检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：王春华第三军医大学

学位级别：硕士

目的:通过观察PT孔在NAFLD大鼠及体外肝细胞脂肪变模型的状态变化,研究PT孔开放与NAFLD肝细胞凋亡的关系及可能的发生机制。方法:(1) 24只S-D雄性大鼠随机分为基础饲料组(正常对照组,C组)、高脂饲料组(脂肪肝组,F组),其中C组取8周时相... 详细信息

目的: 通过观察PT孔在NAFLD大鼠及体外肝细胞脂肪变模型的状态变化,研究PT孔开放与NAFLD肝细胞凋亡的关系及可能的发生机制。方法: (1) 24只S-D雄性大鼠随机分为基础饲料组(正常对照组,C组)、高脂饲料组(脂肪肝组,F组),其中C组取8周时相点,F组取4周、8周、12周3个时相点,每时相点6只动物。(2)动态观察各组:①血浆甘油三酯、游离脂肪酸、丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶变化;②HE染色光镜观察肝脏组织病理改变;③电镜观察肝细胞线粒体超微结构变化;④分光光度计检测肝细胞线粒体PT孔状态变化;⑤流式细胞仪AnnexinV/PI双标法检测肝细胞凋亡百分数;⑥免疫组织化学法及Western-blot检测Bcl-2、Bax、Cyt C在肝脏中的表达。 (2)通过油酸诱导L02肝细胞脂肪变建立体外NAFLD脂肪变模型(S组),按脂变时间分为0、24、48、72小时4个时相点,油酸诱导L02肝细胞脂肪变体外NAFLD模型加入PT孔特异拮抗剂CsA组(S+CsA组),设正常L02肝细胞为对照组(L组),动态观察各组:①荧光显微镜法观察PT孔的状态变化;②流式细胞仪AnnexinV/PI双标法检测肝细胞凋亡百分数;③免疫细胞化学法检测Cyt C、Bcl-2、Bax在肝细胞中的表达。结果: (1)①在F组血浆甘油三酯、游离脂肪酸、丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶随高脂饲料饲养时间延长呈上升趋势,在12周时达到高峰,差异具有显著性(P<0.05);②HE染色结果显示:C组大鼠肝脏无异常发现;F组肝脏在4周时出现脂肪变,病理分级为2度脂肪变, 8周呈3度脂肪变,12周出现炎细胞浸润,进展为非酒精性脂肪性肝炎;③电镜下观察F组12周肝细胞线粒体,外室及嵴内间隙肿胀,部分内室肿胀;④PT孔开放情况:在Ca++诱导下, F组4周、8周线粒体PT孔开放比率较C组即有明显增加,以F组12周最为显著(P<0.05)。CsA作用下F组、C组无显著区别(P>0.05);⑤F组与C组相比,细胞凋亡率呈增加趋势, F组4周与C组相比较有所增加但无显著差别(P>0.05),高脂8周、高脂12周与对照组相比有显著差别(P<0.05);⑥免疫组织化学染色显示: Bcl-2在C组的表达为散在弱阳性,F组4、8、12周阳性细胞数渐增加,并在脂肪变明显的部位着色深;Bax在C组呈弱阳性表达,在F组随脂肪变时间延长,表达逐渐增多,阳性细胞数增多,染色加深。Cyt C在C组肝细胞胞浆中呈黄色细颗粒,均匀分布,在F组随着时间延长,染色加深,表达量增多,弥漫分布;Western blot检测结果显示:F组Bcl-2、Bax、CytC蛋白的表达随着脂肪变时间延长增多, Bcl-2、Bax蛋白表达尤以F组12周明显,与C组比较,差异具有显著性(P<0.05); Cyt C在F组4周、8周、12周较C组明显增加(P<0.05),但F组间比较无显著差异(P>0.05)。 (2)油酸与L02肝细胞共同孵育24小时后出现肝细胞脂肪变,提示NAFLD体外模型造模成功;①油酸可诱导S组0小时肝细胞PT孔开放,PT孔开放后24小时可引起肝细胞脂肪变,PT孔的特异阻断剂CsA可阻断PT孔的开放。Ca++作用下出现PT孔开放,但S组、L组比较无显著差异(P>0.05)。②AnnexinV/PI双标法流式细胞仪检测细胞凋亡率提示L组与S组24小时相比较无显著差异(P>0.05),S组48小时、72小时细胞凋亡率明显增加,与L组比较有显著差异(P<0.05)。③免疫细胞化学显示Bcl-2、CytC在L组和S组0小时为弱阳性表达,散在棕黄色颗粒存在于细胞浆,以胞核周边为多见;Bax为弱阳性浅淡表达。随脂肪变时间延长,Bcl-2、Bax、CytC在S组表达逐渐增高,在72小时达到高峰,Bcl-2/Bax呈逐渐升高趋势。其中CytC、Bcl-2胞浆内呈深棕色弥漫存在,为强阳性表达;与L组比较有显著差异(P<0.05)。结论: 1、PT孔开放介导的细胞凋亡途径参与了NAFLD肝细胞凋亡。2、Bcl-2蛋白家族参与PT孔介导的NAFLD肝细胞凋亡的调节,升高的Bcl-2/Bax在NAFLD发展过程中不能有效阻止肝细胞凋亡的发生。3、血浆和细胞内的FFA增多可引起肝细胞脂肪变,同时可引起NAFLD肝细胞PT孔开放,介导肝细胞凋亡。

