检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：杨丹中国医科大学

学位级别：博士

目的：　　大肠癌(colorectal cancer，CRC)是世界第三常见恶性肿瘤。5-FU是治疗大肠癌的重要化疗药物之一。虽然以5-FU为基础的化疗方案已经成为治疗大肠癌的重要途径，然而由于固有和获得性耐药问题导致仅有约25％的患者对5-FU治疗有... 详细信息

目的：　　大肠癌(colorectal cancer，CRC)是世界第三常见恶性肿瘤。5-FU是治疗大肠癌的重要化疗药物之一。虽然以5-FU为基础的化疗方案已经成为治疗大肠癌的重要途径，然而由于固有和获得性耐药问题导致仅有约25％的患者对5-FU治疗有效。虽然合用如奥沙利铂等药物能够增强5-FU的临床疗效，但这些疗法往往伴随着明显的不良反应并有约一半患者死亡。因此目前仍然迫切需要发展新的治疗策略以增强5-FU抗肿瘤效果。　　BH3拟似物(BH3-mimetics)是以Bcl-2家族抗凋亡蛋白为靶点的小分子化合物。BH3拟似物通过破坏Bcl-2家族抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白间的由BH3结构域介导的相互作用诱导细胞凋亡。近年来，棉酚、apogossypol、ABT-737、ABT-263、TW-37、obatoclax、HA14-1等BH3拟似物已成为研究的热点。多项试验表明BH3拟似物能够通过恢复高水平表达Bcl-2家族抗凋亡蛋白的肿瘤细胞正常凋亡途径增强传统化疗敏感性。如棉酚可以提高紫杉醇对人类前列腺癌PC-3细胞的细胞毒作用。醋酸棉酚和地塞米松合用可明显增强后者促凋亡活性。棉酚同吉西他滨合用可以逆转高水平表达Bcl-2蛋白的细胞株对吉西他滨的耐药。在患者接受环磷酰胺-阿霉素-长春新碱-泼尼松龙(CHOP)方案治疗前给予棉酚可获得比单独应用CHOP方案或者棉酚更好的疗效。此外，棉酚被证明可增强地塞米松对多发性骨髓瘤细胞、环磷酰胺和美罗华对B细胞淋巴瘤移植瘤的治疗作用。这些研究表明，棉酚同与其他药物合用可以提高细胞毒效应，因此将棉酚同常见化疗药物合用于治疗耐药的肿瘤可能是一种新策略。BH3I-2'是一种人工合成的结构与Bak BH3肽链相似的小分子BH3拟似物。多项研究表明BH3I-2'通过同Bcl-2、 Bcl-XL结合诱导细胞凋亡。BH3I-2'也可增强某些抗肿瘤药物的敏感性。研究表明BH3I-2'可增加死亡受体5单克隆抗体TRA-8对乳腺癌细胞的治疗作用。BH3I-2'能增强胶质瘤细胞和前列腺癌细胞对TRAIL的敏感性。BH3I-2还可增强阿霉素和蛋白酶体抑制剂硼替佐米对Bcl-2蛋白过表达甲状腺肿瘤细胞的敏感性。　　本实验拟通过研究两种BH3拟似物（棉酚、BH3I-2'）能否增加5-FU对大肠癌细胞的敏感性及探讨相关机制为大肠癌治疗提供新的策略和方法，同时进一步揭示BH3拟似物抗肿瘤作用的机理，为BH3拟似物用于肿瘤的治疗提供更多的实验依据。　　方法：　　1、采用MTT法测定5-FU、棉酚和BH3I-2'对细胞增殖抑制作用。　　2、采用流式细胞术(PI单染法)进行细胞周期解析及凋亡判定。　　3、采用Lipofectamine2000试剂进行瞬时转染。　　4、采用Westemblot检测PARP、caspase-3，8，9、cyclin A、 cyclin D1、cyclin E、mTOR、p-mTOR、S6K1、p-S6K1、TS和TP蛋白的表达。　　5、统计学处理:每次实验重复3次，数据以均数±标准差表示，两组间差异采用Student's t-test分析。P＜0.05有统计学意义。　　结果：　　1、MTT法测得棉酚作用于三种大肠癌细胞24小时和48小时的IC50值，HT-29细胞为44.22±1.02μmol/L和26.11±1.04μmol/L;HCT116细胞为24.92±1.08μmol/L和14.11±1.08μmol/L;RKO细胞为31.25±1.04μmol/L和21.83±1.05μmol/L;以不同浓度BH3I-2'作用于HCT116细胞24小时和48小时，以MTT法测得IC50值分别为107.5±1.27μmol/L和65.16±1.07μmol/L。不同浓度棉酚作用于HT-29细胞、RKO细胞和HCT116细胞48小时后，流式细胞术分析结果显示随着浓度增加亚二倍体凋亡峰(sub-G1峰)逐渐明显，细胞凋亡率逐渐增高，G0/G1期细胞比例逐渐增高。不同浓度棉酚作用于HT-29细胞、RKO细胞和HCT116细胞24小时后，westernblot法分析结果显示随着浓度增加凋亡相关蛋白PARP，caspase3，8，9裂解逐渐增多，细胞周期蛋白D1表达水平逐渐降低而细胞周期蛋白A和细胞周期蛋白E表达水平无明显改变。不同浓度BH3I-2作用于HCT116细胞24小时后，以westernblot法检测结果显示随着浓度增加凋亡相关蛋白PARP、caspase3，8活化裂解程度逐渐增高，细胞周期蛋白D1表达水平逐渐降低而细胞周期蛋白A和细胞周期蛋白E表达水平无明显改变。　　2、分别以20μg/ml5-FU和20μmol/L棉酚作用于HT-29细胞，4μg/ml5-FU和10μmol/L棉酚在作用于HCT116细胞，

