检索结果-内蒙古大学图书馆

农业生物技术学报 2023年第7期31卷 1419-1429页

作者：宋贵兵贾鸿儒蒋蕾昝林森王洪宝西北农林科技大学动物科技学院国家肉牛改良中心

富亮氨酸重复序列神经元蛋白-1基因(leucine rich repeat neuronal protein-1, LRRN1)编码一种Ⅰ型跨膜蛋白，在神经发育与再生进程中发挥重要作用。牛成肌细胞的增殖分化直接影响其肌肉的生长发育，从而影响牛肉的产量。本研究旨在探究... 详细信息

富亮氨酸重复序列神经元蛋白-1基因(leucine rich repeat neuronal protein-1, LRRN1)编码一种Ⅰ型跨膜蛋白，在神经发育与再生进程中发挥重要作用。牛成肌细胞的增殖分化直接影响其肌肉的生长发育，从而影响牛肉的产量。本研究旨在探究LRRN1基因在秦川牛(Bos taurus)不同组织中的表达规律及其对牛成肌细胞增殖分化的影响，以确定其在成肌分化中的主要作用。首先采用q RT-PCR技术检测LRRN1在新生(3日龄)和成年(24月龄)秦川牛不同组织中的表达规律，及其在体外培养的牛骨骼肌成肌细胞不同分化时期的表达特性；利用腺病毒介导的shRNA和pcDNA3.1(+)构建LRRN1基因干扰和过表达载体，转染秦川牛成肌细胞，采用EdU法检测细胞增殖，通过qRT-PCR和Western blot检测增殖标志分子的表达变化；经成肌诱导分化培养基作用后，观察肌管形成表型并检测分化标志分子的表达变化。结果显示，LRRN1在秦川牛各组织中广泛表达，在新生牛和成年牛肾脏和背最长肌中高表达；LRRN1基因表达在成肌分化过程中先升高、后降低，在分化4 d达到峰值，此后逐渐降低，与成肌细胞的体外分化进程具有相同的变化趋势。在成肌细胞中干扰LRRN1基因表达，结果显示，EdU染色的增殖细胞占比显著减少(P<0.05)，增殖标志基因CCNA2(P<0.01)、CCNB1(P<0.05)、PCNA(P<0.01)、CCND2(P<0.05)和CDK1(P<0.05)下调表达，CCND2、CDK1、CCNB1和PCNA蛋白表达量也降低；LRRN1过表达也显著抑制成肌细胞增殖(P<0.05),CCNA2(P<0.05)、CCNB1(P<0.01)、PCNA(P<0.01)和CCNE2(P<0.05)基因表达被抑制，CCNB1、PCNA与CDK1的蛋白表达量也降低。对细胞分化表型进行观察，发现LRRN1干扰抑制肌管形成，抑制分化标志基因MYOG(P<0.01)、MYF5(P<0.01)、MYF6(P<0.01)、MYH3(P<0.01)和CKM(P<0.05)的表达，MYOG、MYF5和MYH3的蛋白表达量也降低；LRRN1过表达则促进肌管形成，MYH3(P<0.01)、MYOD(P<0.05)、MYF5(P<0.05)和MYF6(P<0.05)的基因表达量显著升高，MYOD和MYH3的蛋白表达量也增加。上述结果提示，LRRN1是成肌细胞分化的正向调节因子，但是对成肌细胞增殖的作用尚需更全面和深入的研究。因此，LRRN1对秦川牛肌肉组织的生长发育具有潜在的调控作用，对其深入的功能研究可用于秦川牛的分子育种实践。

关键词：秦川牛富亮氨酸重复序列神经元蛋白-1基因(LRRN1) 成肌细胞细胞增殖分化

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CD226在TPO诱导胎肝Lin-细胞增殖分化过程中的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第4期17卷 307-309页

