检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：王明月山东农业大学

学位级别：硕士

禽网状内皮组织增生症是由禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)感染导致的肿瘤性传染病。REV主要侵害家禽的淋巴系统,引起严重的免疫抑制。近年来,流行病学调查发现REV感染在多个国家及我国鸡群中已相当普遍,同... 详细信息

禽网状内皮组织增生症是由禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)感染导致的肿瘤性传染病。REV主要侵害家禽的淋巴系统,引起严重的免疫抑制。近年来,流行病学调查发现REV感染在多个国家及我国鸡群中已相当普遍,同时疫苗中REV污染也时有报道,开展REV监测与净化对该病防控极为重要。REV可通过种蛋垂直传播,是种源需要净化的病毒之一,同时携带REV的SPF鸡胚用于生产弱毒疫苗会造成疫苗中污染REV。通过细胞病毒分离是检测REV的标准方法之一,该方法虽然准确但也存在缺点,一方面该方法耗时较长,另一方面该方法对人的操作能力和试验条件要求较高。目前已有多种分子生物学方法应用于REV的检测,如RT-PCR、荧光定量RT-PCR等,同样对人员操作水平和检测仪器以及操作环境等具有较高要求,不适于在基层推广,亟需建立一种适于基层现场的REV快速核酸检测方法。本研究基于重组酶介导等温核酸扩增(Recombinase aided amplification,RAA)技术,建立了一种用于检测REV核酸的荧光RAA方法。根据GenBank上REV全基因组序列,针对其pol基因保守区域设计了 4对引物和探针,通过凝胶RAA方法对相关引物进行筛选优化,选择出了最佳引物和探针,探索反应体系和反应条件并对其灵敏性、特异性以及可重复性进行实验比对。结果表明,本研究所建立的荧光RAA方法灵敏度为102 copies/μL,与TaqMan荧光定量PCR灵敏度相当,是普通PCR灵敏度的10倍。本方法仅能检测到REV核酸,与鸡马立克氏病病毒、禽白血病病毒、鸡传染性贫血病毒、禽戊型肝炎病毒以及禽腺病毒等病毒核酸均无交叉反应,特异性良好。为进一步探索建立的荧光RAA方法在不同应用情境的检测效果。首先,将不同剂量的REV掺入禽用弱毒疫苗,人为模拟制备了 REV疫苗污染,并采用了三种方法进行测试比对。结果表明,荧光RAA和荧光定量PCR方法均可检测到最低1 TCID50/1000羽份的REV污染,普通PCR仅可检测到103 TCID50/1000羽份的REV污染。随后,我们将REV接种SPF鸡胚,出壳后雏鸡采集肛拭子,通过不同方法进行REV排毒检测。结果表明,荧光RAA检测结果和荧光定量PCR检测结果完全一致。运用荧光RAA方法对各地区送检的疑似REV阳性样品进行检测,从15份样品中鉴定到2份REV阳性,与病毒分离鉴定结果一致;进一步对分离到的2株REVgp90基因进行了测序与分析,发现两株REV gp90同源性差别较大。综上所述,本研究建立了一种用于REV检测的荧光RAA检测方法,该方法具有灵敏度高、特异性好的优势,并且操作简便,方便快捷。本方法为REV的快速检测提供了有力的技术支持。

关键词：禽网状内皮组织增生症荧光RAA 特异性灵敏度外源病毒

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禽网状内皮组织增生症研究进展

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中国动物保健 2023年第9期25卷 115-116页

作者：刘洪勋博兴县畜牧兽医服务中心山东滨州256500

禽网状内皮组织增生症(RE),也被称为极性网状内皮组织细胞癌,是一种重要的家禽免疫抑制疾病。其病原体禽网状内皮组织组织增生症病毒(REV)广泛分布于不同鸟类,可引起亚临床感染。REV具有免疫抑制作用,REV整合到其他较大DNA病毒基因组中... 详细信息

