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猴头菇多糖对免疫应激小鼠胸腺和脾脏显微结构、免疫功能及细胞增殖和凋亡的影响

中国食品卫生杂志 2022年第3期34卷 482-490页

作者：王趁芳邓娟韩玉皎顾有方靳二辉金光明安徽科技学院生命与健康科学学院安徽滁州233100 动物营养调控与健康安徽省重点实验室安徽滁州233100

目的研究猴头菇多糖对脂多糖(LPS)诱导免疫应激小鼠胸腺和脾脏显微结构、细胞因子分泌、抗氧化功能及细胞增殖和凋亡的影响,为猴头菇多糖在缓解应激状态中的应用提供参考。方法选用12周龄雄性昆明小鼠50只,随机分为对照组、模型组和试验... 详细信息

目的研究猴头菇多糖对脂多糖(LPS)诱导免疫应激小鼠胸腺和脾脏显微结构、细胞因子分泌、抗氧化功能及细胞增殖和凋亡的影响,为猴头菇多糖在缓解应激状态中的应用提供参考。方法选用12周龄雄性昆明小鼠50只,随机分为对照组、模型组和试验Ⅰ-Ⅲ组(n=10)。除对照组腹腔注射生理盐水外,其余4组在试验结束前3 d腹腔注射0.6 mL/kg/d的LPS(1次/d)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别灌胃80、160、320 mg/kg的猴头菇多糖,持续2周。测定胸腺和脾脏促炎细胞因子水平、抗氧化功能及细胞增殖和凋亡基因表达,并进行显微结构观察分析。结果与对照组相比,模型组胸腺和脾脏中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),总超氧化物歧化酶(T-SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)活性显著降低(P<0.05)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量也显著降低(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05),脾脏增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达量显著降低(P<0.05),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达量显著增加(P<0.05)。与模型组相比,试验Ⅲ组小鼠胸腺和脾脏IL-1β、IL-4和IFN-γ水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),T-SOD、T-AOC和GSH-Px的活性或含量均显著升高(P<0.05)、MDA含量和Caspase-3 mRNA表达量显著降低(P<0.05)。组织学观测发现,试验Ⅲ组小鼠胸腺和脾脏显微结构与模型组相比明显改善,胸腺皮质厚度增加(P<0.01),脾小结和动脉周围淋巴鞘厚度降低(P<0.05或P<0.01)。结论补充320 mg/kg猴头菇多糖能够明显改善免疫应激对小鼠胸腺和脾脏显微结构的损伤,抑制免疫应激诱导的促炎细胞因子分泌和细胞凋亡基因表达,增强抗氧化酶活性。

关键词：猴头菇多糖免疫器官显微结构免疫功能抗氧化功能细胞增殖和凋亡

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硼对大鼠肝脏显微结构、肝糖原含量、抗氧化功能及细胞增殖和凋亡相关基因表达的影响

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动物营养学报 2022年第3期34卷 1963-1974页

作者：丁永旺任曼赵春芳顾有方靳二辉李升和安徽科技学院动物科学学院凤阳233100 动物营养调控与健康安徽省重点实验室凤阳233100

本试验旨在研究硼对大鼠肝脏显微结构、肝糖原含量、抗氧化功能及细胞增殖和凋亡相关基因表达的影响。选用100只清洁级健康的(22±2)日龄雄性SD大鼠,适应性7 d后随机分为10组,每组10只。对照组饮用蒸馏水(硼含量为0),试验组分别饮... 详细信息