作者：马东初孙英慧常奎忠戴兵刘亚革孙忱贾卫菅金龙金伯泉第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032 沈阳军区总医院医学实验科辽宁沈阳110016

目的研究CD226在造血干/祖细胞上的表达分布。TPO诱导胎肝造血干/祖细胞增殖分化过程中，CD226表达的变化及可能的信号调控途径。方法采用鸡尾酒单抗阴性分离富集Lin－造血干/祖细胞，培养于含TPO的无血清培养体系中，用PD98059阻断MAP... 详细信息

目的研究CD226在造血干/祖细胞上的表达分布。TPO诱导胎肝造血干/祖细胞增殖分化过程中，CD226表达的变化及可能的信号调控途径。方法采用鸡尾酒单抗阴性分离富集Lin－造血干/祖细胞，培养于含TPO的无血清培养体系中，用PD98059阻断MAPK信号转导途径，流式细胞仪双荧光分析CD226、CD34、CD41a和CD61的表达。结果CD226在Lin－CD34＋细胞和Lin－CD34－细胞上均有表达。TPO可诱导Lin－CD41a－CD226－细胞先分化为CD41a＋CD226－细胞，再进一步分化为CD41a＋CD226＋细胞，TPO也可诱导Lin－CD226＋细胞表达CD41a和CD61。在培养的早期，PD98059可抑制CD34＋CD226＋细胞的减少，在晚期则可抑制CD41a＋CD226＋细胞的增多。结论CD226与造血干/祖细胞和巨核细胞的增殖分化可能具有密切的关系。

关键词： CD226 造血干/祖细胞巨核细胞血小板生成素胎肝细胞增殖分化

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嗅鞘细胞对神经干细胞增殖分化的影响

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中华实验外科杂志 2005年第9期22卷 1123-1124页

作者：唐洲平王萍康慧聪雷霆朱遂强王伟方思羽华中科技大学同济医学院附属同济医院临床神经研究中心武汉430030 湖北恩施自治州中心医院麻醉科

目的研究嗅鞘细胞(OECs)和神经干细胞(NSCs)分别及共培养的相互作用,为CNS神经损伤修复提供移植的理论依据。方法分离培养NSCs和OECs,在无血清DMEM/F12液中NSCs和OECs共培养,用免疫细胞化学和激光共聚焦显微术来分析结果。结果共培养7d... 详细信息

目的研究嗅鞘细胞(OECs)和神经干细胞(NSCs)分别及共培养的相互作用,为CNS神经损伤修复提供移植的理论依据。方法分离培养NSCs和OECs,在无血清DMEM/F12液中NSCs和OECs共培养,用免疫细胞化学和激光共聚焦显微术来分析结果。结果共培养7d观察OECs能促进NSCs增殖分化,分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,其中神经元比例高达78.2%。结论OECs可促进NSCs的增殖分化,其分化的神经元比例高。

关键词：嗅鞘细胞神经干细胞共培养增殖分化细胞增殖分化激光共聚焦显微术 OECs NSCs 免疫细胞化学

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机械应力对皮肤细胞增殖分化影响的研究进展

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中华烧伤杂志 2008年第1期24卷 74-76页

作者：刘虎仙陶白江贾赤宇胡大海解放军第二炮兵总医院烧伤整形科北京100088 解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所第四军医大学西京医院全军烧伤中心

在机械应力的作用下，受力细胞生长发生改变，细胞分裂增殖，这种现象在医学领域中很常见。如皮肤软组织扩张术、牵张术，肢体、颅颌骨牵引术等等，均通过外力刺激因素获得“额外”组织。在一些病理变化中也有类似现象，如肾小球高血压... 详细信息

在机械应力的作用下，受力细胞生长发生改变，细胞分裂增殖，这种现象在医学领域中很常见。如皮肤软组织扩张术、牵张术，肢体、颅颌骨牵引术等等，均通过外力刺激因素获得“额外”组织。在一些病理变化中也有类似现象，如肾小球高血压对系膜细胞的反复压力刺激使之增生等。近年来，机械应力对组织细胞的作用机制已备受关注，现就此作如下综述。