禽网状内皮组织增生症(RE),也被称为极性网状内皮组织细胞癌,是一种重要的家禽免疫抑制疾病。其病原体禽网状内皮组织组织增生症病毒(REV)广泛分布于不同鸟类,可引起亚临床感染。REV具有免疫抑制作用,REV整合到其他较大DNA病毒基因组中的能力使其诊断和预防变得复杂,可能导致其他疫病的疫苗接种失败。目前还没有有效的治疗方案和预防疫苗,这也使如何限制RE对家禽养殖的影响变得复杂。本文综述了RE已知的知识现状,强调了这一问题的严重性。

关键词：禽网状内皮组织增生症病毒共同感染

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黔东南小香鸡种群禽白血病、禽网状内皮组织增生症和鸡白痢感染情况检测与分析

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农技服务 2023年第12期40卷 60-62页

作者：王璇张晓可李婷赵宇张涛潘永王庆红章厉劼潘淑惠金晓峰文正常贵州省畜牧兽医研究所贵州贵阳550005 贵州省兽药饲料检测所贵州贵阳550003

为了解黔东南小香鸡种群禽白血病(AL)、禽网状内皮组织增生症(RE)和鸡白痢(PD)的感染状况,便于有效预防、净化疫病,更好地保护黔东南小香鸡的种质资源,从鸡群采集524份血清样品,采用ELISA检测禽白血病病毒p27抗原(ALV-p27)、禽网状内皮... 详细信息

为了解黔东南小香鸡种群禽白血病(AL)、禽网状内皮组织增生症(RE)和鸡白痢(PD)的感染状况,便于有效预防、净化疫病,更好地保护黔东南小香鸡的种质资源,从鸡群采集524份血清样品,采用ELISA检测禽白血病病毒p27抗原(ALV-p27)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)及鸡白痢感染抗体水平,采用PCR核酸检测进行禽白血病病毒A、B、J亚群(ALV-A、B、J)鉴定。结果表明:样品中ALV-p27抗原的阳性率为85.88%、ALV-J亚群的阳性率42.67%,REV抗体的阳性率为25.57%,鸡白痢抗体的阳性率为3.82%。根据检测结果,建议尽早对种群采取净化措施,以避免AL进一步发生及流行。

关键词：黔东南小香鸡禽白血病鸡白痢禽网状内皮组织增生症 ELISA

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禽网状内皮组织增生症及其危害

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北方牧业 2023年第7期 42-42页

作者：邓小芸黑龙江职业学院农牧工程学院黑龙江哈尔滨150111

禽网状内皮组织增生症(RE)是由网状内皮组织增生症病毒(REV)引起的禽类的一种重要的免疫抑制性和致瘤性疾病。近年来,国内外鸡群中REV流行逐渐严重,是养禽业健康发展的重要威胁之一。本文综述了REV的分子病原学、流行病学,以及直接和间... 详细信息

禽网状内皮组织增生症(RE)是由网状内皮组织增生症病毒(REV)引起的禽类的一种重要的免疫抑制性和致瘤性疾病。近年来,国内外鸡群中REV流行逐渐严重,是养禽业健康发展的重要威胁之一。本文综述了REV的分子病原学、流行病学,以及直接和间接危害,对人们更好地认识和防控该病具有重要意义。

关键词：禽网状内皮组织增生症养禽业免疫抑制性 REV 分子病原学流行病学致瘤性

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2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行病学调查

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家禽科学 2021年第9期 35-37页

作者：李玉杰邢林林孙圣福曹振山徐聪徐鸿陈静山东省动物疫病预防与控制中心山东济南250010

为了解2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行情况,对我省内8个种鸡场内的种鸡进行随机抽样,利用商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对850份血清进行抗体的检测。结果显示,REV抗体阳性率为1.65%。因此,山东省内已出现禽网状内... 详细信息

为了解2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行情况,对我省内8个种鸡场内的种鸡进行随机抽样,利用商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对850份血清进行抗体的检测。结果显示,REV抗体阳性率为1.65%。因此,山东省内已出现禽网状内皮组织增殖症感染情况,且出现在种鸡场中,应引起足够的重视,制定REV净化方案,创建REV阴性场。

