目的探讨红细胞生成素(EPO)治疗前后肾性贫血患儿网织红细胞参数变化情况及临床意义。方法采用Beckm an cou lter LH 750全自动血液分析仪及Beckm an LX20全自动生化分析仪,检测EPO治疗前65例慢性肾功能不全不同病期患儿和65名正常对照...
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目的探讨红细胞生成素(EPO)治疗前后肾性贫血患儿网织红细胞参数变化情况及临床意义。方法采用Beckm an cou lter LH 750全自动血液分析仪及Beckm an LX20全自动生化分析仪,检测EPO治疗前65例慢性肾功能不全不同病期患儿和65名正常对照的红细胞(RBC)计数、血红蛋白(Hb)含量、网织红细胞百分比(Ret%)、网织红细胞不成熟度(IRF)和平均网织红细胞体积(MRV),同时检测其血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量,并进行比较分析;比较EPO治疗前、后肾性贫血患儿Ret%、RBC、Hb、IRF、MRV等参数的变化。结果EPO治疗前,氮质血症组和肾功能衰竭组的Ret%较对照组均有升高,但IRF值基本正常或略低;经过EPO治疗后肾功能不全患儿的贫血状态明显得到改善,IRF值和MRV值明显升高,IRF值升高的程度比Ret%更加明显。结论Ret参数尤其是IRF值的检测,有助于了解肾性贫血患儿的骨髓增生程度和红系的生长情况。
目的通过研究重组人红细胞生成素（recombinant human erythropoietin，rhEPO）对局灶性脯缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）和BCL-2表达的影响，探讨EPO脑保护作用的可能机制。方法应用线栓法建立...
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目的通过研究重组人红细胞生成素（recombinant human erythropoietin，rhEPO）对局灶性脯缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）和BCL-2表达的影响，探讨EPO脑保护作用的可能机制。方法应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注（middle cerebral artery occlusion／reperfusion，MCAO／R）模型，腹腔注射rhEPO进行干预，通过HE染色光镜观察组织病理学变化，应用免疫组化技术检测缺血侧大脑皮质MMP-9和BCL-2的表达。结果HE染色：在各时间点，rhEPO组存活神经细胞数量显著较多，损伤程度显著较轻。MMP-9免疫组化染色：正常对照组和假手术组偶见阳性细胞；生理盐水对照组缺血侧脑组织MMP-9阳性细胞在再灌注后6h开始出现，24h达高峰，72h开始减少；rhEPO组MMP-9阳性细胞变化趋势与生理盐水对照组相似，但在同一时间点显著少于生理盐水对照组（t分别为12．0236、12．6350和12．7796，P均〈0．01）。BCL-2免疫组化染色：对照组和假手术组末见阳性细胞；牛理盐水对照组缺血侧脑组织BCL-2阳性细胞数在再灌注后6h达高峰，24h数量减少，72h进一步减少；rhEPO组BCL-2阳性细胞变化趋势与生理盐水对照组相似，但在同一时间点显著多于生理盐水对照组（t分别为5．7631、8．1101和5．7987，P均〈0．01）。结论rhEPO町能通过抑制MMP-9表达和上调BCL-2表达抑制缺血侧皮质神经细胞凋亡而发挥保护作用。
目的肾间质纤维化(renal interstital fibrosia,RIF)的核心是肾小管上皮细胞转分化。探讨促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对高糖诱导的正常人肾小管上皮细胞(human kidney cells,HK-2)转分化的影响及其可能机制。方法体外培养HK-2细胞,按随机数字表法分为空白对照组、高糖诱导组(高糖终浓度30 mmol/L)、甘露醇对照组(甘露醇浓度24.5mmol/L)、EPO对照组(EPO终浓度为20 U/m L)、5 U/m L EPO干预组、10 U/m L EPO干预组、20 U/m L EPO干预组及ROCK抑制剂(Y27632)组(Y27632终浓度为30μmol/L,加入Y27632 30 min后加高糖,高糖终浓度为30 mmol/L),各组均刺激24 h。应用RT-PCR法检测细胞Rho A mRNA、ROCK1 mRNA的水平;细胞免疫荧光法检测细胞E-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(αsmoothmuscleactin,α-SMA)的表达;ELISA法检测上清液纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达。结果 RT-PCR结果显示高糖诱导组Rho A mRNA及ROCK1 mRNA表达较空白对照组显著升高(1.400±0.022 vs 0.945±0.132,1.913±0.011 vs1.007±0.002,P<0.05);5、10、20 U/m L EPO干预组,Rho A mRNA的表达水平(0.278±0.006、0.770±0.005、0.334±0.009)均较空白对照组(0.945±0.131)减少(P<0.05),ROCK1 mRNA的表达水平(1.418±0.006、0.919±0.004、0.477±0.002)较空白对照组(51.007±0.002)减少(P<0.05);ELISA及细胞免疫荧光结果显示高糖诱导组FN、α-SMA蛋白的表达较空白对照组明显增加[(14 545.53±317.27)ng/m L vs(2 582.50±87.20)ng/m L,0.335±0.006 vs 0.224±0.006,P<0.05];直线相关性分析,高糖诱导组,5、10、20 U/m L EPO干预组Rho A mRNA与ROCK1 mRNA表达均呈正相关(P<0.05)。高糖诱导组α-SMA较空白对照组上升,E-钙黏蛋白较空白对照组下降(P<0.05);EPO干预组及ROCK抑制剂组E-钙黏蛋白表达较高糖诱导组增加,而α-SMA表达下降(P<0.05);ELISA结果显示,EPO干预组ROCK抑制剂组FN表达较高糖诱导组下降(P<0.05),且下降程度与EPO浓度相关。结论 EPO可抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化,从而延缓肾间质纤维化,其机制可能与Rho A/ROCK信号通路有关。
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