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云南植物研究 2007年第5期29卷 492-496页

作者：王桂芹努尔巴衣.阿布都沙勒克安徽科技学院生物系安徽凤阳233100 新疆大学资源与环境科学学院新疆乌鲁木齐830046

利用解剖学和组织化学的方法,研究了野生和栽培白头翁(Pulsatilla chinensis)主根的解剖结构和皂苷组织化学定位。结果表明:野生白头翁根部韧皮纤维散在,而栽培白头翁的则多个聚集成环状或其它形状;栽培白头翁根的次生木质部导管管腔内... 详细信息

利用解剖学和组织化学的方法,研究了野生和栽培白头翁(Pulsatilla chinensis)主根的解剖结构和皂苷组织化学定位。结果表明:野生白头翁根部韧皮纤维散在,而栽培白头翁的则多个聚集成环状或其它形状;栽培白头翁根的次生木质部导管管腔内富含侵填体;野生白头翁根中分泌腔和分泌道丰富;分泌腔与分泌道的数量及大小是决定白头翁皂苷物质含量高低的主要因子。因此,分泌腔与分泌道大小和数量的多寡可以作为判断所选育的白头翁品种是否优良的结构性指标。

关键词：白头翁主根分泌腔和分泌道皂苷组织化学定位

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六盘山鸡爪大黄茎蒽醌类化合物组织化学定位的研究

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安徽农业科学 2007年第22期35卷 6824-6826页

作者：章英才黄新玲宁夏大学生命科学学院宁夏银川750021

[目的]为了系统掌握六盘山鸡爪大黄茎蒽醌类化合物的分布特征。[方法]以3年生不同成熟时期的六盘山鸡爪大黄茎为实验材料,采用组织化学方法研究了其蒽醌类化合物的组织化学定位特征及贮藏和积累的规律。[结果]随着茎的不断成熟,在茎的... 详细信息

[目的]为了系统掌握六盘山鸡爪大黄茎蒽醌类化合物的分布特征。[方法]以3年生不同成熟时期的六盘山鸡爪大黄茎为实验材料,采用组织化学方法研究了其蒽醌类化合物的组织化学定位特征及贮藏和积累的规律。[结果]随着茎的不断成熟,在茎的表皮、近表皮的1-2层皮层细胞及较内部皮层中,不同程度地增加贮藏和积累了一定数量的蒽醌类化合物,成为茎外部贮藏和积累蒽醌类化合物的主要结构部位。成熟茎大型维管束的维管束鞘、初生韧皮部、初生木质部等组织和髓射线细胞分布了比幼茎多的蒽醌类化合物。[结论]蒽醌类化合物在茎中的分布是多位点的,随着茎发育程度的不同,其表皮、皮层、维管束和髓射线中蒽醌类化合物的分布表现出不同的特点。

关键词：六盘山鸡爪大黄茎蒽醌类化合物组织化学定位

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空心莲子草营养器官结构与三萜皂苷动态积累的关系

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植物研究 2011年第6期31卷 686-691页

作者：王桂芹徐如松王锐安徽科技学院生命科学学院凤阳233100

采用组织化学定位、显微制片技术和三萜皂苷定量分析方法对空心莲子草营养器官结构与三萜皂苷类物质积累关系进行了研究。结果表明:空心莲子草宿根、根状茎、茎和叶中均有三萜皂苷物质的积累,叶和根状茎内含量十分丰富。在相同采收期内... 详细信息

采用组织化学定位、显微制片技术和三萜皂苷定量分析方法对空心莲子草营养器官结构与三萜皂苷类物质积累关系进行了研究。结果表明:空心莲子草宿根、根状茎、茎和叶中均有三萜皂苷物质的积累,叶和根状茎内含量十分丰富。在相同采收期内含量依次为:叶>根状茎>根>茎,叶中主要积累于栅栏组织细胞内。空心莲子草的根和根状茎横切面均属于异常结构,具有成同心环状排列的三生维管束。在宿根和根状茎的次生韧皮部、栓内层、三生韧皮部和结合组织内均有三萜皂苷的分布,三生结构在宿根和根状茎中占有主要地位,是三萜皂苷积累的主要场所。在不同采收期内叶、根状茎和根中三萜皂苷的积累趋势基本一致,均随生长期的增加而递增。空心莲子草茎的横切面由表皮、皮层、维管束和髓腔组成,仅部分皮层细胞和初生韧皮部内有三萜皂苷分布。