关键词：禽网状内皮组织增生症流行病学调查山东省 ELISA

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山东省烟台地区J亚型禽白血病与禽网状内皮组织增生症血清流行病学调查

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家禽科学 2020年第3期 53-56页

作者：盖小君王晓玲郭龙宗陈静烟台市动物疫病预防与控制中心山东烟台264003 山东益生种畜禽股份有限公司山东烟台264003 山东省动物疫病预防与控制中心山东济南250100

为了解山东省烟台地区J亚型禽白血病与网状内皮组织增生症的流行情况,于2019年9~10月,采用酶联免疫吸附试验对来自烟台地区8个农业县的16个种鸡场、20个商品代场和16个散养鸡群共940份血清样本进行检测分析。结果显示:有5个农业县检测到... 详细信息

为了解山东省烟台地区J亚型禽白血病与网状内皮组织增生症的流行情况,于2019年9~10月,采用酶联免疫吸附试验对来自烟台地区8个农业县的16个种鸡场、20个商品代场和16个散养鸡群共940份血清样本进行检测分析。结果显示:有5个农业县检测到J亚型禽白血病,抗体阳性率为2.9%;8个农业县全部检测出禽网状内皮组织增生症,抗体阳性率为43.9%,双抗体阳性率为2.7%。此次调查为烟台地区禽白血病的净化及禽网状内皮组织增生症的防控提供了数据支撑。

关键词：烟台地区 J亚型禽白血病禽网状内皮组织增生症血清流行病学

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大蒜素对禽网状内皮组织增生症病毒感染造成损伤的调控作用研究

大蒜素对禽网状内皮组织增生症病毒感染造成损伤的调控作用研究

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作者：朱琦山东农业大学

学位级别：硕士

禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)是一种禽C型逆转录病毒,其症状包括生长迟缓、免疫抑制等,在世界范围内给家禽业造成了巨大经济损失。但目前尚无针对其的疫苗产品。大蒜素是从大蒜提取的生物活性物质,已有... 详细信息

禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)是一种禽C型逆转录病毒,其症状包括生长迟缓、免疫抑制等,在世界范围内给家禽业造成了巨大经济损失。但目前尚无针对其的疫苗产品。大蒜素是从大蒜提取的生物活性物质,已有研究显示其具有抗菌、抗病毒、增强免疫功能的作用,在畜牧家禽养殖业,医药领域都有应用,且价格较低廉,无药残危害,因此本研究尝试将大蒜素应用于REV的防治,期望为治疗病毒性免疫抑制疾病奠定基础。本研究通过将REV人工感染SPF鸡建立动物模型后,研究日粮中添加大蒜素对感染鸡的生长性能、免疫功能等的影响,为将大蒜素开发研制成新药物打下基础。实验共分两个部分:***感染动物模型的建立。为确定合适的感染日龄,分别选择3日龄(3d)、7日龄(7d)SPF鸡接种REV,比较其生长性能、免疫器官指数、NDV和AIV疫苗的HI抗体效价、血常规、CD4+、CD8+淋巴细胞比率的差别。结果显示,3d SPF鸡和7d SPF鸡感染REV后与对照组相比,均显著抑制SPF鸡的生长性能及对NDV和AIV-H9疫苗的免疫应答水平(P<0.05),但3d SPF鸡感染REV后造成的死亡率(52.5%,21/40)要远高于7d SPF鸡感染组(17.5%,7/40)和对照组,而7d SPF鸡感染组死亡率与对照组相当(17.5%,7/40)。结果表明,REV感染3d SPF鸡和7d SPF鸡后均造成显著的生长和免疫抑制作用,但7日龄为建立REV感染SPF鸡模型的更适合日龄。2.大蒜素对REV造成损伤的调控作用研究。设置5个实验组:对照组、REV感染组、REV感染后饲喂600mg/kg的大蒜素组(R-600D组)、1日龄饲喂300mg/kg的大蒜素组(300D-R-300D组)、REV感染后饲喂300mg/kg的大蒜素组(R-300D组),比较不同剂量大蒜素和起始饲喂时间对抗REV感染的作用,从而筛选最佳添加剂量和投喂时间。结果显示,自5w时,R-300D组体重开始回升,与对照组无差异,显著高于REV、R-600D组(P<0.05),而300D-R-300D组从6w开始与R-300D组组间无差异(P>0.05);针对NDV、AIV-H9疫苗的免疫应答,R-300D组从4w到6w NDV、AIV-H9抗体滴度均高于其它组,接近或高于对照组抗体水平,R-600D组和R-300D组组间无差异(P>0.05)。本研究表明,SNV株REV能显著抑制SPF鸡的生长性能及免疫机能,7日龄SPF鸡为建立REV感染模型的最佳日龄;日粮中添加大蒜素对REV造成的生长性能下降和免疫抑制的调控作用与添加剂量及饲喂时间相关,7日龄SPF鸡感染REV后日粮中添加300mg/kg大蒜素的实验组(R-300D组)显著抑制了REV造成的生长性能下降及免疫抑制,调控效果好于高剂量组(R-600D组)及较早起始添加组(300D-R-300D组),对REV造成的生长性能下降及免疫抑制具有最好的调控作用。这提示在实际应用中不必过高剂量或过早地添加,否则反而达不到最佳效果,并增加用药成本。

