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乙型肝炎病毒X蛋白对细胞因子信号转导抑制分子-1 CpG岛基因甲基化及其表达的影响

中华肝脏病杂志 2013年第10期21卷 723-727页

作者：宋晓玲刘国珍谭德明李艳艳中南大学湘雅医院传染病学教研室病毒性肝炎湖南省重点实验室长沙410008

目的观察HBVX蛋白（HBx）对人源性非肿瘤性肝细胞株QSG7701细胞中细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）表达的影响，并通过研究SOCS-1基因启动子区CpG岛甲基化的情况以探讨HBx影响SOCS-1表达的可能机制。方法本研究室前期构建好的重组... 详细信息

目的观察HBVX蛋白（HBx）对人源性非肿瘤性肝细胞株QSG7701细胞中细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）表达的影响，并通过研究SOCS-1基因启动子区CpG岛甲基化的情况以探讨HBx影响SOCS-1表达的可能机制。方法本研究室前期构建好的重组表达质粒pcDNA—X及空载体pcDNA3．0分别转染QSG7701细胞，经含G418的选择性培养基筛选获得稳定转染HBV—X基因的细胞克隆（pcDNA—X／QSG7701）及稳定转染空载体pcDNA3．0的细胞克隆（pcDNA3．0／QSG7701）。实时逆转录PCR、Westernblot分别检测3种细胞SOCS-ImRNA和蛋白的相对表达情况。甲基化特异性PCR检测三种细胞SOCS一1基因启动子甲基化状态。结果实时逆转录PCR结果显示pcDNA-X／QSG7701中SOCS-1mRNA相对表达水平为0．3249±0．0536，明显低于pcDNA3．0／QSG7701的1．0543±0．1937和未转染的细胞QSG7701mRNA相对表达水平（设为1．0），三组比较，F=19．6，尸〈0．05，差异有统计学意义。Westernblot检测结果显示pcDNA-X／QSG7701中SOCS-1蛋白相对表达水平为0．1496±0．0106，明显低于pcDNA3．0／QSG7701的0．1984±0．0438及未转染的细胞QSG7701的0．2152±0．0816，三组比较，F=19．4，P〈0．05，差异有统计学意义。甲基化特异性PCR结果显示仅在pcDNA—X／QSG7701细胞株存在SOCS-1启动子区域的甲基化。结论HBx可下调SOCS-1的表达，使SOCS一1基因启动子CpG岛发生甲基化，这可能是HBx蛋白致肝细胞癌变的机制之一。

关键词：肝炎病毒乙型 DNA甲基化细胞因子信号转导抑制分子-1 乙型肝炎病毒X蛋白

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心源性猝死患者心肌SOCS-1和SOCS-3表达的研究

引用

中华急诊医学杂志 2010年第3期19卷 277-280页

作者：陈亮马中富唐皓梁艳冰陈志斌李振宇黄子通蒋龙元中山大学附属第一医院普内科广州510080 中山大学附属第二医院急诊科

目的探讨心源性猝死（sudden cardiac death,SCD）患者心肌中细胞因子信号转导抑制分子-1（suppressor of cytokine signaling-1,SOCS-1）和SOCS-3的表达及临床意义.方法取2005-2006年中山大学法医学系的尸检心肌标本24例,其中9例尸... 详细信息

目的探讨心源性猝死（sudden cardiac death,SCD）患者心肌中细胞因子信号转导抑制分子-1（suppressor of cytokine signaling-1,SOCS-1）和SOCS-3的表达及临床意义.方法取2005-2006年中山大学法医学系的尸检心肌标本24例,其中9例尸检符合冠状动脉粥样硬化（非心肌梗死）导致SCD（简称非心梗组）,7例尸检符合急性心肌梗死猝死（简称心梗组）,对照组8例选择了因交通事故、外伤等所致死亡的患者.以RT-PCR法检测对照组、非心梗组和心梗组心肌中SOCS-1,SOCS-3的mRNA表达,用免疫组化法检测对照组、非心梗组和心梗组心肌中SOCS-1,SOCS-3的蛋白表达.数据以SPSS13.0统计学软件处理,采用方差分析检验.结果非心梗组和心梗组患者心肌中SOCS-1 mRNA,SOCS-3 mRNA的表达量均显著高于对照组,分别为[（0.788±0.101）,（0.741±0.111）vs.（0.436±0.044）,P〈0.01],及[（0.841±0.092）,（0.776±0.070）vs.（0.454±0.076）,P〈0.01].非心梗组和心梗组患者心肌中SOCS-1的蛋白抗体阳性细胞数均显著高于对照组,分别为[（320.00±48.48）,（347.14±70.88）vs.（42.50±10.35）,P〈0.01].非心梗组和心梗组患者心肌中SOCS-3的蛋白抗体阳性细胞数均显著高于对照组,分别为[（381.11±59.25）vs.（40.00±10.69）,P〈0.01]和[（332.86±111.91）vs.（40.00±10.69）,P〈0.01].结论冠心病所致SCD患者的心肌中SOCS-1,SOCS-3的表达显著增加,提示它们可能参与了SCD的发病机制.