关键词：大肠癌 BH3拟似物细胞敏感性抗肿瘤作用

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一氧化氮对肿瘤细胞敏感性的化学性修饰

一氧化氮对肿瘤细胞敏感性的化学性修饰

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作者：苏晓明第四军医大学

学位级别：博士

作为一种泛素化分子,一氧化氮可诱导许多生物学效应,并且在肿瘤的演化和进展中也起到非常重要的作用。一氧化氮可参与多个导致蛋白发生变化的信号转导机制。并且这些蛋白的变化是浓度依赖性的。不断产生的持续剂量的一氧化氮通过激活Cas... 详细信息

作为一种泛素化分子,一氧化氮可诱导许多生物学效应,并且在肿瘤的演化和进展中也起到非常重要的作用。一氧化氮可参与多个导致蛋白发生变化的信号转导机制。并且这些蛋白的变化是浓度依赖性的。不断产生的持续剂量的一氧化氮通过激活Caspase诱导凋亡;而生理浓度或者低剂量的一氧化氮则抑制细胞凋亡。我们以往的研究也表明细胞辐射损伤抑制的产生和染色体畸变的降低可以用p53和一氧化氮的相互作用这一信号通路模式来阐述。然而一氧化氮对细胞敏感性诱导的具体机制尚不十分清楚。本课题的目的是阐明不同浓度的一氧化氮对肿瘤细胞敏感性的影响以及与其相关的可能性机制。本课题第一部分研究以人肺癌细胞为研究对象,来阐述一氧化氮在携带不同p53基因状态的细胞中对辐射诱导的细胞死亡和染色体畸变的影响以及与p53相关的可能性分子机制。p53缺如的人肺癌H1299细胞通过稳定转染wtp53和mp53基因,得到本实验使用的野生型或突变型p53细胞。X线照射前,细胞作用于不同浓度的硝酸异山梨酯(ISDN,一种一氧化氮供体)和/或羧基-2-苯-4,4,5,5-四甲基咪唑-1-氧-3-氧化物(c-PTIO,一种一氧化氮清除剂)。细胞内质粒载体的稳定表达由RT-PCR和限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)法检测。细胞敏感性、凋亡、染色体畸变和γH2AX分别由克隆形成实验、Hoechst33342染色法、TUNEL染色法、染色体显带技术和流式细胞术测定。凋亡相关蛋白的表达由Western blot检测。实验结果如下:在H1299/wtp53和H1299/mp53细胞中,p53基因7号外显子RT-PCR的产物可以观察到清晰的110 bp条带。并且7号外显子用MspI或BsrI限制性内切酶特异性消化后,分别在H1299/wtp53或H1299/mp53细胞中,可以观察到清晰的70 bp条带。这表明本实验模型是成功的和有效的。在wtp53细胞中,X线辐射前作用于低浓度的ISDN(5μM),可观察到明显的辐射抑制现象以及凋亡、DNA双链断裂和双着丝粒体染色体畸变的显著降低。