检索结果-内蒙古大学图书馆

云南大学学报（自然科学版） 2016年第4期38卷 652-660页

作者：付旭锋刘平陈冰冰焦扬司维郑冰蓉云南大学医学院云南昆明650091 云南中科灵长类生物医学重点实验室云南昆明650500 昆明理工大学灵长类转化医学研究院云南昆明650504 昆明医科大学云南省干细胞与再生医学重点实验室云南昆明650500

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞,它能够发育成硬骨、软骨、脂肪和其他类型的细胞,因此已成为细胞治疗的重要候选种子细胞,特别在各种退行性疾病和自身免疫性疾病的组织修复和... 详细信息

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞,它能够发育成硬骨、软骨、脂肪和其他类型的细胞,因此已成为细胞治疗的重要候选种子细胞,特别在各种退行性疾病和自身免疫性疾病的组织修复和免疫调节方面有良好的应用前景.有效的应用须建立在有生物学特性保持良好的充足MSCs的前提下.由于临床上细胞移植的供体和受体往往存在不同时性,很难保证即离即用,且充足的数量需求保证也会是一个问题.因此,能保证良好生物学特性稳定保持的MSCs冻存方法就显得尤为重要.本文即对MSCs冻存技术的研究进展进行综述.

关键词：间充质干细胞细胞冻存冷冻保护剂

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果糖和二硫苏糖醇对骨髓间充质干细胞冻存后活性及多能性的影响

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中国组织工程研究 2016年第41期20卷 6085-6091页

作者：郑欣桐刘钦张璟霞罗庆陈哲宋关斌重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室重庆市400044

背景:冻存是保证干细胞临床应用的关键步骤之一,但现有冻存技术常导致细胞活性降低、多能性丧失及分化能力下降。目的:探究果糖及二硫苏糖醇是否有助于维持冻存后骨髓间充质干细胞多能性及成骨分化潜能。方法:分离培养SD大鼠骨髓间充质... 详细信息

背景:冻存是保证干细胞临床应用的关键步骤之一,但现有冻存技术常导致细胞活性降低、多能性丧失及分化能力下降。目的:探究果糖及二硫苏糖醇是否有助于维持冻存后骨髓间充质干细胞多能性及成骨分化潜能。方法:分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,在细胞冻存前分别用果糖(200μmol/L),二硫苏糖醇(500μmol/L)μmol/L)及果糖(200μmol/L)+二硫苏糖醇(500预处理1 h。冻存6个月后,复苏细胞并用倒置显微镜观察细胞形态,MTT实验检测细胞活性,定量PCR检测相关干性基因(Nanog,Oct4及Sox2)的表达,碱性磷酸酶活性测试及茜素红染色检测复苏骨髓间充质干细胞成骨分化能力。结果与结论:(1)复苏后各组细胞在形态上无明显差别;(2)果糖预处理及联合预处理有助于骨髓间充质干细胞活性维持;(3)二硫苏糖醇预处理可显著促进骨髓间充质干细胞多能性相关基因Nanog及Sox2的表达;(4)果糖、二硫苏糖醇及联合预处理皆有助于维持骨髓间充质干细胞成骨分化潜能,但以二硫苏糖醇及联合预处理组效果最佳;(5)结果表明,果糖预处理有助于维持冻存骨髓间充质干细胞活性,二硫苏糖醇有助于维持冻存骨髓间充质干细胞多能性及成骨分化能力。

关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞细胞冻存细胞活性多能性成骨分化抗氧化

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3种冻存液配方对原代培养人黑素细胞冻存复苏后细胞存活率的影响

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临床皮肤科杂志 2022年第6期51卷 331-334页

作者：麻彩丽曾金俞金健胡梦君杭州协合医疗用品有限公司研发部、博士后工作站浙江杭州310018

目的:寻找一种适合黑素细胞的冻存方法,并探讨冻存对其细胞活性的影响。方法:采用3种不同冻存配方冻存黑素细胞,复苏后通过台盼蓝染色检测其细胞存活率、CCK-8检测其细胞活力,并比较不同实验组黑素细胞的酪氨酸酶活性及黑素含量。结果:... 详细信息

