检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学杂志 2003年第3期26卷 298-300页

作者：唐岩唐军民李银生伊焕发戴燕北京大学医学部组织胚胎学教研室北京100083 新乡医学院组胚教研室解放军261医院

近年来细胞分离技术的发展十分迅速，分离主要根据各种细胞的不同的物理性状及表面受体或抗原的差异而采取不同的分离技术。免疫磁珠(Immunomag-netic bead, IMB)技术是由20世纪70年代起步，80年代兴起的国内外应用较多的一种新技术。……

关键词：免疫磁珠技术外周血树突状细胞细胞分离技术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

骨肉瘤肿瘤干细胞的研究现状、争议和思考

引用

中华骨科杂志 2018年第18期38卷 1135-1142页

作者：周振华肖建如第二军医大学(海军军医大学)附属长征医院骨肿瘤外科 200003

骨肉瘤是最常见的原发恶性骨肿瘤之一，好发于儿童和青少年，一旦出现转移往往预后不佳。临床上骨肉瘤经常出现化疗耐药情况，亟需新的治疗方式和治疗靶点。肿瘤干细胞学说的出现吸引了众多从事骨肉瘤生物学研究者的目光，已有的研究表... 详细信息

骨肉瘤是最常见的原发恶性骨肿瘤之一，好发于儿童和青少年，一旦出现转移往往预后不佳。临床上骨肉瘤经常出现化疗耐药情况，亟需新的治疗方式和治疗靶点。肿瘤干细胞学说的出现吸引了众多从事骨肉瘤生物学研究者的目光，已有的研究表明骨肉瘤由多种不同功能的肿瘤细胞亚群构成，其中只有一小部分骨肉瘤细胞具有肿瘤干细胞的特征，例如自我更新和多向分化能力，这些能力使骨肉瘤干细胞能够分化成不同类型的肿瘤细胞；除此之外骨肉瘤干细胞在骨肉瘤的增殖、侵袭、复发和转移中发挥着决定性的作用，这些研究表明骨肉瘤的发生可能与肿瘤干细胞的存在密切相关。可能的机制是肿瘤干细胞自我更新途径有别于正常组织干细胞。骨肉瘤干细胞的发现为理解骨肉瘤的生物学特性提供了新的视野，但是未来仍然需要更进一步的研究来了解正常组织干细胞和肿瘤干细胞在骨肉瘤发生、发展中的作用，各种信号通路调节正常组织干细胞和肿瘤干细胞自我更新的途径，以及相关的信号通路失调导致肿瘤发生的机制。我们期望通过骨肉瘤干细胞的研究最终可以寻找到骨肉瘤新的治疗靶点以及预警分子，给提高骨肉瘤患者的预后甚至根治骨肉瘤带来希望。在本文中我们总结了近年骨肉瘤干细胞的研究进展，包括骨肉瘤干细胞分离技术和现有的分子标志等，并且针对骨肉瘤干细胞研究领域的一些争议进行了探讨。

关键词：骨肉瘤细胞肿瘤干细胞细胞自我更新组织干细胞原发恶性骨肿瘤生物学特性分化能力细胞分离技术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

提高小鼠原代肝星状细胞获得率及纯度的分离方法

引用

中国组织工程研究 2018年第21期22卷 3376-3380页

作者：徐莹张定棋慕永平陈佳美王清兰平键刘伟刘平上海中医药大学上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海中医临床重点实验室上海市201203 上海中医药大学上海高校中医内科学E-研究院上海市201203

背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法... 详细信息

背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以无钙镁离子的前灌流液经门静脉充分灌注肝脏,再先后以1 g/L链霉蛋白酶和0.7 g/LⅣ型胶原酶灌注,使用Nycodenz进行梯度密度离心,获取中间层原代肝星状细胞,锥虫蓝染法观察肝星状细胞活力,流式细胞法检测细胞纯度,免疫荧光法检测Desmin表达,并于倒置显微镜下观察细胞培养3,5,7 d后的形态变化,PCR法检测培养3,5,7 d后α-平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白基因表达情况。结果与结论:(1)每只小鼠肝脏可获得肝星状细胞(5.5±0.4)×10~6个,锥虫蓝检测细胞活力均大于95%,流式细胞法检测细胞纯度为94%,免疫荧光检测细胞高表达Desmin;(2)随着体外培养时间的延长,可见原代肝星状细胞逐渐由圆形向星型发展;(3)随培养天数增长,α-平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白表达逐渐升高;(4)结果提示,实验成功建立了高效分离小鼠肝星状细胞的方法,可为获得高纯度、高细胞活力的小鼠原代肝星状细胞提供技术方案,也为肝纤维化的机制研究提供技术保障。