然而,如果c-PTIO和ISDN照射前6小时共同存在于细胞培养液中,以上这些效应几乎被彻底地抑制。然而,X线辐射前,wtp53细胞作用于高浓度的ISDN(500μM),可观察到明显的辐射增敏现象以及凋亡、DNA双链断裂和双着丝粒体染色体畸变的显著升高。此外,H1299/wtp53细胞中辐射后凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3的表达数据表明,当p53功能正常时,一氧化氮可双向性影响X线照射诱导的通过Caspase-3和Bax介导的凋亡。这可能是一氧化氮影响野生型p53人肺癌细胞辐射敏感性的一个重要原因。但是,在上述ISDN的任何浓度,所有这些现象并没有在H1299/mp53细胞中观察到。基于以上研究,在第二部分研究中,我们只选择携带野生型p53基因的人肺癌细胞做为研究对象。本研究目的是从细胞所处周期位置不同对一氧化氮敏感性影响不同的角度,去探讨不同剂量的一氧化氮对辐射诱导的H1299/wtp53细胞杀伤和染色体畸变的双向性影响。急性X线照射前6小时,细胞作用于不同浓度的ISDN或0.02 Gy小剂量预照射。细胞同步化由血清饥饿法获得。离心收集悬浮在培养液中的有丝分裂细胞,重新接种于新鲜培养液中。细胞敏感性、细胞周期分布和染色体畸变分别由克隆形成实验、流式细胞术和染色体显带技术检测。实验结果如下:主要在细胞有丝分裂后17.5小时,在急性大剂量辐射前给予低浓度的ISDN(5μM)或者小剂量的预照射(0.02 Gy)处理,可以观察到明显的辐射适应性反应,具体表现为产生辐射抑制和抑制染色体畸变的发生。这种由低浓度的ISDN(5μM)或者小剂量的预照射(0.02 Gy)诱导的辐射适应性反应伴随着G2/M期的显著性缩短(P<0.01 vs对照组)和S期的轻微延长(P<0.05 vs对照组)。另一方面,与之相反的是,也是在细胞有丝分裂后17.5小时,在急性大剂量辐射前给予高浓度的ISDN(500μM)处理,可以观察到明显的辐射增敏性效应,具体表现为产生辐射增敏和增加染色体畸变的发生。这种由高浓度的ISDN(500μM)诱导的辐射增敏效应伴随着G2/M期的显著性延长(P<0.001 vs对照组)和S期的缩短轻微(P<0.05 vs对照组)。由此可知,G2/M细胞对ISDN诱导的细胞死亡和染色体畸变是最敏感的,ISDN对细胞生存率和染色体畸变的影响依赖于细胞周期位置。由于一氧化氮在肿瘤细胞中的增敏效应受p53基因状态的影响,因此,下一步研究的目的寻找一条新的靶向型途径,通过增加一氧化氮诱导的DNA双链断裂(DSBs)来提高一氧化氮的增敏治疗效果。本研究使用的细胞:胎鼠成纤维细胞(MEF)携带野生型或