关键词：线粒体通透转换孔线粒体通透性转换非酒精性脂肪性肝病非酒精性脂肪性肝炎凋亡

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ATP敏感性钾通道和线粒体通透转换孔参与白藜芦醇苷的心肌保护作用(英文)

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中国药理学与毒理学杂志 2009年第2期23卷 81-88页

作者：张利萍杨长瑛王莹萍关玥徐瑛张翼河北医科大学基础医学院生理学教研室河北石家庄050017

目的探讨白藜芦醇苷(Poly)对大鼠缺血再灌注(I-R)心肌损伤的保护作用及其机制。方法应用Langendorff室技术制备离体大鼠心脏I-R损伤模型。雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、Poly(25, 50和75μmol.L-1)组、格列本脲(Gli) +Poly组、5-... 详细信息

目的探讨白藜芦醇苷(Poly)对大鼠缺血再灌注(I-R)心肌损伤的保护作用及其机制。方法应用Langendorff室技术制备离体大鼠心脏I-R损伤模型。雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、Poly(25, 50和75μmol.L-1)组、格列本脲(Gli) +Poly组、5-羟基癸酸(5-HD) +Poly组和苍术苷(Atr) +Poly组。对照组心脏由K-H液灌流110 min;模型组由K-H液灌流20 min后,停灌30 min,复灌60min;Poly组在I-R处理前用含不同浓度Poly的K-H液灌流10 min;Gli +Poly和5-HD+Poly组在I-R前分别用含Gli (10μmol.L-1)和5-HD(100μmol.L-1)的K-H液灌流5 min,再加入Poly (50μmol.L-1)灌流10 min;Atr +Poly组用含Poly(50μmol.L-1)K-H液灌流10 min及停灌30 min后,先用含Atr(20μmol.L-1)的K-H液灌流15 min,然后改用K-H液灌流。分别记录各组停灌前、停灌30 min和复灌60 min内的左心室舒张末压(LVEDP)、左心室舒张压(LVDP)、左心室等容期压力最大变化速率(±dp/dtmax)和冠脉流量(CF)等心功能指标。心脏复灌60 min后,用氯化三苯基四氮唑染色法测定心肌梗死面积,透射电镜下检测心肌超微结构变化。结果缺血前各组心功能参数无明显变化。与模型组相比,Poly可浓度依赖性地促进大鼠I-R后心功能的恢复,预防I-R损伤。复灌60 min后,Poly组大鼠心脏LVDP,±dp/dtmax和CF明显高于模型组;LVEDP则低于模型组;缺血前给予Poly(50μmol.L-1)10 min可明显减小I-R后心肌梗死面积,并改善心肌超微结构。Gli, 5-HD和Atr可阻断Poly对I-R心脏心功能参数和心肌梗死面积等的保护作用。结论 Poly具有明显的抗心肌I-R损伤作用,其心脏保护作用可能与其增加细胞膜和线粒体膜ATP敏感性钾通道开放和抑制线粒体通透转换孔开放有关。

关键词：白藜芦醇苷钾通道线粒体通透转换孔心肌再灌注损伤

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体外非酒精性脂肪肝细胞模型线粒体通透转换孔的变化及其与细胞凋亡的关系

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中华肝脏病杂志 2007年第11期15卷 837-839页

作者：陈东风王春华第三军医大学大坪医院野战外科研究所、消化内科重庆400042

目的探讨线粒体通透转换孔（PT孔）与肝细胞脂肪变和细胞凋亡的关系。方法采用油酸诱导肝细胞株L02细胞建立非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）体外模型，油红O染色观察细胞脂肪变情况，应用荧光显微镜法观察各组荧光下降百分比（反映PT孔的... 详细信息

