检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：路璐冯志新刘茂军吴叙苏甘源刘冬阳刘冬霞邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京天邦生物科技有限公司南京农业大学

猪肺炎支原体(***,Mhp)引起的猪支原体肺炎或称猪喘气病对猪的危害很大,是目前国内外造成养猪业重大经济损失的疾病之一。猪肺炎支原体主要通过膜蛋白吸附于猪呼吸道上皮细胞表面的纤毛顶端,影响纤毛的运动,使纤毛的顶端折断脱落,纤毛... 详细信息

猪肺炎支原体(***,Mhp)引起的猪支原体肺炎或称猪喘气病对猪的危害很大,是目前国内外造成养猪业重大经济损失的疾病之一。猪肺炎支原体主要通过膜蛋白吸附于猪呼吸道上皮细胞表面的纤毛顶端,影响纤毛的运动,使纤毛的顶端折断脱落,纤毛功能丧失,猪出现喘气症状。原位杂交是应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交,再应用标记物相关的检测系统,在核酸原有的位置将其显示出来。优势在于可以定位特异核酸的表达部位。本实验采用非放射性地高

关键词：猪肺炎支原体组织原位杂交原位杂交检测

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一种与不育有关的人精子蛋白质的组织特异性及表达

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中国医学科学院学报 1999年第3期21卷 166-169页

作者：张梅林周雪峰曹登峰缪时英吴燕婉邢志军宗书东王琳芳中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室国家计划生育委员会科学技术研究所

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该... 详细信息

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该ｃＤＮＡ只在人和大鼠睾丸组织中表达；在人睾丸曲细精管的精原细胞、精母细胞和精子细胞中均有转录。结论ＢＳＤ－２．４ｃＤＮＡ编码蛋白具有睾丸组织特异性，并在精子发生的各个阶段均有不同程度的表达。

关键词：人精子蛋白质组织特异性组织原位杂交

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人TSARG4真核表达载体的构建及稳定转染HeLa细胞系的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第8期25卷 684-687页

作者：杨幼波向红邢晓为中南大学湘雅三医院内分泌科湖南长沙410013 中南大学湘雅三医院医学实验中心湖南长沙410013

目的:构建人TSARG4基因真核表达载体,转染HeLa细胞,建立稳定转染TSARG4的HeLa细胞系。方法:应用RT-PCR从人睾丸中扩增TSARG4的开放阅读框(ORF),并将PCR产物插入到pUCm-T载体中测序验证。随后,将TSARG4进一步克隆到pcDNA3.1(+)真核表达... 详细信息

目的:构建人TSARG4基因真核表达载体,转染HeLa细胞,建立稳定转染TSARG4的HeLa细胞系。方法:应用RT-PCR从人睾丸中扩增TSARG4的开放阅读框(ORF),并将PCR产物插入到pUCm-T载体中测序验证。随后,将TSARG4进一步克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体中。用脂质体将经过测序、验证的pcDNA3.1(+)/TSARG4质粒转染HeLa细胞,通过G418筛选建立TSARG4稳定转染的HeLa细胞系。RT-PCR和组织原位杂交技术检测TSARG4在稳定转染的HeLa细胞系中的表达。结果:成功构建了pcDNA3.1(+)/TSARG4表达质粒,建立了稳定转染的HeLa细胞系。RT-PCR和组织原位杂交检测结果表明,TSARG4基因在该细胞系中成功表达。结论:TSARG4真核表达载体成功构建和稳定转染HeLa细胞系的建立为进一步体外研究TSARG4的功能奠定了基础。

关键词： TSARG4 基因表达转染 RT-PCR 组织原位杂交

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芜菁NAC转录因子BcNAC2基因的分离及其表达

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园艺学报 2011年第6期38卷 1089-1096页

作者：张海娟吴剑锋胡帅余小林浙江大学蔬菜科学研究所农业部园艺植物生长发育与品质调控重点开放实验室杭州310029

根据拟南芥NAC2的全长序列设计引物,从芜菁中成功分离了NAC转录因子BcNAC2基因,该基因最大开放阅读框为1683bp,编码560个氨基酸,共包含6个外显子和5个内含子。将BcNAC2与其他30个NACs蛋白进行序列比对以及重构系统进化树分析发现,BcNAC... 详细信息

