检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医学 2013年第32期42卷 3918-3920页

作者：戚大梁王强易维京解放军第八二医院一四九临床部江苏连云港222042

目的制备特异性抗组氨酸标签(His-tag)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以合成的15个组氨酸的多肽耦联牛血清清蛋白(BSA)为抗原免疫Balb/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选阳性克隆及有限稀释法进... 详细信息

目的制备特异性抗组氨酸标签(His-tag)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以合成的15个组氨酸的多肽耦联牛血清清蛋白(BSA)为抗原免疫Balb/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选阳性克隆及有限稀释法进行克隆化,用Protein G柱亲和纯化抗体及ELISA检测纯化抗体的效价、相对亲和力及抗体亚类,用ELISA及Western blotting对mAb的特异性进行鉴定,并与含His-tag的重组蛋白特异性抗体配对建立双抗夹心ELISA定量检测对应的重组蛋白。结果筛选出5株能稳定分泌抗His-tag的杂交瘤细胞株,抗体亚类均为IgG1(κ),其中1-G2亲和力最高(1.27×1010),并且1-G2在ELISA及Western blotting中能与不同类型的含His-tag的重组蛋白结合,能与降钙素原(PCT)抗体构建双抗夹心ELISA定量检测含His-tag的PCT重组蛋白,灵敏度达到4.6ng/mL。结论成功制备了特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗His-tag的mAb,该抗体能应用于ELISA及Western blotting等多种His-tag的检测方法,为蛋白质研究检测、定位、相互作用等提供了工具。

关键词：抗体单克隆酶联免疫吸附测定印迹法蛋白质组氨酸标签

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一种抗大田软海绵酸单链抗体的氨基酸序列及其表达载体

一种抗大田软海绵酸单链抗体的氨基酸序列及其表达载体

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作者：林旭聪田印琪袁琳谢增鸿 350108 福建省福州市闽侯县福州大学城乌龙江北大道2号福州大学

本发明具体涉及了一条抗大田软海绵酸的单链抗体的氨基酸序列及其表达载体。所述氨基酸序列包括：一重链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.1所示；一轻链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.2所示。编码该重链可变区的核苷酸序列如SEQ... 详细信息

标准号: CN114106170A

本发明具体涉及了一条抗大田软海绵酸的单链抗体的氨基酸序列及其表达载体。所述氨基酸序列包括：一重链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.1所示；一轻链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.2所示。编码该重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，编码该轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。所述单链抗体的核苷酸序列与带有组氨酸标签麦芽糖结合蛋白的pET28a‑MBP‑T7‑6×His表达载体形成了可溶性重组质粒。

关键词：氨基酸序列核苷酸序列重链可变区表达载体单链抗体麦芽糖结合蛋白可溶性重组轻链可变区组氨酸标签可变区软海绵质粒

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一种基于荧光探针Rho-IDA-CoII的信号肽文库的高通量筛选方法

一种基于荧光探针Rho-IDA-CoII的信号肽文库的高通量筛选方法

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作者：柳志强沈骥冬蔡雪金利群郑裕国 310000 浙江省杭州市拱墅区潮王路18号

本发明公开了一种基于荧光探针Rho‑IDA‑CoII的信号肽文库的高通量筛选方法。与传统的筛选方法相比，使用荧光探针标记定量法能准确测定50~500 ng范围内的组氨酸标签融合蛋白，不会受到复杂样品及环境污染导致的高背景荧光，应用范围广... 详细信息

标准号: CN114231553A

本发明公开了一种基于荧光探针Rho‑IDA‑CoII的信号肽文库的高通量筛选方法。与传统的筛选方法相比，使用荧光探针标记定量法能准确测定50~500 ng范围内的组氨酸标签融合蛋白，不会受到复杂样品及环境污染导致的高背景荧光，应用范围广。通过荧光高通量筛选法，从枯草芽孢杆菌表达腈水合酶信号肽文库中，筛选得到能分泌表达活性腈水合酶的枯草芽孢杆菌重组子，其培养上清液中检测到腈水合酶活性为12.97±0.77 U/mL。本发明的可分泌表达腈水合酶的重组子可应用于工业生产腈水合酶及其下游应用。

