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山东大学耳鼻喉眼学报 2011年第3期25卷 5-8页

作者：陈金辉陶泽璋武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科武汉430060

目的研究端粒酶逆转录酶（TERT）和细胞增殖核抗原（PCNA）在喉鳞癌组织及细胞中的表达及其临床病理学意义。方法采用连续光谱扫描量子点免疫荧光组织化学方法检测喉鳞癌组织芯片中TERT和PCNA蛋白的表达情况;靶向抑制喉癌细胞株Hep-2的T... 详细信息

目的研究端粒酶逆转录酶（TERT）和细胞增殖核抗原（PCNA）在喉鳞癌组织及细胞中的表达及其临床病理学意义。方法采用连续光谱扫描量子点免疫荧光组织化学方法检测喉鳞癌组织芯片中TERT和PCNA蛋白的表达情况;靶向抑制喉癌细胞株Hep-2的TERT,运用RT-PCR检测TERT和PCNA mRNA的表达情况。结果良恶性头颈部肿瘤中TERT和PCNA的表达差异有统计学意义（P〈0.01）。TERT在病理分级III级组中的阳性率明显高于Ⅰ-Ⅱ级组（P〈0.05）,PCNA表达在病理分级Ⅲ级组中的阳性率显著高于Ⅰ-Ⅱ级组（P〈0.01）,且TERT和PCNA的表达呈中度正相关性（r=0.577,P〈0.05）;细胞实验中,靶向抑制TERT后,喉癌细胞株Hep-2增殖能力明显下降,TERT mRNA表达下调80%,PCNA mRNA表达同时下调70%。结论 TERT和PCNA与喉鳞癌的发生相关,且两者有协同作用,TERT影响肿瘤细胞增殖能力可能与PCNA表达变化有关。

关键词：端粒酶逆转录酶细胞增殖核抗原量子点 RNA干扰

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雌激素受体、孕激素受体、c-erbB2、p53和细胞增殖核抗原在胆囊癌中的表达及意义

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中华实验外科杂志 2005年第12期22卷 1532-1532页

作者：刘会春鲁贻民谈燚蚌埠医学院附属医院肝胆外科安徽233004

胆囊癌与雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的代谢异常有关.本实验采用免疫组织化学SP法检测胆囊良、恶性组织中的ER、PR、细胞增殖核抗原(PCNA)、c-erbB2及p53表达水平.

关键词： c-erbB2 细胞增殖核抗原雌激素受体孕激素受体 p53表达胆囊癌免疫组织化学SP法代谢异常恶性组织

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增殖细胞核抗原（PCNA）短发夹状RNA抑制人骨肉瘤细胞增殖的实验研究

增殖细胞核抗原（PCNA）短发夹状RNA抑制人骨肉瘤细胞增殖的实验...

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作者：张其亮华中科技大学

学位级别：博士

第一部分增殖细胞核抗原(PCNA)短发夹状RNA表达载体的构建及鉴定目的:设计并构建人增殖细胞核抗原(PCNA)短发夹状RNA表达载体，测定其序列，并初步观察其抑制人骨肉瘤细胞PCNAmRNA、蛋白表达及细胞增殖的情况，为应用PCNA短发夹状... 详细信息