关键词：空心莲子草营养器官解剖结构三萜皂苷含量组织化学定位

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珠子参根茎结构特征与皂苷积累的动态变化关系

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植物研究 2011年第3期31卷 284-288页

作者：王桂芹努尔巴衣.阿布都沙勒克安徽科技学院生命科学学院凤阳233100

皂苷类物质是珠子参根茎内贮存的重要次生代谢物质。根据皂苷类物质的化学性质,采用组织化学定位、显微制片技术和皂苷定量分析方法对不同生长年限珠子参的根茎节部进行了解剖学与皂苷动态积累的关系研究。结果表明:珠子参根茎节部横切... 详细信息

皂苷类物质是珠子参根茎内贮存的重要次生代谢物质。根据皂苷类物质的化学性质,采用组织化学定位、显微制片技术和皂苷定量分析方法对不同生长年限珠子参的根茎节部进行了解剖学与皂苷动态积累的关系研究。结果表明:珠子参根茎节部横切面结构复杂,具有2至多个维管柱,属异常结构。珠子参根茎节部的加粗生长依赖于次生结构与三生结构的发生和分化。根茎节部分泌腔周围的分泌细胞、次生韧皮和三生韧皮部是珠子参皂苷类物质主要积累场所。随着珠子参生长年限的延长,根茎节部分泌腔、异常维管柱的数目及皂苷的含量增加。分泌腔、异常维管柱的数量和相对密集的节部可作为珠子参优良品种选育的结构和形态指标。

关键词：珠子参根茎组织化学定位解剖结构皂苷含量

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空心莲子草的解剖结构和皂甙组织化学定位及季节变化研究

空心莲子草的解剖结构和皂甙组织化学定位及季节变化研究

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作者：吴春红湖北大学

学位级别：硕士

消灭钉螺是预防血吸虫病的一项有效措施，而药物灭螺则是其中一种见效快的重要方法。植物灭螺因不引起环境污染，现已成为诸多探索灭螺药物的有效途径之一。迄今为止，植物灭螺药的研究大都是直接利用其植物的水浸液，或者通过一定的溶... 详细信息

消灭钉螺是预防血吸虫病的一项有效措施，而药物灭螺则是其中一种见效快的重要方法。植物灭螺因不引起环境污染，现已成为诸多探索灭螺药物的有效途径之一。迄今为止，植物灭螺药的研究大都是直接利用其植物的水浸液，或者通过一定的溶媒剂对灭螺活性成分进行提取，利用提取的成分进行灭螺。旱生态型空心莲子草植株矮小，但茎叶发达，有肉质贮藏根;水生态型空心莲子草茎粗、长，无根状茎和贮藏根，有大量的不定根。本文通过石蜡切片对旱生态型和水生态型空心莲子草的营养器官进行解剖观察，结果显示：旱生态型空心莲子草根的初生木质部为三原型，且木质部远远多于韧皮部，由额外形成层细胞分化产生的三生结构排列成整齐的同心环状。旱生茎髓腔小，薄壁细胞较小且规则，细胞间隙亦小，可见束间、束中形成层连合形成清晰的大圆形环，维管束贯穿在环中。水生茎髓腔占茎粗的3/4，薄壁细胞间隙大，通气组织发达，机械组织不发达，维管束靠近内侧髓腔。旱生叶的栅栏组织细胞小，数量多，排列紧凑，叶脉处厚角组织发达，叶面角质层稍厚;水生叶的栅栏组织细胞大，数量少，海绵组织细胞数量多，排列松散，角质层薄。空心莲子草营养器官组织中的灭螺成分皂甙的分布和积累也存在差别，旱生态型的皂甙含量多于水生态型。用三氯化锑高氯酸溶液对空心莲子草皂甙分布和积累进行定性实验观察，用石油醚超声萃取进行定量分析，证明空心莲子草皂甙含量最高的部位是茎，根部次之，叶中含量最少;根据一个生长期的实验调查，确定适宜的采收季节为每年的11和12月。

