检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 1997年第1期24卷 71-75页

作者：吴本传陈昭烈刘红叶建新军事医学科学院生物工程研究所北京100071

介绍一种简便高效的两步纯化重组组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)的方法 ,产rt PA的CHO工程细胞SGG培养上清 ,经微孔玻璃珠 (MPG)吸附和赖氨酸 Sepharose 4B柱亲和吸附色谱纯化 ,纯化倍数平均达到 380倍 ,比活性为 390 0 0 0U/mg蛋白 ,rt... 详细信息

介绍一种简便高效的两步纯化重组组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)的方法 ,产rt PA的CHO工程细胞SGG培养上清 ,经微孔玻璃珠 (MPG)吸附和赖氨酸 Sepharose 4B柱亲和吸附色谱纯化 ,纯化倍数平均达到 380倍 ,比活性为 390 0 0 0U/mg蛋白 ,rt PA活性回收率达到 1 4 0 % ,经SDS PAGE还原电泳分析主要为t PA蛋白 ,其中高分子t PA占 80 %左右 .用纤维蛋白自显影法检测均有溶纤活性 ,蛋白质印迹证实具有t

关键词：组织型纤溶酶原激活剂重组纯化鉴定

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组织型纤溶酶原激活剂突变体的构建、表达及特性分析

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中国科学（B辑） 1995年第4期25卷 399-405页

作者：刘士辉黄培堂黄翠芬军事医学科学院生物工程研究所北京100850

利用寡核苷酸诱导的定位突变技术及DNA重组技术构建了组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的PAI-1结合位点Lys296～Gly302缺失的突变体de1(296～302),K1,K2区去糖基化突变体N117Q/N184Q,以及两者的组合突变体GGI,并在COS-7细胞中获得了暂时性表... 详细信息

利用寡核苷酸诱导的定位突变技术及DNA重组技术构建了组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的PAI-1结合位点Lys296～Gly302缺失的突变体de1(296～302),K1,K2区去糖基化突变体N117Q/N184Q,以及两者的组合突变体GGI,并在COS-7细胞中获得了暂时性表达,并进一步在CHO细胞中稳定表达了组合突变体GGI.在此基础上对表达产物的生物学特性进行了分析,结果显示de1(296～302)和组合突变体GGI获得了PAI-1抗性,组合突变体GGI在与纤维蛋白亲和力未受损害的同时,特异活性约提高46％,半衰期延长约1倍.此组合突变体很可能成为优于野生t-PA的新型溶栓剂候选株.

关键词：组织型纤溶酶原激活剂突变体 PAI-1 t-PA

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凝血酶增高NMDA受体敏感性与组织型谷氨酰胺转移酶的关系

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中华内科杂志 2005年第9期44卷 668-671页

作者：曾非余绍祖曾庆杏武汉大学人民医院神经内科 430060

目的探讨凝血酶增高大鼠的小脑颗粒细胞N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)敏感性是否与细胞内组织型谷氨酰胺转移酶(tTG)变化有关.方法以0.01 U/ml浓度凝血酶单独或与tTG抑制剂单丹磺酰尸胺(MDC) 0.5×10-4 mol/L处理原代培养的Wistar大... 详细信息

目的探讨凝血酶增高大鼠的小脑颗粒细胞N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)敏感性是否与细胞内组织型谷氨酰胺转移酶(tTG)变化有关.方法以0.01 U/ml浓度凝血酶单独或与tTG抑制剂单丹磺酰尸胺(MDC) 0.5×10-4 mol/L处理原代培养的Wistar大鼠小脑颗粒细胞30 min后,以0.1×10-4 mol/L、0.25×10-4 mol/L和0.5×10-4 mol/L 3种浓度NMDA作用3 h诱导上述处理的细胞凋亡,比较流式细胞仪检测到的细胞凋亡率差异以判断NMDA受体敏感性的变化;RT-PCR和Gelpro图像分析软件检测各NMDA浓度有/无凝血酶预处理的细胞内tTG mRNA变化差异.结果凝血酶预处理细胞后上述3种浓度NMDA诱导的细胞凋亡率均升高[(8.3±0.5～15.1±0.8)%, (14.1±1.1～23.8±0.7)%, (26.8±1.9～33.7±2.1)%].预处理细胞时加入MDC可阻断凝血酶对NMDA受体的这种影响,细胞凋亡率降至(5.8±1.2)%、(11.5±1.5)%和(19.0±1.7)%;凝血酶预处理后各浓度NMDA处理细胞内tTG mRNA量均同一浓度单独NMDA处理的细胞高.结论凝血酶通过增高细胞内tTG使小脑颗粒细胞NMDA受体敏感性增高.