关键词：肝星状细胞细胞分离技术原代细胞细胞外基质荧光鉴定肝纤维化细胞得率国家自然科学基金肝细胞细胞分离组织工程

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用转铁蛋白受体和胎儿血红蛋白标记染色方法分选孕妇外周血中胎儿有核红细胞的研究

引用

中华妇产科杂志 2006年第2期41卷 126-127页

作者：赵跃宏任景慧徐宏里徐洪斌林琳华李富荣王新根暨南大学第二临床医学院妇产科深圳518020 暨南大学第二临床医学院中心实验室深圳518020

由于孕妇外周血中胎儿细胞的含量极少,Hahn, Holzgreve[1]和Bianchi等[2]报道,孕妇每毫升外周血中仅有1～2个完整胎儿细胞.所以采用特异性单克隆抗体对胎儿细胞进行标记,并结合流式细胞仪进行高效富集分选的技术,是分离、纯化孕妇外周... 详细信息

由于孕妇外周血中胎儿细胞的含量极少,Hahn, Holzgreve[1]和Bianchi等[2]报道,孕妇每毫升外周血中仅有1～2个完整胎儿细胞.所以采用特异性单克隆抗体对胎儿细胞进行标记,并结合流式细胞仪进行高效富集分选的技术,是分离、纯化孕妇外周血中胎儿细胞的最佳手段[3].但因目前尚未发现识别胎儿细胞的特异性抗体,故不同学者选用的标记性抗体也有所不同.本研究采用荧光激活细胞分离技术(fluorescence-activated cell sorting,FACS ),通过对孕妇外周血及未孕妇女外周血中转铁蛋白受体(transferrin receptor, CD71)单标记染色和胎儿血红蛋白(fetal haemoglobin,HbF)单标记染色与双标记染色情况的比较,探讨CD71 与HbF染色法分选胎儿有核红细胞的价值。

关键词：胎儿有核红细胞孕妇外周血转铁蛋白受体胎儿血红蛋白分选染色方法蛋白标记 receptor 细胞分离技术胎儿细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同声压级次声对大鼠海马细胞凋亡的影响

引用

中华物理医学与康复杂志 2004年第3期26卷 148-151页

作者：刘朝晖陈景藻李康樗曹云新第四军医大学放射医学教研室西安710032 第四军医大学免疫学教研室西安710032

目的　探讨 8Hz ,90dB/13 0dB次声作用对海马细胞凋亡的影响。方法　将雄性SD大鼠 88只随机分为 11个组 ,即对照组、90dB次声作用 1d组、7d组、14d组、2 1d组及 2 8d组 ,13 0dB次声作用 1d组、7d组、14d组、2 1d组及 2 8d组 ,每组 8只... 详细信息

目的　探讨 8Hz ,90dB/13 0dB次声作用对海马细胞凋亡的影响。方法　将雄性SD大鼠 88只随机分为 11个组 ,即对照组、90dB次声作用 1d组、7d组、14d组、2 1d组及 2 8d组 ,13 0dB次声作用 1d组、7d组、14d组、2 1d组及 2 8d组 ,每组 8只。采用细胞分离技术、荧光染色和流式细胞仪观察大鼠脑海马细胞凋亡率。结果　与对照组比较 ,90dB/1d组、13 0dB/1d组、13 0dB/7d组次声作用后 ,海马细胞未显示凋亡率增高 (P >0 .0 5 ) ;90dB/7d组、90dB/14d组、90dB/2 1d组、13 0dB/14d组、13 0dB/2 1d组次声作用后 ,海马细胞凋亡率显著增高 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,90dB/2 1d组比 90dB/14d组明显回落 (P <0 .0 1) ,但仍高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,90dB/14d组海马细胞凋亡率达到高峰 (P <0 .0 1) ,90dB/2 8d组及 13 0dB/2 8d组与对照组相比 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论　 8Hz ,90dB/13 0dB次声作用一定时间后 ,均可导致海马细胞凋亡数量显著增高 ,尤以 90dB/14d组效应最强 ;8Hz ,90dB/13 0dB次声作用对大鼠海马细胞具有损伤效应。随作用时间延长 ,海马细胞对 8Hz ,90dB/13 0dB次声作用均可产生适应性。