关键词：空心莲子草解剖结构皂甙组织化学定位

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紫茎泽兰叶中多酚成分积累规律研究

紫茎泽兰叶中多酚成分积累规律研究

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作者：赵丽君华南农业大学

学位级别：硕士

紫茎泽兰(Eupatorium adenopkorum Spreng)是菊科(Compositae)泽兰属多年生草本植物,以种子繁殖为主,同时兼具极强的无性繁殖能力。该植物原产于南美洲,自上世纪40-50年代由东南亚传入我国云南南部后,现已成为危害最为严重的入侵植物之... 详细信息

紫茎泽兰(Eupatorium adenopkorum Spreng)是菊科(Compositae)泽兰属多年生草本植物,以种子繁殖为主,同时兼具极强的无性繁殖能力。该植物原产于南美洲,自上世纪40-50年代由东南亚传入我国云南南部后,现已成为危害最为严重的入侵植物之一。紫茎泽兰叶中富含绿原酸等酚类化合物,对其加以资源化利用是防控该植物进一步扩散的一项有效措施。因此,本研究对紫茎泽兰不同发育程度叶片中酚类成分的分布和积累动态规律进行了探索,目的是为确定植物原料的合理采收期提供理论依据。本文的主要研究结果如下:　　采用Folin-Ciocalteu法测定叶器官中总酚含量的结果显示,在叶片从幼嫩到成熟的过程中,总酚含量呈急剧下降的趋势,其变化范围在57.36-15.43 mg/g之间;且以顶叶(最幼嫩)中的总酚含量为最高(57.36 mg/g),其与成熟叶和衰老叶相比均存在显著差异(P＜0.05)。　　采用紫外分光光度计法测定酚类代谢关键酶PAL和C4H活性的结果显示,在叶片从幼嫩到衰老的过程中,这两种酶的活性总体上均呈下降趋势;其活性变化范围分别在6166.67-41.67 U/g鲜重之间和5322.00-1073.33 U/g鲜重之间;均以顶叶中的酶活性为最高,其与成熟叶和衰老叶相比均存在显著差异(P＜0.05)。　　应用Neu's-荧光显微镜法对紫茎泽兰叶片酚类物质进行组织化学的结果显示,在紫外光激发下,不同发育程度叶片的叶肉细胞内均发出绿色荧光,绿色荧光的产生部位主要为叶绿体和液泡;绿原酸标准品在紫外激发下亦发出相似的绿色荧光模式,初步推测叶肉细胞中绿色荧光发生的部位很可能就是绿原酸分布的场所。　　利用漆酶-胶体金法对紫茎泽兰叶肉细胞酚类物质进行细胞化学定位的结果显示,酚类成分主要分布于叶绿体上的造粉体、细胞壁及液泡中,同时细胞质中也有少量金颗粒存在。　　综上所述,本文得出以下结论:　　 (1)总酚含量、PAL和C4H酶活性在紫茎泽兰不同发育程度叶中均存在显著差异,且随着叶片由幼嫩至成熟而呈现急剧下降的趋势。　　 (2)在紫茎泽兰植株上叶片普遍未成熟时进行采收最为适宜。　　 (3)紫茎泽兰酚类物质在叶中主要分布于叶肉组织,且叶绿体和液泡是其主要的积累场所。　　 (4)在叶肉细胞中造粉体可能是酚类成分的主要合成场所,并由此处将富集的酚类物质转移到细胞的其他部位;同时,叶绿体与酚类物质间的密切联系暗示了酚类成分的光保护功能,这可能是紫茎泽兰适应高海拔生境的一种重要生理机制。

关键词：菊科植物紫茎泽兰叶片多酚成分积累组织化学定位资源化利用

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牛膝营养器官解剖结构与三萜皂苷积累的关系

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安徽科技学院学报 2011年第3期25卷 9-12页

作者：王桂芹郑玉华吴莹安徽科技学院生命科学学院安徽凤阳233100

采用组织化学定位、显微制片和定量分析方法，对牛膝（Achyranthes bidentata）营养器官解剖结构特点、三萜皂苷含量及三萜皂苷积累场所进行了研究。结果表明，牛膝的根和茎均属于异常结构，根中具有同心环状排列的三生维管柬，三生维... 详细信息

