著。同时,黄芩苷促进IFN-α、IFN-β和IL-10的分泌（9.75 mg/L时的促进作用均极显著,****P<0.0001）,抑制TNF-α的分泌。 5.基于Illumina平台进行转录组测序,通过对黄芩苷（H-IBV）组与IBV组相比的基因集中差异表达基因的功能注释、通路富集和STRING网络互作图进行分析,发现黄芩苷作用后不仅正向调控MDA5/RIG-I受体信号通路中的IRF7,也抑制Toll样受体信号通路中的TLR3信号转导,正调IL-27介导的通路和调控JAK-STAT等信号通路,最终促进I型干扰素（IFN-α）和调控等细胞因子的表达,加强细胞内免疫系统与反应,再加上对病毒感染通路的负调控,从而干扰IBV在CEK细胞内复制。综上,黄芩苷具有良好的体外抗IBV作用,能不同程度地影响NF-κB和MDA5/IRF7信号通路中相关基因的转录水平,调控TLR3等信号通路,促进干扰素的产生,加强细胞免疫和对病毒感染过程的负调控,最终达到治疗IBV的效果。

关键词：禽传染性支气管炎病毒黄芩苷抗病毒转录组作用机制

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禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120全基因组序列测定分析

禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120全基因组序列测定分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张毅王红宁王霆高荣张云飞张安云樊汶樵田浪四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病与食品安全四川省重点实验室”

本研究测定了IBV疫苗株H120的全基因组序列,通过与GenBank上公布的IBV全基因组序列进行比对,对其分子特征及系统进化分析。设计18对引物,用RT-PCR方法对IBV疫苗株H120的全基因组进行分段扩增、克隆和序列测定,测定结果表明,H120基因组全... 详细信息

本研究测定了IBV疫苗株H120的全基因组序列,通过与GenBank上公布的IBV全基因组序列进行比对,对其分子特征及系统进化分析。设计18对引物,用RT-PCR方法对IBV疫苗株H120的全基因组进行分段扩增、克隆和序列测定,测定结果表明,H120基因组全长27631bp(不包括polyA),包含有10个开放阅读框(ORF).H120全基因组序列与GenBank上公布的13株IBV基因组序列的同源率在84.6～94.5%之间,与ArkDPI11同源性最高为94.5%.本研究选择具有代表性的IBV H120疫苗株进行全基因组测序及序列分析,为对其分子特征及IBV的系统进化分析提供基础.

关键词：禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120 基因组序列分析

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禽传染性支气管炎病毒(IBV)分离鉴定、S1基因遗传进化研究

禽传染性支气管炎病毒(IBV)分离鉴定、S1基因遗传进化研究

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四川省畜牧兽医学会2014学术年会

作者：杨鑫王红宁周英顺张志坤李然许纪刚四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室 “985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台四川成都610064

收集来自四川、重庆、湖北等14个规模化鸡场疑似感染禽传染性支气管炎病毒病料66份进行IBV分离鉴定,测定分离株S1基因序列并完成了遗传进化分析.结果共分离到19株IBV毒株.遗传进化分析发现,19个IBV分离毒株S1基因大小为1614～1626bp,S1... 详细信息

收集来自四川、重庆、湖北等14个规模化鸡场疑似感染禽传染性支气管炎病毒病料66份进行IBV分离鉴定,测定分离株S1基因序列并完成了遗传进化分析.结果共分离到19株IBV毒株.遗传进化分析发现,19个IBV分离毒株S1基因大小为1614～1626bp,S1基因序列相似性为77.8～99.8％,19个分离毒株S1基因型分别为A2-QX-LX4-1ike,SAIBK-like,TW2575/98-1ike等三种类型,而与现有疫苗毒株具有较远的遗传距离,提示我国应考虑使用新的与本地株亲缘关系较近的IBV毒株研发疫苗.建立基于1135条IBV毒株S1基因遗传进化分析发现,来自世界范围内1135条S1基因分为5个大群(ClusterⅠ-ClusterⅤ),其中ClusterⅠ以DE072为代表分布于美国.ClusterⅡ可分为2个亚群,其亚群1分布在澳大利亚,亚群2分布在中国及韩国日本等东亚地区.Cluster Ⅲ分布在澳大利亚,Cluster Ⅳ分布在中国.Cluster Ⅴ可分为18个亚群,18个亚群包含从最早分离到最近分离的IBV毒株,还包括从野鸡、野鸭等野生动物中所分离毒株,很好的显示了IBV进化的历史.本研究丰富了IB的分子流行病学数据,为IBV遗传进化及基因型特征的研究奠定了基础.