关键词：禽网状内皮组织增生症大蒜素生长性能免疫抑制

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重庆市禽白血病及禽网状内皮组织增生症的血清流行病学调查

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2014年第11期 54-55页

作者：沈清霞任冬梅丁红雷王豪举西南大学动物科技学院动物医学系重庆400715

禽白血病和禽网状内皮组织增生症均为禽的肿瘤性免疫抑制疾病,是危害养鸡业的两种非常重要的病毒性传染病。为调查重庆市肉鸡中禽白血病及禽网状内皮组织增生症的流行情况,在北碚区、涪陵区、开县、垫江县、潼南县五个区(县)的8个活禽... 详细信息

禽白血病和禽网状内皮组织增生症均为禽的肿瘤性免疫抑制疾病,是危害养鸡业的两种非常重要的病毒性传染病。为调查重庆市肉鸡中禽白血病及禽网状内皮组织增生症的流行情况,在北碚区、涪陵区、开县、垫江县、潼南县五个区(县)的8个活禽交易市场采集260份血清样本,采用酶联免疫吸附试验检测了所有血清中禽白血病病毒(ALV)和禽网状内皮组织增生病毒(REV)的抗体。检测结果显示:禽白血病病毒和禽网状内皮组织增生病毒抗体阳性率分别为16.5%(43/260)和5%(13/260),双抗体阳性率为4.61%(12/260)。与全国其他地区相比,重庆市肉鸡中这两种病原的感染率相对要低,但仍应重视这两种疾病的防控,以控制病原的进一步传播。

关键词：重庆市禽白血病禽网状内皮组织增生症肉鸡酶联免疫吸附试验(ELISA)

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禽网状内皮组织增生症（RE）抗体检测试剂盒的研制

禽网状内皮组织增生症（RE）抗体检测试剂盒的研制

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作者：姜艳萍山东农业大学

学位级别：硕士

禽网状内皮组织增生症(Reticuloendotlleliosis,RE)是由禽反转录病毒属的网状内皮组织增生症病毒(REV)所引起的一组病理综合征,可引起禽类肿瘤和免疫抑制性疾病,干扰其他的免疫效应,导致免疫失败,并容易导致不同程度的二重感染、多重感... 详细信息