本试验旨在研究硼对大鼠肝脏显微结构、肝糖原含量、抗氧化功能及细胞增殖和凋亡相关基因表达的影响。选用100只清洁级健康的(22±2)日龄雄性SD大鼠,适应性7 d后随机分为10组,每组10只。对照组饮用蒸馏水(硼含量为0),试验组分别饮用硼含量为5、10、20、40、80、160、320、480、640 mg/L的蒸馏水。试验期60 d。结果表明:1)与对照组相比,饮水补充5、10和20 mg/L硼可明显改善肝脏显微结构,肝小叶轮廓更加清晰,肝细胞索排列更加整齐,双核肝细胞数量增多,肝枯否氏细胞数量增加,进而改善肝脏显微结构;而饮水补充480和640 mg/L硼则导致肝细胞索排列紊乱,肝血窦变宽,肝细胞核染色加深,肝细胞内出现空泡样结构。2)与对照组相比,饮水补充5和10 mg/L硼极显著提高肝脏中肝糖原含量(P<0.01),显著或极显著提高肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05或P<0.01),显著或极显著提高肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)和增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA相对表达量(P<0.05或P<0.01);饮水补充480和640 mg/L硼则极显著降低肝脏中肝糖原含量(P<0.01),显著或极显著降低肝脏T-AOC(P<0.05或P<0.01),显著或极显著提高肝脏丙二醛(MDA)含量(P<0.05或P<0.01),极显著提高肝脏B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)和半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA相对表达量(P<0.01),显著或极显著降低肝脏Nrf2、依赖还原型辅酶Ⅰ(Ⅱ)醌氧化还原酶1(NQO1)、PCNA和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)mRNA相对表达量(P<0.05或P<0.01)。由此可见,饮水补充5和10 mg/L硼可明显改善大鼠肝脏显微结构,增加肝糖原含量,提高肝脏抗氧化能力,促进肝脏Nrf2和PCNA mRNA表达,而饮水补充480和640 mg/L硼则产生相反作用。

关键词：硼大鼠肝脏显微结构抗氧化功能细胞增殖和凋亡

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牛磺酸对高温条件下奶牛乳腺上皮细胞增殖和凋亡的影响

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中国兽医学报 2023年第9期43卷 1964-1969页

作者：吕雨杰贾晗梁亮罗宗刚蒙灿刘菲菲张龚伟左福元王玲西南大学动物科学技术学院重庆荣昌402460 重庆市肉牛工程研究中心重庆荣昌402460

为探究牛磺酸对高温条件下奶牛乳腺上皮细胞增殖和凋亡的影响,本试验在奶牛乳腺上皮细胞中添加不同浓度的牛磺酸进行42℃高温处理,通过CCK8检测细胞活力,Annexin V-FITC检测细胞凋亡水平,利用RT-PCR检测细胞中凋亡相关基因mRNA的表达变... 详细信息

为探究牛磺酸对高温条件下奶牛乳腺上皮细胞增殖和凋亡的影响,本试验在奶牛乳腺上皮细胞中添加不同浓度的牛磺酸进行42℃高温处理,通过CCK8检测细胞活力,Annexin V-FITC检测细胞凋亡水平,利用RT-PCR检测细胞中凋亡相关基因mRNA的表达变化。结果表明,高温条件下8,32mmol/L牛磺酸能促进奶牛乳腺上皮细胞增殖,缓解细胞凋亡;奶牛乳腺上皮细胞中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax、Bax/Bcl-2基因的表达量随牛磺酸浓度的增加先降低后升高,抗凋亡基因Bcl-2表达量变化则呈相反趋势,Caspase-3、Caspase-9、Bax基因表达量及Bax/Bcl-2在32mmol/L组最低,与对照组显著差异(P<0.05);Caspase-8基因表达量在0~128mmol/L处理组间差异不显著(P>0.05),Bcl-2基因在32mmol/L处理组的表达量显著高于其他处理组(P<0.05),Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax/Bcl-2在256mmol/L处理组的表达量较对照组显著升高(P<0.05)。说明一定浓度的牛磺酸可以提高奶牛乳腺上皮细胞的增殖和抗凋亡能力,从而减轻了高温对细胞的损伤。

关键词：牛磺酸高温细胞增殖和凋亡乳腺上皮细胞

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益气化瘀法治疗子宫肌瘤临床及对细胞增殖和凋亡调控因子影响的研究

益气化瘀法治疗子宫肌瘤临床及对细胞增殖和凋亡调控因子影响的研...