关键词：皮肤软组织扩张术细胞增殖分化机械应力细胞分裂增殖医学领域骨牵引术刺激因素病理变化

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HD02对慢性前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化的影响

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中国临床康复 2003年第28期7卷 3796-3797,T001页

作者：高唱吴伟康王景周赵丹洋中山大学中山医学院中西医结合研究所广东省广州市500080 解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科重庆市400042

目的:观察HD02对慢性前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化的变化。方法:结扎双侧颈总动脉制备慢性前脑缺血大鼠模型,采用免疫单标和双标方法检测成体大鼠神经干细胞及分化的功能细胞。给予模型大鼠HD02水煎剂灌胃,分别于造模后15,30d观察神... 详细信息

目的:观察HD02对慢性前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化的变化。方法:结扎双侧颈总动脉制备慢性前脑缺血大鼠模型,采用免疫单标和双标方法检测成体大鼠神经干细胞及分化的功能细胞。给予模型大鼠HD02水煎剂灌胃,分别于造模后15,30d观察神经干细胞增殖分化的变化。结果:与正常对照组相比,慢性前脑缺血大鼠大脑皮质、室周区、海马BrdU阳性细胞数和BrdU+NF200,BrdU+NeuroD,BrdU+GFAP免疫荧光双标细胞数于造模后15d明显增多(P<0.01),但造模后30dBrdU阳性细胞数和BrdU+NF200,BrdU+NeuroD,BrdU+GFAP免疫荧光双标细胞数与正常对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);造模后30d,HD02组BrdU阳性细胞数和BrdU+NF200,BrdU+NeuroD,BrdU+GFAP免疫荧光双标细胞数较慢性前脑缺血组明显增多(P<0.01)。

关键词： HD02 前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化血清

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细胞外基质成份纤维粘联蛋白的分离、鉴定及其与细胞增殖分化关系的研究

细胞外基质成份纤维粘联蛋白的分离、鉴定及其与细胞增殖分化关系...

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作者：林彭年中国协和医科大学

学位级别：博士

本文在建立猪血浆纤粘蛋白(fibronectin，FN)及其他细胞外基质成分分离手段的基础上，制得了高纯质FN等贴壁因子及高纯度FN抗体，从而进一步研究了FN等细胞外基质成分对于细胞贴壁、增殖、分化的影响以及在红细胞释放中的作用。结合细... 详细信息

本文在建立猪血浆纤粘蛋白(fibronectin，FN)及其他细胞外基质成分分离手段的基础上，制得了高纯质FN等贴壁因子及高纯度FN抗体，从而进一步研究了FN等细胞外基质成分对于细胞贴壁、增殖、分化的影响以及在红细胞释放中的作用。结合细胞骨架的变化，研究了它们在细胞恶性变和去恶性前后的改变和在红细胞排核过程中的可能作用。 ***等因子的分离签定：用我们自制的叨胶和肝素-Sepharose 4B亲和柱，从猪血浆中分离得到了大最电泳纯的FN。进而用免疫沉淀法、PAGE、SDS-PAGE和细胞贴壁实验等证明，此FN与其他来源的FN间存在免疫交叉反应。它是由2个分子量约22θK的亚基通过链间二硫键连接而成的大分子糖蛋白。具有非常显著的促细胞贴壁功能。在分离FN的同时我们还从猜血浆中得到了另一分子量、亲和大分子能力与FN相同，而亚基、功能、分布(仅限于猪)不同的大分子糖蛋白(polynect in，pN)。PN与FN间不存在免疫交叉反应。Ⅳ型胶原是基膜中的一种重要成份，我们用高盐和乙酸提取，用离子交换层析柱纯化而制得Ⅳ型胶原。这为今后工作打下一良好基础。 ***抗体的制备：用我们自己制备的FN在佛氏佐舸配合下免疫日本大耳白兔，得到了效价较高的FN抗血清。此血清经过盐析及FN-Sepharose 4B亲和柱纯化达到亲和层析纯。蛋白量及效价测定证明其活性较高，这为免疫组化试验提供方便。 3．细胞外基质与细胞贴壁、增殖、分化之间关系的研究表明，FN具有显著的促成纤维细胞贴壁的功能。这一功能不受蛋白质、核酸合成抑制剂的抑制，对细胞骨架聚合抑制剂及细胞周期阻断荆不敏感，这表明细胞的贴壁只是基质FN与膜FN受体间的特异结合。对于贴壁类型的细胞来说，贴壁与否直接髟响到细胞DNA、RNA、蛋白质的合成。细胞的不贴壁将会造成大分子合成的减低。同时也影响到细胞的增

