检索结果-内蒙古大学图书馆

您好，读者！请登录

内蒙古大学图书馆

首页
概况
党建
资源
服务
科研支持
- 论文收录引用证明
- 科技查新
知识产权
档案馆
帮助

咨询与建议

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

您的常用邮箱：*

您的手机号码：*

问题描述：

当前已输入0个字，您还可以输入200个字

全部搜索
期刊论文
图书
学位论文
标准
纸本馆藏
外文资源发现
数据库导航
超星发现

高级检索

时间限定

出版年份：

-

文献类型

图书期刊文献学位论文多媒体

馆藏选择

电子馆藏纸本馆藏

核心期刊

全部期刊 SCI 收录期刊 SSCI 收录期刊 EI 收录期刊 CSCD 收录期刊 CSSCI 收录期刊

语言

中文英文

文献类型

期刊文献图书学位论文标准纸本馆藏

帮助

文字说明：

T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

检索规则说明：

AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

检索范例：

范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二：P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016

分类表

所选分类

>> <<

限定检索结果

文献类型

1 篇 学位论文

馆藏范围

1 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

1 篇 农学
- 1 篇 兽医学

主题

1 篇 鸡白介素2基因
1 篇 禽传染性支气管炎...
1 篇 双顺反子表达质粒...
1 篇 鸡白介素18基因
1 篇 dna疫苗
1 篇 禽传染性支气管炎...

机构

1 篇 四川农业大学

作者

1 篇 唐梦君

语言

1 篇 中文

检索条件"主题词=禽传染性支气管炎病毒S1、M、N基因"

共 1 条记录，以下是1-10 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

禽传染性支气管炎病毒基因双顺反子DnA疫苗及mRnA3的分子特性研究

禽传染性支气管炎病毒基因双顺反子DNA疫苗及mRNA3的分子特性研究

引用

作者：唐梦君四川农业大学

学位级别：博士

1、本研究采用PCR扩增获取鸡的IL-2、IL-18基因,将其插入pmD18-T载体中进行测序鉴定。对含有s1、m、n目的基因的pIBVs1、pIBVm、pIBVn质粒进行测序分析。结果表明,IL-2、IL-18、s1、m、n基因全长分别为432bp、536bp、1671bp、678bp和123... 详细信息