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作者：孟炜黑龙江中医药大学

学位级别：博士

目的：探讨TNF-α、sIL-2R等与子宫肌瘤发病的关系，从细胞增殖和凋亡角度，研究益气化瘀法治疗子宫肌瘤的疗效机制。方法：临床选取67例子宫肌瘤病人，随机分成三组，分别应用益气化瘀法组成的“化瘤方”及“桂枝茯苓胶囊”、“RU... 详细信息

目的：探讨TNF-α、sIL-2R等与子宫肌瘤发病的关系，从细胞增殖和凋亡角度，研究益气化瘀法治疗子宫肌瘤的疗效机制。方法：临床选取67例子宫肌瘤病人，随机分成三组，分别应用益气化瘀法组成的“化瘤方”及“桂枝茯苓胶囊”、“RU486”治疗，并比较疗效。同时测定治疗前后外周血清中的TNF-α、sIL-2R、E2、P的含量，并测定未用药的21例子宫肌瘤内的ER、PR、P53、Bcl-2、Bax、Fas-L等蛋白基因的表达，而且应用贴壁培养法建立子宫肌瘤细胞系，比较上述三种药物作用后对瘤细胞内的Bcl-2、Fas、Fas-L等蛋白基因表达及其细胞周期、凋亡率的影响。结果：三组药物治疗子宫肌瘤均有效，以“化瘤方”的疗效突出（P＜0.05）。与正常人比较，患者外周血清中的TNF-α、sIL-2R水平较高（P＜0.01）。与正常子宫比较，肌瘤组织中存在较高的ER、PR、Bcl-2的表达，而Fas-L、Bax的表达较低。细胞增殖周期中的S期细胞百分比升高。“化瘤方”、“桂枝茯苓胶囊”、“RU486”作用后，Bcl-2表达减弱。Fas、Fas-L表达增高，细胞凋亡率增加。结论：子宫肌瘤的发病与患者体内的TNF-α、sIL-2R水平增高、肌瘤组织中的ER、PR、Bcl-2高表达有关；“化瘤方”、“桂枝茯苓胶囊”、“RU486”治疗子宫肌瘤有效与促进Fas、Fas-L表达、降低Bcl-2表达，从而促进瘤细胞凋亡有关。其中以益气化瘀消补结合法治疗效果最佳。

关键词：子宫肌瘤 Fas 培养液外周血子宫肌瘤细胞细胞增殖和凋亡益气化瘀法

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MiR-20a-3p通过靶向SFMBT1调节TGF-β1/Survivin通路对角质形成细胞增殖和凋亡的影响

MiR-20a-3p通过靶向SFMBT1调节TGF-β1/Survivin通路对角质形成细...

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作者：李荣花山东大学

学位级别：博士

研究背景银屑病(psoriasis)是一种常见的免疫介导的慢性炎症性皮肤病,其特征性皮损为境界清楚的红色斑块,上覆银白色鳞屑。本病病程较长,易复发,难治愈,严重影响患者的身心健康。此外,银屑病病情十分顽固,反复发作与治疗,使患者及家庭... 详细信息

