检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：陈铿上海交通大学

学位级别：硕士

SrGAPs (Slit-Robo GTPase-activating proteins)是Slit-Robo下游信号通路中的一组重要的RhoGAP分子。在哺乳动物中,srGAP家族主要由srGAP1, srGAP2, srGAP3和ARHGAP4四个成员组成。近年来众多的研究显示srGAP1, srGAP2和srGAP3分子在轴突导向、神经元迁移、突起生长和树突形态发生等神经元发育的过程中起到关键的作用。在SVZ/VZ等神经发生的区域,srGAP家族各成员的mRNA均呈现高表达,提示srGAPs可能作为重要的调节蛋白参与调控神经元早期的发育—神经元分化。我们实验室以往的研究还发现,在神经元发育过程中,srGAP家族各成员存在细胞浆—细胞核转位的现象。然而,srGAPs在细胞核中所扮演的角色仍未被充分揭示。本课题主要探讨细胞核定位的srGAPs在神经元分化过程中潜在的功能。我们通过western blotting等手段证实了srGAP家族各成员主要分布于中枢神经系统,且在P1至P14阶段的大鼠大脑皮层中处于高水平表达。在体外培养的大脑皮层神经元和Neuro2A细胞中,srGAP3分子与染色质重塑复合物的核心成员Brg1分子共定位于细胞核。免疫共沉淀的结果显示,Neuro2A细胞中内源表达的srGAP3与Brg1相结合。SrGAP3在VPA诱导Neuro2A细胞神经元分化的过程中起到阴性调控的作用,进一步深入研究则显示srGAP3的抑制作用与Rac1的活性密切相关。此外,我们还发现过表达srGAP3会导致Neuro2A细胞中GAP-43表达水平的显著下降。以上结果表明,细胞核定位的srGAPs分子在神经元分化过程中发挥着重要的调节作用。

关键词： SrGAPs 细胞核定位神经元分化 Brg1 Rac1 GAP-43

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介导BLM解旋酶细胞核定位的关键氨基酸位点鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2016年第7期32卷 775-782页

作者：段志强许厚强赵佳福陈祥罗霂榃贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵阳550025

BLM解旋酶是人Rec Q DNA解旋酶家族重要成员之一,在机体的DNA复制、重组、损伤修复以及维护基因组稳定性等方面发挥重要作用。早期研究表明,BLM解旋酶通过自身携带的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)进入细胞核,但是介导其... 详细信息

BLM解旋酶是人Rec Q DNA解旋酶家族重要成员之一,在机体的DNA复制、重组、损伤修复以及维护基因组稳定性等方面发挥重要作用。早期研究表明,BLM解旋酶通过自身携带的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)进入细胞核,但是介导其细胞核定位的关键氨基酸位点尚不清楚。本研究构建了BLM解旋酶C端(aa642-1417)截短体克隆,首先通过截短表达的方法确证其NLS结构域。在此基础上,构建重组真核表达载体p EGFP-NLS/BLM-NES/Rev,通过观察BLM NLS碱性氨基酸位点突变对EGFP-NLS/BLM-NES/Rev融合蛋白细胞核定位的影响,以此快速鉴定NLS中介导BLM解旋酶细胞核定位的关键氨基酸位点。结果表明,BLM(aa642-1417)C端截短体具有与全长BLM解旋酶相同的细胞核定位,同时确证1344RSKRRK1349是BLM解旋酶NLS结构域的活性位点,且具有与SV40 NLS相同的核输入能力。氨基酸位点突变试验结果表明,R1344A、K1346A、R1348A和K1349A点突变均减少了EGFP-NLS/BLM-NES/Rev和EGFP-BLM(642-1417)融合蛋白的细胞核定位。因此,这4个位点是介导BLM解旋酶细胞核定位的关键氨基酸位点。此结果为后续研究BLM解旋酶细胞核定位的分子机制奠定了基础。

关键词： BLM解旋酶细胞核定位核定位信号分子机制

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新城疫病毒M蛋白细胞核定位的机制与功能研究进展

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畜牧兽医学报 2021年第4期52卷 891-898页

作者：段志强谢玲玲周迪王燕碧赵采芹唐宏贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省种畜禽种质测定中心贵阳550018

新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)M蛋白一种非糖基化膜相关蛋白,主要位于病毒囊膜内表面,构成了病毒囊膜和核衣壳连接的支架。研究表明,M蛋白是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白。在NDV感染早期,M蛋白可通过自身携带的核定位信号进... 详细信息

