检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：李小平重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：比较不同肝癌细胞株对5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-aza-dC）的敏感性，探讨肝癌细胞对5-aza-dC的敏感性是否与细胞总DNA甲基化水平有关。　　方法：用不同剂量的5-aza-dC处理肝癌细胞株（HepG2，QGY7701，HepG2.2.15）及正常肝细胞... 详细信息

目的：比较不同肝癌细胞株对5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-aza-dC）的敏感性，探讨肝癌细胞对5-aza-dC的敏感性是否与细胞总DNA甲基化水平有关。　　方法：用不同剂量的5-aza-dC处理肝癌细胞株（HepG2，QGY7701，HepG2.2.15）及正常肝细胞株L02，用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖，caspase 3活性以及细胞DNA片断化检测细胞凋亡，彗星实验检测DNA损伤，定量RT-PCR检测MICB的表达。细胞总DNA甲基化水平用epigenetik公司的MethylampTM Global DNA quantification kit检测。　　结果：与HepG2细胞和QGY7701细胞相比，HepG2.2.15细胞和L02细胞对5-aza-dC不敏感。经过10μmol/L 5-aza-dC处理3d后，L02、HepG2、QGY7701和HepG 2.2.15 细胞中Caspase3的活性分别为：9.1±0.6U、17.1±1.2U、17.7±0.7U和6.7±0.8U。但是HepG2和QGY7701细胞中Caspase3的活性升高较L02和HepG 2.2.15细胞明显（P值分别为：HepG2比HepG2.2.15: 0.014;QGY7701比HepG2.2.15: 0.005;HepG2比L02:0.009;QGY7701比L02:0.005）。BrdU掺入率分别为：0.301±0.078%、.491± 0.078%、0.623±0.071%和0.372%±0.035%。但是QGY7701细胞中BrdU掺入率升高较L02细胞明显（P=0.04）。彗星实验显示5-aza-dC处理能够引起DNA损伤，但不同细胞之间的DNA损伤程度没有显著差别(P＞0.05)。定量RT-PCR表明5-aza-dC处理能够诱导MICB的表达，但不同细胞之间MICB表达增加程度没有明显差别(P＞0.05)。另外，我们发现总DNA甲基化水平在四种细胞之间没有明显差别。　　结论：5-aza-dC 能够抑制肝癌细胞增殖、诱导凋亡，还能通过引起DNA损伤诱导MICB的表达。细胞对5-aza-dC的敏感性与细胞总DNA甲基化水平无关。

关键词：肝细胞肝癌肝癌细胞株 5-氮杂-2'-脱氧胞苷细胞敏感性 DNA甲基化细胞增殖细胞凋亡

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一株西尼罗病毒株的生物学特征研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第2期25卷 133-136页

作者：张久松张泮河詹琳司炳银祝庆余曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

目的　对引进的西尼罗病毒 (WNV)毒株的形态学、致病性、细胞敏感性、免疫原性等生物学性状进行探讨 ,为进一步开展WNV的相关研究奠定基础。方法　选择Vero E6与C6 36细胞观察WNV的细胞病变效应 (CPE) ,并制作电镜负染标本和组织切片... 详细信息

目的　对引进的西尼罗病毒 (WNV)毒株的形态学、致病性、细胞敏感性、免疫原性等生物学性状进行探讨 ,为进一步开展WNV的相关研究奠定基础。方法　选择Vero E6与C6 36细胞观察WNV的细胞病变效应 (CPE) ,并制作电镜负染标本和组织切片标本进行病毒形态学鉴定 ;通过乳鼠脑内接种WNV确认其致病性 ;以灭活的感染乳鼠脑悬液免疫BALB c小鼠 ,以间接免疫荧光试验(IFA)测定其血清WNVIgG抗体 ;用RT PCR检测病毒核酸 ,扩增的核苷酸序列通过BLAST作同源性比较。结果　WNV所致Vero E6与C6 36细胞的CPE分别以细胞圆缩和融合为主要特征 ;电镜下所见病毒体为有包膜、直径约 30～ 5 0nm的球形颗粒 ;脑内接种WNV可致全部乳鼠死亡 ;灭活病毒可诱导小鼠产生WNV抗体 ;经RT PCR扩增 ,在WNV培养液及感染乳鼠脑组织中均检测到目的基因片段 ,且仅与WNV有较高的同源性 (94 %～ 1 0 0 %)。结论　本研究使用的WNV毒株可供进一步开展WNV的相关研究。

