检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2002年第5期29卷 729-733页

作者：易平汪莉孙清萍朱英国武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室武汉430072

以红莲 (HL)型水稻细胞质雄性不育系A、保持系B及杂种一代F1为材料 ,首次比较研究了红莲型水稻线粒体atp6基因转录本的编辑位点及各位点的编辑频率 .结果表明atp6基因的转录本有 18个编辑位点 ,其中有 15个发生在密码子的第一和第二位点... 详细信息

以红莲 (HL)型水稻细胞质雄性不育系A、保持系B及杂种一代F1为材料 ,首次比较研究了红莲型水稻线粒体atp6基因转录本的编辑位点及各位点的编辑频率 .结果表明atp6基因的转录本有 18个编辑位点 ,其中有 15个发生在密码子的第一和第二位点上 ,这些位点的编辑最终会导致氨基酸种类的变化 .18个编辑位点在A、B和F1中没有差异 ,但各位点的编辑频率在引入了核恢复基因的条件下发生了较大的变化 ,完全编辑的比例增加 .这些结果首次证明HL型细胞质雄性不育与线粒体atp6转录本的编辑有一定相关性。

关键词：红莲型细胞质雄性不育水稻线粒体 atp6基因转录本编辑位点

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红莲型细胞质雄性不育水稻线粒体DNA的AP-PCR分析

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武汉植物学研究 2002年第6期20卷 405-408页

作者：汪莉易平万翠香朱英国武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室武汉430072

为了研究红莲型细胞质雄性不育与线粒体基因组的关系 ,以水稻红莲型粤泰细胞质雄性不育系 A和保持系 B及杂种一代 F1 为材料 ,应用 AP- PCR分析 ,用 10个单引物对其线粒体 DNA进行扩增。实验结果表明 ,不同的引物在 3种材料间均有不同... 详细信息

为了研究红莲型细胞质雄性不育与线粒体基因组的关系 ,以水稻红莲型粤泰细胞质雄性不育系 A和保持系 B及杂种一代 F1 为材料 ,应用 AP- PCR分析 ,用 10个单引物对其线粒体 DNA进行扩增。实验结果表明 ,不同的引物在 3种材料间均有不同程度的差异 ,为红莲型细胞质雄性不育分子机理的研究提供了线索 ;此外 ,在引物 6 F1的扩增图谱中找到一条在 YTA和 F1 中特异的带 TAF6 F 2 ,Sounthern分析 TAF6 F2 不育胞质的特异性 ,可能与红莲型水稻细胞质雄性不育性状的形成有关。

关键词：红莲型细胞质雄性不育水稻线粒体DNA AP-PCR分析

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红莲型细胞质雄性不育水稻小孢子发育过程中Ca2+-ATPase活性分析

红莲型细胞质雄性不育水稻小孢子发育过程中Ca2+-ATPase活性分析

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2007中国科协年会专题论坛“红莲型杂交水稻学术专题研讨会”

作者：张再君宁婷婷常逊李绍清李阳生朱英国武汉大学生命科学学院

Ca-ATPase 在维持细胞质内 Ca稳态方面起重要作用.以红莲型雄性不育水稻粤泰 A、B 不同发育时期花粉为材科,分析花粉细胞质膜、线粒体膜和液泡膜上 Ca-ATPase 活性的动态变化.结果表明, 粤泰 A 与粤泰 B 花粉细胞质膜、线粒体膜及液泡膜... 详细信息