1、本研究采用PCR扩增获取鸡的IL-2、IL-18基因,将其插入pmD18-T载体中进行测序鉴定。对含有s1、m、n目的基因的pIBVs1、pIBVm、pIBVn质粒进行测序分析。结果表明,IL-2、IL-18、s1、m、n基因全长分别为432bp、536bp、1671bp、678bp和1230bp,鉴定的目的基因正确。以pDsRed-Express-n1载体为骨架,以内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site)序列为连接元件构建绿色和红色荧光基因的双顺反子表达质粒pIREs-EGFP/Red,转染Vero细胞后观察到绿色和红色荧光基因均获得表达。构建的pIREs-EGFP/Red载体含有卡那霉素抗性基因,比含有氨苄抗性的双顺反子载体具有更高的生物安全性,为今后开展各种病原微生物双顺反子DnA疫苗的研制提供研究工具。 2、用s1、m、n基因与IL-2、IL-18基因分别替换pIREs-EGFP/Red质粒中的荧光基因,构建双顺反子表达质粒pIREs-s1/IL2、pIPEs-m/IL2、pIREs-n/IL2、pIREs-s1/IL18、pIPEs-m/IL18和pIREs-n/IL18及其单基因表达质粒,转染Vero细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测质粒在体外的表达。RT-PCR检测表明转染了重组质粒的Vero细胞中均能特异的扩增出s1、m、n和(或)IL-2、IL-18基因片段;间接免疫荧光检测表明,转染了重组质粒的细胞显示出黄绿色荧光,而转染了空质粒的细胞则没有显示出任何特异荧光。本研究为IBV结构基因和细胞因子双顺反子DnA疫苗免疫试验提供了材料。 3、采用本课题组获得专利(专利号为200410081443.4)的质粒提取、纯化方法制备质粒,将质粒溶液(1mg/mL)与脂质体溶液(10mg/mL)等体积混合配制成DnA疫苗。将配制的DnA疫苗通过腿部肌肉多点注射7日龄非免疫雏鸡,28日龄加强免疫一次。分别在免疫前和免疫后7、14、21、28、35d采血检测ELIsA抗体效价和外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的数量。二免后两周用IBV强毒进行攻毒。ELIsA抗体水平结果显示:pIREs-s1/IL2、pIPEs-m/IL2、pIREs-n/IL2疫苗组产生的抗体水平高于pIREs-s1、pIREs-m、pIREs-n疫苗组,在免疫后14-35d,差异显著(P＜0.05);pIREs-m/IL18、pIPEs-n/IL18疫苗组产生的抗体水平也高于pIpEs-m、pIREs-n疫苗组,在免疫后14-35d,差异显著(P＜0.05),pIREs-s1/IL2、pIREs-s1/IL18疫苗组产生的抗体水平与pIREs-s1+pIREs-IL2、pIREs-s1+pIREs-IL18疫苗组相比在免疫后21-35d差异显著(P＜0.05):外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群数量检测结果显示:pIREs-s1/IL2、pIREs-m/IL2、pIREs-n/IL2疫苗组在免疫后7-28d,与pIREs-s1、pIREs-m、pIREs-n疫苗组相比差异显著(P＜0.05),pIREs-s1/IL18、pIREs-m/IL18、pIREs-n/IL18疫苗组在免疫后14-28d CD3+、CD4+T、CD8+T淋巴细胞亚群的数量高于pIREs-s1、pIREs-m、pIREs-n疫苗组,差异显著(P＜0.05)。pIREs-s1/IL2、pIREs-s1/IL18疫苗组的CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群数量较pIREs-s1+pIREs-IL2、pIREs-s1+pIREs-IL18 DnA疫苗组高,但差异不显著(P＞0.05)。攻毒结果表明,双顺反子DnA疫苗组的保护率介于65%～85%,其中REs-s1/IL2、pIREs-s1/IL18疫苗组的保护率分别为85%和75%,高于混合质粒pIREs-s1+pIREs-IL2、pIREs-s1+pIREs-IL18 DnA疫苗组的70%和60%。其中pIREs-s1/IL2疫苗组的保护率85%高于灭活疫苗组的攻毒保护率75%。本研究研制出的IBV结构蛋白与IL-2、IL-18双顺反子DnA疫苗,为提高IBV DnA疫苗的免疫效率提供了新的途径。 4、采用RT-PCR获取IBV E基因,用以替换pIREs-m/Red质粒中的红色荧光基因,构建双顺反子表达质粒pIREs-m/E,转染Vero细胞后进行表达检测。采用本论文第三章的方法制备DnA疫苗和进行动物免疫试验。结果表明:在免疫后7-35d,pIREs-m/E免疫组产生的抗体水平及外周血T淋巴细胞亚群数量高于pIREs-m组,但差异不显著(P＞0.05)

关键词：禽传染性支气管炎病毒双顺反子表达质粒pIREs-EGFP/DsRed 禽传染性支气管炎病毒s1、m、n基因鸡白介素2基因鸡白介素18基因 DnA疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

没有更多数据了...

共1页 << < 1 > >>

检索报告对象比较合并检索0

隐藏清空

合并搜索

回到顶部

执行限定条件

内容：

评分：

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

订阅名称：

通借通还

温馨提示：

图书名称：

借书校区：

取书校区：

手机号码：

邮箱地址：

一卡通帐号：

电话和邮箱必须正确填写，我们会与您联系确认。

联系人：

所在院系：

联系邮箱：

联系电话：

内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号邮编: 010021

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：