目的:寻找一种适合黑素细胞的冻存方法,并探讨冻存对其细胞活性的影响。方法:采用3种不同冻存配方冻存黑素细胞,复苏后通过台盼蓝染色检测其细胞存活率、CCK-8检测其细胞活力,并比较不同实验组黑素细胞的酪氨酸酶活性及黑素含量。结果:实验组B[8%二甲基亚砜(DMSO)+92%胎牛血清(FBS)]冻存复苏的黑素细胞存活率[(58.36±6.60)%]及细胞活力[(97.69±2.49)%]均高于其他2组,且复苏后的黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素含量与正常传代的黑素细胞比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:使用8%DMSO+92%FBS冻存复苏黑素细胞后其细胞活性和功能均较好,适宜进行白癜风相关的研究。

关键词：细胞冻存黑素细胞酪氨酸酶细胞活性

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谷胱甘肽与富氢冻存液在鸡血细胞冻存中的保护作用

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中国组织化学与细胞化学杂志 2016年第1期25卷 75-79页

作者：曹美霞程丽芳姬云涛刘佳屈长青安徽大学生命科学学院合肥230601 抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心阜阳236037

目的通过观察细胞冷冻复苏后的存活率及凋亡情况,探讨细胞冻存液中添加谷胱甘肽(GSH)和氢气(H_2)对细胞的保护作用。方法在冻存液中添加GSH和/或通入H_2后冻存鸡血细胞,1个月后复苏,采用台盼蓝拒染和MTT法分别检测细胞存活率与细胞活性... 详细信息

目的通过观察细胞冷冻复苏后的存活率及凋亡情况,探讨细胞冻存液中添加谷胱甘肽(GSH)和氢气(H_2)对细胞的保护作用。方法在冻存液中添加GSH和/或通入H_2后冻存鸡血细胞,1个月后复苏,采用台盼蓝拒染和MTT法分别检测细胞存活率与细胞活性,流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果 GSH、H_2或H_2+GSH处理使细胞活力明显提高,而早期凋亡率明显降低。结论谷胱甘肽与富氢冻存液对鸡血细胞冻存具有保护作用。

关键词：细胞冻存复苏谷胱甘肽富氢冻存液

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山羊小肠上皮细胞冻存与复苏的试验研究

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黑龙江畜牧兽医 2008年第3期 30-31页

作者：王海霞匡伟赵国琦扬州大学动物科技学院江苏扬州225009

在体外细胞培养工作中,为了保种和长期保存其生物活性,细胞的冷冻与复苏成了一个重要的环节.对于体外培养的细胞,必须能够以一种较高的效率实现冻存与复苏,才能达到组织工程种子细胞的要求.试验采用不同的冻存液、不同的冻存速率对体外... 详细信息

在体外细胞培养工作中,为了保种和长期保存其生物活性,细胞的冷冻与复苏成了一个重要的环节.对于体外培养的细胞,必须能够以一种较高的效率实现冻存与复苏,才能达到组织工程种子细胞的要求.试验采用不同的冻存液、不同的冻存速率对体外分离培养的山羊IEC进行冻存与复苏,旨在提出最佳的冻存复苏方案.

关键词：细胞冻存复苏试验山羊肠上皮体外细胞培养生物活性长期保存

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低浓度二甲基亚砜保护SSMC7721细胞冻存后活力

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中国组织化学与细胞化学杂志 2016年第1期25卷 70-74,102页

作者：李中文吴涛付应霄吴守伟蚌埠医学院生物科学系细胞生物学教研室蚌埠233030

目的研究二甲基亚砜作为冻存保护剂对SSMC7721细胞冻存复苏后细胞生长相对活力和凋亡的影响。方法选择传代培养处于对数生长期SSMC7721细胞,体积分数2%、5%、10%和20%DMSO分别冻存10d、30d后复苏,采用倒置显微镜形态学观察、MTT法测定... 详细信息