关键词：成熟红细胞膜细胞增殖分化联蛋白

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FSH诱导卵巢颗粒细胞增殖分化的信号转导机制

FSH诱导卵巢颗粒细胞增殖分化的信号转导机制

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作者：于福清中国科学院动物研究所

学位级别：博士

本论文以原代培养GC为实验模型，研究了FSH对GC增殖分化的影响，以及FSH激活的有丝分裂原蛋白激酶(MAPKs)在GC增殖分化过程中的作用。用已烯雌酚(DES)处理23日龄SD大鼠，每只每天皮下注射0.5mgDES，连续注射3天，于第4天处死动物，用针... 详细信息

本论文以原代培养GC为实验模型，研究了FSH对GC增殖分化的影响，以及FSH激活的有丝分裂原蛋白激酶(MAPKs)在GC增殖分化过程中的作用。用已烯雌酚(DES)处理23日龄SD大鼠，每只每天皮下注射0.5mgDES，连续注射3天，于第4天处死动物，用针刺法取GC，进行无血清培养。以增殖细胞核抗原(PCNA)为GC增殖的检测指标，以甾体生成快速调节蛋白(StAR)和甾类激素生成为GC分化指标，我们检测了FSH对GC增殖分化的作用，并对其分子机理进行了探讨。\n　　本文研究了p38MAPK通路在FSH诱导甾体生成过程中的作用。研究发现：FSH促进了LRH-1和DAX-1蛋白表达；向培养液中加入SB203580后，以上转录因子的蛋白水平和荧光强度明显减弱，提示FSH活化的p38MAPK参与了LRH-1和DAX-1的表达调控。\n　　本文研究了ERK1/2在FSH诱导GC增殖分化过程中的作用。\n　本文用放射免疫分析(RIA)、Westernblotting和激光共聚焦方法证实：PMA单独作用不影响GC甾体生成，但它显著抑制了FSH对甾体生成的诱导作用(p＜0.

关键词：卵巢颗粒细胞甾类激素生成颗粒细胞细胞增殖分化信号转导机制

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转录因子调控成骨细胞增殖分化研究进展

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广东医学 2011年第12期32卷 1625-1627页

作者：吴昆鹏杨巧珠黄真轩何冠峰刘义广东医学院第一临床学院广东湛江524023 广东医学院广东天然药物研究与开发实验室广东湛江524023

随着细胞工程学和组织工程学的发展,利用骨组织工程方法或基因治疗方法修复骨缺损逐渐成为热点.成骨细胞在骨形成和骨重塑过程中起着关键的作用,而转录因子在成骨细胞增殖分化过程中不仅可以调节成骨细胞的功能,而且可以决定基质干细胞... 详细信息

随着细胞工程学和组织工程学的发展,利用骨组织工程方法或基因治疗方法修复骨缺损逐渐成为热点.成骨细胞在骨形成和骨重塑过程中起着关键的作用,而转录因子在成骨细胞增殖分化过程中不仅可以调节成骨细胞的功能,而且可以决定基质干细胞向成骨细胞分化的方向.