关键词：禽传染性支气管炎病毒分离鉴定纤突糖蛋白基因遗传进化

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禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组的克隆与序列测定

禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组的克隆与序列测定

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中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：周生王红宁胡慧琼黄勇柳萍四川农业大学动物科技学院(四川雅安)

根据国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列,经多重比较后设计20对引物,用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB株全基因组进行了分段扩增,并将扩增产物分别插入到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM.用PCR方法鉴定带有阳性... 详细信息

根据国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列,经多重比较后设计20对引物,用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组进行了分段扩增,并将扩增产物分别插入到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM<,109>.用PCR方法鉴定带有阳性重组质粒的菌落,并对阳性重组质粒中插入的片段进行序列测定.测序结果表明:禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组被成功的分段克隆到pMD18-T载体中;分离株SAIB<,K>株基因组序列全长27,395bp,与国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列Beaudette(NC001451)、BJ(AY319651)、LX4(AY217750)进行同源性比较分析,同源率在85﹪-90﹪之间.

关键词：禽传染性支气管炎病毒全基因组分离株序列测定基因克隆冠状病毒

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N-（1’-苯乙基）-吩嗪-1-甲酰胺调控自噬信号通路介导的抗禽传染性支气管炎病毒的作用机制

N-（1’-苯乙基）-吩嗪-1-甲酰胺调控自噬信号通路介导的抗禽传染...

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作者：穆歌长江大学

学位级别：硕士

由γ冠状病毒属的禽传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)引起的传染性支气管炎(IB)具有高度传染性,给全球家禽养殖业造成了重大经济损失。疫苗免疫是目前防控IBV的主要手段,但由于该病毒的高频突变和重组,导致... 详细信息

由γ冠状病毒属的禽传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)引起的传染性支气管炎(IB)具有高度传染性,给全球家禽养殖业造成了重大经济损失。疫苗免疫是目前防控IBV的主要手段,但由于该病毒的高频突变和重组,导致不同的血清型和致病型以及新毒株不断出现,使得大部分商品疫苗的保护效果较为有限。除了研发更加广谱的疫苗外,积极研发安全有效的抗IBV药物也能为控制IB的流行提供新的解决思路。尽管多款小分子药物已被批准用于治疗新冠病毒引起的肺炎,但少有关于它们的抗IBV活性的研究报道。天然或化学合成的吩嗪类化合物已被证实具有广谱的抗菌及抗肿瘤活性,对人、畜低毒且易被降解,但关于其抗病毒活性的研究很少。我们在前期研究中发现了一种化学合成的新化合物,N-(1’-苯乙基)-吩嗪-1-甲酰胺(SQXA-12),具有较强的抗IBV活性,其半抑制浓度(IC50)为4μg/m L或12.25μmol/L。基于此,本研究通过利用分子生物学技术,分析其对细胞中与抗病毒相关信号通路的调控作用,揭示其抗病毒机理。研究结果如下: (1)SQXA-12具有抗IBV活性本研究利用Western blot、q PCR及双荧光素酶等方法检测SQXA-12的抗IBV活性,在感染了IBV的H1299和Vero细胞中加入终浓度为4μg/m L的SQXA-12处理。Western blot结果表明Vero细胞中SQXA-12在不同时期对病毒抑制率均在65%以上,在H1299细胞中抑制率均在40%以上。q PCR结果显示,在不同感染时间SQXA-12均能显著抑制IBV m RNA的合成,Vero细胞中8 hpi病毒抑制率为74%,16 hpi约为91%,24 hpi约为97%;H1299细胞中8 hpi病毒抑制率约为54%,16 hpi约为76%,24 hpi约为98%。表型观察发现药物处理后细胞病变效应与对照组相比更轻。双荧光素酶检测发现SQXA-12对两种细胞中IBV的复制抑制率均可达到90%以上,并在病毒不同感染阶段中均具有显著的抗IBV活性。 (2)SQXA-12调控多种膜蛋白基因的表达对转录组中差异较大的膜蛋白基因进行q PCR检测发现,与对照组相比,SQXA-12处理后在8 hpi时MPP4、TMEM163和LAMP3上调2倍,TM4SF18上调2.6倍,TMEM268上调2.7倍,TMEM74上调4.8倍;16 hpi时TMEM268上调2.2倍,TMEM74上调2.4倍,TMEM163上调2.6倍,LAMP3上调2.9倍,EMC6下调74%;24 hpi时MPP4和TM4SF18上调约1.9倍,EMC6下调86%,其他基因无显著性差异。Western blot检测结果显示,SQXA-12处理下,细胞中与自噬相关的LAMP3和TMEM41B表达量在不同病毒感染时期均呈不同程度的上调,由此推测SQXA-12可能会参与自噬的调控。 (3)SQXA-12抑制感染IBV细胞的自噬流 Western blot检测发现,SQXA-12在感染IBV的两种细胞中显著降低了LC3II/LC3I的比值,在Vero细胞中平均下调约21%,H1299细胞中下调约45%。同时相应的自噬底物P62蛋白表达均有所累积,说明SQXA-12可能抑制自噬体的形成或者阻断自噬体的降解。使用自噬调节剂处理后,根据Western blot及免疫荧光结果,进一步确认SQXA-12抑制了细胞内的自噬流。并且使用抑制剂氯喹处理的细胞中IBV-N表达量下降12%,使用SQXA-12处理的细胞N蛋白下降54%,二者联用N蛋白下降63%,两种药物对IBV的抑制具有累加效果;使用激活剂雷帕霉素后细胞中IBV-N表达量上升1.2倍,SQXA-12处理后N蛋白下降58%,二者联用后N蛋白下降63%,SQXA-12可以拮抗雷帕霉素对自噬的激活作用。这表明自噬在病毒的复制过程中起到了重要的作用。 (4)SQXA-12对自噬相关信号通路的调控作用 Western blot检测不同感染时间点与自噬相关的关键因子,结果发现SQXA-12处理后,Beclin 1在8 hpi上调约1.5倍,但在16 hpi和24 hpi呈现下调趋势。p-ULK/ULK在8 hpi和24 hpi时呈上升趋势,在16 hpi时下调40%。这些结果表明SQXA-12在病毒复制初期上调Beclin 1和p-ULK的表达水平,但在中后期呈现出不同程度的抑制作用。SQXA-12还在病毒复制前期激活自噬上游细胞内质网应激(UPR)的IRE1-JNK通路及p-e IF2α,但病毒感染中末期均下调IRE1-JNK、PERK-e IF2α的磷酸化水平,其中PERK/p-PERK和p-e IF2α/e I