目的探讨线粒体通透转换孔（PT孔）与肝细胞脂肪变和细胞凋亡的关系。方法采用油酸诱导肝细胞株L02细胞建立非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）体外模型，油红O染色观察细胞脂肪变情况，应用荧光显微镜法观察各组荧光下降百分比（反映PT孔的开放程度），流式细胞仪Annexin V／P1法检测细胞凋亡情况。结果荧光显微镜观察结果显示，油酸可诱导L02细胞PT孔开放（72．58％±2．78％），与对照组（8．28％±4．98％）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；并可于24h后引起肝细胞脂肪变，至72h后肝细胞脂肪变持续存在；随NAFLD体外模型造模时间延长，细胞凋亡比例逐渐增加，以48h和72h（分别为11．09％±4．95％和15．24％±2．45％）最为显著，与对照组（4．56％±1．25％）比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论PT孔开放程度与NAFLD体外模型细胞凋亡密切相关，并与肝细胞脂肪变有一定关系。

关键词：脂肪肝非酒精性线粒体通透转换孔游离脂肪酸类非酯化细胞凋亡非酒精性脂肪性肝炎

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线粒体通透转换孔与心肌缺血-再灌注损伤

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医学研究生学报 2007年第3期20卷 327-330页

作者：刘晓明徐建国南京军区南京总医院南京大学医学院临床学院麻醉科江苏南京210002

缺血-再灌注会导致线粒体通透转换孔(MPTP)的开放,通道的低水平开放和随后的关闭,会导致线粒体释放细胞色素C及其他前凋亡分子,如果开放无限制继续,会导致离子稳态失衡,引起一系列细胞死亡的瀑布式反应。缺血-再灌注期间直接或间接的抑... 详细信息

缺血-再灌注会导致线粒体通透转换孔(MPTP)的开放,通道的低水平开放和随后的关闭,会导致线粒体释放细胞色素C及其他前凋亡分子,如果开放无限制继续,会导致离子稳态失衡,引起一系列细胞死亡的瀑布式反应。缺血-再灌注期间直接或间接的抑制MPTP开放,对再灌注损伤产生明显的保护作用。近期发现,MPTP短暂的低水平开放对其后的再灌注损伤也有保护作用。作者着重对MPTP的组成及机制、心肌缺血-再灌注时的通透改变和与心肌缺血预处理的关系作一综述,以寻求防治心肌缺血-再灌注损伤的新策略。

关键词：线粒体通透转换孔缺血-再灌注损伤心肌缺血预处理

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线粒体通透转换孔开放与NAFLD大鼠肝细胞凋亡的关系

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重庆医学 2007年第8期36卷 681-682,685页

作者：王春华陈东风第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科重庆400042

目的探讨大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)发生发展过程中线粒体通透转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)状态改变,及其与肝细胞凋亡的关系。方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组... 详细信息

目的探讨大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)发生发展过程中线粒体通透转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)状态改变,及其与肝细胞凋亡的关系。方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组与实验组,对照组6只给予正常鼠食,8周后处死;实验组18只给予高脂饮食。分别于饲养4、8、12周时处死。提取线粒体,分光光度计检测线粒体通透转换孔的状态变化,流式细胞术检测肝细胞凋亡情况。结果线粒体通透转换孔开放率随高脂饮食饲养时间延长明显增加,肝细胞凋亡比例亦明显增加。结论大鼠非酒精性脂肪性肝病肝细胞凋亡与线粒体通透转换孔有关。线粒体通透转换孔可能参与非酒精性脂肪肝向非酒精性脂肪性肝炎转变的“二次打击”过程。

关键词：线粒体通透转换孔细胞凋亡非酒精性脂肪性肝病

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线粒体通透转换孔的分子机理

线粒体通透转换孔的分子机理

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中国药理学会第十次全国学术会议

作者：李科南李小倩焦金金李静唐向东南开大学医学院药理系教育部生物活性材料重点实验室

再灌注损伤(Reperfusion injury,RI)是众多疾病如急性心肌梗塞与缺血性中风病理损害的主要机制。在缺血后再灌注的头几分钟,线粒体内膜上形成大量的通透转换孔(mPTP),导致线粒体基质肿胀、线粒体崩解,继而引起细胞死亡。关于mPTP的分子... 详细信息

再灌注损伤(Reperfusion injury,RI)是众多疾病如急性心肌梗塞与缺血性中风病理损害的主要机制。在缺血后再灌注的头几分钟,线粒体内膜上形成大量的通透转换孔(mPTP),导致线粒体基质肿胀、线粒体崩解,继而引起细胞死亡。关于mPTP的分子身份,目前存在很大争议。也有的证据支持线粒体溶质运载体

关键词：线粒体通透转换孔分子机理 SLC

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线粒体通透转换孔开放与NAFLD大鼠肝细胞凋亡的关系

线粒体通透转换孔开放与NAFLD大鼠肝细胞凋亡的关系

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中华医学会第七次全国消化病学术会议

作者：王春华陈东风第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科

目的探讨大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty hver disease,NAFLD)发生发展过程中线粒体通透转换孔(mitochondrial permeability transition pore,PT 孔)状态改变,及其与肝细胞凋亡的关系。方法 24只雄性 SD 大鼠随机分为2组,... 详细信息