关键词：生物学特征 Vero-E6 病毒株 BALB/c小鼠间接免疫荧光试验 RT-PCR检测 RT-PCR扩增 C6/36细胞细胞病变效应 WNV 相关研究脑内接种西尼罗病毒细胞敏感性生物学性状形态学鉴定 IgG抗体同源性比较核苷酸序列免疫原性

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新分离呼吸道肠道病毒生物学特性和S4片段的序列测定

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中国病毒学 2006年第4期21卷 324-327页

作者：朱虹苏裕心宋立华何君黄如统貌盼勇端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院北京100039

新分离呼吸道肠道病毒(简称呼肠病毒)经过空斑分纯后进行生物学和部分基因序列的鉴定。首先通过BYD株(由端青从北京于某患者标本中分离到的第一株呼肠病毒)对4种传代细胞的敏感性试验,选出L929和LLC-MK2敏感细胞,然后用LLC-MK2细胞进行... 详细信息

新分离呼吸道肠道病毒(简称呼肠病毒)经过空斑分纯后进行生物学和部分基因序列的鉴定。首先通过BYD株(由端青从北京于某患者标本中分离到的第一株呼肠病毒)对4种传代细胞的敏感性试验,选出L929和LLC-MK2敏感细胞,然后用LLC-MK2细胞进行理化性质试验,血凝试验和形态学鉴定。结果显示该病毒为耐乙醚、不耐酸、不耐热的RNA病毒;对人O型红细胞能产生凝集,滴度达1:32;电镜下可查见细胞胞浆内有球形、直径为70nm～80nm、双层衣壳的病毒颗粒。提取BYD株RNA并进行S4片段序列分析,结果显示该片段的氨基酸序列与已知呼肠病毒1～3型标准株的同源性分别为95%、90%和95%。以上这些生物学以及S4片断的序列分析结果表明:新分离BYD株病毒符合呼肠病毒科的特性。

关键词：呼吸道肠道病毒细胞敏感性理化性质形态学序列分析

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巴泰病毒云南株生物学性状研究

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中国人兽共患病学报 2013年第6期29卷 527-532页

作者：章域震张海林杨卫红冯云云南省地方病防治所/云南省病毒立克次体研究中心大理671000

目的掌握巴泰(Batai)病毒生物学特性,为巴泰病毒的监测和调查研究提供科学依据。方法用分离自云南省菲律宾按蚊(Anopheles philippinensis)的巴泰病毒LC92-4株,采用细胞培养、小白鼠感染、血凝抑制、间接免疫荧光、空斑试验以及病理检... 详细信息

目的掌握巴泰(Batai)病毒生物学特性,为巴泰病毒的监测和调查研究提供科学依据。方法用分离自云南省菲律宾按蚊(Anopheles philippinensis)的巴泰病毒LC92-4株,采用细胞培养、小白鼠感染、血凝抑制、间接免疫荧光、空斑试验以及病理检测和电镜观察等方法进行生物学特性试验。结果巴泰病毒可引起<4周龄小白鼠发病死亡。感染鼠脑病毒颅内、皮下和腹腔接种2周龄小白鼠的LD50分别为5.67logLD50/0.025mL、5.3logLD50/0.03mL和4.5logLD50/0.03mL。感染病毒鼠的心、肝、脾、肺、肾病毒悬液颅内接种2周龄小白鼠,LD50分别为3.75、4.25、2.25、3.0、2.25logLD50/0.025mL。感染发病小白鼠脑、心、肝、脾、肺、肾均发现病理改变。感染鼠的脑组织经电镜检测发现圆形有包膜病毒颗粒,大小约82nm。巴泰病毒能在BHK21和Vero细胞产生明显病变,并可产生空斑;在BHK21细胞上,空斑滴度为6.04logPFU/mL;在C6/36细胞上不产生病变。感染病毒鼠脑接种BHK21和Vero细胞,TCID50分别为5.50logTCID50/0.025mL和5.00logTCID50/0.025mL。在pH5.75～7.0条件下,巴泰病毒不具有与鸽、鹅、鸡、鸭、人O型和绵羊红血球发生凝集的特性;空斑减少中和试验检测云南省357份人血清,阳性2份,中和抗体滴度均为1∶10。结论乳小白鼠和幼年小白鼠对巴泰病毒高度易感。BHK21和Vero细胞对巴泰病毒敏感,可用于病毒分离培养和空斑测定。建立的免疫荧光和空斑减少中和试验具有特异性,可用于巴泰病毒抗体检测。应进一步开展该病毒的分布及其与疾病关系的研究。