Ca-ATPase 在维持细胞质内 Ca稳态方面起重要作用.以红莲型雄性不育水稻粤泰 A、B 不同发育时期花粉为材科,分析花粉细胞质膜、线粒体膜和液泡膜上 Ca-ATPase 活性的动态变化.结果表明, 粤泰 A 与粤泰 B 花粉细胞质膜、线粒体膜及液泡膜 Ca-ATPase 活性变化明显不同.在四分体至单核早期, 不育系粤泰 A 花粉细胞质膜 Ca-ATPase 活性稍高于粤泰 B;单核晚期及二核期则正好相反,粤泰 A 花粉细胞质膜 Ca-ATPase 活性显著低于粤泰 B.仅单核晚期,粤泰 A 液泡膜 Ca-ATPase 活性显著高于粤泰 B, 其他三个时期粤泰 A、B 中的液泡膜 Ca-ATPase 活性差异不显著.粤泰 A 中线粒体膜 Ca-ATPase 活性自四分体到二核期逐渐下降,四分体时期,粤泰 A 中线粒体膜 Ca-ATPase 活性显著高于粤泰 B,单核早期粤泰 A 与粤泰 B 没有显著差异,而在之后的单核晚期和二核期,粤泰 A 中 Ca-ATPase 活性明显低于粤泰 B.综合分析认为,在粤泰 A 花粉发育动态变化过程中,为维持花粉细胞质钙稳态,首先细胞质膜 Ca-ATPase 将钙转移到花粉细胞质外,线粒体膜 Ca-ATPase 将细胞质过量钙离子转移到线粒体中,随着花粉发育进程,单核晚期,花粉细胞质膜和线粒体膜 Ca-ATPase 活性持续下降,无力进一步维持钙稳态时,而此时花粉中央大液泡形成,液泡膜 Ca-ATPase 急剧上升以维持花粉钙的稳态,但是液泡最终不能承受太过量的钙积累而导致液泡破裂,细胞质积累过量的钙离子,使钙稳态遭受破坏,最终使花粉败育.

关键词：红莲型细胞质雄性不育花粉发育 Ca2+-ATPase 钙稳态

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分子标记鉴定红莲型细胞质雄性不育杂交水稻组合及其亲本

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中南民族大学学报（自然科学版） 2003年第2期22卷 17-19页

作者：徐鑫王春台朱英国刘学群中南民族大学生物技术国家民委重点实验室武汉大学植物发育教育部重点实验室

利用 RAPD分子标记对红莲型细胞质雄性不育 (HL- CMS)杂交水稻组合及其亲本进行了 DNA多态性分析 .从 1 2 4个随机引物中筛选出具有非常明显的多态性 ,且只能扩增出 1～ 5个片段的 4个引物能有效地区分和鉴定红莲型 (HL) 2个杂交水稻组... 详细信息

利用 RAPD分子标记对红莲型细胞质雄性不育 (HL- CMS)杂交水稻组合及其亲本进行了 DNA多态性分析 .从 1 2 4个随机引物中筛选出具有非常明显的多态性 ,且只能扩增出 1～ 5个片段的 4个引物能有效地区分和鉴定红莲型 (HL) 2个杂交水稻组合 (粤泰系列 ,从广系列 )

关键词：杂交水稻随机扩增多态型DNA 多态性红莲型细胞质雄性不育亲本杂交组合分子标记

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水稻HL-CMS细胞质雄性不育基因的体外转录及Northern Blot检测

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安徽农业科学 2014年第12期42卷 3497-3498,3501页

作者：华宇峰刘京王春台刘学群谭艳平中南民族大学生命科学学院/生物技术国家民委重点实验室武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室湖北武汉430074

[目的]通过基因克隆和体外转录技术获得水稻红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)不育系粤泰A(YTA)中的2个细胞质雄性不育基因orf216和orfH79的RNA,为Northern Blot检测提供阳性定量标准品,并可作为凝胶阻滞试验的底物,用于研究与恢复基因编码... 详细信息