关键词： N-(1’-苯乙基)-吩嗪-1-甲酰胺禽传染性支气管炎病毒自噬信号通路抗病毒机制

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S2亚基N-糖基化位点对禽传染性支气管炎病毒致病性的影响研究

S2亚基N-糖基化位点对禽传染性支气管炎病毒致病性的影响研究

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作者：王安东四川农业大学

学位级别：硕士

禽传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Virus,IBV）在全世界范围内流行,造成雏鸡死亡、肉鸡生长阻滞和蛋鸡产蛋性能下降。IBV的S蛋白是一种高度糖基化的毒力蛋白,存在大量的N-糖基化位点,目前关于S蛋白的研究主要集中突变和重... 详细信息

禽传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Virus,IBV）在全世界范围内流行,造成雏鸡死亡、肉鸡生长阻滞和蛋鸡产蛋性能下降。IBV的S蛋白是一种高度糖基化的毒力蛋白,存在大量的N-糖基化位点,目前关于S蛋白的研究主要集中突变和重组发生率高的S1亚基,而相对保守的S2亚基上的N-糖基化修饰对病毒的感染性和致病性的影响尚不清楚。本论文主要探究IBV S2亚基N-糖基化位点对IBV的致病性的影响,主要内容如下: 首先,通过在线软件来预测分析IBV-Zy3c100-S2亚基的N-连接的糖基化位点,并联合不同基因型IBV S2亚基中位点的分布情况,分析发现14个常见N-糖基化位点。收集510条IBV S基因序列进行单氨基酸多态性分析,结果表明这14个常见N-糖基化位点中存在7个非完全保守位点,因此将这7个突变位点作为预选突变位点,确定9种突变方式:N545S/T,N679D,N950T,N1017S/T,N1061D,N1077D和K717N。通过对预选位点的进一步分析,这些位点均位于S2亚基表面,且位点分布与功能基序和抗原表位的出现保持高度一致性。然后,以细菌人工染色体（BAC）构建的QX型IBV-Sczy3c100的感染性克隆为操作平台,切除整个S基因后,回补S1片段,得到S2基因缺失中间载体BAC-Zy3c100-S2Δ;PUC-19质粒经Bam HⅠ酶切后与完整的S2片段进行无缝克隆,利用PCR对该质粒进行线性化并引入目标突变,获得包含突变的S2片段并回补至中间载体,构建9种重组的感染性c DNA并拯救出四种重组病毒:r Zy3c100-S2N545S、r Zy3c100-S2K717N、r Zy3c100-S2N1017S和r Zy3c100-S2N1061D。最后,通过适应性检测、TCID50、EID50和复制曲线测定观察表型变化。结果表明N545S和K717N突变增强病毒在鸡胚和细胞中的复制滴度,增强CEK的细胞损伤。最后,对S2亚基N-糖基化位点对IBV致病性的影响进行分析。将成功拯救的毒株进行动物致病性实验,结果表明,N545S和K717N突变株较亲本毒株发病率上升,出现雏鸡死亡。剖检记录脏器损伤和测定病毒载量发现,K717N和N545S突变株的脏器损伤指数和病毒载量上升。进一步显微病理观察发现,K717N和N545S突变导致肾脏和气管病变程度加重。突变毒株附着和内化及微量中和试验发现,N545S突变增强病毒早期进入CEK细胞的复制能力,同时N545S和K717N突变降低亲本毒株血清中和抗体效价。结构预测发现N-糖基化位点替代导致位点结构偏移和抗原表位结构变化,因此推测N-糖基化位点替代导致S2亚基结构变化影响S2亚基的膜融合构象和抗原结构,进而改变病毒的致病性。综上所述,S2基因N-糖基化位点与IBV的致病性相关,其中N545S和K717N突变能够增强IBV的致病性,位点替代导致的病毒早期生活周期和S2亚基构象变化可能是重组毒株致病性增强的原因。实验结果为进一步揭示IBV S2亚基N-糖基化位点功能提供重要参考。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 S2亚基 N-糖基化致病性