关键词：大鼠海马细胞凋亡次声细胞分离技术流式细胞仪

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人红系终末分化中不同期幼稚细胞的分离和功能研究

人红系终末分化中不同期幼稚细胞的分离和功能研究

引用

作者：胡景平中南大学

学位级别：博士

红血球的生成,是造血干细胞定向往红细胞发育,成熟的过程,是一个连续而又具有阶段性的过程。血型糖蛋白A的出现表示红系终末分化的开始,细胞从原成红细胞开始向嗜碱性幼红细胞,嗜多色性幼红细胞,正染色幼红细胞增殖分化,最后细胞脱核后... 详细信息

红血球的生成,是造血干细胞定向往红细胞发育,成熟的过程,是一个连续而又具有阶段性的过程。血型糖蛋白A的出现表示红系终末分化的开始,细胞从原成红细胞开始向嗜碱性幼红细胞,嗜多色性幼红细胞,正染色幼红细胞增殖分化,最后细胞脱核后变成网织红细胞。网织红细胞经过成熟变成成熟红细胞后通过骨髓进入血液循环系统。本文建立了一个稳定的模拟红系体内发育的培养体系,并运用蛋白质印迹实验和流式细胞学分析法检测了数十种红系发育相关的膜表面蛋白,骨架蛋白以及跨膜蛋白在培养过程中表达水平的变化。实验结果表明,Band3在发育过程中上升的幅度最为明显而α4integrin,一种粘附分子,先是保持高表达水平,而后降至最低。我们选取了Band3和a4integrin这两个变化最大的膜蛋白作为标记物,搭配血型糖蛋白A,红系的特异性标记物,对我们的培养体系的分化过程进行了监测,并选取了第7天和第14天的细胞进行流式细胞分选。我们在第7天的细胞中得到了具有形态学特征的原成红细胞,早期嗜碱性幼红细胞,晚期嗜碱性幼红细胞和嗜多色性幼红细胞,我们在第十四天的细胞中得到了具有形态学特征的嗜多色性幼红细胞和正染色幼红细胞,流式细胞分选得到的细胞纯度达到90%以上。为了检测这些细胞是否具有各个期该有的功能,我们对这些细胞进行培养,细胞计数以及做生长曲线,实验结果表明原成红细胞可以分裂4次,早期嗜碱性幼红细胞可以分裂3次,晚期嗜碱性幼红细胞可以分裂2次,嗜多色性幼红细胞可以分裂1次,正染色幼红细胞不能再分裂,这说明我们流式分选得到的各个期的细胞具有了红系终末分化中个幼稚细胞的有丝分裂能力。我们将这三个标记物运用到正常人的骨髓中,并将人骨髓进行流式细胞分选,我们在正常人骨髓中得到了纯度高达90%以上的各个期的细胞。我们将7个正常人骨髓的有核红细胞进行统计学分析,发现在正常人的骨髓中,我们得到的成原红细胞：早期嗜碱性幼红细胞：晚期嗜碱性幼红细胞：嗜多色性幼红细胞：正染色幼红细胞的比例达到了预测了1：2：4：8：16。而当我们运用这三个标记物到骨髓异常增生综合症的病人身上时,发现他们骨髓中红系发育终末阶段的情况发生了变化。我们在本研究中发现了建立了稳定的红系体外诱导培养体系,并且发现了红系发育的独特标记物。该标记物的发现能让我们能够得到大量的不同期的红系终末发育的有核红细胞,以便于让我们更深层次的对红细胞的分化和发育进行研究,也让我们可以将不同期的有核红细胞进行RNA测序,DNA测序等方面的分子生物学研究。红系特异性标记物的发现也能让我们将其投入临床应用中,帮助诊断时期专一性的血液疾病以及跟红系发育相关的血液系统疾病例如骨髓衰竭等。