第一部分增殖细胞核抗原(PCNA)短发夹状RNA表达载体的构建及鉴定目的:设计并构建人增殖细胞核抗原(PCNA)短发夹状RNA表达载体，测定其序列，并初步观察其抑制人骨肉瘤细胞PCNAmRNA、蛋白表达及细胞增殖的情况，为应用PCNA短发夹状RNA表达载体抑制人骨肉瘤细胞系MG-63增殖的实验研究提供基础。方法:参照干涉RNA的设计原则，选择合适的靶序列，设计并合成出特异性的发夹状序列，将其接入pSilence2.1-neo表达载体，筛选阳性克隆，扩增后进行基因序列测定。脂质体介导pSilence2.1-neo-PCNA载体转染人骨肉瘤细胞系MG-63，RT-PCR法检测转染前后人骨肉瘤细胞PCNAmRNA的表达情况，免疫组化检测转染前后人骨肉瘤细胞PCNAmRNA的表达情况,MTT法检测转染前后细胞增值情况的变化。结果:经基因序列测定证实短发夹状RNA构建成功，RT-PCR结果显示，pSilence2.1-neo-PCNA载体转染能显著抑制PCNAmRNA及蛋白的表达，转染后24h、48h、72hmRNA表达抑制率分别为68.62％、80.62％、73.12％，PI值分别为空白组的47.72％、23.37％、35.90％。MTT法显示转染组24h、48h、72h、96h的细胞增殖抑制率分别为53.56％、68.89％、60.19％、45.69％。结论:成功构建了PCNA短发夹状RNA表达载体pSilence2.1-neo-PCNA，并初步证实了其抑制PCNA蛋白表达的效果，为进一步研究PCNA干涉RNA抑制人骨肉瘤细胞增殖的实验研究提供了基础。第二部分pSilence2.1-neo-PCNA表达载体转染抑制人骨肉瘤细胞增殖的体外实验目的:检测pSilence2.1-neo-PCNA表达载体稳定转染抑制人骨肉瘤细胞系MG-63PCNAmRNA及蛋白表达的能力及其对人骨肉瘤细胞体外细胞增殖、细胞DNA合成、细胞周期分布及细胞凋亡的影响。方法:将pSilence2.1-neo-PCNA表达转染通过脂质体介导转染人骨肉瘤细胞系MG-63，应用G418筛选阳性克隆，扩大培养，建立稳定转染pSilence2.1-neo-PCNA表达载体的细胞系，RT-PCR法检测各组neo基因mRNA表达；RT-PCR法检测稳定转染后细胞PCNAmRNA表达，Westonblot法和免疫组化法检测稳定转染后细胞PCNA蛋白的表达，MTT法检测细胞增殖情况，3H-TdR掺入检测细胞中DNA合成。流式细胞仪测定细胞周期变化，吖啶橙染色及TUNEL法检测稳定转染组细胞凋亡的情况。结果:经G418筛选得到稳定表达pSilence2.1-neo-PCNA的细胞，neo基因检测显示重组载体已整合到细胞中。对稳定转染组的检测显示：稳定转染组mRNA的表达为空白组的19.49％，Westonblot结果显示：转染组蛋白表达为空白组的26.10％％。转染组细胞生长明显受阻，14天后转染组的细胞生长率为空白组的45％；；转染组3H-TdR掺入率为305±54明显低于空白组(1425±256)(P＜0.01)。MTT法显示培养24h、48h、72h、96h后与空白组相比，转染组细胞增殖抑制率分别为53.25％、61.78％、59.72％、45.92％，细胞周期分析显示，shRNA转染组G1期细胞含量为78.55％±5.92％，显著高于空白组(52.41％±4.16％)(P＜0.01)；shRNA转染组S期细胞含量为13.93％±3.85％，显著低于空白组(32.04％±2.14％)(P＜0.01)。转染组凋亡率为16.54％，而空白组仅为4.35％，两者有显著差异(P＜0.01)。TUNEL法显示，稳定转染组的凋亡明显增多。转染组的克隆形成率为24.27％,显著低于空白组(54.78％)和空载体组(54.32％)(P＜0.01) 结论:pSilence2.1-neo-PCNA表达载体转染人骨肉瘤细胞后获得稳定表达的细胞系。同时该表达载体可显著抑制人骨肉瘤细胞PCNAmRNA及蛋白的表达pSilence2.1-neo-PCNA转染可显著抑制MG-63细胞的细胞增殖活性，抑制细胞的DNA合成，促进细胞的凋亡。第三部分pSilence2.1-neo-PCNA表达载体抑制人骨肉瘤细胞增殖的体内实验。目的:检测pSilence2.1-neo-PCNA表达载体对人骨肉瘤细胞裸鼠移植瘤模型生长的影响。方法:将空白组、空载体组及稳定转染pSilence2.1-neo-PCNA表达载体组细胞，导接种到裸鼠背部，皮下组

关键词：干扰RNA 细胞增殖核抗原 PCNA 骨肉瘤 RT-PCR Weston-blot MTT

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集成MRI定量参数联合表观扩散系数预测乳腺癌Ki-67表达状态的临床研究

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磁共振成像 2025年第4期16卷 41-47,53页

作者：黄越李锋武汉科技大学襄阳市中心医院研究生联合培养基地襄阳441021 武汉科技大学医学部医学院武汉430081 湖北文理学院附属襄阳市中心医院放射影像科襄阳441021