采用组织化学定位、显微制片和定量分析方法，对牛膝（Achyranthes bidentata）营养器官解剖结构特点、三萜皂苷含量及三萜皂苷积累场所进行了研究。结果表明，牛膝的根和茎均属于异常结构，根中具有同心环状排列的三生维管柬，三生维管束的轮数最多可达7～8环；茎中具有2个髓维管束；叶为异面叶，海绵组织中具有发达的通气组织。牛膝根、茎和叶中均积累三萜皂苷，含量依次为：叶〉根〉茎。根中以三生韧皮部为主要积累场所；叶内主要积累于栅栏组织细胞内。

关键词：牛膝营养器官解剖结构组织化学定位三萜皂苷

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二种石斛属植物和小叶石仙桃生物碱的组织化学定位

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中国药学杂志 2006年第11期41卷 824-826,867页

作者：吕洪飞罗文姬盛仙永沈锦波毛灵芝浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 中国科学院植物研究所

目的对不同年龄的铁皮石斛、铜皮石斛及其石斛伪品———小叶石仙桃的不同器官进行生物碱组织化学定位,选择具有较高药用价值的石斛类药用植物和药用部位,确定铁皮石斛的最佳采收期。方法采用冰冻切片法,根据生物碱的理化性质,用碘化铋... 详细信息

目的对不同年龄的铁皮石斛、铜皮石斛及其石斛伪品———小叶石仙桃的不同器官进行生物碱组织化学定位,选择具有较高药用价值的石斛类药用植物和药用部位,确定铁皮石斛的最佳采收期。方法采用冰冻切片法,根据生物碱的理化性质,用碘化铋钾染色法对3种植物的生物碱进行组织化学定位。结果生物碱主要存在于3种植物茎的薄壁细胞、根的皮层细胞、叶的叶肉细胞中;其总生物碱含量顺序为:二生年的铁皮石斛≈铜皮石斛>小叶石仙桃。此外,在3种植物不同的器官中,其总生物碱的含量都呈现“叶>茎≈根”的规律。结论在种间及同种植物的不同年龄或不同器官中,其生物碱的含量存在差异。其中,以二年生铁皮石斛和铜皮石斛茎叶的生物碱含量较高,表明其药用价值也较高。

关键词：铁皮石斛铜皮石斛小叶石仙桃石斛碱组织化学定位

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棉花PsbP启动子的功能研究

棉花PsbP启动子的功能研究

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作者：杨大伟新疆农业大学

学位级别：硕士

基因表达和调控是植物基因工程研究的重要内容,而启动子在决定基因表达方面起着转录调控中心的作用,它在很大程度上决定着目的基因表达的时间、空间和强度。目前在商业化转基因作物中使用的启动子往往都是组成型启动子,该类型启动子驱... 详细信息

基因表达和调控是植物基因工程研究的重要内容,而启动子在决定基因表达方面起着转录调控中心的作用,它在很大程度上决定着目的基因表达的时间、空间和强度。目前在商业化转基因作物中使用的启动子往往都是组成型启动子,该类型启动子驱动外源基因持续、稳定的表达往往造成能量的非必要浪费,增加植株的代谢负担,同时,组成型表达外源基因还可能具有一定的潜在副作用。因此,用特异性启动子取代组成型启动子,使外源基因能够定时、定点、定量地在植物中表达是植株基因工程研究的重要内容。 PsbP是叶绿体光系统Ⅱ中放氧复合体的外周蛋白,是保证PSⅡ功能完整性不可缺少的组成部分,在水裂解过程中起着维持Ca2+浓度的作用。本文克隆了棉花GhPsbP基因的cDNA全长及启动子,对全长启动子5'端进行了6个缺失突变,并分别构建了7个融合GUS基因的表达载体转化烟草。对不同转基因烟草株系进行组织化学定位及表达分析,证明了该启动子为绿色组织特异表达启动子,确定了其结构和功能。该启动子的核心区域为-1-97bp,该段序列即可驱动GUS基因在烟草的叶片中特异表达;分离了该启动子中控制茎及成熟叶片特异表达区域-508-670bp之间的162bp的重要区段,其中出现频率较高的5'-TTTTA-3'和5'-TATAAAT-3'基序可能是潜在的正调控元件,也可能与成熟叶片和茎杆中的特异表达相关;-1055-2077bp区段分布着增强子元件,2077bp片段启动子的效率是核心启动子的5倍,启动子全长序列较之缺失突变体的表达效率最高。构建了棉花GhPsbP全长启动子驱动CP4 epsps基因的植物表达载体,转化烟草获得32株转基因植株,分析了epsps在转基因植株中的表达情况,结果表明:GhPsbP可以驱动功能基因CP4 epsps在烟草的绿色组织特异表达,其在茎叶绿色组织中的表达量足以抵抗工作浓度草甘膦的毒害。获得了抗性较强的转基因烟草株系,为今后开展抗草甘膦转基因工作选择适宜的基因材料及表达调控元件提供了有力的理论基础和实验依据,也为绿色组织特异性启动子的研究及应用奠定了一定的基础。