研究背景银屑病(psoriasis)是一种常见的免疫介导的慢性炎症性皮肤病,其特征性皮损为境界清楚的红色斑块,上覆银白色鳞屑。本病病程较长,易复发,难治愈,严重影响患者的身心健康。此外,银屑病病情十分顽固,反复发作与治疗,使患者及家庭蒙受沉重的经济负担。因此,进一步深入研究银屑病的发病机制具有非常重要的意义。银屑病的发病机制尚不完全明确,目前认为银屑病是由遗传因素和环境因素共同作用引起的多基因遗传病,主要通过Th细胞及其分泌的细胞因子与角质形成细胞(keratinocyte,KC)相互作用,最终导致KC发生过度增殖和异常分化。近年来的研究发现,Th17细胞(一种新的T细胞亚型)及其活化产生的细胞因子interleukin(IL)-17A、IL-17F和IL-22在银屑病的发病中起重要作用。已有的研究表明,IL-22在银屑病患者皮损和外周血中均显著增加,且IL-22水平的高低与疾病的严重程度呈正相关。IL-22可与KC表面相应的受体结合,架起免疫细胞与KC之间相互作用的桥梁,从而抑制KC的终末分化,促进KC的增殖和迁移,导致银屑病的发生发展。miRNA是一类长度约为20个左右核苷酸的非编码单链小RNA,可以与靶mRNA的3'UTR端进行结合,导致靶mRNA降解或翻译抑制,负向调控靶蛋白的表达,从而调节细胞增殖、分化和凋亡等过程。越来越多的miRNA被报道在银屑病皮损和外周血中异常表达。不同的miRNA在银屑病发病中发挥不同作用。这些miRNA分子通过负向调节靶蛋白,参与银屑病皮损处KC的增殖分化或炎症性免疫反应。根据前期的miRNA Array基因芯片技术,我们发现miR-20a-3p在银屑病患者皮损和IL-22介导的角质形成细胞中的表达均下调。研究表明,IL-22通过介导KC的增殖和分化在银屑病的病理生理过程中发挥重要作用。因此我们选择miR-20a-3p作为研究对象,探讨miR-20a-3p在银屑病和IL-22诱导的角质形成细胞增殖中的功能作用,从表观遗传学方向进一步探究IL-22在银屑病发病中的作用机制,从而为银屑病的治疗提供新的靶点。本研究可分为二部分。第一部分miR-20a-3p对人角质形成细胞增殖、周期和凋亡的功能学研究本研究从表观遗传学方向出发,寻找与银屑病发病相关的新型miRNAs,为本病的治疗提供新的靶点和依据。在前期的研究中,我们课题组利用miRNA基因芯片技术,筛选出IL-22刺激人角质形成细胞后差异表达的miRNAs;继而又通过miRNA Array基因芯片技术筛选银屑病患者皮损组织与正常对照者皮肤组织中差异表达的miRNAs。我们发现miR-20a-3p在银屑病患者皮损和IL-22介导的角质形成细胞中的表达均下调,因此,本实验选择miR-20a-3p作为研究对象,探究其在IL-22介导的银屑病中可能发挥的作用。研究目的检测银屑病皮损组织和健康对照者皮肤组织中miR-20a-3p表达水平的差异,检测IL-22刺激角质形成细胞后miR-20a-3p表达水平的变化。研究miR-20a-3p 对人角质形成细胞增殖、周期和凋亡的影响。研究方法(1)收集6例银屑病患者皮损和6例健康对照者皮肤组织,TRIzol试剂提取总RNA,行qRT-PCR检测miR-20a-3p的表达。(2)以人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞株)为研究对象,实验组给予IL-22刺激24h,浓度为100 ng/ml,对照组不予刺激,行qRT-PCR检测IL-22刺激角质形成细胞后miR-20a-3p表达水平的变化。(3)通过转染miR-20a-3p模拟物、抑制物及其各自的对照,分别采用CCK8和EdU细胞增殖实验、流式细胞术细胞周期检测实验和膜联蛋白V-FITC/PI染色凋亡实验来评价miR-20a-3p对人角质形成细胞增殖、周期和凋亡的影响。(4)转染miR-20a-3p模拟物、抑制物及其各自的对照后,Western blot实验检测细胞周期相关蛋白以及凋亡相关蛋白表达水平的变化。研究结果(1)qRT-PCR结果显示,与健康对照组皮肤组织相比,miR-20a-3p在银屑病患者皮损组织的表达量下调;(2)qRT-PCR结果显示,miR-20a-3p在IL-22刺激的角质形成细胞中表达下调。(3)在HaCaT细胞中,过表达miR-20a-3p后,CCK-8细胞增殖实验结果显示,细胞增殖活性降低;EdU增殖实验结果显示,EdU阳性细胞率(即处在DNA复制期的细胞数)降低;细胞周期实验结果显示,细胞周期阻滞在G1期,S期缩短;凋亡实验显示细胞早期凋亡和晚期凋亡率均增加。反之,下调miR-20a-3p可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,细胞周期G1期缩短、S期延长。(4)过表达miR-20a-3p后,Western blot结果显示细胞周期相关蛋白CDK2

关键词：银屑病 miR-20a-3p IL-22 细胞增殖和凋亡银屑病 SFMBT1 TGF-β/Survivin 细胞增殖和凋亡

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孕激素对PR-M阳性原代子宫肌瘤细胞增殖和凋亡影响

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现代妇产科进展 2017年第1期26卷 55-57,60页

