检索结果-内蒙古大学图书馆

眼科研究 2010年第1期28卷 22-24页

作者：黄洁刘焰沈晓璐顾青孙晓东许迅上海交通大学附属第一人民医院眼科 200080 上海市宝山中心医院眼科研究生201900 上海交通大学附属新华医院眼科研究生20009

角膜上皮的完整和无血管状态对维持角膜的生理功能和透明性十分重要.角膜上皮的完整性有赖于角膜缘干细胞(limbal stem cells,LSCs)的增生和分化,多种原因可造成LSCs的缺乏或功能障碍,使角膜丧失完整性和透明性.LSCs功能障碍有许多新疗... 详细信息

角膜上皮的完整和无血管状态对维持角膜的生理功能和透明性十分重要.角膜上皮的完整性有赖于角膜缘干细胞(limbal stem cells,LSCs)的增生和分化,多种原因可造成LSCs的缺乏或功能障碍,使角膜丧失完整性和透明性.LSCs功能障碍有许多新疗法,其中角膜缘上皮细胞体外培养后移植成为研究热点.目前多数学者采用组织块法进行角膜缘上皮细胞的培养,培养体系中干细胞能否从在组织块中迁移出来尚有争议,而酶消化法越来越受重视。

关键词：角膜缘上皮细胞组织块培养法酶消化法角膜缘干细胞细胞体外培养角膜上皮功能障碍生理功能

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应用组织块培养法对大鼠视网膜干细胞进行分离培养及鉴定

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国际眼科杂志 2010年第9期10卷 1665-1667页

作者：齐首楠苏冠方王晨光王淑荣穆毓吉林大学第二医院眼科中国吉林省长春市130041

目的:应用组织块培养大鼠视网膜干细胞的有效性。方法:机械分离出生10d大鼠睫状体组织,剪成细小组织块,置入20μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20μg/L表皮生长因子及1×B27添加剂的无血清DMEM/F12培养液中培养,同时取大鼠胚胎脑组织... 详细信息

目的:应用组织块培养大鼠视网膜干细胞的有效性。方法:机械分离出生10d大鼠睫状体组织,剪成细小组织块,置入20μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20μg/L表皮生长因子及1×B27添加剂的无血清DMEM/F12培养液中培养,同时取大鼠胚胎脑组织,应用常规机械-酶消化法进行神经干细胞的分离培养作为阳性对照。应用免疫荧光染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白(nestin)的表达,应用含100mL/L的胎牛血清的培养基促进其分化以确定其神经干细胞特性。结果:原代培养48h后在组织块边缘开始出现细胞团,折光性强,呈球形或者桑葚状悬浮生长。培养4～5d后,悬浮生长的细胞团数量增多,出现较大的细胞团,原代培养7d后传代,传代后细胞能重新形成细胞团。应用免疫荧光方法可检测到细胞内nestin阳性表达,且视网膜干细胞可在以血清为诱导条件下变为贴壁生长,并分化出具有神经细胞形态的细胞。其形态、增殖及可分化特性与作为阳性对照的神经干细胞相似。结论:组织块培养法对细胞损伤小,操作简便,可成功对大鼠视网膜干细胞进行分离培养。

关键词：组织块培养法视网膜干细胞分离培养鉴定

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组织块培养法及胶原酶消化法分离培养豚鼠耳蜗微血管内皮细胞

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听力学及言语疾病杂志 2002年第3期10卷 158-160,T001页

作者：魏运军张学渊第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉科重庆400038

目的　建立稳定的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的培养方法。方法　采用显微解剖技术分离出豚鼠耳蜗血管纹 ,分别用组织块法及酶消化法进行培养及纯化。结果　耳蜗血管纹组织块培养后 2天 ,部分组织块边缘有散在的细胞生长 ,这些细胞逐渐增殖... 详细信息

目的　建立稳定的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的培养方法。方法　采用显微解剖技术分离出豚鼠耳蜗血管纹 ,分别用组织块法及酶消化法进行培养及纯化。结果　耳蜗血管纹组织块培养后 2天 ,部分组织块边缘有散在的细胞生长 ,这些细胞逐渐增殖形成大片细胞集落 ;耳蜗血管纹组织经胶原酶消化后 1～ 3天 ,可观察到培养皿底由一些细胞组成的细胞岛 ;细胞纯化后大多呈多边形 ,致密融合时具有内皮细胞培养时典型的“铺路石样”外观 ,经免疫组化检测其内皮细胞标志性抗原Ⅷ因子 ,95 %以上的培养细胞的胞浆中呈棕黄色阳性反应。