目的探讨大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty hver disease,NAFLD)发生发展过程中线粒体通透转换孔(mitochondrial permeability transition pore,PT 孔)状态改变,及其与肝细胞凋亡的关系。方法 24只雄性 SD 大鼠随机分为2组,对照组6只给予正常鼠食,8周后处死;实验组18只给予高脂饮食。分别于饲养4、8、12周时处死。提取线粒体,分光光度计检测线粒体通透转换孔的状态变化,

关键词：线粒体通透转换孔肝细胞凋亡大鼠肝细胞非酒精性脂肪性肝病 NAFLD

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补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔调控的影响

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新中医 2010年第6期42卷 113-115页

作者：黄红黄宏兴李颖王高峰王广伟广州中医药大学广东广州510405 广州医学院第一附属医院广东广州510120

目的:探讨补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔(MPTP)的调控作用。方法:将6月龄的雌性SD大鼠随机分为手术模型组、雌激素组、中药组和空白对照组。以双侧卵巢摘除手术造模成功后,中药组给予中药灌胃,每天1次;雌激素组予尼... 详细信息

目的:探讨补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔(MPTP)的调控作用。方法:将6月龄的雌性SD大鼠随机分为手术模型组、雌激素组、中药组和空白对照组。以双侧卵巢摘除手术造模成功后,中药组给予中药灌胃,每天1次;雌激素组予尼尔雌醇灌胃,每周1次;手术模型组和空白对照组给予蒸馏水灌胃,每天1次。治疗3月后,收集肌肉组织进行MPTP的活性检测。结果:MPTP吸光值(OD)比值在30、60min这两个时间点上,雌激素组、空白对照组与手术模型组比较,差异均有显著性意义(P<0.05);而中药组与其他各组比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:补肾健脾活血中药可在一定程度上调控骨质疏松骨骼肌MPTP的开放程度,但药物浓度未达到作用的阀值,差异无显著性意义,值得进一步研究。

关键词：补肾健脾活血方骨质疏松线粒体通透转换孔动物实验大鼠

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补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔的调控影响

补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔的调控影响

引用

中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议

作者：黄红黄宏兴李颖王高峰王广伟广州中医药大学广州医学院第一附属医院

目的探讨补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔的调控作用。方法6月龄的雌性SD大鼠随机分为模型组、雌激素组、中药组和空白组。造模成功后,中药组给予中药灌胃,每天1次;激素组给予尼尔雌醇按灌胃,每周1次;模型组和空白组给... 详细信息

目的探讨补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔的调控作用。方法6月龄的雌性SD大鼠随机分为模型组、雌激素组、中药组和空白组。造模成功后,中药组给予中药灌胃,每天1次;激素组给予尼尔雌醇按灌胃,每周1次;模型组和空白组给予蒸馏水灌胃,每天1次。治疗3个月后,收集肌肉组织进行线粒体通透转换孔的活性检测。结果线粒体通透转换孔吸光值(OD)比值在30min和60min这两个时间点上,雌激素组、空

关键词：线粒体通透转换孔健脾活血方骨骼肌骨质疏松

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补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔的调控影响

补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔的调控影响

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广东省医学会第九次骨质疏松学学术会议暨湛江市医学会骨质疏松学专业委员会第一次学术会议

作者：黄红黄宏兴李颖王高峰王伟广州中医药大学广州医学院第一附属医院

目的：探讨补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔的调控作用。方法：6月龄的雌性SD大鼠随机分为模型组、雌激素组、中药组和空白组.造模成功后,中药组给予中药灌胃，每天1次;激素组给予尼尔雌醇按灌胃,每周1次;模型组和空白... 详细信息

目的：探讨补肾健脾活血方对骨质疏松骨骼肌线粒体通透转换孔的调控作用。方法：6月龄的雌性SD大鼠随机分为模型组、雌激素组、中药组和空白组.造模成功后,中药组给予中药灌胃，每天1次;激素组给予尼尔雌醇按灌胃,每周1次;模型组和空白组给予蒸馏水灌胃,每天1次.治疗3个月后,收集肌肉组织进行线粒体通透转换孔的活性检测。结果：线粒体通透转换孔吸光值(OD)比值在30min和60rain这两个时间点上,雌激素组、空白对照组与模型组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);而中药组与其他各组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论：补肾健脾活血中药可以调控骨质疏松骨骼肌线粒体通透孔的开放程度,但方中的药物浓度未达到作用的阀值,值得进一步的研究。

关键词：骨质疏松补肾健脾活血方线粒体通透转换孔骨骼肌

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