关键词：一氧化氮电离辐射细胞敏感性凋亡 p53 DNA双链断裂染色体畸变细胞周期 DNA修复乳腺癌易感基因2

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甲基莲心碱增强STI 571对K562/G01细胞敏感性及其机制研究

甲基莲心碱增强STI 571对K562/G01细胞敏感性及其机制研究

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作者：闵慧中南大学

学位级别：硕士

目的： 　　探讨甲基莲心碱增强STI571对K562/G01细胞敏感性,对细胞增殖、凋亡、bcr/abl融合基因和p210Bcr-abl融合蛋白表达的影响,为临床应用提供理论及实验依据。 　　方法：<br&gt... 详细信息

目的： 　　探讨甲基莲心碱增强STI571对K562/G01细胞敏感性,对细胞增殖、凋亡、bcr/abl融合基因和p210Bcr-abl融合蛋白表达的影响,为临床应用提供理论及实验依据。 　　方法： 　　采用改良四氮唑盐法(MTT)检测细胞毒性；流式细胞仪测定经药物处理的K562/G01细胞凋亡率；分光光度法检测定Caspase-3活性；RT-PCR法和蛋白免疫印迹(Western-blot)法检测Nef对bcr/abl融合基因及p210Bcr-abl融合蛋白表达的影响。 　　结果： 　　 (1)@Nef2～64μmol/L、As2O310～160μmol/L对K562/G01细胞增殖均有抑制作用,Nef、As2O3对K562/G01细胞的IC10为8.1±0.16μmol/L、10.42±0.64。@STI571在K562细胞的IC50为0.63±0.04μmol/L,对K562/G01细胞的IC50为26.52±1.35μmol/L,K562细胞对STI571的耐药倍数是42.1倍。@Nef4μmol/L、Nef8 　　 μmol/L、As2O310μmol/L与STI571(0.01～100μmol/L)联合用药组与STI571(0.01～100μmol/L)单独用药组相比均不同程度的降低了K562/G01细胞的IC50值,IC50由29.41±0.48μmol/L降至14.39±0.48、8.80±0.25和12.75±1.50μmol/L。 　　 (2)①PI染色流式细胞术检测各给药组24、48、72和96h凋亡率,与阴性对照组相比Nef4μmol/L和8μmol/L组细胞凋亡率无显著增高(p>0.05),STI57110μmol/L联合Nef8μmol/L组与STI571组比的凋亡率显著增高(p<0.05)。@KS62/G01细胞经药物处理培养48h、96h后,采用分光光度法检测经药物处理48h后细胞Caspase-3活性,与阴性对照相比,Nef4μmol/L、8μmol/L组Caspase-3活性无显著增高(p>0.05),联合用药组Caspase-3活性显著高于STI571(p<0.05)组和As2O3组(p<0.05)；而经药物处理96h后,Nef4μmol/L、8μmol/L组Caspase-3活性显著增高(p>0.05)。 　　 (3)①Western-blotting结果显示:与阴性对照组比较,Nef4μmol/L、8μmol/L组p210Bcr-abl曲。蛋白表达无显著变化(p>0.05)；与STI57110μmol/L组相比,STI57110μmol/L联合Nef8μmol/L用药组p210Bcr-abl蛋白表达显著下降(p<0.05)。②RT-PCR结果显示:与阴性对照组相比,Nef4、8μmol/L组bcr/abl融合基因表达无显著变化(p>0.05)；与STI571组相比,STI57110μmol/L联合Nef8μmol/L用药组bcr/abl融合基因表达显著下降(p<0.01)。 　　结论： 　　 Ne侑邑提高K562/G01细胞对STI571敏感性；通过增强STI571对K562/G01细胞的促进凋亡及Caspase-3活化作用；同时Nef能增强STI571下调bcr/abl融合基因及p210Bcr-abl融合蛋白表达。