目的探讨增强前后集成MRI(synthetic MRI,SyMRI)定量参数与乳腺癌细胞增殖核抗原(Ki-67 antigen,Ki-67)表达状态之间的关系,并评估该参数联合表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)在Ki-67表达状态中的预测效能。材料与方... 详细信息

目的探讨增强前后集成MRI(synthetic MRI,SyMRI)定量参数与乳腺癌细胞增殖核抗原(Ki-67 antigen,Ki-67)表达状态之间的关系,并评估该参数联合表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)在Ki-67表达状态中的预测效能。材料与方法回顾性收集2023年3月至2024年10月期间,在襄阳市中心医院就诊并确诊为乳腺癌的163例患者的临床与影像资料,这些患者均接受完整的MRI检查,并通过病理学检查证实肿瘤性质。在GE工作站上,获取并记录增强前后SyMRI定量参数值,增强前T1值(T1-Pre)、增强前T2值(T2-Pre)、增强前质子密度值(proton density,PD-Pre)和增强后T1值(T1-Gd)、增强后T2值(T2-Gd)、增强后PD值(PD-Gd),并据此计算各值增强前后弛豫时间相对变化率,记作ΔT1%、ΔT2%和ΔPD%。根据Ki-67表达情况,将收集的患者分为高表达组(≥30%)和低表达组(<30%),采用SPSS 27对数据结果进行统计学分析,以P<0.05表示差异具有统计学意义。定性资料采用卡方检验,定量资料进行柯尔莫戈洛夫-斯米诺夫(Kolmogorov-Smirnov test,K-S)检验正态分布后,采用独立样本t检验或非参数检验比较Ki-67高表达组和低表达组磁共振参数的组间差异,将有意义的变量纳入二元logistic回归分析,将有统计学意义的变量建立联合模型,并利用DeLong检验评估模型对Ki-67表达状态的预测效能。结果两组在病灶最大直径、ADC值、雌激素受体、孕激素受体、时间-信号强度曲线(time-signal intensity curve,TIC)和采用的治疗方案选择方面差异存在统计学意义(P<0.05);但患者年龄、人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor,HER-2)、病灶边缘和形态、强化特征、乳腺腺体类型、淋巴结是否转移等因素,两组间差异不具有统计学意义。关于SyMRI定量参数,高、低表达组在T1-Pre、T2-Pre、T1-Gd、T2-Gd、ΔT1%方面差异具有统计学意义(P<0.05);而PD-Pre、PD-Gd、ΔT2%、ΔPD%两组间差异不具有统计学意义。进一步多因素logistic回归分析,TIC、T1-Gd和ADC值存在显著统计学意义,AUC分别为0.608、0.837和0.701;敏感度分别为52%、89%和85%;特异度分别为68%、68%和46%。此外,T1-Gd、ADC值和TIC三者联合建立逻辑回归预测模型,其预测Ki-67表达状态的AUC达0.881,敏感度为89%,特异度为76%。结论在SyMRI定量分析中,T1-Gd作为一种非侵入性影像学生物标志物,能够有效预估乳腺癌中Ki-67的表达水平。通过整合ADC值与TIC,所构建的联合预测模型显著提高了预测乳腺癌Ki-67表达水平的准确性和效能,这一发现为无创性评估乳腺癌细胞增殖活性和治疗效果提供了一种新的思路和方法。

关键词：磁共振成像乳腺癌集成磁共振成像细胞增殖核抗原表观扩散系数

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功能矫治器前伸下颌后大鼠髁突软骨增殖细胞核抗原(PCNA)表达、内源性胰岛素(Ins)、甲状旁腺素(PTH)含量昼夜节律变化的实验研究

功能矫治器前伸下颌后大鼠髁突软骨增殖细胞核抗原(PCNA)表达、内...