关键词：受体 N-甲基-D-天冬氨酸凝血酶脱噬作用 NMDA受体谷氨酰胺转移酶敏感性组织型 N-甲基-D-天冬氨酸受体增高

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组织型纤溶酶原激活剂基因在小鼠体内的表达

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中国兽医学报 1998年第4期18卷 313-316页

作者：李银聚扈荣良赖良学岳军明金宁一殷震解放军农牧大学军事兽医研究所

将组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）基因ｃＤＮＡ经多次亚克隆插入到真核表达载体ｐＳＶＬ的ＳＶ４０启动子和ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子下游，构建了重组质粒ｐＳＶＬ－ｔＰＡ和ｐｃＤＮＡ３－ｔＰＡ。分别将这２种重组质粒直接注射... 详细信息

将组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）基因ｃＤＮＡ经多次亚克隆插入到真核表达载体ｐＳＶＬ的ＳＶ４０启动子和ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子下游，构建了重组质粒ｐＳＶＬ－ｔＰＡ和ｐｃＤＮＡ３－ｔＰＡ。分别将这２种重组质粒直接注射于小鼠骨骼肌，观察了ｔ－ＰＡ基因在小鼠体内的表达情况。体外凝血试验结果显示，注射重组质粒ＤＮＡ后，第５天凝血时间有所延长，第１５～２０天达到高峰，小鼠体外凝血时间平均延长７ｍｉｎ左右，延长时间与基因注射量呈明显的正相关。

关键词：小鼠组织型纤溶酶原激活剂基因表达

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乳头黏膜相关淋巴组织型结外边缘区B细胞淋巴瘤一例

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中华病理学杂志 2006年第1期35卷 58-59页

作者：王鹏余小蒙周小鸽张淑红张彦宁北京友谊医院病理科 100050

患者女,57岁.左侧乳头肿大半年余,因短期内迅速增大于2002年11月就诊.患者自发病以来无发热、消瘦及明显不适.体检:左侧乳头明显肿大,表皮粗糙;腋窝及颈部未触及肿大淋巴结.血象等辅助检查未见异常.乳头细针穿刺细胞学检查见大量单一、... 详细信息

患者女,57岁.左侧乳头肿大半年余,因短期内迅速增大于2002年11月就诊.患者自发病以来无发热、消瘦及明显不适.体检:左侧乳头明显肿大,表皮粗糙;腋窝及颈部未触及肿大淋巴结.血象等辅助检查未见异常.乳头细针穿刺细胞学检查见大量单一、异型的淋巴细胞,高度怀疑淋巴瘤,遂行门诊手术切除左侧乳头送检。

关键词： B细胞淋巴瘤结外边缘区黏膜相关乳头组织型肿大淋巴结患者

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组织型纤溶酶原激活物研究进展

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国外医学（输血及血液学分册） 1995年第1期18卷 19-23页

作者：赵海霞内蒙古医学院微生物免疫教研室 010059

组织型纤溶酶原激活物(t-PA)对于维持机体内纤溶和凝血两个系统的平衡、防止血栓形成起着重要作用。本文着重从t-PA分子的结构特征、生理作用机制、代谢调节以及血液中t-PA浓度变化在临床上的意义等几个方面,综述了近年来t-PA研究的新... 详细信息

组织型纤溶酶原激活物(t-PA)对于维持机体内纤溶和凝血两个系统的平衡、防止血栓形成起着重要作用。本文着重从t-PA分子的结构特征、生理作用机制、代谢调节以及血液中t-PA浓度变化在临床上的意义等几个方面,综述了近年来t-PA研究的新进展。

关键词：组织型纤溶酶原激活物 t-PA 结构抗凝血药

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组织型纤溶酶原激活剂的发光分析法及其应用

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生物化学杂志 1991年第5期7卷 595-601页

作者：蒋滋慧王会信谢支光王芳刘农乐徐秀英周廷冲军事医学科学院基础医学研究所北京100850 四川川北医学院附属医院

本文建立了组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)活力的发光固相测定方法。用氨基乙基丁基异鲁米诺(ABEI)标记纤维蛋白原(Fg),在一定条件下,t-PA作用于固相(包被ABEI-Fg),产生纤维蛋白的降解产物。测定可溶性降解产物的发光强度,即能计算t-PA活... 详细信息