[目的]通过基因克隆和体外转录技术获得水稻红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)不育系粤泰A(YTA)中的2个细胞质雄性不育基因orf216和orfH79的RNA,为Northern Blot检测提供阳性定量标准品,并可作为凝胶阻滞试验的底物,用于研究与恢复基因编码产物的相互作用,从而为阐释不育基因与恢复基因的相互作用分子机制奠定基础。[方法]以红莲型胞质雄性不育基因orf216和orfH79的特异引物,利用不育系YTA为材料,PCR扩增获得相应片段,分别连接至pGEM-T Easy质粒并筛选阳性重组质粒,测序鉴定后酶切线性化,补平粘性末端,以rN4为底物、用依赖于DNA的RNA聚合酶进行体外转录,转录产物用DNase处理除去DNA模板,纯化并测定RNA浓度,并用Northern Blot验证。[结果]获得了细胞质雄性不育基因orf216和orfH79各自的RNA,经检测orf216浓度为1.286μg/μl,A260/A280为2.01;orfH79浓度为1.006μg/μl,A260/A280为2.10。[结论]运用体外转录技术获得的RNA片段条带单一,纯度较高,可用于体外大量获取目的 RNA。

关键词：水稻红莲型细胞质雄性不育体外转录 Northern Blot

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水稻HL-CMS中2个雄性不育候选基因表达模式的初步研究

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华中农业大学学报 2009年第4期28卷 394-397页

作者：陈为周杰谭艳平程钢刘新琼王春台刘学群中南民族大学生命科学学院/生物技术国家民委重点实验室武汉430074

采用实时荧光定量PCR技术,比较了水稻红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)不育系粤泰A(YTA)中的2个雄性不育候选基因HLsp和orfH79在根、茎、叶以及减数分裂期小穗和三核期花药中的表达模式。结果表明,HLsp和orfH79均在减数分裂期小穗中表达最... 详细信息

采用实时荧光定量PCR技术,比较了水稻红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)不育系粤泰A(YTA)中的2个雄性不育候选基因HLsp和orfH79在根、茎、叶以及减数分裂期小穗和三核期花药中的表达模式。结果表明,HLsp和orfH79均在减数分裂期小穗中表达最高,而在营养生长的根、茎、叶及成熟花粉中表达很低。HLsp在粤泰A不同组织中的表达均低于orfH79,但HLsp在减数分裂期小穗中的表达量与在其它组织中的表达量的差异明显比orfH79大。2个不育候选基因HLsp和orfH79在HL-CMS不育系YTA不同组织及发育时期的表达差异,暗示二者在水稻HL-CMS的发生中可能行使不同的功能。

关键词：水稻红莲型细胞质雄性不育实时荧光定量PCR 基因表达

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红莲型CMS水稻RF5育性恢复复合体及其亚基RFC5的功能研究

红莲型CMS水稻RF5育性恢复复合体及其亚基RFC5的功能研究

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作者：徐杨红武汉大学

学位级别：博士

细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility)是高等植物中一种重要的生物学现象,这是由细胞核与细胞质相互作用产生的结果。它为杂交水稻的利用和发展奠定了基础。杂交水稻的成功利用依赖于三系配套,即保持系,恢复系和不育性。杂交种... 详细信息