关键词：造血发生红细胞细胞分离技术正常红系发育异常红系发育骨髓异常增生综合症

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠不同阶段生精细胞的差异表达基因的研究

大鼠不同阶段生精细胞的差异表达基因的研究

引用

作者：王鲁京北京协和医学院(清华大学医学部)&中国医学科学院

学位级别：博士

哺乳动物的精子发生是一个十分复杂但又高度有序的细胞分化过程，是相关基因严格受时空调控相继转录表达的结果。生精细胞的发生分多阶段进行，曲细精管截面上不仅可以看到处于精子发生过程不同阶段的各种生精细胞的组合，还可以看到支... 详细信息

哺乳动物的精子发生是一个十分复杂但又高度有序的细胞分化过程，是相关基因严格受时空调控相继转录表达的结果。生精细胞的发生分多阶段进行，曲细精管截面上不仅可以看到处于精子发生过程不同阶段的各种生精细胞的组合，还可以看到支持细胞、间质细胞等其它类型的细胞。它们分别具有自己的基因时空表达规律。多年来人们采用了重力沉降法、密度梯度离心以及曲细精管分段分离等多种方法试图获得处于不同阶段纯净的各类细胞，但均存在着组织异质性问题。因此分离得到单一的生精细胞群并建立单一细胞类型的cDNA文库，就可以特异性地研究单一细胞的基因表达和有效地筛选不同生精细胞群之间差异表达的基因。激光捕获显微切割技术(Laser Capture Microdissection，LCM)带来了细胞分离技术的革命，它能够快速、高效和精确地从复杂组织环境中捕获分离单一细胞。本研究小组已经成功地利用其捕获和分离了大鼠初级精母细胞和圆形精子细胞。本实验在此基础上从分离的两种细胞中提取RNA，合成双链cDNA，并进一步通过抑制性消减杂交(Suppressive Subtractive Hybridization，SSH)方法构建了大鼠初级精母细胞(RSA)和圆形精子细胞(RSB)的双向cDNA消减文库。所构建文库的滴度高达8．3×10（上标9）／ml，重组质粒克隆阳性率为91．67％，插入片段大小分布于250bp～1．7kb，主要集中于500bp～1kb。根据SSH的结果，选择918个PCR纯化产物(603个初级精母细胞差异表达，315个圆形精子细胞差异表达)进行斑点杂交(Dot Blotting)分析，以验证差异表达并分析其表达差异的强度。结果得到772个克隆在两种细胞之间表达差异相差大于3倍(473个初级精母细胞差异表达，299个圆形精子细胞差异表达)。对斑点杂交筛选出的772个克隆进行部分测序，共产生了610个质量满意的ESTs，总测序成功率达到79．02％。其中从初级精母细胞和圆形精子细胞中分别获得403和207个质量满意的EST。经生物信息学处理，去除重复序列，将测序结果组装成单一品种的EST，得到531个基因品种，RSA和RSB分别为336和195个。参照国外文献，将这些EST分为3类。第一类代表已知基因，指与GenBank中人的基因同源性大于95％，同源片段长度大于100bp的EST，其中主要是蛋白编码序列，还包含少量的染色体序列和线粒体基因序列；第二类代表已知EST，指与已知基因无同源性或同源性较低，但与dbEST库中的序列同源性大于95％，同源性长度大于100bp的EST；达不到上述标准的EST归入第三组即全新的EST。由于不同组织中基因的表达水平不同及cDNA文库构建所产生的冗余性，结果从RSA和RSB文库中分别获得了336和195个基因品种。两个文库中已知基因、已知EST和全新EST的分布，在RSA中分别为24．11％、4．46％和71．43％；RSB中分别为25．64％、8．21％和66．15％。对代表已知基因的ESTs按照功能分为9类，初步探讨了大鼠精子发生过程中差异表达基因的作用和意义。利用公共数据库，对圆形精子细胞差异表达的02-66克隆进行电子克隆，使用拼接引物PCR扩增出cDNA并测序。测序全长为564bp，编码179个氨基酸，其核苷酸序列和GenBank中7个功能未知的序列高度同源。其编码蛋白结构域分析显示其部分氨基酸序列和AhpC-TSA和Piwi有较高的结构相似性。AhpC／TSA家族具有广泛的细胞内还原活性。Piwi基因编码一种核质蛋白，能够通过体细胞信号传导和细胞自主调节双重机制控制原始生殖细胞(germ-line stem cells，GSCs)的分裂活性。