目的研究二甲基亚砜作为冻存保护剂对SSMC7721细胞冻存复苏后细胞生长相对活力和凋亡的影响。方法选择传代培养处于对数生长期SSMC7721细胞,体积分数2%、5%、10%和20%DMSO分别冻存10d、30d后复苏,采用倒置显微镜形态学观察、MTT法测定细胞相对活力、流式细胞仪检测细胞凋亡,综合分析不同浓度DMSO冻存不同时间复苏对SSMC7721的影响。结果各浓度DMSO冻存SSMC7721对细胞生长和凋亡均有影响。20%DMSO对SSMC7721细胞影响明显,细胞培养不易贴壁逐渐脱落,浓度低于5%时,细胞生长状态良好;10%和20%DMSO细胞相对活力急剧下降;随着DMSO浓度增加和冻存时间延长,细胞凋亡率明显上升,存活率明显下降,5%DMSO冻存的凋亡率10.24%,20%DMSO冻存的凋亡率93.49%。结论 2%~5%DMSO冻存肝癌SSMC7721细胞,复苏后培养有较好的细胞相对活力,能有效减少细胞凋亡,起到的冻存保护剂作用。

关键词： DMSO 肝癌细胞凋亡细胞冻存

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DMSO-FREE细胞冻存液的研制

DMSO-FREE细胞冻存液的研制

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作者：陈焕芸华东理工大学

学位级别：硕士

治疗级细胞产品的冻存是其应用中的重要环节,因传统的细胞冻存液中含有具有一定细胞毒性的二甲基亚砜(Dimethylsulfoxide,DMSO),限制了其在临床上的应用。因此,DMSO-FREE细胞冻存液具有重要的实际应用价值。本文以人间充质干细胞(human ... 详细信息

治疗级细胞产品的冻存是其应用中的重要环节,因传统的细胞冻存液中含有具有一定细胞毒性的二甲基亚砜(Dimethylsulfoxide,DMSO),限制了其在临床上的应用。因此,DMSO-FREE细胞冻存液具有重要的实际应用价值。本文以人间充质干细胞(human Mesenchymal Stem Cell,hMSC)为对象研究了聚-γ-谷氨酸(Poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)在DMSO-FREE冻存液中的作用,研制了两款基于甘油的DMSO-FREE细胞冻存液。首先在含10%甘油及90%RPMI-1640培养基的DMSO-FREEK562细胞基础冻存液中,采用单因素优化实验,选取2,000、10,000、50,000和2,000,000四个分子量以及0.01%、0.05%和0.1%三个浓度,考察了 γ-PGA分子量和添加浓度对K562细胞的冷冻保护效果的影响。结果发现:在DMSO-FREE K562细胞基础冻存液中添加0.01%、分子量为50,000的γ-PGA冻存K562细胞10周后,复苏的细胞仍可保持良好的细胞形态与完整的细胞骨架,细胞复苏率以及复苏后再培养24小时后的存活率分别可达到(83.00±3.00)%和(88.83±14.29)%显著高于未添加组的(70.33±5.51)%和(67.51±5.20)%(p<0.05),且复苏后再培养时可快速进入细胞对数生长期,其对K562细胞的冷冻保护效果达到DMSO细胞冻存液水平。进一步,在含10%甘油及90%胎牛血清的DMSO-FREE hMSCs细胞基础冻存液中添加0.01%、分子量为50,000的γ-PGA冻存hMSCs细胞30天后,复苏后hMSCs的存活率为(96.96±0.29)%,复苏率可达(69.26±4.40)%,显著高于未添加组的(59.34±3.93)%(p<0.05),且能保持正常的细胞形态、完整的细胞骨架,更好地维持细胞的三系分化功能。由此可见,在DMSO-FREE细胞冻存液中添加γ-PGA可显著提高其对细胞的冻存效果,其次,以hMSCs为研究细胞,采用临床注射液级的复方氨基酸、人血白蛋白、右旋糖酐40、葡萄糖、混合糖电解质和甘油为组分,利用D-最优混料设计方法,确定了最优组合配方,获得一款可输注的DMSO-FREE细胞冻存液。采用该细胞冻存液将hMSCs冷冻保存30天后,hMSCs的存活率和复苏率可分别可达到(95.95±0.30)%和(59.95±6.04)%,且细胞仍可维持其正常表型、形态和完整的细胞骨架,仍具有三系分化能力,达到了与含DMSO细胞冻存液相近的细胞冻存效果。以上研究结果为用于治疗级细胞产品冻存的DMSO-FREE细胞冻存液的开发提供了新的思路及技术支撑。