关键词：腈水合酶枯草芽孢杆菌高通量筛选分泌表达信号肽重组子文库筛选荧光探针标记腈水合酶活性培养上清液应用范围广组氨酸标签背景荧光复杂样品融合蛋白荧光探针传统的定量法荧光应用检测

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一种许氏平鲉IL-6重组蛋白、可溶表达方法及应用

一种许氏平鲉IL-6重组蛋白、可溶表达方法及应用

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作者：齐鑫闫少静李昀温海深王孝杰左陈鹏吕里康 266075 山东省青岛市崂山区松岭路238号

本发明属于基因工程技术领域，公开了一种许氏平鲉IL‑6重组蛋白、可溶表达方法及应用，所述许氏平鲉IL‑6重组蛋白包括IL‑6成熟肽氨基酸序列、N端的促溶短肽以及C端6×组氨酸标签；优选地，所述IL‑6重组蛋白氨基酸序列为SEQ ID NO：... 详细信息

标准号: CN114057897A

本发明属于基因工程技术领域，公开了一种许氏平鲉IL‑6重组蛋白、可溶表达方法及应用，所述许氏平鲉IL‑6重组蛋白包括IL‑6成熟肽氨基酸序列、N端的促溶短肽以及C端6×组氨酸标签；优选地，所述IL‑6重组蛋白氨基酸序列为SEQ ID NO：1，所述IL‑6成熟肽氨基酸序列为SEQ ID NO：2，所述编码N端促溶短肽、IL‑6成熟肽氨基酸以及C端连接肽及His标签的DNA序列为SEQ ID NO：3。本发明首次构建了许氏平鲉IL‑6的原核表达载体pET‑IL6‑His，能够得到氨基酸序列与IL‑6成熟肽一致的许氏平鲉IL‑6重组蛋白，该许氏平鲉IL‑6重组蛋白能够用于许氏平鲉的催产育苗中。

关键词：重组蛋白成熟肽氨基酸序列氨基酸序短肽基因工程技术原核表达载体组氨酸标签连接肽氨基酸催产构建可溶优选育苗应用

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一种抗四溴双酚A-双（2-羟乙基）醚单链抗体的氨基酸序列及其表达载体

一种抗四溴双酚A-双（2-羟乙基）醚单链抗体的氨基酸序列及其表达...

引用

作者：林旭聪吴星霖何幼芬谢增鸿 350108 福建省福州市闽侯县福州大学城乌龙江北大道2号福州大学

本发明具体提供了一种抗四溴双酚A‑双（2‑羟乙基）醚单链抗体的氨基酸序列及其表达载体。所述氨基酸序列包括：一重链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.1所示；一轻链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.2所示。编码该重链可变区的核... 详细信息

标准号: CN114106189A

本发明具体提供了一种抗四溴双酚A‑双（2‑羟乙基）醚单链抗体的氨基酸序列及其表达载体。所述氨基酸序列包括：一重链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.1所示；一轻链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.2所示。编码该重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，编码该轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。将所述的单链抗体的核苷序列克隆到带有组氨酸标签麦芽糖结合蛋白的pET28a‑MBP‑T7‑6×His表达载体中，可实现高可溶性表达。

关键词：氨基酸序列核苷酸序列重链可变区表达载体单链抗体麦芽糖结合蛋白可溶性表达轻链可变区组氨酸标签四溴双酚A 序列克隆可变区羟乙基核苷

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一种人源程序性细胞死亡因子受体蛋白-1及其生产方法和应用

一种人源程序性细胞死亡因子受体蛋白-1及其生产方法和应用

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作者：董金华董航魏小源单喜军黄小明李鑫钰 261000 山东省潍坊市奎文区胜利东街4948号

本发明公开了一种人源程序性细胞死亡因子受体蛋白‑1及其生产方法和用途，该蛋白含有一个附加的半胱氨酸标签用于功能性分子的标记，含有一个组氨酸标签用于蛋白的纯化，编码该蛋白的基因具有针对原核细胞表达优化的序列；生产方法为先... 详细信息