关键词：组织块培养法胶原酶消化法血管纹内皮细胞细胞培养免疫细胞化学染色血迷路屏障

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兔视网膜Müller细胞的组织块培养法

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中国眼耳鼻喉科杂志 1997年第2期 52-53页

作者：刘瑶王文吉上海医科大学眼耳鼻喉科医院眼科 200031

细胞培养是探讨眼病病机及防治的重要手段之一。目前国内对视网膜Mller细胞的培养多使用酶消化法,我们应用组织块法培养兔视网膜Mller细胞,体会此法有许多优点,报道如下。材料和方法细胞培养:取新西兰白兔一只,经耳缘静脉注入空气10ml... 详细信息

细胞培养是探讨眼病病机及防治的重要手段之一。目前国内对视网膜Mller细胞的培养多使用酶消化法,我们应用组织块法培养兔视网膜Mller细胞,体会此法有许多优点,报道如下。材料和方法细胞培养:取新西兰白兔一只,经耳缘静脉注入空气10ml处死后,无菌条件下取出眼球。

关键词：视网膜组织块培养法细胞培养酶消化法神经胶质纤维酸性蛋白新西兰白兔培养细胞重要手段血管内皮细胞波形蛋白

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改良的软骨组织块培养法

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实用美容整形外科杂志 2000年第2期11卷 63-65页

作者：张晨王玉彬柏树令高景恒辽宁省人民医院整形外科 110015 锦州医学院普外科中国医科大学基础医学院解剖学教研室

为软骨的组织工程的临床应用寻求一种与之相适应的体外扩增种子细胞的方法。将传统的组织块培养法进行改良 ,在置入培养皿前先以 0 .2 5 %胰蛋白酶、0 .0 8%EDTA及 0 .1%睾丸透明质酸酶消化软骨组织块 (实验组 ) ,以传统的组织块培养法... 详细信息

为软骨的组织工程的临床应用寻求一种与之相适应的体外扩增种子细胞的方法。将传统的组织块培养法进行改良 ,在置入培养皿前先以 0 .2 5 %胰蛋白酶、0 .0 8%EDTA及 0 .1%睾丸透明质酸酶消化软骨组织块 (实验组 ) ,以传统的组织块培养法为对照组进行培养。结果 :在培养的第 3天 ,实验组贴壁率为 88.89% (32 / 36 ) ,对照组为 6 8.89% (2 3/ 36 ) (P <0 .0 5 ) ;培养后的第 30天 ,实验组的细胞簇形成阳性率为 10 0 % (12 / 12 ) ,而对照组为 0 (0 /12 ) (P <0 .0 1)。结论 :改良的软骨组织块培养法优于传统的组织块培养法。

关键词：组织块培养法软骨组织工程

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食管癌旁粘膜细胞的组织块培养法

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细胞生物学杂志 1988年第1期 42-45页

作者：裴许芳周佳农王秀琴丁志侠吴旻中国医学科学院肿瘤研究所

一、体外培养的成人食管粘膜组织块不但可以长出许多生长旺盛的上皮细胞,还可经多次迁移接种培养,不断提供大量新的上皮细胞。组织块的体外存活时间最长可达4个月以上。二、低钙、低血清加激素及生长因子等成份的199培养液,可以促进上... 详细信息

一、体外培养的成人食管粘膜组织块不但可以长出许多生长旺盛的上皮细胞,还可经多次迁移接种培养,不断提供大量新的上皮细胞。组织块的体外存活时间最长可达4个月以上。二、低钙、低血清加激素及生长因子等成份的199培养液,可以促进上皮细胞从组织块迁移出来,并抑制成纤维细胞的生长。三、本实验体系为进行食管上皮细胞癌变的研究,提供了一个较好的体外实验系统。

关键词：组织块培养法粘膜生物膜食管癌食管肿瘤纤维细胞轻度增生石蜡包埋切片

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酶消化结合组织块培养法用于颞下颌关节盘组织工程细胞扩增的初步研究

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世界科技研究与发展 2010年第5期32卷 687-690页

