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一种新的快速细胞分离法

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重庆医学 1998年第6期27卷 396-397页

作者：梁光萍第三军医大学西南医院烧伤研究所 400038

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一种实用的豚鼠心室肌细胞分离法

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第四军医大学学报 1997年第5期18卷 482-483页

作者：王海昌贾国良第四军医大学西京医院心内科

一种实用的豚鼠心室肌细胞分离法王海昌贾国良（第四军医大学西京医院心内科西安７１００３３）关键词细胞分离法心室肌豚鼠中图号Ｒ３３１．３８获得正常的单心肌细胞是应用班片钳（ｐａｔｃｈ－ｃｌａｍｐ）进行心肌电生理研究的基础... 详细信息

一种实用的豚鼠心室肌细胞分离法王海昌贾国良（第四军医大学西京医院心内科西安７１００３３）关键词细胞分离法心室肌豚鼠中图号Ｒ３３１．３８获得正常的单心肌细胞是应用班片钳（ｐａｔｃｈ－ｃｌａｍｐ）进行心肌电生理研究的基础．自从Ｋｏｎｏ［１］和Ｐｏｗｅｌ等...

关键词：细胞分离法心室肌豚鼠心肌电生理

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白细胞分离法治疗溃疡性结肠炎的作用机制

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中华医学杂志 2011年第14期91卷 1004-1006页

作者：曹晓沧陈梦诗王邦茂天津医科大学总医院消化科 300052

溃疡性结肠炎（UC）常伴有循环中活化粒、单核巨噬细胞（granulocytes and monocytes/macrophage,GM）及相关的促炎因子增加,以及体内循环免疫复合物水平的升高,活动期UC的肠道损伤也与局部GM浸润程度相关.因此,去除部分白细胞可能对缓... 详细信息

溃疡性结肠炎（UC）常伴有循环中活化粒、单核巨噬细胞（granulocytes and monocytes/macrophage,GM）及相关的促炎因子增加,以及体内循环免疫复合物水平的升高,活动期UC的肠道损伤也与局部GM浸润程度相关.因此,去除部分白细胞可能对缓解病情有利.日本学者最先尝试并开发白细胞分离法（leukocytapheresis,LCAP）治疗UC,之后其相继在英国、美国、澳大利亚和加拿大投入临床使用[1].

关键词：溃疡性结肠炎细胞分离法治疗循环免疫复合物单核巨噬细胞促炎因子浸润程度肠道损伤

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白细胞分离法治疗炎症性肠病

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中华消化杂志 2005年第9期25卷 575-576页

作者：赖雅敏钱家鸣中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院消化科 100730

炎症性肠病(IBD)包括克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC).20%～30%的患者对目前已有的药物治疗反应不佳,最终不得不切除全结肠,因而临床上亟待新的治疗方法。

关键词：药物治疗反应炎症性肠病细胞分离法溃疡性结肠炎克罗恩病治疗方法全结肠

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医院血流感染病原菌分布构成及MALDI-TOF MS在快速鉴定病原菌中的价值分析

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中国病原生物学杂志 2025年第1期20卷 71-76页

作者：肖铟刘沫然齐齐哈尔医学院附属第三医院肿瘤一科黑龙江齐齐哈尔161000 齐齐哈尔医学院附属第三医院检验中心黑龙江齐齐哈尔161000

目的探讨医院血流感染病原菌种类及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)技术在病原菌快速识别中的应用。方法收集2022-2023年本院血流感染患者的血培养阳性标本234份,对分离出的病原菌进行种类鉴定及药敏试验。通过细胞... 详细信息