关键词：巴泰病毒动物易感性细胞敏感性间接免疫荧光试验空斑试验空斑减少中和试验

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卡铂、威猛、甲氨蝶呤、尼莫地平联用对脑胶质瘤的抑制作用

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山东医药 2005年第10期45卷 22-23页

作者：王明盛杨正明陈坚华中科技大学同济医学院附属同济医院湖北武汉43000022

目的观察卡铂(CBP)、威猛(Vm-26)、甲氨蝶呤(MTX)及尼莫地平(NIM)联用对脑胶质瘤的抑制作用,探讨其与脑胶质瘤细胞敏感性的关系,为临床提供有效的化疗依据。方法采用MTT比色法及3H-TdR渗入法测定脑胶质瘤细胞增殖抑制作用,比较脑胶质瘤... 详细信息

目的观察卡铂(CBP)、威猛(Vm-26)、甲氨蝶呤(MTX)及尼莫地平(NIM)联用对脑胶质瘤的抑制作用,探讨其与脑胶质瘤细胞敏感性的关系,为临床提供有效的化疗依据。方法采用MTT比色法及3H-TdR渗入法测定脑胶质瘤细胞增殖抑制作用,比较脑胶质瘤细胞对CBP、Vm-26、MTX及NIM单用、联用的敏感性。结果CBP、Vm-26、MTX、NIM联用对肿瘤细胞的抑制率达96.64%,明显高于CBP+NIM(69.03%)、Vm-26+NIM(71.35%)、MTX+NIM(62.75%)及CBP+Vm-26+MTX(84.59%)的抑制效果(P均<0.01),同时CBP、Vm-26、MTX浓度降低至单用的1/10～1/100。结论CBP、Vm-26、MTX及NIM联用对肿瘤细胞的疗效明显优于单用,且具有抑制率高、用药浓度低的特点。

关键词：甲氨蝶呤尼莫地平联用卡铂 ^3H-TdR渗入法 Vm-26 脑胶质瘤细胞增殖抑制作用 MTT比色法肿瘤细胞细胞敏感性 CBP MTX NIM 抑制效果用药浓度抑制率单用

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CVA10免疫荧光检测方法的建立及其在灭活验证中的应用

CVA10免疫荧光检测方法的建立及其在灭活验证中的应用

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作者：张宇昊北京协和医学院

学位级别：硕士

目的:手足口病一直是我国婴幼儿群体内高发的传染病,尤其是在近些年EV-A71疫苗的成功上市并大量接种后,CVA10病毒越来越成为手足口病的主要流行株之一,因此针对CVA10疫苗开发的意义越来越重要,对于我国乃至世界的公共卫生具有重要的意... 详细信息