关键词：甲基莲心碱细胞敏感性融合基因蛋白表达

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2015—2020年黑龙江省脊髓灰质炎实验室细胞敏感性监测与评价

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中国公共卫生管理 2022年第5期38卷 673-676页

作者：王晗宋婧吕珀孙兆丹宋长江韩宇黑龙江省疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨150030 内蒙古通辽市疾病预防控制中心

目的评价2015—2020年黑龙江省脊髓灰质炎(以下简称脊灰)实验室细胞系质量控制情况。方法采用巢氏聚合酶链式反应(PCR)方法对细胞支原体进行检测,采用96孔微量板病毒滴定法对脊灰病毒的敏感性进行检测,并对检测结果进行分析。结果黑龙... 详细信息

目的评价2015—2020年黑龙江省脊髓灰质炎(以下简称脊灰)实验室细胞系质量控制情况。方法采用巢氏聚合酶链式反应(PCR)方法对细胞支原体进行检测,采用96孔微量板病毒滴定法对脊灰病毒的敏感性进行检测,并对检测结果进行分析。结果黑龙江省脊灰实验室在2015—2020年使用的细胞系支原体检测均为阴性,3个型别的脊灰病毒敏感性分别为:Sabin 1在人横纹肌肉瘤细胞系(rhabdomyosarcoma,RD)细胞上滴度为108.23±0.23,在表达人脊灰病毒的小鼠肺细胞系(Mouse Lung Cells that Express Receptors for HumanPolioviruses,L20B)细胞上滴度为10^(6.97±0.37);SabinⅡ在RD细胞上滴度为10^(8.27±0.47),在L20B细胞上滴度为10^(6.92±0.17);SabinⅢ在RD细胞上滴度为10^(8.10±0.40),在L20B细胞上滴度为10^(6.60±0.40),均在有效范围内波动。结论2015—2020年,黑龙江省脊灰实验室细胞质量状况良好,未出现细胞支原体污染,并且RD细胞、L20B细胞对脊灰病毒及肠道病毒的敏感性均在正常范围内波动。支原体检测和细胞敏感性监测作为质量控制的重要指标,保证了实验室检测脊灰病毒的敏感性。

关键词：脊髓灰质炎支原体检测细胞敏感性质量控制

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重离子辐射细胞敏感性预测研究趋势

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兰州医学院学报 2004年第2期30卷 55-56,F003页

作者：杨建设李文建赵靖中国科学院近代物理研究所 730000

自从X射线被人类发现以来,人们对射线的研究越来越深入.尽管各种射线对人体的自然照射弊大于利,但是对射线的控制利用却给人类带来了巨大的利益,癌症的放射治疗就是其中之一.长期以来,人类利用X射线、γ射线等低线性传能密度(Linear ene... 详细信息

自从X射线被人类发现以来,人们对射线的研究越来越深入.尽管各种射线对人体的自然照射弊大于利,但是对射线的控制利用却给人类带来了巨大的利益,癌症的放射治疗就是其中之一.长期以来,人类利用X射线、γ射线等低线性传能密度(Linear energy transfer,LET)射线治疗了无数的恶性肿瘤患者,取得了一定的疗效,但同时,对于正常组织的杀伤也无法避免.近年来,人们利用各种类型的加速器获得了高LET的重离子束,由于其特有的生物物理学特性,如剂量分布的布拉格峰(Bragg Peak)、高的相对生物学效应(Relative biological effectiveness,RBE)、低的氧增比(OER)和低的修复效应等,用其替代常规射线来治疗恶性肿瘤,取得了满意的疗效[1].现将重离子治癌的研究进展综述如下:

关键词：重离子辐射细胞敏感性 X射线细胞周期

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五种虫媒病毒的细胞敏感性观察

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微生物学杂志 2002年第2期22卷 28-29,64页