作者：封全灵王智霆熊祯祯张倩雯刘慧云戈士文郑州大学第三附属医院妇产科郑州450052 河南省医药科学研究院郑州450052

目的:研究孕激素对孕激素受体M(PR-M)阳性原代子宫肌瘤细胞生长的作用,并探讨其机制。方法:收集2015年9月到2016年6月在郑州大学第三附属医院妇科因子宫肌瘤行全子宫切除的肌瘤标本,原代培养细胞成功后用Western blot分别检测筛选出PR-M... 详细信息

目的:研究孕激素对孕激素受体M(PR-M)阳性原代子宫肌瘤细胞生长的作用,并探讨其机制。方法:收集2015年9月到2016年6月在郑州大学第三附属医院妇科因子宫肌瘤行全子宫切除的肌瘤标本,原代培养细胞成功后用Western blot分别检测筛选出PR-M(+)/PR-A/B(-)的标本作为实验组和PR-M(-)/PR-A/B(+)作为对照组。用不同浓度米非司酮(MIF)处理,培养48h后,应用MTT法和流式细胞仪分别检测其对PR-M阳性和PR-M阴性子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果:随着浓度的增加与作用时间的延长,PR-M(+)和PR-M(-)子宫肌瘤细胞生长均受到抑制,浓度≥1×10^(-6)mol/L MIF处理48h后,两组肌瘤细胞的增殖抑制率和凋亡率逐渐增加,呈浓度和剂量依赖性(均<0.05)。其中PR-M(+)组肌瘤细胞各浓度增殖抑制率和凋亡率均小于PR-M(-)组,差异有统计学意义(均<0.05)。结论:MIF对PR-M原代培养子宫肌瘤细胞凋亡的作用和抑制增殖的作用时间-剂量依赖性。孕激素可能通过PR-M抑制原代培养子宫肌瘤细胞的凋亡促进肌瘤的发生发展,这种作用可被孕激素受体拮抗剂阻断。

关键词：孕激素 PR-M 子宫肌瘤细胞增殖和凋亡

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益气养阴、活血化瘀法对动脉损伤兔的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

益气养阴、活血化瘀法对动脉损伤兔的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的...

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作者：高敏辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的：探讨中药对兔动脉内膜损伤后的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法：将健康新西兰兔30只随机分为正常组、模型组、西药(氟伐他汀)对照组和中药治疗组，正常组6只，其余各组每组8只。通过喂养高脂饲料同时予以腹主动脉内膜... 详细信息

目的：探讨中药对兔动脉内膜损伤后的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法：将健康新西兰兔30只随机分为正常组、模型组、西药(氟伐他汀)对照组和中药治疗组，正常组6只，其余各组每组8只。通过喂养高脂饲料同时予以腹主动脉内膜剥脱术的方法造成兔动脉内膜损伤，术后2周采血、取腹主动脉下段。光镜、电镜下观察血管平滑肌细胞形态；全自动生化仪酶法检测胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白；逆转录—聚合酶链反应法测定c-myc基因和血小板源性生长因子-BB水平；免疫组化法测定胰岛素样生长因子—1水平和凋亡指数。结果：光镜和电镜下观察，正常组血管平滑肌细胞无增殖，呈“收缩型”，模型组显著增殖，呈“合成型”，中药治疗组和西药组血管平滑肌细胞增殖水平较模型组低，所有标本均未见到凋亡小体的典型形态；模型组血脂各项指标均比正常组显著升高(P＜0.05，P＜0.01)，中药治疗组甘油三酯比模型组显著降低(P＜0.05)；模型组血小板源性生长因子-BB、c-myc基因和胰岛素样生长因子—1水平明显高于正常组(P＜0.01)，西药对照组血小板源性生长因子-BB和胰岛素样生长因子—1水平比模型组显著降低(P＜0.05)，中药治疗组血小板源性生长因子-BB、c-myc基因和胰岛素样生长因子—1水平比模型组显著降低(P＜0.05)，中药治疗组和西药对照组之间无显著差异；各组原位细胞凋亡检测未发现阳性结果；c-myc和血小板源性生长因子-BB mRNA表达的相关性分析显示二者呈正相关，模型组相关系数为8.603，P＜0.05，中药治疗组相关系数为2.672，P＜0.05。结论：中药通过抑制血小板源性生长因子-BB和胰岛素样生长因子—1的合成和分泌抑制VSMC增殖，这种作用部分是通过抑制c-myc表达实现的，与其降低TG的作用无关。提示中药可能具有防治经皮冠状动脉介入治疗后再狭窄和降低甘油三酯的作用。