目的:手足口病一直是我国婴幼儿群体内高发的传染病,尤其是在近些年EV-A71疫苗的成功上市并大量接种后,CVA10病毒越来越成为手足口病的主要流行株之一,因此针对CVA10疫苗开发的意义越来越重要,对于我国乃至世界的公共卫生具有重要的意义。本研究旨在通过对CVA10病毒的灭活进行研究,并建立免疫荧光检测方法辅助进行灭活验证,为CVA10疫苗的开发提供基础。方法:使用甲醛和BPL两种灭活剂,探究不同浓度灭活剂和不同的灭活时间对病毒灭活的影响。同时将得到的灭活条件应用于病毒收获液和病毒原液中,探究该灭活条件是否仍适用。使用肠道病毒实验常用的RD细胞、Vero细胞和MA104细胞,确定CVA10的最敏感细胞。建立免疫荧光检测CVA10病毒颗粒的方法,确定一抗最佳工作浓度、病毒最佳孵育时间、可以检测到的病毒下限以及特异性,并将免疫荧光方法应用于灭活验证中。结果:甲醛 50μg/ml 灭活 24h、100μg/ml 灭活 18h、150μg/ml 灭活 12h、200μg/ml 灭活6h;BPL 1:1000浓度灭活1h、1:2000浓度灭活6h、1:3000浓度灭活6h、1:4000浓度灭活6h,以上条件均可以将病毒完全灭活,且灭活验证符合要求。CVA10病毒在RD细胞、Vero细胞和MA104细胞中均能良好生长,无论在一步生长曲线还是增殖动力学曲线中,CVA10病毒感染RD细胞测得的病毒感染性滴度均值最高,并且增殖最快。结果表明RD细胞为CVA10最敏感细胞,因此在灭活验证中使用该种细胞进行实验。本研究建立了免疫荧光检测CVA10病毒的方法,最佳一抗工作浓度为1:100,该方法500CCID50/ml的CVA10病毒量与Vero细胞孵育18小时即可有少量的病毒颗粒;感染细胞在病毒感染24h后可以检测到的病毒量下限为50 CCID50/ml;病毒感染4天后可以检测到的病毒量下限为0.5 CCID50/ml,并且特异性良好,不会与其他型肠道病毒产生交叉反应。将免疫荧光方法与细胞盲传实验结合进行灭活验证的确认,提高了传统灭活验证方法检测的可靠性。结论:甲醛和BPL均可作为CVA10病毒的灭活剂。在肠道病毒常用细胞中,RD细胞是CVA10的最敏感细胞,使用RD细胞进行灭活验证可提高灭活验证结果的可靠性。成功建立了免疫荧光检测CVA10病毒颗粒的方法,该方法可以检测到的病毒量下限为0.5 CCID50ml,并且特异性良好,不与其他型肠道病毒产生交叉反应,可以辅助进行灭活验证实验,提高灭活验证结果的可靠性。

关键词：柯萨奇病毒A组10型灭活验证免疫荧光细胞敏感性

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新型EGFR靶向性小分子NXG对肺癌敏感性判定

新型EGFR靶向性小分子NXG对肺癌敏感性判定

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作者：孙莹莹哈尔滨医科大学

学位级别：硕士

目的:研究新型EGFR靶向性小分子NXG(NXGH和NXGF)对不同EGFR表达水平及突变状态的肺癌细胞的敏感性。<br>　　方法:应用4种不同EGFR表达水平及突变状态肺癌肿瘤细胞系:PC9（EGFR19外显子缺失突变）、H1975（L858R合并T790... 详细信息