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抗禽传染性支气管炎病毒活性植物的筛选及其作用机制初探

抗禽传染性支气管炎病毒活性植物的筛选及其作用机制初探

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作者：朱秀长江大学

学位级别：硕士

为了筛选出具有抗病毒活性的植物,本文以经人工嵌合荧光素酶基因的禽传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus, IBV)为供试病毒,人类肺癌细胞H1299细胞为宿主细胞,对采自鄂西山区分属于21科27属的28种植物(包括8种中国特... 详细信息

为了筛选出具有抗病毒活性的植物,本文以经人工嵌合荧光素酶基因的禽传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus, IBV)为供试病毒,人类肺癌细胞H1299细胞为宿主细胞,对采自鄂西山区分属于21科27属的28种植物(包括8种中国特有植物,9种珍稀植物)甲醇提取物进行了抗病毒活性测定,并明确活性植物的抗病毒机制。分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇对活性植物的甲醇浸提物进行萃取得到石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水溶物5种萃取物,并对各萃取物进行抗病毒活性测定。本试验所选用的供试病毒是通过反向遗传操作,在IBV全基因组的基础上,用荧光素酶luciferase的基因序列替代IBV的非功能基因3ab片段,该病毒能够成功侵染人类肺癌细胞(H1299细胞),并且遗传稳定性与IBV相近,其增殖过程中能融合表达荧光素酶,根据融合蛋白荧光素酶的表达量,来反应病毒的增殖情况,从而检测各植物对IBV的抑制活性。现将主要研究结果总结如下：1、28种植物的甲醇浸提率本文采用冷浸法对采自鄂西山区的28种植物进行甲醇浸提,用旋转蒸发仪减压浓缩得到各植物的甲醇提取物,对各提取物称重并计算其提取率。结果表明,在同等条件下,中华抱茎蓼Polygonum amplexicaule D. Don var. sinense Forb. et Hemsl. ex Stew的甲醇提取率最高,为52.43%；石海椒Reinwardtia indica Dum的甲醇提取率最低,仅为3.75%。2、28种植物甲醇浸提物的抗IBV活性1)植物甲醇浸提物对H1299细胞的毒性试验本试验采用细胞形态观察法,分别于药剂处理24h和48h后通过倒置显微镜观察H1299细胞的形态变化,确定各供试植物甲醇浸提物的H1299细胞最高无毒浓度。结果表明,海金沙L. japonicum甲醇浸提物对H1299细胞的无毒浓度最高,为7×10-Sg/mL,而八角莲D. versipellis甲醇浸提物对H1299细胞的无毒浓度最低,为5×10-8g/mL。表明海金沙L. japonicum甲醇浸提物对H1299细胞的毒性最低,而八角莲D. versipellis甲醇浸提物对H1299细胞的毒性最高。2)28种植物甲醇浸提物的抗IBV活性本试验采用荧光值法对28种植物的抗病毒活性进行测定,试验结果表明,大花还亮草Delphinium anthriscifolium、钝叶楼梯草Elatostema obtusum Wedd、海金沙Lygodium japonicum (Thunb.) Sw.、裸芸香Psilopeganum sinense Hemsl和陕西羽叶报春Primula filchnerae Knuth、湖北大戟Euphorbia hylonoma Hand.-Mazz和天师栗Aesculus wilsonii Rehd等7种植物甲醇提取物表现出不同程度的抗IBV活性,其中大花还亮草、海金沙和裸芸香的抑制率最高,均为99.97%。3、大花还亮草、海金沙和裸芸香甲醇浸提物的抗IBV作用机制本试验采用荧光值法对大花还亮草D. anthriscifoliu、海金沙L. japonicum和裸芸香P. sinense 3种植物甲醇浸提物的抗IBV作用机制进行研究。于IBV感染H1299细胞前用萃取物处理IBV,结果表明,大花还亮草、海金沙和裸芸香3种植物甲醇提取物均能抑制IBV感染H1299细胞,其抑制率分别是98.74%、98.65%和91.41%。于IBV感染H1299细胞前用萃取物处理细胞,结果表明,大花还亮草甲醇提取物促进H1299细胞抗IBV感染的活性最高,抑制率为99.89%;海金沙甲醇提取物次之,抑制率为79.01%；裸芸香甲醇提取物最低,抑制率为68.44%。于IBV感染H1299细胞后用萃取物处理被IBV感染的H1299细胞,结果表明,海金沙甲醇浸提物抑制IBV在H1299细胞内的复制活性最好,抑制率为91.49%。但是,裸芸香甲醇提取物和大花还亮草甲醇提取物不表现抑制IBV在H1299细胞内复制的活性。4大花还亮草、海金沙和裸芸香各萃取物的抗IBV活性试验本试验分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇对大花还亮草D. anthriscifoliu、海金沙L. japonicum和裸芸香P. sinense 3种植物的甲醇浸提物进行萃取,分别得到3种植物的石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水溶物,以IBV为供试病毒,H1299细胞为宿主细胞,对各萃取物的抗病毒活性进行测定。于IBV感染H1299细胞前用萃取物处理H1299细胞,结果表明,大花还亮草水溶物不表现促进H1299细胞抗IBV感染的活性,氯仿萃取