关键词：心源性猝死心肌梗死细胞因子信号转导抑制分子-1 细胞因子信号转导抑制分子-3

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HBx对SOCS-1 CpG岛甲基化及其表达的影响

HBx对SOCS-1 CpG岛甲基化及其表达的影响

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作者：宋晓玲中南大学

学位级别：硕士

目的：观察H13x对人源性非瘤性肝细胞株QSG7701细胞中细胞因子信号转导抑制分子-1(SOCS-1)启动子区CpG岛甲基化及其表达的影响,以探讨HBx致肝细胞癌变的可能机制。方法：本研究室前期构建好的重组表达质粒pcDNA-X及空载体pcDNA3.0分别转... 详细信息

目的：观察H13x对人源性非瘤性肝细胞株QSG7701细胞中细胞因子信号转导抑制分子-1(SOCS-1)启动子区CpG岛甲基化及其表达的影响,以探讨HBx致肝细胞癌变的可能机制。方法：本研究室前期构建好的重组表达质粒pcDNA-X及空载体pcDNA3.0分别转染QSG7701细胞,经含G418的选择性培基筛选获得稳定转染HBV-X基因的细胞克隆(pcDNA-X/QSG7701)及稳定转染空载体pcDNA3.0的细胞克隆(pcDNA3.0/QSG7701)。RT-PCR、 Western blot分别检测三种细胞HBx mRNA及HBx蛋白的表达情况。Real-time PCR、Western blot分别检测3种细胞SOCS-1mRNA及蛋白的表达情况。甲基化特异性PCR法(MSP)检测三种细胞SOCS-1基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果：RT-PCR、Western blot检测结果显示转染了X基因的QSG7701细胞中有HBx mRNA及蛋白的表达,转染了空质粒的pcDNA3.0/QSG7701及QSG7701无HBx mRNA及蛋白的表达。Real-time PCR、Western blot检测结果显示pcDNA-X/QSG7701中SCOS-1mRNA和蛋白表达水平明显低于与pcDNA3.0/QSG7701及未转染的细胞QSG7701(P<0.05)。MSP结果显示转染了含X基因重组质粒的QSG7701细胞中发现SOCS-1启动子区CpG岛甲基化,转染了对照空质粒的pcDNA3.0/QSG7701和未转染的QSG7701细胞株中未发现SOCS-1启动子区CpG岛甲基化。结论：乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)在mRNA及蛋白水平下调了SOCS-1基因的表达,并使SOCS-1启动子区CpG岛发生甲基化,这可能是HBx致肝细胞癌变的机制之一。

关键词： HBV-X 乙型肝炎病毒细胞因子信号转导抑制分子-1 甲基化

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SOCS1在人骨髓间充质干细胞中的表达以及稳定表达SOCS1间充质干细胞株的建立

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标记免疫分析与临床 2015年第6期22卷 562-568页

作者：邹瑞丰谢静仪中山大学干细胞与组织工程中心广东广州510080 暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院龙华分院肾内科广东深圳518020 深圳市人民医院龙华分院风湿免疫科广东深圳518020

目的探讨不同炎性因子刺激下细胞因子信号转导抑制分子-1(suppressor of cytokine signaling1,SOCS1)在人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中的表达情况,并研究稳定表达SOCS1的MSCs细胞株的建立方法。方法用SOCS1相关炎... 详细信息

目的探讨不同炎性因子刺激下细胞因子信号转导抑制分子-1(suppressor of cytokine signaling1,SOCS1)在人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中的表达情况,并研究稳定表达SOCS1的MSCs细胞株的建立方法。方法用SOCS1相关炎性因子刺激剂处理24小时后裂解MSCs,Westen Blot检测各组细胞SOCS1的表达。通过Gateway技术,构建出表达SOCS1基因的载体质粒p Final/PGK-puro-EF1α-SOCS1-IRES-EGFP,将其与包装质粒共转染293FT细胞产生慢病毒,通过多次感染将载体导入人骨髓间充质干细胞,流式细胞术筛选出稳定表达SOCS1的人骨髓间充质干细胞,并用Westen Blotting、流式细胞术、成骨成脂肪诱导分化来鉴定。结果 SOCS1蛋白在IFN-γ、Pam3CSK4、Poly(I∶C)、LPS和ODN 2006刺激的MSCs中表达升高(P<0.01)。表达载体包装出的病毒感染后的MSCs中SOCS1蛋白水平提高,流式细胞检测表达(>95%)CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166,不表达(<2%)CD34和CD45,在相应诱导剂诱导下可分化为成骨细胞和脂肪细胞。结论多种炎性因子能诱导MSCs内SOCS1表达升高,说明SOCS1可能参与了MSCs的免疫调节功能;成功建立了稳定表达SOCS1的MSCs细胞株。

关键词：人骨髓间充质干细胞细胞因子信号转导抑制分子-1 Gateway

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