作者：彭文明黄如统军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

对新引进 5种虫媒病毒 :马雅罗病毒 (MAY) ,西门利克病毒 (SFV) ,墨累谷脑炎病毒 (MVE) ,伊利乌斯病毒 (ILH)和布尼安姆韦拉病毒 (BUN)采取乳鼠脑内接种的方法传出 ;选择BHK2 1、LLC MK2 、A549和C6 / 36传代细胞 ,进行这 5种病毒的敏... 详细信息

对新引进 5种虫媒病毒 :马雅罗病毒 (MAY) ,西门利克病毒 (SFV) ,墨累谷脑炎病毒 (MVE) ,伊利乌斯病毒 (ILH)和布尼安姆韦拉病毒 (BUN)采取乳鼠脑内接种的方法传出 ;选择BHK2 1、LLC MK2 、A549和C6 / 36传代细胞 ,进行这 5种病毒的敏感性试验 ,观察病毒在细胞上的CPE出现时间、特点以及滴度。实验表明 ,BHK2 1细胞对 5种病毒CPE特征明显 ,出现时间较早 ,滴度较高 ,适用于 5种病毒的组织培养。

关键词：虫媒病毒细胞敏感性细胞培养

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2015-2018年辽宁省脊灰实验室细胞敏感性监测与评价

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预防医学情报杂志 2019年第7期35卷 643-646页

作者：任丽萍邵玉平王艳方兴姚文清辽宁省疾病预防控制中心

目的评价辽宁省脊灰实验室2015-2018年所用细胞系的质量控制情况,为急性驰缓性麻痹(acute flaccid paralysis)病例监测提供可靠的质量保证。方法以辽宁省脊灰实验室2013年制备的脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型质量控制(Laboratory quality contro... 详细信息

目的评价辽宁省脊灰实验室2015-2018年所用细胞系的质量控制情况,为急性驰缓性麻痹(acute flaccid paralysis)病例监测提供可靠的质量保证。方法以辽宁省脊灰实验室2013年制备的脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型质量控制(Laboratory quality control standard,LQC)株为标准毒株,转脊灰病毒受体的小鼠肺细胞(L20B细胞)和横纹肌肉瘤细胞细胞(RD细胞)由中国疾病预防控制中心脊灰实验室提供。支原体的检测用PCR方法,细胞敏感性检测用标准毒株滴定法。结果辽宁省脊灰实验室2015-2018年使用的L20B和RD细胞系支原体检测均为阴性,两种细胞系的病毒滴度与LQC参考值比较波动幅度均在±0.5 log CCID50/0.1 ml以内。结论 2015-2018年辽宁省脊灰实验室使用的细胞系状态稳定,无支原体污染,对脊灰病毒敏感性良好,为脊灰实验室网络运转和辽宁省AFP病例监测提供了准确、可靠的病毒学依据。

关键词：脊髓灰质炎病毒细胞敏感性细胞支原体

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西尼罗病毒的细胞敏感性观察

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寄生虫与医学昆虫学报 2006年第2期13卷 85-88页

作者：张映梅姜淑芳赵彤言董言德军事医学科学院微生物流行病研究所

本研究选用C636、BHK21、Vero和VeroE64株传代细胞进行西尼罗病毒的细胞敏感性试验,观察西尼罗病毒在各传代细胞系上细胞病变出现的时间以及病变特征。结果表明,该病毒在4种传代细胞出现CPE的时间及特征均有所不同,其中C636细胞对西尼... 详细信息

本研究选用C636、BHK21、Vero和VeroE64株传代细胞进行西尼罗病毒的细胞敏感性试验,观察西尼罗病毒在各传代细胞系上细胞病变出现的时间以及病变特征。结果表明,该病毒在4种传代细胞出现CPE的时间及特征均有所不同,其中C636细胞对西尼罗病毒的细胞病变特征最为明显,出现时间适中,更适用于西尼罗病毒的组织培养研究。

关键词：西尼罗病毒细胞敏感性细胞病变

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芹菜素联合结直肠癌化疗药物在制备提高结直肠癌细胞敏感性药物中的应用

芹菜素联合结直肠癌化疗药物在制备提高结直肠癌细胞敏感性药物中...