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作者：熊国平华西医科大学四川大学

学位级别：博士

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HMGB1对人肝癌细胞株HepG2体外增殖的影响

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中南大学学报（医学版） 2010年第5期35卷 451-457页

作者：贺新春范学工周蓉蓉 WANG Haichao 中南大学湘雅医院传染科长沙410008 纽约大学北岸医学院急诊科纽约11030

目的:观察HMGB1对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响并初步探讨其可能机制。方法:采用不同剂量(0,10,50,100 ng/mL)重组HMGB1(rHMGB1)刺激HepG2细胞24 h,用MTT法检测HepG2细胞增殖,Western印迹和RT-PCR法检测cyclin D1,PCNA的表达。结果:不同剂量(10,50,100 ng/mL)rHMGB1组HepG2细胞增殖能力均明显高于对照组(P<0.05)。HMGB1抗体(20μg/mL)能中和HMGB1(10ng/mL)对HepG2细胞的促增殖作用(P<0.05)。Western印迹和RT-PCR显示,与对照组比较,HMGB1能明显促进HepG2细胞PCNA,cyclin Dl蛋白和mRNA的表达(P<0.05),HMGB1抗体能明显抑制HMGB1上调PCNA,cyclin Dl蛋白和mRNA的表达(P<0.05)。结论:HMGB1可能通过上调cyc-lin Dl和PCNA表达,促进HepG2细胞增殖。HMGB1抗体对肝细胞癌可能有治疗作用。

关键词： HMGB1 HepG2 细胞增殖核抗原 cyclin Dl

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下颌前伸后大鼠髁突软骨增殖细胞核抗原表达昼夜节律

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现代口腔医学杂志 2000年第6期14卷 368-369页

作者：肖立伟白丁陈扬熙熊国平华西医科大学口腔医学院成都610041 深圳市人民医院口腔医学中心

目的　比较昼夜不同时段戴用功能矫治器后 ,髁突软骨增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的昼夜变化 ,为探讨功能矫治昼夜最佳介入时段 ,提供直接实验依据。方法　采用免疫组织化学法 ,检测不同时段前伸大鼠下颌后 ,髁突软骨PCNA表达的昼夜变化... 详细信息

目的　比较昼夜不同时段戴用功能矫治器后 ,髁突软骨增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的昼夜变化 ,为探讨功能矫治昼夜最佳介入时段 ,提供直接实验依据。方法　采用免疫组织化学法 ,检测不同时段前伸大鼠下颌后 ,髁突软骨PCNA表达的昼夜变化。结果　戴用功能矫治器后 ,PCNA表达强度增加 ;白天戴用组明显高于夜晚组。结论　功能矫治器可以刺激髁突软骨增生 ;在髁突软骨昼夜自发性生长最旺盛时段戴用矫治器。

关键词：颞下颌关节功能矫治器细胞增殖核抗原

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顺铂对A549细胞DNA损伤修复生物标记物表达的影响

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中华预防医学杂志 2003年第2期37卷 109-111页

作者：王志勇周晟吕斌张霞郝巧玲周宜开华中科技大学同济医学院环境医学研究所武汉430030

目的　研究顺铂对肺癌A5 49细胞中切除修复鼠缺陷交叉互补基因 2 (ERCC2 )蛋白、尿嘧啶DNA糖基化酶 (UDG)、细胞增殖核抗原 (PCNA)在肺癌和食管癌组织中表达水平的影响。方法　通过彗星试验、RT PCR和蛋白印记法研究 3种生物标记物在顺... 详细信息

目的　研究顺铂对肺癌A5 49细胞中切除修复鼠缺陷交叉互补基因 2 (ERCC2 )蛋白、尿嘧啶DNA糖基化酶 (UDG)、细胞增殖核抗原 (PCNA)在肺癌和食管癌组织中表达水平的影响。方法　通过彗星试验、RT PCR和蛋白印记法研究 3种生物标记物在顺铂处理和未处理A5 49细胞之间的表达水平。分为染毒前、染毒 12h、染毒 2 4h、停止染毒 12h、停止染毒 2 4h 5个不同时间段组 ,每组细胞数均为 1× 10 6个 /ml。结果　在低浓度顺铂 (IC2 0 剂量 )作用下 ,染毒 2 4h内DNA损伤程度的变化与作用时间成正比 ,染毒 12h、2 4h尾相 (单位 :mm)分别为 5 0 2± 0 6 8和 7 2 2± 0 5 3,与阴性对照的尾相2 73± 0 2 9比较有明显差异。停止染毒 2 4h尾相为 3 6 4± 0 70 ,与阴性对照比较无明显差异。ERCC2、UDG和PCNA的mRNA水平和蛋白质水平在细胞染毒后均明显升高 ,染毒 2 4h后mRNA水平分别为 0 71± 0 0 8、0 74± 0 0 6和 0 82± 0 0 9,均明显高于阴性对照 (分别为 0 2 8± 0 0 5、0 31± 0 0 5和 0 37± 0 0 6 ) ;蛋白质表达水平分别为 4 37± 0 5 7、5 47± 0 46和 2 2 1± 0 47,均明显高于阴性对照(分别为 2 2 1± 0 47、2 5 4± 0 38和 3 2 1± 0 47)。停止染毒后 3种酶的mRNA分别为 0 31±

