检索结果-内蒙古大学图书馆

食品工业科技 2023年第5期44卷 60-66页

作者：倪俊袁彩莲佘容赵成法李丽娟杨旭杨晓燕大理大学天然抗氧化剂和抗氧化炎症研究院云南大理671003 大理大学东喜玛拉雅研究院云南大理671003 大理大学公共卫生学院云南大理671003 三江并流区域生物多样性保护与利用云南省创新团队云南大理671003 中国三江并流区域生物多样性协同创新中心云南大理671003

目的:探究细胞代次对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导构建人克隆结肠腺癌细胞(Caco-2)氧化应激模型的影响。方法:以不同浓度t-BHP(1、2和3 mmol/L)处理第F15代Caco-2细胞1、2、3、4、5和6 h后测定不同处理下细胞丙二醛(MDA)和8-羟基脱氧鸟苷(... 详细信息

目的:探究细胞代次对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导构建人克隆结肠腺癌细胞(Caco-2)氧化应激模型的影响。方法:以不同浓度t-BHP(1、2和3 mmol/L)处理第F15代Caco-2细胞1、2、3、4、5和6 h后测定不同处理下细胞丙二醛(MDA)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量,以确定构建Caco-2细胞氧化应激模型的基础条件。再以8-OHdG为分子标志物,探究细胞代次(F14、F15、F18、F19和F20)对Caco-2细胞氧化应激模型构建的影响。结果:采用1、2和3 mmol/L t-BHP处理F15代Caco-2细胞3~6 h均可稳定构建氧化应激模型。当以2.0 mmol/L t-BHP处理不同代次Caco-2细胞5 h后,F14、F15和F18代细胞的8-OHdG浓度均显著高于对照(P<0.05),而F19和F20代细胞的8-OHdG浓度与对照无显著差异。结论:Caco-2细胞代次会影响其氧化应激模型的构建,F19代之前的Caco-2细胞采用2 mmol/L t-BHP处理细胞5 h可稳定构建氧化应激模型。

关键词： Caco-2细胞叔丁基过氧化氢氧化应激细胞模型细胞代次 8-羟基脱氧鸟苷

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人二倍体细胞株KMB-17细胞代次检测模型的建立

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中国生物制品学杂志 2018年第1期31卷 28-30,34页

作者：李育中陈晨杨建波杨勤兴周海军寸韡中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的建立人二倍体细胞株KMB-17细胞代次与端粒长度之间的关系模型。方法将KMB-17细胞按照1∶2的分种率连续传代,以传代后再长满瓶为1代,取第22、25、28和30代KMB-17细胞,提取基因组DNA,采用实时荧光定量PCR法检测端粒重复拷贝数(T)及单... 详细信息

目的建立人二倍体细胞株KMB-17细胞代次与端粒长度之间的关系模型。方法将KMB-17细胞按照1∶2的分种率连续传代,以传代后再长满瓶为1代,取第22、25、28和30代KMB-17细胞,提取基因组DNA,采用实时荧光定量PCR法检测端粒重复拷贝数(T)及单个拷贝基因(S),以T/S值表示不同代次KMB-17细胞的端粒长度。结果第22、25、28和30代KMB-17细胞的T/S值分别为1 224±48、818±86、671±118和505±41,T/S值随细胞代次的增加而降低。结论 KMB-17细胞代次与细胞端粒长度间具有明显相关性,即细胞代次越高,细胞端粒长度越短。

关键词：人二倍体细胞 KMB-17细胞细胞代次端粒

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不同代次诱导多能干细胞增殖及牙周定向分化的能力

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北京大学学报（医学版） 2017年第1期49卷 16-24页

作者：李静文殷晓晖栾庆先北京大学口腔医学院·口腔医院牙周科口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室口腔数字医学北京市重点实验室北京100081

目的:研究不同代次诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)在增殖及向牙周定向分化能力上的区别,为今后深入研究和可能的临床应用提供理论基础。方法:复苏不同代次(P5、P10、P15、P20)人牙龈成纤维细胞来源的i PSCs,观... 详细信息