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作者：巩跃生董雷张威杨峰刘超峰肖瑞萍耿春辉李永伟 450000 河南省郑州市管城回族区陇海东路51号

芹菜素联合结直肠癌化疗药物在制备提高结直肠癌细胞敏感性药物中的应用，芹菜素与治疗结直肠癌药物的摩尔浓度比为38‑42μM：18‑25μM（μmol/L）。本发明能够有效提高结直肠癌细胞对顺铂敏感性，有效缓解改善结直肠癌化疗药物耐药性... 详细信息

标准号: CN116942654A

芹菜素联合结直肠癌化疗药物在制备提高结直肠癌细胞敏感性药物中的应用，芹菜素与治疗结直肠癌药物的摩尔浓度比为38‑42μM：18‑25μM（μmol/L）。本发明能够有效提高结直肠癌细胞对顺铂敏感性，有效缓解改善结直肠癌化疗药物耐药性，显著提高治疗效果，有巨大的社会和经济效益。

关键词：结直肠癌化疗药物芹菜素治疗结直肠癌摩尔浓度比细胞敏感性耐药性有效缓解治疗效果顺铂制备细胞应用联合

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CEM、Reh、Jurkat白血病细胞对NK细胞杀伤敏感性的差异及其机制的初步探讨

CEM、Reh、Jurkat白血病细胞对NK细胞杀伤敏感性的差异及其机制的...

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作者：颜述中国医科大学

学位级别：硕士

目的: 　　初步探讨ALL白血病细胞系CEM、Reh、Jurkat对NK细胞杀伤敏感性的差异与其机制,为提高NK细胞杀伤ALL自血病细胞敏感性提供基础。 　　材料与方法: 　　用免疫磁珠... 详细信息

目的: 　　初步探讨ALL白血病细胞系CEM、Reh、Jurkat对NK细胞杀伤敏感性的差异与其机制,为提高NK细胞杀伤ALL自血病细胞敏感性提供基础。 　　材料与方法: 　　用免疫磁珠阴性分选法分离三名健康志愿者外周血NK细胞作为效应细胞,在含5%FBS、500U/mlIL-2的SCGM培养基体外培养第0天、7天,应用CCK-8试剂盒法按照效靶比1:1,5:1,10:1,对ALL细胞系Jurkat、Reh、CEM进行杀伤实验。应用实时定量PCR方法检测JuFkat、Reh、CEM细胞上NK细胞活化性受体相关的配体MICA、MICB、ULBPI、CD155和死亡受体Fas、TNFRI、DR4、DR5的mRNA表达水平。 　　结果: 　　三种ALL细胞系对人原代NK细胞杀伤均敏感,敏感性由高至低为Jurkat＞Reh＞CEM(P＜0.05)。在mRNA水平,与NK细胞活化性受体对应的配体和死亡受体的表达有异质性,Jurkat细胞高表达MICB及CD155,Reh细胞死亡受体DR4、DR5表达较高,而CEM细胞MICA、ULBP1、Fas及TNFRI表达较高。MICB在Jurkat细胞高农达,Reh中度表达,而CEM表达较低。在效靶比为1:1,5:1,10:1时,白血病细胞MICBmRNA的表达水平与其对人原代NK细胞的杀伤敏感性有高度正相关关系,随着效靶比的增加,相关性越姓(相关系数r分别为0.99.1.00,1.00,P＜0.05)。 　　结论: 　　 ALL细胞系对人NK细胞杀伤的敏感性差异与配体MICBmRNA的表达水平存在相关性,与死亡受体Fas、TNFRI、DR4、DR5的表达水平无明显相关性。

关键词：急性淋巴细胞白血病自然杀伤细胞死亡受体细胞毒性细胞敏感性

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