新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)M蛋白一种非糖基化膜相关蛋白,主要位于病毒囊膜内表面,构成了病毒囊膜和核衣壳连接的支架。研究表明,M蛋白是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白。在NDV感染早期,M蛋白可通过自身携带的核定位信号进入细胞核。根据已报道的相关RNA病毒M蛋白功能的研究结果,推测NDV M蛋白早期的细胞核定位有利于细胞质中病毒基因组的复制和转录,并且可能会抑制细胞基因的转录和蛋白质合成。目前,国内外对M蛋白的研究主要集中在M蛋白与NDV毒力和复制的关系以及以M蛋白为核心的病毒样颗粒形成机制和利用方面,而对M蛋白细胞核定位的机制和功能研究相对较少。鉴于M蛋白细胞核定位在NDV复制和致病过程中的重要作用,本文主要从NDV M蛋白的细胞定位特征、M蛋白细胞核定位的分子机制和功能方面进行阐述,以期为NDV M蛋白细胞核定位的功能及其作用机制研究提供理论参考。

关键词：新城疫病毒 M蛋白细胞核定位核定位信号基因转录

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5-脂氧合酶基因打靶小鼠及细胞核定位研究

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中国科学基金 2001年第1期15卷 19-22页

作者：陈新生王寅殷明第二军医大学药学院上海200433

简要介绍了5-脂氧合酶基因打靶小鼠模型的性质,在各种疾病模型中的表型,以及5-脂氧合酶细胞核定位研究的新进展。

关键词： 5-脂氧合酶基因打靶细胞核定位基因调控白三烯生物合成药物研制

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冠状病毒核衣壳蛋白细胞核定位特征的研究进展

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中国预防兽医学报 2009年第7期31卷 577-580页

作者：吕茂杰冯力陈建飞时洪艳中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

冠状病毒属于尼多病毒目（Nidovirales），冠状病毒科（Coronaviridae），冠状病毒属（Coronavirus）成员，为单股正链RNA病毒，根据其基凶组和抗原性的特征又分为3个群：第1群主要包括猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenterit... 详细信息

冠状病毒属于尼多病毒目（Nidovirales），冠状病毒科（Coronaviridae），冠状病毒属（Coronavirus）成员，为单股正链RNA病毒，根据其基凶组和抗原性的特征又分为3个群：第1群主要包括猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus，TGEV）、

关键词：冠状病毒属细胞核定位核衣壳蛋白特征猪传染性胃肠炎病毒正链RNA病毒冠状病毒科 virus

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水稻OsWrky基因的细胞核定位研究

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山东农业大学学报（自然科学版） 2002年第4期33卷 506-508页

作者：齐高燕郭泽建浙江大学生物技术研究所杭州310029

绿色荧光蛋白 (GFP)基因是一种被广泛应用的报告基因。为了了解克隆的水稻WRKY(OsWrky)基因的核定位性质 ,将OsWRKY与GFP基因融合 ,并构建在Ubiquitin启动子控制的pCambia130 1载体上 (pCU -OsWrkyGFP)。利用基因枪介导的方法将pCU -OsW... 详细信息

绿色荧光蛋白 (GFP)基因是一种被广泛应用的报告基因。为了了解克隆的水稻WRKY(OsWrky)基因的核定位性质 ,将OsWRKY与GFP基因融合 ,并构建在Ubiquitin启动子控制的pCambia130 1载体上 (pCU -OsWrkyGFP)。利用基因枪介导的方法将pCU -OsWrkyGFP导入洋葱内表皮后 ,荧光显微镜观察GFP的发光部位仅在细胞核内 ,而作为对照的没有融合OsWRKY基因的载体 (pCU -GFP)轰击后细胞质和细胞核中都有荧光。

关键词：水稻 OsWrky基因细胞核定位绿色荧光蛋白转录因子

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中期因子的细胞核定位及其对rRNA转录和细胞凋亡影响的研究

中期因子的细胞核定位及其对rRNA转录和细胞凋亡影响的研究

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作者：肖永陶浙江大学

学位级别：硕士

中期因子(midkine，MK)是一种多功能的肝素结合生长因子，分子质量约13kD，它在各种恶性肿瘤，如肝癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌、胰腺癌、Wilms肿瘤等中高度表达，在正常成人组织中几乎不表达。MK的表达量随着肿瘤的恶化而不断地升高，在... 详细信息