关键词：正常组中药治疗 myc 平滑肌细胞增殖模型组胰岛素样生长因子益气养阴细胞增殖和凋亡动脉损伤活血化瘀法

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长非编码RNA HOTTIP调控胃癌细胞增殖和凋亡的机制研究

长非编码RNA HOTTIP调控胃癌细胞增殖和凋亡的机制研究

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作者：夏睿南京医科大学

学位级别：硕士

新近研究表明长非编码RNA(lncRNA)在调控细胞分化、细胞增殖和细胞侵袭转移等生物学功能中发挥重要作用。其中许多lncRNA在包括胃癌在内的多种肿瘤中表达发生紊乱。本研究中,通过分析GEO数据库中胃癌-正常组织的lncRNA表达谱,发现HOTTI... 详细信息

新近研究表明长非编码RNA(lncRNA)在调控细胞分化、细胞增殖和细胞侵袭转移等生物学功能中发挥重要作用。其中许多lncRNA在包括胃癌在内的多种肿瘤中表达发生紊乱。本研究中,通过分析GEO数据库中胃癌-正常组织的lncRNA表达谱,发现HOTTIP在胃癌组织中表达较正常组织显著上调。HOTTIP定位于人类染色体HOXA基因座(7p15.2),是自HOXA13基因反义序列转录出的一条长达4665nt的lncRNA。定量PCR(qPCR)验证了芯片分析结果,且HOTTIP在胃癌细胞中表达亦显著上调。分析发现HOTTIP启动子区存在转录因子E2F1和SP1的结合位点,ChIP实验检测证明E2F1和SP1参与调控HOTTIP转录表达。胃癌细胞中干扰HOTTIP的表达显著抑制细胞的增殖和侵袭转移能力,并诱导细胞凋亡;动物实验结果证实干扰HOTTIP的表达抑制胃癌细胞的肿瘤形成能力。对胃癌细胞中干扰HOTTIP的表达RNA测序结果进行功能基因组学分析发现:许多参与细胞发育及细胞凋亡的相关基因表达发生变化。通过靶基因筛选发现HOXA13和抑癌基因BTG2是HOTTIP靶基因,实验研究首次验证HOXA13促进胃癌细胞增殖并抑制胃癌凋亡。机制研究证实在胃癌细胞中HOTTIP能与PRC2表观遗传复合物结合,HOTTIP可能通过绑定PRC2调控BTG2的表达。更重要的是,临床组织样本中检测分析发现HOTTIP的表达量在大样本芯片数据中与胃癌早期基因同步上调而与凋亡通路呈负相关,这些结果提示高表达的HOTTIP可能是胃癌病人癌症发展的重要分子标记。

关键词： HOTTIP 胃癌细胞胃癌组织启动子区 BTG 靶基因 RNA HOTTIP 非编码细胞增殖和凋亡机制研究

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miR-142-5p对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

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现代肿瘤医学 2020年第15期28卷 2565-2570页

作者：李照强吴金定崔新美赵晓娟杜俊英蔡霖铜川市人民医院病理科陕西铜川727000 福州金域医学检验所实验诊断部福建福州350001

目的:探讨miR-142-5p靶向PTEN-PI3K/Akt信号调控人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的具体机制。方法:Real-time PCR检测miR-142-5p在人卵巢癌组织及各卵巢癌细胞系中的表达情况。利用MTT、细胞克隆形成实验观察miR-142-5p对SKOV3细胞... 详细信息