目的:研究不同代次诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)在增殖及向牙周定向分化能力上的区别,为今后深入研究和可能的临床应用提供理论基础。方法:复苏不同代次(P5、P10、P15、P20)人牙龈成纤维细胞来源的i PSCs,观察细胞形态并比较其增殖能力,进一步将各代次细胞形成拟胚体,于含生长分化因子-5(growth/differentiation factor-5,GDF-5)的培养基中诱导分化14 d,同时分别设置未诱导自发分化组为阴性对照,茜素红染色观察矿化结节并半定量分析钙盐沉积量,qRT-PCR及免疫荧光染色分别检测牙周相关基因及蛋白的表达,评价各代次间分化能力的差异。结果:不同代次的i PSCs均具有很强的体外增殖能力,经牙周定向诱导的细胞呈成纤维细胞样生长,茜素红染色可形成"矿化"结节,细胞钙盐沉积量较自发分化组显著增高且差异有统计学意义(P5:t=2.125,P=0.003;P10:t=2.246,P=0.021;P15:t=3.754,P=0.004;P20:t=3.933,P=0.002),但相同诱导条件下不同代次间钙盐沉积量差异无统计学意义(牙周定向诱导组:F=2.365,P=0.109;自发分化对照组:F=2.901,P=0.067),此外,相同代次细胞中诱导组牙周相关标记物的表达均高于对照组且差异有统计学意义(P<0.05),但不同代次间的蛋白表达差异无统计学意义(骨涎蛋白:F=0.9267,P=0.450;波形蛋白:F=0.9171,P=0.455;牙骨质蛋白1:F=2.129,P=0.137)。结论:不同代次不会影响i PSCs的增殖及分化能力,体外长期培养的i PSCs易于扩增,较高代次者经诱导仍可高效定向分化,适合作为牙周组织工程的种子细胞。

关键词：多能干细胞细胞代次牙周定向分化细胞增殖

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冻存对不同代次髓核细胞影响的初步研究

冻存对不同代次髓核细胞影响的初步研究

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作者：徐学振哈尔滨医科大学

学位级别：硕士

目的：探讨适合作为种子细胞冻存的兔髓核细胞代次。<br>　　方法：取3～4月龄兔10只，麻醉后，在严格无菌条件下分离胸腰段(T1-L7)髓核细胞，体外培养：A组：(对照组，n=10)原代细胞培养后进行各项指标检测；B、C、D、... 详细信息

目的：探讨适合作为种子细胞冻存的兔髓核细胞代次。<br>　　方法：取3～4月龄兔10只，麻醉后，在严格无菌条件下分离胸腰段(T1-L7)髓核细胞，体外培养：A组：(对照组，n=10)原代细胞培养后进行各项指标检测；B、C、D、E、F组：分别为一、二、三、四、五代细胞冻存后复苏组，各组n=10，检测细胞浓度均为1×105/ml，冻存2～3月，复苏后继续培养两周，各组分别进行：台盼蓝染色测定细胞成活率，MTT检测细胞生长活性；测定蛋白聚糖(Proteoglycan，PG)含量及糖胺聚糖(Glycosaminoglycans，GAG)合成，观察兔髓核细胞的生长动力学变化；RT-PCR检测Ⅱ型胶原基因表达。采用SPSS13.00进行统计学分析。<br>　　结果：B、C两组复苏后各项检测指标最接近A组，较好保持了兔髓核细胞的细胞源性，A、B、C三组的PG合成及GAG含量最高，D、E两组较A、B、C三组含量少(P<0.05)，开始出现出轻度退变，但细胞特性高于F组(P<0.05)，F组则表现为退变细胞，细胞特性明显低于A、B、C三组(P<0.01)；C组因进行了体外扩增，细胞数量明显较A、B组多。<br>　　结论：第1、2代兔髓核细胞冻存后较好保持了其细胞源性，2代更适合作为种子细胞进行低温保存。

关键词：髓核细胞细胞冻存细胞代次动物模型细胞培养

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乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴定用BHK21细胞密度和代次的确认

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国际生物制品学杂志 2018年第6期41卷 270-274页

作者：易维维彭维刘晓华江虹霞廖海棠马玉晓吕钢杨文杰刘菊卓金蓉成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室 610023

目的确定乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗病毒滴定使用的BHK21细胞的密度和代次范围。方法抽取20批不同代次BHK21细胞在6孔细胞板内培养成单层,进行细胞计数,计算细胞密度,滴定同批次乙脑病毒滴度国家参考品。将BHK21细胞从P95传代至P105,观... 详细信息

目的确定乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗病毒滴定使用的BHK21细胞的密度和代次范围。方法抽取20批不同代次BHK21细胞在6孔细胞板内培养成单层,进行细胞计数,计算细胞密度,滴定同批次乙脑病毒滴度国家参考品。将BHK21细胞从P95传代至P105,观察细胞形态及生长情况,与已用于检定的BHK21细胞(细胞重复6次滴定同批参考品,对滴度结果进行双因素方差分析,并与细胞的病毒滴度检测结果进行趋势分析比较。结果20批6孔板单层BHK21细胞密度均值1.55×10^6个/ml,差异较大(95%置信区间:7.89×10^4~3.02×10^6个/ml)。病毒滴度结果均在规定范围内(6.48~7.12 lg蚀斑形成单位/ml,相对标准偏差<5%),单层细胞密度对滴度结果无显著影响。P95—P105 BHK21细胞的生长情况及细胞形态与次数(F=0.13,P=0.721 4)、不同细胞代次(F=1.17,P=0.337 6)及两者的交互作用(F=0.30,P=0.978 0)对检测结果的影响无统计学意义,试验结果与较低代次细胞(细胞可连续传代至P105用于乙脑减毒活疫苗病毒滴定,且单层BHK21细胞密度对滴度检测结果无显著影响。