目的探讨医院血流感染病原菌种类及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)技术在病原菌快速识别中的应用。方法收集2022-2023年本院血流感染患者的血培养阳性标本234份,对分离出的病原菌进行种类鉴定及药敏试验。通过细胞分离液(Percoll液)密度梯度离心法(简称Percoll分离法)与十二烷基硫酸钠(SDS)沉淀法联合MALDI-TOF MS法直接鉴定提取物,将鉴定结果与传统血培养结果进行比较,对比两种不同前处理方式联合MALDI-TOF MS对病原菌的鉴定效率。结果在234份血培养阳性标本中,主要分离自消化科病房(21.37%,50/234),其次为呼吸科病房(14.10%,33/234)。从234份血培养阳性标本中分离出234株病原菌,包括177株革兰阴性菌(75.64%)和57株革兰阳性菌(24.36%)。在革兰阴性菌中,大肠埃希菌103株(44.02%),占比最高,其次为肺炎克雷伯菌44株(18.80%)。革兰阳性菌中,金黄色葡萄球菌23株(9.83%),占比最高,其他菌株数量较少。大肠埃希菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明、庆大霉素耐药率超50%,对哌拉西林/他唑巴坦、美罗培南、亚胺培南、阿米卡星耐药率低于10%。肺炎克雷伯菌对头孢呋辛、环丙沙星耐药率超50%,对哌拉西林/他唑巴坦、美罗培南、亚胺培南、阿米卡星耐药率低于10%。两者对氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、庆大霉素耐药率差异显著(P<0.05),而对其他抗生素耐药率差异不显著(P>0.05)。金黄色葡萄球菌对青霉素G等耐药率超50%,对莫西沙星等耐药率较低,未发现对利奈唑胺、万古霉素耐药。与传统培养法对比,Percoll分离法联合MALDI-TOF MS快速鉴定的准确率为93.59%,革兰阴性菌鉴定结果准确率为94.92%,革兰阳性菌鉴定结果准确率为89.47%。SDS沉淀法联合MALDI-TOF MS快速鉴定的准确率为76.5%,革兰阴性菌鉴定结果准确率为80.23%,革兰阳性菌鉴定结果准确率为64.91%。Percoll分离法联合MALDI-TOF MS快速鉴定的病原菌的准确率显著高于SDS沉淀法联合MALDI-TOF MS,其中对革兰阴性菌、革兰阳性菌、肺炎克雷伯菌、人葡萄球菌的鉴定准确率差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究血流感染阳性标本主要分离自消化科病房,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主要病原菌,其耐药性监测显示对常见抗生素存在不同程度耐药。Percoll分离法联合MALDI-TOF MS快速鉴定的病原菌的准确率显著优于SDS沉淀法,为临床快速、准确诊断血流感染提供了有力支持。

关键词：血流感染病原菌细胞分离法十二烷基硫酸钠沉淀法基质辅助激光解析电离飞行时间质谱

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豚鼠耳蜗单离螺旋神经节细胞外毛细胞同时分离法

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临床耳鼻咽喉科杂志 2001年第8期15卷 372-373页

作者：李树华韩东一杨伟炎姜泗长沈阳军区总医院耳鼻咽喉科沈阳110015 解放军总医院耳鼻咽喉-头颈外科

随着细胞生物学及分子生物学技术的进步,保持活性的单离螺旋神经节细胞(SGC)和(或)外毛细胞(OHC)已成为听觉生理、生化、病理及药理实验的重要模型.OHC为听觉的感受细胞,SGC为听觉初级神经元.观察同一因素对OHC及SGC的影响有重要意义,... 详细信息

随着细胞生物学及分子生物学技术的进步,保持活性的单离螺旋神经节细胞(SGC)和(或)外毛细胞(OHC)已成为听觉生理、生化、病理及药理实验的重要模型.OHC为听觉的感受细胞,SGC为听觉初级神经元.观察同一因素对OHC及SGC的影响有重要意义,这就需要同时获得来源于同一耳蜗的单离的SGC和OHC.为此,我们尝试了在同一耳蜗同时分离单离的SGC和OHC的可能性,获得较好结果,报告如下.

关键词：耳蜗螺旋神经节细胞外毛细胞细胞分离法

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人肠系膜小动脉平滑肌细胞急性酶分离法及其在离子通道研究中的应用

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现代临床医学生物工程学杂志 2004年第3期10卷 194-196页

作者：倪锦刘洋张贞雄唐显玲刘进广州市儿童医院麻醉科广州510120 四川大学华西医院麻醉学与危重病医学教研室成都610041 泸州医学院附属医院麻醉科泸州646000

目的　建立一种人肠系膜小动脉平滑肌细胞急性酶分离法并在分离的细胞上研究其离子通道特性 .方法　采用木瓜蛋白酶、胶原酶和透明质酸酶分离出人肠系膜小动脉平滑肌细胞 ,用膜片钳全细胞记录法记录通道电流 .结果　该方法分离过程简单 ... 详细信息

目的　建立一种人肠系膜小动脉平滑肌细胞急性酶分离法并在分离的细胞上研究其离子通道特性 .方法　采用木瓜蛋白酶、胶原酶和透明质酸酶分离出人肠系膜小动脉平滑肌细胞 ,用膜片钳全细胞记录法记录通道电流 .结果　该方法分离过程简单 ,所获细胞数量多 ,形态正常 ,在这些细胞上容易记录到正常的外向钾通道电流 .结论　应用本方法易得单个活性正常。