关键词：成骨细胞增殖转录因子调控细胞增殖分化基因治疗方法组织工程方法成骨细胞分化组织工程学细胞工程学

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神经干细胞增殖分化研究中的常用标记物

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中华行为医学与脑科学杂志 2013年第3期22卷 283-285页

作者：武菲张秋玲泰山医学院泰安271000

自1992年Reynolds等提出神经干细胞（neural stem cell，NSC）的概念后，神经干细胞就因其独特的地位与优势迅速成为神经科学研究的热点，在研究神经干细胞内源性增殖与外源性移植时，对其正确、高效、明晰的标记显得极为重要。

关键词：神经干细胞细胞增殖分化标记物 cell 科学研究外源性内源性

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Notch信号通路在内耳干细胞增殖分化中的作用

Notch信号通路在内耳干细胞增殖分化中的作用

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作者：张鹏鑫中山大学

学位级别：硕士

第一部分、小鼠内耳干细胞的分离、培养、鉴定 　　目的：建立小鼠内耳干细胞体外培养的模型。 　　方法：取刚出生的小鼠耳蜗基底膜，体外于无Ca、Mg的D-Hanks溶液中进行分离，单细胞悬液置于含... 详细信息

第一部分、小鼠内耳干细胞的分离、培养、鉴定 　　目的：建立小鼠内耳干细胞体外培养的模型。 　　方法：取刚出生的小鼠耳蜗基底膜，体外于无Ca、Mg的D-Hanks溶液中进行分离，单细胞悬液置于含有2％B27、1％N2、50ng/mlIGF-1、20ng/ml EGF、10ng/ml bFGF的DMEM∶F12(1∶1)培养基中悬浮培养。用Abcg2、Brdu免疫荧光法鉴定内耳干细胞。 　　结果：所取的小鼠耳蜗基底膜单细胞可形成集落样生长的内耳干细胞球，Abcg2、Brdu免疫细胞化学染色阳性。 　　结论：新生小鼠基底膜可以体外诱导出表达干细胞标记的球体，具有自我更新能力，可能为内耳干细胞。 　　第二部分、Notch信号对内耳干细胞增殖及干性维持的调节 　　目的：探讨Notch信号通路对内耳干细胞增殖的影响以及对干细胞干性的维持。 　　方法：内耳干细胞培养，一组加含DMSO的培养基，一组加含DAPT的培养基，观察两组球体的数量、大小，用Brdu、Active-notch1、Myosin7a免疫荧光法观察两组细胞表达的差异。 　　结果：球体增殖期有Active-notch1的表达，DMSO组干细胞球体数量与DAPT组无差别，球体体积DMSO组比DAPT组大，DMSO组Brdu阳性细胞数较DAPT组明显增多，DAPT组表达myosin7a，DMSO组不表达myosin7a。 　　结论：notch信号通路的活化抑制内耳干细胞球体的增殖，维持内耳干细胞的干性。 　　第三部分、Notch信号对内耳干细胞分化的作用 　　目的：探讨notch信号通路对内耳干细胞分化的影响。 　　方法：内耳干细胞无血清培养液培养7天后，收集接种盖玻片上进行贴壁分化，分为两组，一组加含DMSO的分化培养基，一组加含DAPT的分化培养基，分化7天后，用myosin7a、P27kip1、F-actin免疫荧光法观察两组细胞表达的差异。 　　结果：DAPT可以促进内耳干细胞向毛细胞方向分化，毛细胞标记myosin7a表达明显增多。F-actin染色显示DAPT处理后具有纤毛结构的毛细胞样细胞数量增加，表达p27kip1的细胞明显减少。 　　结论：notch信号通路的活化抑制内耳干细胞向毛细胞的定向分化，促进内耳干细胞向支持细胞方向分化。

关键词： Notch信号内耳干细胞细胞增殖分化免疫荧光法支持细胞分化

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