细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility)是高等植物中一种重要的生物学现象,这是由细胞核与细胞质相互作用产生的结果。它为杂交水稻的利用和发展奠定了基础。杂交水稻的成功利用依赖于三系配套,即保持系,恢复系和不育性。杂交种的产生关键在于不育系的育性恢复。植物细胞质雄性不育育性恢复的分子机理比较复杂,其作用机制在基因组水平,转录水平,表达水平以及代谢水平中均有相关研究报道。红莲型细胞质雄性不育是一种重要的不育类型。在红莲型不育系水稻中,线粒体基因OrfH79能编码一种毒性蛋白,使线粒体呼吸链产生紊乱,造成能量不足,从而导致花粉败育。在红莲型恢复系水稻中,核编码的PPR蛋白,能募集其它育性恢复复合体亚基,进入线粒体,并对不育转录本进行加工,清除毒性蛋白,从而恢复线粒体正常的能量代谢功能,使花粉育性得到恢复。关于育性恢复复合体的相关研究已有报道,前期研究表明,在Rf5恢复机理中,PPR791募集GRP162、V-ATPase、WD40以及ERCC4,并在线粒体中组装成约440KD的复合体,进而特异性切割不育转录本atp6-orfH79,从而恢复水稻花粉育性。在此基础上,本论文进一步探究了育性恢复复合体中各亚基之间的相互作用关系,证明了育性恢复复合体中各亚基在线粒体中的一致定位。此外,通过开发一种简单高效的线粒体方法来研究线粒体的功能。最后通过对ERCC4功能的详细分析,探索了水稻中由于核质互作引起的细胞质雄性不育的分子进化机制。研究结果如下: 1、利用 CRISPR/Cas9 技术对Rf5 NIL 材料中 V-ATPase(RFC4)、ERCC4(RFC5)分别进行转基因敲除实验,对转基因敲除成功材料后代T1分析发现,RFC4和RFC5的表达量均有一定程度的下降,同时不育转录本在蛋白水平转录水平都得到了一定程度的升高。花粉育性分析发现,其后代花粉呈现典型的红莲型圆败,且花粉育性为50%。通过双分子荧光互补实验(BiFC)以及酵母双杂实验,进一步验证了在RF5育性恢复复合体中各亚基之间的相互作用关系,且细化了各个亚基在空间中可能的相对关系。通过在不育材料YTA以及可育材料Rf5 NIL中的BiFC实验,深化了对RF5复合体在不同材料中育性恢复过程的认识。免疫胶金实验进一步阐明了不同复合体亚基在两种材料中的定位模式。 2、使用原核表达技术成功表达了 RFC5-GST全长,并与不育转录本孵育,进行体外切割实验。结果表明RFC5全长能同时特异性切割和降解不育转录本,此外,RFC5被发现能与不育转录本结合。在RFC5过表达材料的转基因T1中,不育转录本含量显著下降。 3、通过对RFC5功能进一步分析发现,Rfc5与酵母中Rad1同源,表明其可能参与DNA损伤修复机制。定位分析发现RFC5同时定位于细胞核及线粒体中。通过线粒体Co-IP实验发现,RFC5与RAD10相互作用。酵母双杂实验表明RFC5能形成二聚体。对日本晴(Nipponbare)Rfc5进行敲除分析发现,其育性受到影响。EMSA实验表明RFC5能特异性性的结合DNA splay结构和DNA holliday结构,但并不能行使其切割功能。此外rfc5突变体幼苗时期的生长速度要比野生型显著缓慢,对其毒性胁迫研究发现,突变体对丝裂霉素以及环丙沙星更加敏感,且突变体的DNA损伤修复能力更弱。 4、提出了一种简单高效的线粒体提取方法,通过结合植物原生质体的提取和动物线粒体的提取方法,从水稻幼苗中提取线粒体,该方法简单方便,不需要大量的植物材料,试剂耗材以及昂贵的仪器设备,而且实验操作简单,排除了繁琐的材料研磨,Percoll梯度准备以及长时间的差速离心。使用这种方法可以非常高效的提出比较纯的线粒体,所提出的线粒体完整度好,具有生物学活性,可用于常规的线粒体生理生化实验。所提线粒体可用水稻育性恢复复合体各亚基的定位,从而促进对红莲型细胞质雄性不育育性恢复机制的研究。

关键词：红莲型细胞质雄性不育育性恢复复合体核质互作 DNA损伤修复

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朱英国团队揭开水稻恢复基因之谜

引用

粮食科技与经济 2012年第2期37卷 3-3页

武汉大学朱英同院士课题组在研究水稻红莲型细胞质雄性不育育性恢复机理方面取得新突破，首次提出恢复基因分予复合体，推进了育性恢复机理的认知。相关论文近日存线发表于植物学科权威杂志《植物细胞》。目前。

关键词：恢复基因红莲型细胞质雄性不育水稻英国育性恢复武汉大学植物细胞植物学科

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