禽网状内皮组织增生症(Reticuloendotlleliosis,RE)是由禽反转录病毒属的网状内皮组织增生症病毒(REV)所引起的一组病理综合征,可引起禽类肿瘤和免疫抑制性疾病,干扰其他的免疫效应,导致免疫失败,并容易导致不同程度的二重感染、多重感染和继发感染,加剧某些疾病的临床表现,使疫病的诊断和防控难度加大。目前,对禽网状内皮组织增生症尚无有效的疫苗和药物进行预防和治疗,国内外主要通过抗原／抗体检测,淘汰患病鸡净化种群的方式来控制这种肿瘤病的发生为了进一步了解我国REV的流行情况,及早淘汰REV阳性鸡,间接ELISA检测REV抗体最适于临床检测。但国内至今还未见REV抗体检测试剂盒的相关专利;国外特异性检测REV抗体检测试剂盒虽已经商品化,但由于价格昂贵,很难大范围使用。因此,建立具有我国自主知识产权的ELISA抗体检测试剂盒显得尤为重要。 REV-env基因编码的gp90C末端表位位于感染细胞的表面,含有顺序和构象表位,是病毒的免疫显性蛋白,能够激发感染宿主产生中和抗体;因此REV的ENV蛋白被认为是一种应用于REV诊断的良好选择。本课题以REV原型株SNV株为标准株,用特异性引物扩增出1200bp相对保守的env基因序列,该段基因包含了REV病毒90%以上的抗原位点,既保证了基因的保守性又保留了良好的抗原性。将扩增出的基因片断与表达载体pET-28a连接组成重组质粒pET-28a-env,将重组质粒转化入BL21宿主菌,优化诱导表达条件,表达产物经SDS-PAGE电泳,显示蛋白以包涵体的形式存在,在45KD处出现目的蛋白。采用尿素法纯化大量表达的蛋白包涵体,通过透析法恢复蛋白的天然构象和蛋白活性。测定纯化蛋白浓度后进行ELISA和Western-blot检测,结果显示ELISA检测灵敏性能达到100ng/mL,表达的蛋白具有良好的灵敏性和特异性。将纯化的目的蛋白倍比稀释后包被ELISA板,4℃孵育过夜,商品化试剂盒检测REV阳性抗血清倍比稀释进行正交实验,确定了抗原的最佳包被浓度为4.24μg/mL,抗血清最佳稀释倍数为1：800倍；当抗原浓度为1.06μg/mL,抗血清稀释倍数为1：1600倍时,仍可检测到抗体阳性,显示其具有高敏感性；按照ELISA常规操作方法,固定其他反应条件,每次设一个条件作为变量对反应条件依次进行优化,结果显示最佳包被液为50mmol/L pH9.6碳酸盐缓冲液、最佳封闭液浓度为4%脱脂乳、最佳封闭时间为2h、抗血清孵育时间为1.5h、二抗稀释浓度为4000倍、二抗孵育时间为1h、显色时间为30min：通过对40份SPF鸡血清的检测,确定了其临界值(OD450nm0.340)；通过对4份阳性血清的检测,得出板内的变异系数为2.4%-10.1%,板间的变异系数为6.9%-11.3%,均小于15%,说明具有很好的重复性；通过对J亚群起那白血病病毒(ALV-J)、马立克氏病毒(MDV)、新城疫病毒(NDV)和禽流感病毒(H5及H9)鸡常见病病毒的5种抗血清进行检测,结果显示无交叉反应,具有很高的特异性；本试剂盒与IDEXX试剂盒分别对186份临床样本进行检测,本试剂盒检测阳性率为51.08%,IDEXX试剂盒检测阳性率为48.92%,表明本试剂盒敏感性高于IDEXX试剂盒,两者匹配率为91.94%。用该试剂盒对山东省508只鸡进行了检测,检测品种包括蛋种鸡、商品蛋鸡、乌鸡和麻鸡,其阳性检出率分别为37.43%、6.52%和62.00%,平均阳性检出率为34.25%。检测到的所有品种都存在REV感染情况,说明REV感染在我省鸡群中普遍存在。本研究的完成为制备REV抗体ELISA检测试剂盒的国产化奠定了基础；为快速、准确诊断禽网状内皮组织增生症、保障我国禽业的健康持续发展提供技术支持。