标准号: CN110713545B

本发明公开了一种人源程序性细胞死亡因子受体蛋白‑1及其生产方法和用途，该蛋白含有一个附加的半胱氨酸标签用于功能性分子的标记，含有一个组氨酸标签用于蛋白的纯化，编码该蛋白的基因具有针对原核细胞表达优化的序列；生产方法为先将hPD‑1细胞外氨基酸的基因进行优化，利用PCR将优化的hPD‑1基因扩增后克隆到蛋白表达质粒，构建了hPD‑1原核表达载体；在大肠杆菌细胞内表达hPD‑1并利用组氨酸标签进行纯化，最后使用变性剂进行溶解，透析以对其进行复性，获得重组hPD‑1蛋白质，利用酶联免疫吸附试验验证蛋白质的活性。本发明所公开的hPD‑1生产方法工艺简单易行，所生产的hPD‑1蛋白质成本低，将为hPD‑1单克隆抗体的开发及进一步研发免疫检测技术和抗体医药提供重要工具。

关键词：蛋白质组氨酸标签蛋白酶联免疫吸附试验优化生产大肠杆菌细胞蛋白表达质粒免疫检测技术因子受体蛋白原核表达载体原核细胞表达单克隆抗体功能性分子半胱氨酸基因扩增细胞死亡重要工具基因变性剂源程序氨基酸复性构建抗体透析研发溶解标签克隆验证细胞开发

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一种人源弓形虫重组抗原蛋白的制备方法

一种人源弓形虫重组抗原蛋白的制备方法

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作者：李永刚李伟周冰涵张杰 210000 江苏省南京市栖霞区仙林街道仙林大学城纬地路9号F7栋417室

本发明公开了一种人源弓形虫重组抗原蛋白的制备方法，涉及蛋白纯化技术领域。本发明所述方法，选取弓形虫表面抗原SAG1的全长序列，融合组氨酸标签，在大肠杆菌中大量表达弓形虫重组抗原的包涵体，经过高浓度的尿素变性，依次进行镍柱... 详细信息

标准号: CN113603760A

本发明公开了一种人源弓形虫重组抗原蛋白的制备方法，涉及蛋白纯化技术领域。本发明所述方法，选取弓形虫表面抗原SAG1的全长序列，融合组氨酸标签，在大肠杆菌中大量表达弓形虫重组抗原的包涵体，经过高浓度的尿素变性，依次进行镍柱纯化和阴离子交换柱纯化，最后复性得到抗原性较强的弓形虫重组抗原蛋白。本发明所述方法，首先可有效去除绝大多数杂蛋白，获得抗原性较强的弓形虫重组抗原蛋白，抗原纯度达95%以上，能够在‑20℃稳定保存；其次，本发明所述方法容易放大至大规模生产条件下使用，满足工业生产需要。

关键词：弓形虫重组抗原蛋白抗原性蛋白纯化技术阴离子交换柱大肠杆菌组氨酸标签表面抗原抗原纯度全长序列重组抗原包涵体杂蛋白变性复性镍柱去除人源制备尿素放大融合保存

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一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1及其制备方法和应用

一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1及其制备方法和应用

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作者：张蓬军傅慧兰杨倩倩刘光富俞晓平 310018 浙江省杭州市下沙高教园区学源街258号

本发明公开了一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1及其制备方法和应用，属于生物高分子技术领域。本发明公开的一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1，由15aa组氨酸标签区、184aa烟草环斑病毒重链可变区、15aa连接肽和反向连接的120aa烟草环斑病毒... 详细信息

标准号: CN113061182A

本发明公开了一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1及其制备方法和应用，属于生物高分子技术领域。本发明公开的一种烟草环斑病毒单链抗体TRAB1，由15aa组氨酸标签区、184aa烟草环斑病毒重链可变区、15aa连接肽和反向连接的120aa烟草环斑病毒轻链可变区4段顺次连接构成，长度为334个氨基酸残基。TRAB1产量为480～2300mg/L发酵液，纯度为84.9～96.8％。本发明烟草环斑病毒单链抗体TRAB1具有选择性识别烟草环斑病毒外壳蛋白的特性，且对携带烟草环斑病毒样本反应阳性，在烟草环斑病毒出入境检验检疫领域具有广阔的应用前景。