关键词：生精细胞差异表达基因激光捕获显微切割技术细胞分离技术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

氧化鐵奈米粒子於功能性分析之應用

引用

化学 2015年第1期73卷 67-78页

作者：林峙諳賴緒明張銘湘李存詔簡又新許維喆賴秉杉

氧化铁奈米粒子(iron oxides nanoparticles, IONPs)因特殊的物理与化学性质而产生许多用途，除本身性质外可再藉由不同的功能性修饰，针对不同的需求可特化为多功能性之奈米材料，在分析检测上有相当大的助益，本文针对IONPs 介绍了数... 详细信息

氧化铁奈米粒子(iron oxides nanoparticles, IONPs)因特殊的物理与化学性质而产生许多用途，除本身性质外可再藉由不同的功能性修饰，针对不同的需求可特化为多功能性之奈米材料，在分析检测上有相当大的助益，本文针对IONPs 介绍了数种分析相关之应用。

关键词：氧化鐵奈米粒子磁性材料磁分離技術分子模板基質輔助雷射脫附游離法細胞分離技術生醫晶片核磁共振顯影

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

组织干细胞（tissue stem cells）

引用

日本医学介绍 2005年第11期26卷 527-528页

作者：刘冲（译）

1-定义组织按相应的分化阶段分为①干细胞（stemcells）；②前体细胞（progenitor cells／transit amplifying cells）；③成熟细胞（maturecells）三类。组织干细胞或称躯体性干细胞，既有多分化能力，也保持未分化性的胚胎性干细胞特... 详细信息

1-定义组织按相应的分化阶段分为①干细胞（stemcells）；②前体细胞（progenitor cells／transit amplifying cells）；③成熟细胞（maturecells）三类。组织干细胞或称躯体性干细胞，既有多分化能力，也保持未分化性的胚胎性干细胞特征。干细胞具有多分化能力的同时，也具有干细胞产生干细胞的自我复制能力。这样的由干细胞系统产生的细胞群有血细胞、皮肤表皮细胞、消化道黏膜细胞、睾丸生殖细胞等。干细胞占构成组织的全体细胞的比例很低，例如造血干细胞仅以有核细胞的1／100000的低比率存在。但是，利用多种单克隆抗体和干细胞特有的药剂排泄活性、荧光细胞分离技术（FACS），使分离干细胞成为可能。干细胞的细胞转化周期非常慢，该集团中一部分细胞进入细胞周期后，区别于前体细胞可显示出高的增殖能力。明确什么刺激使干细胞开始增殖、分化、子细胞的不均等分裂，或自我复制（birth）和细胞分化（death）两个不同的方向是由怎样的机制产生的是今后的课题。

关键词：组织干细胞自我复制能力细胞分离技术分化能力前体细胞皮肤表皮细胞睾丸生殖细胞细胞周期增殖能力

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种简便的大鼠肝脏星状细胞分离培养方法及鉴定

引用

中国肿瘤外科杂志 2011年第2期3卷 99-101页

作者：张荣涛李向农徐州医学院江苏徐州221002 徐州医学院附属医院普外科

目的探索简单经济的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)分离培养方法,提高实验效率。方法取SD大鼠,行肝脏门静脉插管,用链酶蛋白酶、Ⅳ型胶原酶灌注,消化。细胞悬液经Percoll密度梯度离心液分离,台盼蓝染色鉴定细胞活性,Desmin抗... 详细信息

目的探索简单经济的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)分离培养方法,提高实验效率。方法取SD大鼠,行肝脏门静脉插管,用链酶蛋白酶、Ⅳ型胶原酶灌注,消化。细胞悬液经Percoll密度梯度离心液分离,台盼蓝染色鉴定细胞活性,Desmin抗体免疫组化鉴定纯度。结果 HSCs得率为(2.35±0.15)×107/每肝,细胞活率为(95.5±0.6)%,纯度为(92.4±1.5)%。结论该法有效简化了大鼠HSCs提取的方法,有利于原代大鼠HSCs的生物学研究。

关键词： SD大鼠肝星状细胞细胞分离技术原代培养细胞活性鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：