本文建立了组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)活力的发光固相测定方法。用氨基乙基丁基异鲁米诺(ABEI)标记纤维蛋白原(Fg),在一定条件下,t-PA作用于固相(包被ABEI-Fg),产生纤维蛋白的降解产物。测定可溶性降解产物的发光强度,即能计算t-PA活性。该方法的标准曲线范围对t-PA为0.156IU/mL～40IU/mL。灵敏度可达0.156IU/mL。回收率为98.6％(n=27)。批内批间变异系数分别为6.6％及10.3％。该方法曾用于检测细胞培养液中提取t-PA样品及t-PA基因表达时培养液中t-PA的活性。也曾用于检测从组织中纯化t-PA样品及血浆中t-PA活性的测定。文中讨论了该方法与其它方法优缺点的比较。

关键词：纤溶酶激活剂组织型发光分析法

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组织型纤溶酶原激活物及其抑制物与缺血性脑卒中的康复

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国外医学（物理医学与康复学分册） 1996年第3期16卷 108-110页

作者：沈志祥江苏省淮阴市第二人民医院康复医学科淮阴市223002

本文介绍了组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI)的来源、基本结构及在纤溶系统中的主要作用,并对其与缺血性脑卒中的发生、发展和恢复的关系以及运动对其产生的影响进行了综述。

关键词：纤溶系统中风康复组织型纤溶酶原激活物

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组织型纤溶酶原激活剂（t－PA）cDNA序列的测定

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生物化学杂志 1995年第2期11卷 175-179页

作者：刘士辉黄培堂黄翠芬军事医学科学院生物工程研究所

已经从ｍｅｌａｎｏｍａ细胞系中成功地获得了人组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）ｃＤＮＡ，在此基础上用双脱氧终止法测定了ｔ－ＰＡｃＤＮＡ编码区全序列及３′非编码区部分序列，并发现与Ｐｅｎｎｉｃａ等发表的ｔ－ＰＡｃＤＮＡ序... 详细信息

已经从ｍｅｌａｎｏｍａ细胞系中成功地获得了人组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）ｃＤＮＡ，在此基础上用双脱氧终止法测定了ｔ－ＰＡｃＤＮＡ编码区全序列及３′非编码区部分序列，并发现与Ｐｅｎｎｉｃａ等发表的ｔ－ＰＡｃＤＮＡ序列相比，有两处差异，其一是第１７２５位核苷酸残基为Ｃ而非Ａ，并使此处序列与Ｐｅｎｎｉｃａ序列相比新产生一个ＳｔｙＩ切点，但由于差异发生在密码子第三位，没有引起编码的氨基酸变化；其二是第１７７７位核苷酸残基（终止密码子后第４位核苷酸残基）为Ｔ而非Ｇ，使与终止密码子相隔３个核苷酸残基处产生了一个新的ＴＧＡ，与Ｐｅｎｎｉｃａ序列相比此处的ＢｓｔＮＩ切点也消失了。

关键词：组织型纤溶酶原激活剂 cDNA 序列分析

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组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)工程细胞系遗传特性及成瘤性分析

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细胞生物学杂志 1996年第2期18卷 86-89页

作者：陈琳徐秀英刘士辉朱恒奇黄培堂军事医学科学院生物工程研究所北京100071

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)因其在防止血栓形成中起重要作用而受到人们的重视。但由于t-PA在血液中半衰期很短,作为溶栓药,一时难于推广。为了延长半衰期、增强其特异活性,本组构建了t-PA突变体并在CHO-dhfr^-细胞中获得了高效表达。... 详细信息

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)因其在防止血栓形成中起重要作用而受到人们的重视。但由于t-PA在血液中半衰期很短,作为溶栓药,一时难于推广。为了延长半衰期、增强其特异活性,本组构建了t-PA突变体并在CHO-dhfr^-细胞中获得了高效表达。我们在细胞培养基中加入秋水仙素,通过低张、固定、染色,进行染色体分析,结果表明,t-PA工程细胞系染色体条数为20条,畸变类型有异着丝粒。四倍体、裂隙、断片,畸变率为15％,属于正常范围。同时我们对该细胞系进行成瘤性试验,选用4周龄裸鼠作为试验鼠,以Hela细胞为阳性对照,CHO-dhfr^-细胞为阴性对照,试验表明:t-PA工程细胞及表达产物对裸鼠均无成瘤性。

关键词：组织型纤溶酶原激活剂 t-PA 工程细胞系遗传性

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