关键词：人肠系膜小动脉平滑肌细胞分离法离子通道

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复合胶元酶法分离人血管平滑肌细胞的新方法

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第三军医大学学报 1993年第4期15卷 357-360页

作者：王旭开杨成明刘光耀谯怡然第三军医大学大坪医院心内科 630042 第三军医大学基础部病理教研室

目前国内外分离血管平滑肌细胞的常用方法主要是贴块培养分离法和单纯胶元酶分离法,但前者易出现“去分化”或“调整”现象,后者又耗时、膜损伤作用大和收集细胞数量少。本文采用复合胶元酶法对16例外科手术时标本组织血管进行分离与鉴... 详细信息

目前国内外分离血管平滑肌细胞的常用方法主要是贴块培养分离法和单纯胶元酶分离法,但前者易出现“去分化”或“调整”现象,后者又耗时、膜损伤作用大和收集细胞数量少。本文采用复合胶元酶法对16例外科手术时标本组织血管进行分离与鉴定,以评价该方法的应用价值。现介绍如下:

关键词：平滑肌血管胶元酶细胞分离法

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病人血清中登革病毒的分离与鉴定

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中国人兽共患病杂志 2005年第7期21卷 611-612页

作者：何似李世清翁育伟王灵岚福建省疾病预防控制中心福州350001

目的应用细胞分离法从登革热病人急性期血清中分离登革热病毒并应用免疫荧光法证实病毒的血清型.C6/36细胞长成单层后接种急性期血清,以5～7天为一代,观察细胞病变;感染后的细胞使用型特异性抗体进行免疫荧光实验证实其血清型.在10份急... 详细信息

目的应用细胞分离法从登革热病人急性期血清中分离登革热病毒并应用免疫荧光法证实病毒的血清型.C6/36细胞长成单层后接种急性期血清,以5～7天为一代,观察细胞病变;感染后的细胞使用型特异性抗体进行免疫荧光实验证实其血清型.在10份急性期病人血清中,有6份标本成功分离出登革热I型病毒,其结果和RT-PCR等实验方法的结果一致,分离率为60%.

关键词：病人血清分离与鉴定登革病毒 C6/36细胞型特异性抗体免疫荧光法登革热病毒细胞分离法急性期细胞病变 Ⅰ型病毒实验方法血清型感染后 PCR 分离率

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螺旋神经节神经元的切割分离法培养

螺旋神经节神经元的切割分离法培养

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作者：周净洁华中科技大学

学位级别：硕士

目的建立一种简单而且稳定可靠的分离鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGNs)的培养方法。方法根据SGNs分离的方法不同分为切割分离法组(A组)、消化法组(根据消化酶的种类、酶消化的时间不同再分为B、C、D组)。A组把分... 详细信息

目的建立一种简单而且稳定可靠的分离鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGNs)的培养方法。方法根据SGNs分离的方法不同分为切割分离法组(A组)、消化法组(根据消化酶的种类、酶消化的时间不同再分为B、C、D组)。A组把分离得到螺旋神经节组织块,剪切成相同的8-10块后接种到已用多聚赖氨酸包被的35mm培养皿中培养。消化法把分离得到的螺旋神经节组织块移到装有D-Hanks溶液的4ml的离心管中, B组加入0.25%胰蛋白酶+0.001%DNas的消化酶溶液溶液,在37℃作用20分钟后,加入含血清的培养液中止消化,1000rpm离心5分钟,弃上清,加入含血清的培养基轻轻的吹打后接种培养,其他步骤与A组相同。C组单用含0.25%胰蛋白酶的消化酶溶液,作用20分钟。D组,用0.25%胰蛋白酶+0.001%DNas的消化酶溶液溶液,作用30分钟,其余操作与B组相同。倒置显微镜下观察比较各组培养SGN细胞的活力以及生长与分化过程。对SGNs神经元进行免疫细胞化学染色鉴定。结果A组培养的神经细胞、神经突起生长良好,细胞存活时间1-2周。B组分离培养的神经细胞总数与A组差别不显著,神经突起生长的长度比A组短。C、D组培养1周后,神经细胞总数比A组少,存活时间较A组短,神经突起生长比A组短。结论成功建立了切割分离法分离与培养螺旋神经节细胞的方法,与消化法相比,其操作简单,可以取得酶解组织同样的效果,满足体外多种实验的需要。

关键词：螺旋神经节神经元耳蜗细胞分离法

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