关键词：烟草环斑病毒单链抗体出入境检验检疫制备方法和应用氨基酸残基轻链可变区生物高分子选择性识别重链可变区组氨酸标签反向连接反应阳性顺次连接外壳蛋白发酵液连接肽样本携带应用

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突变的核酸、表达载体和制备高比活力漆酶突变体及其方法

突变的核酸、表达载体和制备高比活力漆酶突变体及其方法

引用

作者：方泽民沈琛肖亚中彭齐霞 230000 安徽省合肥市肥西路3号

本发明公开了突变的核酸、表达载体和制备高比活力漆酶突变体及其方法，该突变的核酸的序列如SEQ IDNO：1所示；本发明通过ep‑PCR技术快速获取突变漆酶基因，以形成庞大的突变体文库；同时在蛋白N‑末端构建组氨酸标签，便于后续利用标... 详细信息

标准号: CN112921043B

本发明公开了突变的核酸、表达载体和制备高比活力漆酶突变体及其方法，该突变的核酸的序列如SEQ IDNO：1所示；本发明通过ep‑PCR技术快速获取突变漆酶基因，以形成庞大的突变体文库；同时在蛋白N‑末端构建组氨酸标签，便于后续利用标签进行突变体菌株的高通量筛选，实现了漆酶基因在毕赤酵母中的异源表达和改造，重组毕赤酵母突变菌株酶蛋白的比活力提高约2倍，降低该漆酶的使用成本，提升重组毕赤酵母菌的工业应用潜力。

关键词：突变漆酶基因核酸漆酶重组毕赤酵母毕赤酵母菌高通量筛选突变体菌株突变体文库组氨酸标签毕赤酵母表达载体工业应用快速获取末端构建突变菌株异源表达酶蛋白突变体制备蛋白标签改造

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一种新型冠状病毒中和抗体检测试纸条和试剂盒

一种新型冠状病毒中和抗体检测试纸条和试剂盒

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作者：蔡亚雄黄春荣傅苑珊乔娜 510663 广东省广州市萝岗区科学城荔枝山路8号

本发明涉及一种新型冠状病毒中和抗体检测试纸条和试剂盒，其包括PVC底板和依次相互搭接地设置其上的样品垫、白金垫、结合垫、硝酸纤维素膜、以及吸水垫，其中，所述结合垫上固定有胶体金标记的抗组氨酸标签的抗体和胶体金标记的兔IgG... 详细信息

标准号: CN113391075B

本发明涉及一种新型冠状病毒中和抗体检测试纸条和试剂盒，其包括PVC底板和依次相互搭接地设置其上的样品垫、白金垫、结合垫、硝酸纤维素膜、以及吸水垫，其中，所述结合垫上固定有胶体金标记的抗组氨酸标签的抗体和胶体金标记的兔IgG，所述硝酸纤维素膜上设有包被血管紧张素转换酶2的检测线、以及包被羊抗兔IgG多克隆抗体的对照线，所述白金垫为固定有带有组氨酸标签的新型冠状病毒刺突蛋白受体结合域重组蛋白的玻璃纤维纸。所述新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒，具有快速、便捷，且高灵敏度的优点，可用于2019‑nCoV疫苗接种人员评估疫苗效力和再接种评估，也可用于COVID‑19患者的疾病预后评估。

关键词：新型冠状病毒硝酸纤维素膜胶体金标记组氨酸标签结合垫试剂盒包被可用血管紧张素转换酶中和抗体检测玻璃纤维纸多克隆抗体受体结合域羊抗兔IgG 测试纸条刺突蛋白高灵敏度人员评估疫苗接种疫苗效力预后评估重组蛋白接地对照线检测线吸水垫样品垫兔IgG 抗体接种体检中和疾病评估

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