根据拟南芥NAC2的全长序列设计引物,从芜菁中成功分离了NAC转录因子BcNAC2基因,该基因最大开放阅读框为1683bp,编码560个氨基酸,共包含6个外显子和5个内含子。将BcNAC2与其他30个NACs蛋白进行序列比对以及重构系统进化树分析发现,BcNAC2与十字花科的拟南芥的同源性最高,芜菁BcNAC2与拟南芥NAC2蛋白功能结构域内的特征序列有显著的差异。半定量RT-PCR的结果表明,BcNAC2呈部分组成型表达特征,在授粉8d的嫩角果中表达丰度最高,而且组织原位杂交结果显示,BcNAC2在胚囊中有较高的表达,由此推测,BcNAC2与芜菁的种子或胚的发育相关。

关键词：芜菁 NAC转录因子基因分离半定量RT-PCR 组织原位杂交

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肺炎链球菌感染的猕猴肺及气管内IFN-γ蛋白与mRNA表达

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2012年第1期38卷 48-54页

作者：罗启慧章瑶陈恋陈正礼曾文程安春四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014 四川农业大学实验动物工程技术中心/国家实验用猕猴种源基地四川雅安625014 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014 四川农业大学实验动物工程技术中心/国家实验用猕猴种源基地四川雅安625014 四川农业大学预防兽医研究所四川成都611130

采用常规苏木精-伊红(hematoxylin-eosim,HE)染色、免疫组织化学和组织原位杂交技术,观察感染肺炎链球菌的猕猴肺及气管组织的病理学变化与γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)在其中的蛋白与mRNA表达.结果表明:在光镜下感染组的肺呈现大面... 详细信息

采用常规苏木精-伊红(hematoxylin-eosim,HE)染色、免疫组织化学和组织原位杂交技术,观察感染肺炎链球菌的猕猴肺及气管组织的病理学变化与γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)在其中的蛋白与mRNA表达.结果表明:在光镜下感染组的肺呈现大面积充血、出血,淋巴细胞浸润及肺泡腔内出现浆液性渗出物；IFN-γ蛋白表达面积均高于健康组(P＜0.05)；IFN-γ蛋白产物在肺血管内的光密度值极显著高于健康组(P＜0.01),在气管和肺的其他部位光密度值显著高于健康组(P＜0.05)；IFN-γmRNA在肺气管上皮层、肌层内阳性产物的光密度值均极显著高于健康组(P＜0.01),肺泡隔、血管内、气管固有层内阳性产物的光密度值均显著高于健康组(P＜0.05).说明肺炎链球菌感染的猕猴肺出现了明显的红色肝变期病理变化,且肺及气管中IFN-γ蛋白及mRNA表达显著增加,表明IFN-γ在肺炎链球菌感染猕猴肺及气管的免疫调节中起到了重要作用.

关键词：肺炎链球菌 γ干扰素免疫组化组织原位杂交肺气管猕猴

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StARmRNA在仔猪睾丸组织中的表达研究

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中国生物工程杂志 2007年第3期27卷 60-64页

作者：詹晓庆王鲜忠孙燕王满意张家骅重庆市牧草与草食家畜重点实验室西南大学动物科技学院重庆400716

类固醇合成快速调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)在调节类固醇合成中发挥了重要作用,为了认识StAR蛋白在仔猪性腺发育早期中的表达,以7、14、23、37日龄的仔猪睾丸为研究对象,采用组织原位杂交方法研究了StARmRN... 详细信息

类固醇合成快速调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)在调节类固醇合成中发挥了重要作用,为了认识StAR蛋白在仔猪性腺发育早期中的表达,以7、14、23、37日龄的仔猪睾丸为研究对象,采用组织原位杂交方法研究了StARmRNA在仔猪睾丸中的表达水平。结果表明:在7、14、23、37日龄的仔猪睾丸中,StARmRNA在睾丸的间质细胞中表达,其中在7日龄StARmRNA表达很弱,14、23、37日龄StARmRNA表达较强,StAR蛋白在这一时期的睾丸间质表达与其合成睾酮的能力一致。

关键词：仔猪睾丸类固醇合成快速调节蛋白组织原位杂交

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减肥胶囊减肥机理的分子水平研究

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中医杂志 2007年第7期48卷 641-643页

作者：宰军华魏明王又红代雪娜李强刘卫红孟长海河南中医学院第一附属医院郑州市人民路19号450000

目的从分子水平探讨减肥胶囊对营养性肥胖大鼠的减肥机理。方法采用组织原位杂交技术观察药物治疗组和模型对照组大鼠脂肪组织瘦素基因(Leptin mRNA),下丘脑神经肽Y基因(NPY mRNA)及解偶连蛋白2基因(UCP2 mRNA)表达水平,采用放射性免疫... 详细信息