关键词：日本脑炎疫苗 BHK21细胞细胞密度细胞代次病毒滴定

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不同代次MDCK细胞对流感病毒的敏感性比较

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预防医学情报杂志 2012年第11期28卷 890-892页

作者：杨慧萍刘李马小珍潘明李天舒四川省疾病预防控制中心成都610041

目的比较不同代次的狗肾传代(MDCK)细胞对流感病毒的敏感性差异。方法选择生长状态及形态良好的、不同代次的MDCK细胞,在相同培养条件下同时接种流感样病例咽拭子标本,观察细胞病变,细胞收获后采用血凝试验测定病毒血凝效价和分离率;以... 详细信息

目的比较不同代次的狗肾传代(MDCK)细胞对流感病毒的敏感性差异。方法选择生长状态及形态良好的、不同代次的MDCK细胞,在相同培养条件下同时接种流感样病例咽拭子标本,观察细胞病变,细胞收获后采用血凝试验测定病毒血凝效价和分离率;以参考流感病毒株测定TCID50值,比较不同代次MDCK细胞对流感病毒的敏感性。结果 3个不同代次的MDCK细胞对流感样病例标本的分离阳性率、血凝效价相比差异无统计学意义,且3者TCID50值相比,相差不超出1个Lg。结论在相同实验条件以及细胞生长状态和形态良好的情况下,不同代次的MDCK细胞对流感病毒的敏感性无差异。

关键词： MDCK细胞细胞代次流感病毒敏感性

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bFGF对hBMSCs增殖及成软骨能力影响的实验研究

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组织工程与重建外科杂志 2017年第6期13卷 318-321页

作者：赵丹丹陶然刘豫曹谊林周广东潍坊医学院整形外科研究所山东省潍坊市261042 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011 组织工程国家工程研究中心上海市200241

目的探索碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和成软骨能力的影响,并确定适用于hBMSCs体外软骨构建的细胞代次。方法获取hBMSCs,分别用DMEM和DMEM+bFGF培养基进行培养。两组细胞均传代至第4代,比较两组各代次... 详细信息

目的探索碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和成软骨能力的影响,并确定适用于hBMSCs体外软骨构建的细胞代次。方法获取hBMSCs,分别用DMEM和DMEM+bFGF培养基进行培养。两组细胞均传代至第4代,比较两组各代次hBMSCs的形态变化、细胞得率;取第3代细胞,用pellet法体外成软骨诱导培养3周,观察两组pellet大体观并进行Ⅱ型胶原染色。在上述实验基础上,取hBMSCs用DMEM+bFGF培养基进行培养,1∶3传代培养至第8代,观察各代次细胞的形态变化;对各代次pellet体外成软骨诱导培养3周后,行大体观察并进行Ⅱ型胶原染色。结果 DMEM+bFGF培养体系下的细胞形态、细胞得率及成软骨能力等方面均优于DMEM组。DMEM+bFGF培养体系下,按照1∶3传代的细胞传至第6代仍能维持较好的细胞形态;第1~4代细胞均表达软骨特异性细胞外基质Ⅱ型胶原,第5及后续代次的细胞成软骨能力较差。结论 bFGF可明显促进hBMSCs增殖,并可更好地维持hBMSCs的成软骨能力,在该培养体系下的第1~4代细胞适用于体外软骨构建。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子人骨髓间充质干细胞细胞代次软骨再生

来源：评论

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体外微核试验重要影响因素研究

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化学与生物工程 2013年第2期30卷 64-66页

作者：管莹高茜朱洲海米其利李雪梅缪明明夭建华云南烟草科学研究院云南昆明650106

为了提高体外微核试验结果的可重复性和可比性,通过依据不同判定标准对同一受试物诱发细胞微核率进行统计、检测同一受试物对不同代次CHO细胞的微核率,研究了判定标准、细胞连续传代代次对体外微核试验结果的影响。结果表明,判定标准的... 详细信息

为了提高体外微核试验结果的可重复性和可比性,通过依据不同判定标准对同一受试物诱发细胞微核率进行统计、检测同一受试物对不同代次CHO细胞的微核率,研究了判定标准、细胞连续传代代次对体外微核试验结果的影响。结果表明,判定标准的不同对同一受试物诱发细胞微核率有显著影响;随细胞连续传代代次的升高,同一受试物对CHO细胞微核率呈上升趋势,连续传代9代以内细胞微核率较为稳定。判定标准、细胞连续传代代次是体外微核试验需要控制的重要因素。

关键词：体外微核试验判定标准细胞代次

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