关键词：禽网状内皮组织增生症原核表达蛋白纯化酶联免疫吸附试验

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河北省三种鸡免疫抑制病的感染现状与临床病例分析

河北省三种鸡免疫抑制病的感染现状与临床病例分析

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作者：匡华丽河北科技师范学院

学位级别：硕士

禽白血病、鸡传染性贫血病和禽网状内皮组织增生症是严重危害家禽的免疫抑制病,这三种病对禽类种业造成了极大的危害。因此,本实验对河北地区这三种病的种鸡感染现状进行分析,并对秦皇岛某一发病种鸡场的11份病死鸡的肝脏组织采用聚合... 详细信息

禽白血病、鸡传染性贫血病和禽网状内皮组织增生症是严重危害家禽的免疫抑制病,这三种病对禽类种业造成了极大的危害。因此,本实验对河北地区这三种病的种鸡感染现状进行分析,并对秦皇岛某一发病种鸡场的11份病死鸡的肝脏组织采用聚合酶链式反应的方法进行主要免疫抑制病病原的检测,对其中阳性病料进行分离鉴定、测序分析。研究内容和结果如下: 1.河北省三种鸡免疫抑制病的感染现状采集河北省五个地区的七个种鸡场的种蛋997枚及血清487份,采用酶联免疫吸附试验的方法进行禽白血病病毒p27抗原、禽网状内皮组织增生症病毒和鸡传染性贫血病病毒的抗体检测。结果显示,禽白血病病毒p27抗原的场阳性率为85.71%(6/7),个体阳性率为2.71%(27/997),其中禽白血病病毒p27抗原的阳性率以海兰灰最高,为6.04%,依次为坝上长尾鸡阳性率为4.31%,北京油鸡阳性率为3.33%,太行鸡阳性率为2.07%,而海兰褐和巴布考克B380未检测出禽白血病病毒p27抗原。禽网状内皮组织增生症病毒抗体场阳性率为85.71%(6/7),个体阳性率为11.29%(55/487)。其中海兰褐禽网状内皮组织增生症病毒抗体的阳性率最高为29.27%,依次为巴布考克B380阳性率14.75%,太行鸡阳性率为4.6%,坝上长尾鸡阳性率为4.31%,海兰灰阳性率为2%,北京油鸡未检测出阳性。鸡传染性贫血病病毒抗体场阳性率为100%(7/7),个体阳性率为100%(487/487),鸡传染性贫血病病毒抗体不同品种的检出率都是100%,平均抗体滴度在1826～13245之间。检测结果说明河北省种鸡场的场感染普遍,但禽白血病的感染率相对较低;而禽网状内皮组织增生症病毒和鸡传染性贫血病病毒的感染比较严重,三种病之间的混合感染也十分的普遍。 2.秦皇岛某发病种鸡场免疫抑制病的临床病例分析对河北省秦皇岛市某发病场的11份病料进行了6种鸡常见免疫抑制病病原检测,结果发现11份病料全都感染了禽白血病病毒J亚型,其中4份病料是禽白血病病毒J亚型和鸡传染性贫血病混合感染,禽网状内皮组织增生症、马立克病、禽呼肠孤病、鸡传染性法氏囊病均未检出阳性。对阳性病料进行分离鉴定,成功分离了11株禽白血病病毒J亚型和4株鸡传染性贫血病病毒,并对阳性病料进行禽白血病病毒J亚型ENV基因和鸡传染性贫血病病毒VP1基因的扩增、测序。利用生信软件分析结果显示:本实验11株分离株的禽白血病病毒J亚型ENV基因与中国J亚群分离株GX14YYA1和英国原型株HPRS-103的同源性最高;与美国J亚群分离株ADOL-7501的同源性较低。4株分离株的鸡传染性贫血病病毒VP1基因与广西分离株GX1805和四川分离株SC-NC1同源性较高;与阿根廷分离株CAV-10和巴西分离株CAV的同源性最低。检测结果表明:从禽白血病病毒J亚型生物信息学分析来看,较往年河北地区的流行病学调查的变异程度不大;鸡传染性贫血病病毒分离株从生物信息学分析来看具有强毒的分子特征,但致病性及感染力需要通过动物试验验证。

关键词：免疫抑制病禽白血病禽网状内皮组织增生症鸡传染性贫血种鸡

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