目的从分子水平探讨减肥胶囊对营养性肥胖大鼠的减肥机理。方法采用组织原位杂交技术观察药物治疗组和模型对照组大鼠脂肪组织瘦素基因(Leptin mRNA),下丘脑神经肽Y基因(NPY mRNA)及解偶连蛋白2基因(UCP2 mRNA)表达水平,采用放射性免疫技术检测药物治疗组及非药物治疗组大鼠血清瘦素(Leptin)及神经肽Y(NPY)的含量。结果减肥剂量高、低剂量组均可降低大鼠血清Leptin水平,但与模型对照组比较,差异无显著性(P>0.05);用药后高、低剂量组大鼠血浆NPY水平均有降低,与模型对照组比较差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。减肥胶囊高剂量组脂肪组织Leptin mRNA及下丘脑NPY mRNA表达水平下降,同模型对照组相比,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);减肥胶囊高、低剂量组UCP2 mRNA水平均升高,与模型对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。结论减肥胶囊的作用机理可能是影响了大鼠脂肪组织Leptin mRNA、下丘脑NPY及UCP2 mRNA基因的表达。

关键词：减肥胶囊营养性肥胖大鼠基因表达组织原位杂交

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葛根素抑制HCY所致血管内皮细胞凋亡及其相关机制的研究

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中成药 2010年第6期32卷 911-914页

作者：沈晓君魏晏何航陈芳河南中医学院河南郑州450008 华中科技大学同济医学院湖北武汉430030

目的:差异筛选葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)基因,观察其在动脉粥样硬化(athemsclero-sis,AS)病灶中的表达水平,探讨葛根素抗AS的可能机制。方法:建立同型半胱氨酸(homocysteinemia,HCY)诱导的人主动脉血管内皮... 详细信息

目的:差异筛选葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)基因,观察其在动脉粥样硬化(athemsclero-sis,AS)病灶中的表达水平,探讨葛根素抗AS的可能机制。方法:建立同型半胱氨酸(homocysteinemia,HCY)诱导的人主动脉血管内皮细胞损伤模型,与不同浓度葛根素(10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L)共同培养48h,Annexin V-FITC检测血管内皮细胞凋亡率,RT-PCR筛选差异表达的GRP78基因片段,制备地高辛标记探针,高脂饲料复制兔AS模型,主动脉组织原位杂交检测GRP78mRNA表达水平。结果:经葛根素处理48h后,各组血管内皮细胞凋亡率均低于HCY组(P<0.05、P<0.01),且随葛根素剂量增加而减少;筛选出全长648bp的基因片断与兔葡萄糖调节蛋白78基因高度同源,组织原位杂交显示该基因在AS病灶血管内皮细胞胞质中高表达。结论:GRP78基因参与AS病变形成;葛根素拮抗HCY诱导的血管内皮细胞凋亡,下调GRP78基因表达水平可能是其作用机制之一。

关键词：葛根素同型半胱氨酸血管内皮细胞葡萄糖调节蛋白78 组织原位杂交

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四数苣苔和世纬苣苔辐射对称花的进化发育生物学研究——兼CYC类基因的功能分析

四数苣苔和世纬苣苔辐射对称花的进化发育生物学研究——兼CYC类...

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作者：逄洪波中国科学院大学

学位级别：博士

被子植物的花根据其对称面的多少可以分为三类：辐射对称花、两侧对称花和不对称花。其中辐射对称花是原始性状，在与传粉者的协同进化过程中出现了两侧对称花。然而，在一些两侧对称花支系的进化与系统发育过程中，次生辐射对称花频繁... 详细信息