目的:研究新型EGFR靶向性小分子NXG(NXGH和NXGF)对不同EGFR表达水平及突变状态的肺癌细胞的敏感性。<br>　　方法:应用4种不同EGFR表达水平及突变状态肺癌肿瘤细胞系:PC9（EGFR19外显子缺失突变）、H1975（L858R合并T790M突变）、H358(野生型EGFR)及H520（EGFR阴性表达），应用MTT方法，研究梯度浓度(1.25、2.5、5、10、20、30、40、60和80umol/L) NXG48h时间点对四种肺癌细胞的抑制作用，分别计算IC50及细胞存活率，比较其对不同肿瘤细胞的敏感性。应用SPSS软件对实验数据进行统计学分析。<br>　　结果:NXG对4种肺癌细胞均有明显抑制作用(p＜0.05); PC9、H1975、H358及H520肿瘤细胞NXGH的IC50分别是0.675umol/L、12.097umol/L、11.368umol/L和0.981umol/L，NXGH浓度为1.25umol/L时，4种细胞的存活率分别是0.44±0.11、0.76±0.13、0.83±0.14和0.49±0.37，NXGH浓度为1.25、2.5和5umol/L时，PC9和H1975细胞存活率低于H358和H520(p＜0.05)。PC9、H1975、H358及H520细胞NXGF的IC50分别是0.685umol/L、4.265umol/L、3.097umol/L和0.331umol/L，NXGF浓度为1.25umol/L时，4种细胞的存活率分别是0.52±0.06、0.90±0.24、0.79±0.09和0.39±0.04，NXGF浓度为1.25、2.5umol/L时，PC9细胞存活率低于H358和H520(p＜0.05)，对PC9与H1975抑制率没有差异。<br>　　结论:本实验室设计构建的两种新型EGFR靶向性小分子NXGH和NXGF，对不同EGFR表达水平和突变状态的肺癌细胞均有明显抑制作用;低浓度NXGH和NXGF对突变EGFR肺癌细胞抑制作用最强，浓度大于10umol/L时抑制作用与EGFR表达水平及突变状态无关;有望构建基于NXG结构的小分子用于EGFR突变分子成像及靶向EGFR突变的分子靶向治疗。

关键词： EGFR表达靶向性小分子突变状态肺肿瘤细胞敏感性

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日本眼科学

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世界核心医学期刊文摘（眼科学分册） 2006年第1期2卷 56-61页

局部应用异丙基乌诺前列酮滴眼对正常眼压性青光眼患者和对照者视神经乳头循环的影响；视神经束综合征中视网膜神经纤维层的厚度；糖尿病性黄斑囊样水肿患者玻璃体切除术中行内界膜剥除术的作用；涉及黄斑部的视网膜脱离术后复位黄斑部... 详细信息

局部应用异丙基乌诺前列酮滴眼对正常眼压性青光眼患者和对照者视神经乳头循环的影响；视神经束综合征中视网膜神经纤维层的厚度；糖尿病性黄斑囊样水肿患者玻璃体切除术中行内界膜剥除术的作用；涉及黄斑部的视网膜脱离术后复位黄斑部视锥细胞敏感性评估；

关键词：眼科学视网膜神经纤维层日本内界膜剥除术视神经乳头青光眼患者正常眼压性乌诺前列酮玻璃体切除细胞敏感性

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膀胱肿瘤

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国外科技资料目录（医药卫生） 2002年第3期 129-130页

0210186 阿霉素使膀胱癌细胞对淋巴细胞敏感性的增强〔日〕/本乡文弥//Biotherapy.-2001,15(3).-331～333 冀医情0210187

关键词：阿霉素细胞敏感性鳞状细胞癌钙粘着蛋白移行细胞癌膀胱肿瘤医科膀胱癌细胞肿瘤复发淋巴

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2019年河南省脊髓灰质炎病毒实验室质量控制标准毒株滴定

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河南预防医学杂志 2020年第12期31卷 881-883页

作者：张璐杨建辉朱海明徐瑾河南省疾病预防控制中心免疫预防与规划所河南郑州450016

目的制备和滴定2019年河南省脊髓灰质炎病毒实验室质量控制标准毒株(Laboratory Quality Control Strain,LQCS)。方法中国Sabin参考毒株(China Sabin Test Reference Strain,CSTRS)扩增制备LQCS,以CSTRS为平行实验,进行三次独立实验完成LQCS滴定。结果LQCS RDⅠ型为108.48 CCID50/0.1 mL、RDⅢ型为108.57 CID50/0.1 mL、L20BⅠ型为107.82CCID50/0.1 mL和L20BⅢ型为107.20 CCID50/0.1 mL。结论河南省已制备可用于细胞敏感性实验的LQCS。

关键词：脊髓灰质炎实验室质量控制标准毒株细胞敏感性

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