关键词：组织特异表达 GUS 缺失分析转基因烟草组织化学定位顺式作用元件草甘膦抗性

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中药滇黄芩的遗传操作

中药滇黄芩的遗传操作

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作者：岑举人西北大学

学位级别：硕士

滇黄芩(Scutellaria amoena C. ***)为唇形科黄芩属多年生草本植物,其黄芩苷和黄芩素含量均高于黄芩。作为黄芩的替代品,广泛应用在我国西南地区。目前滇黄芩野生植物资源由于过度开采遭到破坏；而其种子成熟不一致,直播后出苗不齐,也... 详细信息

滇黄芩(Scutellaria amoena C. ***)为唇形科黄芩属多年生草本植物,其黄芩苷和黄芩素含量均高于黄芩。作为黄芩的替代品,广泛应用在我国西南地区。目前滇黄芩野生植物资源由于过度开采遭到破坏；而其种子成熟不一致,直播后出苗不齐,也未能开展大规模人工种植。本研究以滇黄芩为材料,建立了器官发生离体培养体系,毛状根转化和再生体系并克隆了滇黄芩黄酮类合成中关键酶UBGAT基因,为滇黄芩遗传育种操作以及扩大药材资源提供实验基础。具体研究结果如下： (1)以滇黄芩不带腋芽茎段为外植体,采用不同配比激素的MS培养基建立了滇黄芩器官发生,植株再生体系。结果表明,茎段在MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上培养时,愈伤组织诱导率达到100%；以相同培养基进行分化,并在MS+6-BA 2 mg/L+ NAA 0.2 mg/L培养基上扩繁丛生芽。在1/2 M S+IBA 0.2 mg/L培养基诱导生根,扦插继代。用RAPD分子标记方法,分析了滇黄芩通过器官发生途径获得的再生植株可能的遗传变异。不同茎段的再生植株随机选取1条引物进行RAPD扩增,结果显示8株植株扩增出的条带具有高度的一致性。扩增不同继代次数的再生植株DNA,所用的39条随机引物中只有1条引物带型发生变化。以上结果说明经器官发生途径获得的再生植株遗传稳定,可多次继代培养。 (2)应用5%NaOH染色的植物组织化学定位方法,研究了滇黄芩再生植株中黄酮类化合物的积累分布,发现黄酮类化合物主要存在于再生植株营养器官的表皮和皮层,以及茎、叶腺毛中；并且通过HPLC对滇黄芩再生植株中黄芩苷的含量进行测定,其中滇黄芩根的黄芩苷含量为0.12%,茎的黄芩苷含量为0.34%,叶的黄芩苷含量为0.55%。 (3)利用发根农杆菌1.2556感染滇黄芩再生植株的茎段和叶片,建立了毛状根培养体系。经rol-B基因PCR检测和冠瘿碱检测表明Ri质粒已整合入滇黄芩毛状根基因组中并表达。获得的毛状根系经HPLC方法都能检测到黄芩苷合成,其中1个毛状根转化系黄芩苷含量为2.59%,以3年单位时间黄芩苷生成量计算,是药材黄芩的7.18倍。毛状根在附加6-BA 2 mg/L和NAA 0.2 mg/L的MS固体培养基上直接诱导不定芽,并在MS培养基上生根,形成再生转化株系。 (4)采用RT-PCR方法从滇黄芩叶片中克隆二磷酸尿葡萄糖醛酸：黄芩素7-O-葡萄糖醛酸转移酶(UBGAT)全长1326bp的cDNA序列,编码442个氨基酸。序列分析表明与报道的黄芩UBGAT具有99.0%同源性。序列亚克隆到原核表达载体pET 32a中,表达产生56Kd蛋白带。

关键词：滇黄芩器官发生途径遗传稳定 RAPD 毛状根组织化学定位 HPLC 黄芩苷黄酮类物质 UBGAT

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