作者：柯一凡康宏舒维娜苏雪莲李振强闭艳妲周烨兰州大学口腔医学研究所兰州730000 兰州市口腔医院兰州730030

目的采用酶消化结合组织块培养法对山羊颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)盘细胞进行体外培养和扩增,探索TMJ关节盘细胞体外培养及扩增的新方法。方法在无菌条件下,切取一月龄山羊TMJ关节盘,剪至1.0 mm^3的碎块,用0.25%胰酶、0.... 详细信息

目的采用酶消化结合组织块培养法对山羊颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)盘细胞进行体外培养和扩增,探索TMJ关节盘细胞体外培养及扩增的新方法。方法在无菌条件下,切取一月龄山羊TMJ关节盘,剪至1.0 mm^3的碎块,用0.25%胰酶、0.01%Ⅰ型胶原酶消化关节盘组织块,将消化好的组织块置入6孔板中培养。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率,甲苯胺蓝染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定,测定其生长曲线。结果原代培养的关节盘纤维软骨细胞4天可观察到贴壁细胞,7天贴壁细胞逐渐增多,第10天时细胞彼此相连,铺满平底,细胞以梭形为主,部分多角形。传代后12小时贴壁率达90%,大部分为多角形,4～5天即可长满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒,胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。结论酶消化结合组织块培养法培养的山羊TMJ关节盘细胞具有较强的增殖能力,可作为TMJ关节盘组织工程中获取大量原代细胞的实用方法。

关键词：组织块培养法一月龄山羊颞下颌关节盘组织工程

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人年轻恒牙牙髓细胞的组织块培养法

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广东牙病防治 2004年第4期12卷 255-256,i001页

作者：张耀国张光东祁兵朱玲南京医科大学口腔医学院江苏南京210029

目的　探索组织块培养法在人牙髓细胞体外培养中的应用。方法　选择因正畸拔除的完整无龋双尖牙 ,无菌条件下取出牙髓 ,组织块培养法进行原代培养 ,倒置显微镜观察细胞形态 ,取第 4代细胞测定生长曲线并进行细胞来源鉴定。结果　体外培... 详细信息

目的　探索组织块培养法在人牙髓细胞体外培养中的应用。方法　选择因正畸拔除的完整无龋双尖牙 ,无菌条件下取出牙髓 ,组织块培养法进行原代培养 ,倒置显微镜观察细胞形态 ,取第 4代细胞测定生长曲线并进行细胞来源鉴定。结果　体外培养人牙髓细胞呈成纤维细胞样 ,抗波形丝蛋白染色阳性 ,抗角蛋白染色阴性。

关键词：组织块培养法人牙髓细胞体外培养年轻恒牙双尖牙取出拔除目的阴性结论

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改进的“天花板”组织块培养法与消化培养法培养前脂肪细胞的对比研究

改进的“天花板”组织块培养法与消化培养法培养前脂肪细胞的对比...

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中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议

作者：王曜晖刘声远遵义医学院华中科技大学同济医学院病理生理学系

目的:对比改进的"天花板"组织块培养法与消化培养法培养前脂肪细胞的优劣。方法:2种方法获得的前脂肪细胞,培养3 d,显微镜下检测自分化情况,MTT、流式细胞仪检测其增殖情况和细胞周期,培养9 d,绘制生长曲线。使用ITT方法诱导... 详细信息

目的:对比改进的"天花板"组织块培养法与消化培养法培养前脂肪细胞的优劣。方法:2种方法获得的前脂肪细胞,培养3 d,显微镜下检测自分化情况,MTT、流式细胞仪检测其增殖情况和细胞周期,培养9 d,绘制生长曲线。使用ITT方法诱导获得的前脂肪细胞5 d,拍照测细胞直径,油红染色法检测其分化情况。结果:改进的"天花板"组织块培养法培养的第1代存在自分化,但是发生自分化的细胞很少,其它的增殖和分化结果均无显著差异。但此法在同等情况下获得细胞较多,所需经费较少。结论:与消化培养法相比较而言,改进的"天花板"组织块培养法是一种更加简单、经济的获得大鼠前脂肪细胞的方法。

关键词：前脂肪细胞组织块培养法天花板

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改进的“天花板”组织块培养法与消化培养法培养前脂肪细胞的对比研究

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中国病理生理杂志 2010年第A10期26卷 2062-2062页

作者：王曜晖刘声远遵义医学院贵州遵义563000 华中科技大学同济医学院病理生理学系

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