目的:探讨miR-142-5p靶向PTEN-PI3K/Akt信号调控人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的具体机制。方法:Real-time PCR检测miR-142-5p在人卵巢癌组织及各卵巢癌细胞系中的表达情况。利用MTT、细胞克隆形成实验观察miR-142-5p对SKOV3细胞增殖活力的影响;Caspase-3活力检测miR-142-5p对SKOV3细胞凋亡情况;信号通路抑制剂处理及Western blot检测miR-142-5p、PTEN与PI3K/Akt信号通路的关系及PI3K/Akt信号下游基因Akt、FOXO1、cyclin D1等的表达情况;Luciferase实验验证miR-142-5p和PTEN 3'UTR的结合。结果:人上皮性卵巢癌组织及其细胞系中miR-142-5p表达显著增加(P<0.05)。与对照组相比,SKOV3细胞转染miR-142-5p mimics后活细胞数量显著增加,增殖能力显著上升,细胞凋亡下降(P<0.05);与之相反的,转染miR-142-5p inhibitor后SKOV3细胞增殖能力下调,凋亡增加。信号通路抑制剂处理显示miR-142-5p过表达激活PI3K/Akt信号通路。Luciferase实验显示miR-142-5p与PTEN 3'UTR直接结合。与对照组相比,miR-142-5p mimics组PTEN表达显著降低,p-Akt蛋白表达则显著上调(P<0.05),同时过表达PTEN后p-Akt表达则显著降低(P<0.05)。结论:miR-142-5p通过抑制PTEN基因表达活化PI3K/Akt信号通路,促进人上皮性卵巢癌组织及SKOV3细胞增殖存活,抑制细胞凋亡。

关键词： miR-142-5p 人上皮性卵巢癌 PTEN-PI3K/Akt信号细胞增殖和凋亡

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乙二醛酶Ⅰ介导孕激素对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡活性的调控

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现代妇产科进展 2012年第1期21卷 12-16页

作者：王倩倩廖虹魏桠楠吴凌赖允丽孙姗姗赵贵旭顾红琴祝亚平张箴波丰有吉上海交通大学附属上海市第一人民医院妇产科上海200080 上海市第一妇婴保健院上海200040 山东省滕州市中心医院妇产科滕州277500 厦门大学附属第一人民医院厦门361002

目的:探讨孕激素是否通过其受体调控乙二醛酶Ⅰ(GloⅠ)的表达,进而调控子宫内膜癌细胞的增殖和凋亡活性。方法:应用Westen blot检测孕激素对GloⅠ,Caspase3,Cyclin D1表达的影响;经孕激素受体(PR)特异性抑制剂RU-486处理后,用Westen blo... 详细信息

目的:探讨孕激素是否通过其受体调控乙二醛酶Ⅰ(GloⅠ)的表达,进而调控子宫内膜癌细胞的增殖和凋亡活性。方法:应用Westen blot检测孕激素对GloⅠ,Caspase3,Cyclin D1表达的影响;经孕激素受体(PR)特异性抑制剂RU-486处理后,用Westen blot检测PR介导的GloⅠ,Caspase3,Cyclin D1分子的表达;应用siRNA干扰技术敲除GloⅠ表达后,检测GloⅠ对caspase3和Cyclin D1表达的影响,并分别应用MTT和TUNEL检测孕激素通过GloⅠ介导对细胞增殖和凋亡的影响。结果:(1)孕激素呈剂量依赖效应地下调GloⅠ、Cyclin D1的表达、上调Caspase3的表达,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);(2)MPA+RU-486组GloⅠ,Cyclin D1的蛋白水平比RU-486组、MPA处理组增加,Caspase3的表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);(3)siGloⅠ干扰组GloⅠ蛋白表达水平比阴性对照组明显降低,干扰效率达50%(P<0.05),GloⅠ被干扰后,加入孕激素细胞的增殖活性明显受到抑制,凋亡活性增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:孕激素可通过PR调控GloⅠ介导的子宫内膜癌细胞增殖和凋亡活性。

关键词：子宫内膜癌甲羟孕酮孕激素受体乙二醛酶Ⅰ 细胞增殖和凋亡

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