关键词：细胞冻存 DMSO-FREE 聚-γ-谷氨酸 hMSCs

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实用细胞冻存技术在自体造血干细胞移植中的应用

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中国社区医师 2017年第13期33卷 50-51页

作者：张璞李晓林薛燕张慈现向立丽段雅雅冯凯付杰江苏省徐州市中心医院血液科 221009

目的:分析实用细胞冻存技术在自体造血干细胞移植中的应用。方法:收集11例患者自体造血干细胞移植(AHSCT)动员的外周血造血干细胞,收集袋总容量100~150 m L,其中二甲基砜(DMSO)占总容量的10%、异体同型病毒灭活血浆占20%、外周血造血干... 详细信息

目的:分析实用细胞冻存技术在自体造血干细胞移植中的应用。方法:收集11例患者自体造血干细胞移植(AHSCT)动员的外周血造血干细胞,收集袋总容量100~150 m L,其中二甲基砜(DMSO)占总容量的10%、异体同型病毒灭活血浆占20%、外周血造血干细胞占70%。超净台无菌操作分装后放置于-20℃的冰箱冻存12 h,再置于-80℃冰箱冻存。与常用冻存技术做对照,移植前复苏干细胞,检测细胞活性、单个核细胞计数(MNC)和CD34+细胞的回收率;移植后观察患者粒细胞、血小板植入时间。结果:复苏干细胞后检测细胞活性(89.10±3.98)%,MNC和CD34+细胞的回收率分别为(91.84%±2.32)%和(90.59%±1.72)%,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);移植后粒细胞中位植入时间+12 d、血小板中位植入时间+18 d,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DMSO与病毒灭活血浆是一种经济、易操作的干细胞冷冻保护剂。

关键词：细胞冻存自体造血干细胞

来源：评论

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改良兔角膜细胞冻存与复苏方法的实验研究

改良兔角膜细胞冻存与复苏方法的实验研究

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中华医学会第十二届全国眼科学术大会

作者：赵秀梅葛红岩哈尔滨医科大学附属第一临床医学院眼科医院哈尔滨医科大学附属第一临床医学院眼科医院

目的：建立一种改良的兔角膜细胞冻存和复苏的方法。方法：兔角膜细胞消化培养。取第2代细胞分别进行传统和改良方法冻存,于冻存后的第2周、3个月、6个月、1年分别行传统和改良的复苏方法。用 MTT 法测细胞生长曲线,

关键词：兔角膜细胞冻存复苏方法

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杂交瘤细胞冻存方法的改进

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军事医学科学院院刊 1985年第5期 535-538页

作者：辛颜彬杨保安祝庆余徐品芳军事医学科学院微生物流行病研究所

自1977年以来,我们应用四级梯度降温冻存法对30余株哺乳动物细胞及2株节肢动物细胞共1000多支安瓿进行了冷冻保存,效果较好,大部分细胞的活存率在70％以上。在此基础上对8株抗登革4型(DEN-4)病毒杂交瘤细胞400多支安瓿进行了冻存。鉴于... 详细信息

自1977年以来,我们应用四级梯度降温冻存法对30余株哺乳动物细胞及2株节肢动物细胞共1000多支安瓿进行了冷冻保存,效果较好,大部分细胞的活存率在70％以上。在此基础上对8株抗登革4型(DEN-4)病毒杂交瘤细胞400多支安瓿进行了冻存。鉴于四级降温冻存法步骤多,需要经过40℃冰箱和一20℃冰箱长达7～8小时的梯度降温,较难适应单克隆抗体工作中细胞冻存的需要。因此,自1982年以来我们摸索了影响细胞冻存的主要因素,确定了杂交瘤细胞冻存的最适保护剂浓度,并研制成功细胞冻存简易装置。冻存操作时间缩短了4～5小时,减少

关键词：冻存法日本梯度降温细胞冻存杂交瘤细胞杂种细胞血清组 DMSO 亚砜

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