关键词：肺癌 A549细胞 DNA损伤顺铂缺陷交叉互补基因2 尿嘧啶DNA糖基化酶细胞增殖核抗原

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弥漫性大B细胞淋巴瘤中Y-盒结合蛋白-1核定位与P-糖蛋白表达的相关性及临床意义

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中华病理学杂志 2007年第5期36卷 329-330页

作者：周磊磊许文林秦茹娟唐华容沈慧玲施洋江苏大学附属人民医院中心实验室镇江212002 江苏大学附属人民医院肿瘤科镇江212002 江苏大学附属人民医院病理科镇江212002

Y-盒结合蛋白-1（Y—box binding protein-1，YB-1）是冷休克蛋白家族成员之一，与多种基因启动子区的CCAAT盒相结合，调节基因的转录与转译，参与多种生物过程。YB-1的表达及其意义在造血系统肿瘤中的研究鲜有报道。我们以弥漫性大B细... 详细信息

Y-盒结合蛋白-1（Y—box binding protein-1，YB-1）是冷休克蛋白家族成员之一，与多种基因启动子区的CCAAT盒相结合，调节基因的转录与转译，参与多种生物过程。YB-1的表达及其意义在造血系统肿瘤中的研究鲜有报道。我们以弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）为研究对象，检测YB-1与P-糖蛋白（P-gp）的表达，并与细胞增殖核抗原（PCNA）进行相关分析，探讨其与肿瘤特性的关系。

关键词： P-糖蛋白表达大B细胞淋巴瘤结合蛋白-1 弥漫性临床意义核定位造血系统肿瘤细胞增殖核抗原

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DNA修复酶MGMT及Ki-67在星形细胞瘤中的表达及临床意义

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吉林大学学报（医学版） 2007年第3期33卷 549-551页

作者：王丽萍孙逊邹亚彬张俊阁李波曹阳吉林大学第一医院病理科吉林长春130021 吉林大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室吉林长春130021 吉林省生殖保健医院

目的：观察脑星形细胞瘤中DNA修复酶-6氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）及细胞增殖核抗原（Ki-67）蛋白表达及临床意义。方法：69例样本均来源于神经外科手术切除且临床资料完整、术后病理诊断为星形细胞瘤病例，其中Ⅰ-Ⅱ级34例，Ⅲ... 详细信息

目的：观察脑星形细胞瘤中DNA修复酶-6氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）及细胞增殖核抗原（Ki-67）蛋白表达及临床意义。方法：69例样本均来源于神经外科手术切除且临床资料完整、术后病理诊断为星形细胞瘤病例，其中Ⅰ-Ⅱ级34例，Ⅲ级21例，Ⅳ级14例。应用免疫组织化学方法（ABC法）检测样本中MGMT及Ki-67蛋白的表达状况，并进行秩和相关等级检验。结果：星形细胞瘤中MGMT蛋白表达阳性率为60.9%，其中，Ⅰ-Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级分别为88.2%、23.5%和50.0%。不同分级之间MGMT蛋白表达比较差异均有显著性（P=0.0031），MGMT阳性表达率与肿瘤分级呈负相关（r=-0.3511，P=0.0031）；星形细胞瘤中Ki-67阳性率为62.3%，随肿瘤恶性程度的增加蛋白表达明显增强（P=0.0000），该表达与肿瘤分级呈正相关（r=0.6904，P=0.0000）；并且随Ki-67表达强度的增加，MGMT的表达强度明显下降（P=0.0151），Ki-67与MGMT蛋白表达呈负相关（r=-0.2915，P=0.0151）。结论：星形细胞瘤中MGMT及Ki-67表达与肿瘤恶性程度密切相关，提示MGMT和Ki-67可以作为评价星形细胞瘤预后的生物学指标。

关键词：星形细胞瘤 6氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶细胞增殖核抗原

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