关键词：禽传染性支气管炎病毒抗病毒活性大花还亮草海金沙裸芸香

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禽传染性支气管炎病毒可经泄殖腔感染

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中国家禽 1999年第4期 49-49页

禽传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）不仅能在呼吸器官组织中增殖，还能在生殖道，肾脏和小肠等部位增殖。肛门的收缩和小肠下部的运动可将环境中的物质经肛门带入泄殖腔内。进而转移到法氏囊、直肠和盲肠。这使泄殖腔接种物直接到达小肠下... 详细信息

禽传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）不仅能在呼吸器官组织中增殖，还能在生殖道，肾脏和小肠等部位增殖。肛门的收缩和小肠下部的运动可将环境中的物质经肛门带入泄殖腔内。进而转移到法氏囊、直肠和盲肠。这使泄殖腔接种物直接到达小肠下部成为可能。研究表明，泄殖腔是ＩＢ...

关键词：禽传染性支气管炎病毒肾脏日冕形病毒泄殖腔共泄腔法氏囊腔上囊淋巴组织呼吸器官小肠

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同时鉴别不同基因型禽传染性支气管炎病毒的多重PCR引物、检测试剂、方法及应用

同时鉴别不同基因型禽传染性支气管炎病毒的多重PCR引物、检测试...

引用

作者：王永娟赵长菁袁橙董亚青徐淑颖 225300 江苏省泰州市海陵区凤凰东路8号

本发明公开了一种同时鉴别不同基因型禽传染性支气管炎病毒的多重PCR引物、检测试剂、方法及应用，多重PCR引物包括第一引物对，第二引物对，第三引物对，第四引物对，以及第五引物对。本发明构建的多重PCR引物能够通过一次PCR操作，鉴... 详细信息

标准号: CN117737298B

本发明公开了一种同时鉴别不同基因型禽传染性支气管炎病毒的多重PCR引物、检测试剂、方法及应用，多重PCR引物包括第一引物对，第二引物对，第三引物对，第四引物对，以及第五引物对。本发明构建的多重PCR引物能够通过一次PCR操作，鉴别出禽传染性支气管炎病毒优势流行株QX型、GⅥ‑1型和常用疫苗株。并且，整个操作过程简单，一次性PCR即可鉴别出待测样品中含有的上述一种或多种基因型，大大降低了检测成本，提高了检测效率。

关键词：多重PCR引物禽传染性支气管炎病毒鉴别不同基因待测样品第二引物第三引物第四引物第一引物检测试剂整个操作一次PCR 基因型一次性疫苗株检测构建引物应用

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