被子植物的花根据其对称面的多少可以分为三类：辐射对称花、两侧对称花和不对称花。其中辐射对称花是原始性状，在与传粉者的协同进化过程中出现了两侧对称花。然而，在一些两侧对称花支系的进化与系统发育过程中，次生辐射对称花频繁出现。因此，研究不同类群中花对称性的演化机制对于理解被子植物的进化过程具有重要意义。　　苦苣苔科属于广义唇形目的基部类群，包括多种弱两侧对称花和辐射对称花。系统发育分析结果显示：苦苣苔科中两侧对称花比较原始，具有辐射对称花的物种分别与不同的两侧对称类群聚在一起，是多次独立起源的。　　四数苣苔的花发育经历了从早期两侧对称到后期辐射对称的个体发育转化过程，是探讨被子植物两侧对称花向辐射对称花二次转变的理想材料。为了研究四数苣苔辐射对称花形成的分子机制，我们从四数苣苔中分离了控制花对称性的关键基因：BsCYC、BsRAD和BsDIV,进行了组织原位杂交和半定量RT-PCR实验，并对BsCYC1C和BsCYC1D基因进行了转基因功能验证。结果显示：在花发育的早期，BsCYC1C、BsCYC1D基因在所有的花器官中均一表达;从花发育的早中期开始，它们在花瓣上的表达开始出现分化，BsCYC1C只在背部花瓣上表达，BsCYC1D在所有花瓣上都有表达，但是在背部花瓣较在侧部花瓣的表达信号强。二者在雄蕊上的表达模式相似，都是在背部雄蕊上的表达信号最强，其次是在侧部雄蕊，在腹部雄蕊上几乎没有表达;到了花发育的中期，BsCYC1C、BsCYC1D基因在背部区域的表达信号进一步增强，背腹之间的表达差异达到最大;而到了花发育的晚期，BsCYC1C和BsCYC1D基因表达消失。BsCYC2基因只在花发育早期有短暂的、均一表达，然后消失。BsRAD、BsDIV基因在花发育的早期表达区域与BsCYC1C和BsCYC1D基因重合，到了花发育后期，BsRAD只在雄蕊中表达，而BsDIV在所有的花器官中都表达。我们对BsCYC基因开展的转基因实验也表明BsCYC基因对花器官生长具有抑制作用。我们的研究结果表明：在四数苣苔中，BsCYC1C和BsCYC1D是决定花器官背部特征的基因，BsRAD与BsDIV基因共同决定了花器官的腹部特征。并且BsCYC基因对BsRAD、BsDIV基因具有抑制作用，这种作用可能是通过转录后调控实现的。BsCYC、BsRAD和BsDIV基因在花发育过程中的表达特点及其转基因的功能验证，结合四数苣苔花形态上的动态变化，证明了它们在四数苣苔花辐射对称花的形成过程中起重要作用。　　世纬苣苔具有完全的次生辐射对称花。从第一轮到第三轮，花器官均呈辐射对称，由5枚萼片，5枚花瓣，5枚雄蕊组成。为了研究世纬苣苔中CYC类基因的表达和它的花形态是否相关，我们从世纬苣苔中克隆得到4个CYC同源基因，分别命名为TsCYC1C、TsCYC1D、TsCYC2A和TsCYC2B，并且开展了组织原位杂交实验。结果表明：TsCYC1C和TsCYC1D具有相似的表达模式，在所有的花瓣和雄蕊上都有信号，但是TsCYC1D比TsCYC1C表达强度更大、持续时间更长。TsCYC2只在非常早的花序原基上瞬时表达。我们的研究结果显示正是TsCYC基因表达从背部延伸全腹部导致了一个完全背部化的辐射对称花。但是，TsCYC1C和TsCYC1D的表达与雄蕊的退化无关，世纬苣苔中TsCYC基因的表达并没有抑制雄蕊的发育，这可能是由于顺式作用元件的改变导致细胞周期基因不能够和TsCYC基因相偶联的缘故。　　烟叶唇柱苣苔属于苦苣苔科二雄蕊类群，具有两侧对称花，先前的研究已经对烟叶唇柱苣苔开展了表达层次(RT-PCR)的分析，并显示ChCYC基因可能对雄蕊和花瓣的生长具有抑制作用。为了进一步从功能上进行验证，我们将ChCYC1C基因在烟草中进行了过量表达实验，结果表明：转基因植株出现了植株变矮、叶片狭长、分枝增多、花型变小的现象。同时，为了配合其他方面的研究工作，我们还开展了瞬时表达实验，通过分析GUS活性来研究启动子中不同的上游顺式元件对基因表达的影响。

关键词：花对称性基因苦苣苔科四数苣苔世纬苣苔组织原位杂交瞬时表达转基因植株

来源：评论

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I型单纯疱疹病毒在人类口腔粘膜癌前损害发生发展中作用的分子病理研究

I型单纯疱疹病毒在人类口腔粘膜癌前损害发生发展中作用的分子病...

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作者：程斌华西医科大学四川大学

学位级别：博士

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