中期因子(midkine，MK)是一种多功能的肝素结合生长因子，分子质量约13kD，它在各种恶性肿瘤，如肝癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌、胰腺癌、Wilms肿瘤等中高度表达，在正常成人组织中几乎不表达。MK的表达量随着肿瘤的恶化而不断地升高，在肿瘤晚期或者后期的表达量要远远高于初期，而且在多种肿瘤患者的血液甚至尿液里也能检测到高表达的MK蛋白，提示MK可以成为肿瘤诊断的靶分子。关于MK在细胞内的定位，尚有不同的认识。有研究者发现，MK定位于细胞质中；也有研究者发现外源性的MK能够被L细胞内吞，然后转运进入细胞核中。因此对于MK的细胞精细定位，仍是值得深入探讨的问题。本研究利用MK与绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白，追踪MK在HepG2细胞内的定位，同时，利用免疫胶体金技术，研究其在细胞核中的精细定位。结果发现，MK能转移到细胞核，并在核仁大量富集。在核仁中，MK主要定位于致密纤维区(dense fibrillar component，DFC)和颗粒区(granular component，GC)，此外，在致密纤维区和纤维中心(the fibrillar center，FC)的交界处也有一定量的分布。由于核仁是核糖体rRNA转录和加工的重要场所，因此，我们运用荧光定量PCR等方法，研究了MK与核糖体RNA转录的关系，发现抑制MK的表达，能显著降低45S rRNA前体的转录，而增加MK的表达，则能发挥细胞的抗凋亡作用。肿瘤细胞的重要特点是无限增殖，因此蛋白质合成增加，需要加速rRNA的转录和加工。MK提高了HepG2细胞的rRNA转录，说明其与肝癌细胞的快速增殖有关。提示可以通过降低MK在癌细胞中的表达水平，实现治疗肿瘤的目的，这对于今后研发诊断和治疗肿瘤的试剂盒具有重要的意义。

关键词：中期因子细胞核定位核糖体RNA 转录

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Importinα5负向调控importinβ1介导的新城疫病毒M蛋白细胞核定位以及病毒的复制和致病性

Importinα5负向调控importinβ1介导的新城疫病毒M蛋白细胞核定...

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：段志强嵇辛勤赵佳福倪萌萌许海旭胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

引言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,是一种含有单股负链不分节段基因组的RNA病毒。M蛋白是NDV基因组编码分子量最小的一种病毒结构蛋白,构成了病毒RNP与囊膜连接的支架。与大多数副黏病毒M蛋... 详细信息

引言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,是一种含有单股负链不分节段基因组的RNA病毒。M蛋白是NDV基因组编码分子量最小的一种病毒结构蛋白,构成了病毒RNP与囊膜连接的支架。与大多数副黏病毒M蛋白一样,NDVM蛋白也是一种细胞核质穿梭蛋白,在抑制宿主细胞基因转录以及促进子代病毒粒子的组装和出芽方面有重要作用。早期的研究表明,

关键词：新城疫病毒副黏病毒细胞核定位 importin Importin

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Syne/SUN家族蛋白和动物发育——细胞核定位及染色体运动

Syne/SUN家族蛋白和动物发育——细胞核定位及染色体运动

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中国遗传学会“发育、遗传和疾病”研讨会

作者：徐人尔复旦大学发育生物学研究所

细胞核在细胞中的位置,是细胞发挥正常的生物学功能所必需的。在决定细胞核定位的众多力量中,细胞骨架蛋白无疑起着决定性的作用。那么,细胞核又是如何与细胞骨架联系在一起的呢?这里,我将向大家报告最近两年来,我们对细胞核—细胞骨架... 详细信息

细胞核在细胞中的位置,是细胞发挥正常的生物学功能所必需的。在决定细胞核定位的众多力量中,细胞骨架蛋白无疑起着决定性的作用。那么,细胞核又是如何与细胞骨架联系在一起的呢?这里,我将向大家报告最近两年来,我们对细胞核—细胞骨架之间的连接“横杆”——Syne/SUN 家族蛋白的功能研究方面所获得的一些新进展和新认识。骨骼肌细胞为合胞体,含数百具有特定细胞内分布的细胞核。这些细胞核的特殊定位被认为对肌细胞正常功能很重要,但机理未知。运用小鼠遗传学方法,我们发现,肌细胞核正常定位与巨大蛋白分子 Syne-1及 Syne-2有关。Syne-1剔除小鼠中肌细胞核定位异常,包括神经突触下肌细胞核缺失。 Syne-2的过量表达也干扰突触下肌细胞核定位。神经突触下肌细胞核缺失导致运动神经分枝明显变长。 Syne-1和 Syne-2同时被敲除的小鼠则出生后很快因呼吸障碍而死亡。果蝇卵子发生(Oogenesis)过程中,滋养细胞(Nurse cell)的细胞质向卵细胞转移是卵细胞成熟所必须的, 滋养细胞间及滋养细胞与卵细胞间的特殊的细胞间通道-Ring Canal 是发生这种转移必不可少的,为避免 Ring Canal 通道不被阻塞,滋养细胞的细胞核被小心地定位在细胞的中央。运用果蝇生殖细胞嵌合体技术,我们的研究发现 MSP-300蛋白对滋养细胞核的正确定位起重要作用,MSP-300突变体中的卵子不能正常形成,细胞核定位及细胞骨架异常。在减数分裂前期Ⅰ,染色体的端粒与核膜相连,并聚集在核膜的一定区域上,同源染色体联会配对后,端粒从聚集区分散并重新分布在核周。染色体端粒这一明显的动态变化过程是真核生物中广泛存在的现象。但是相关的分子机制及其生物学功能长期来一直未能阐明。我们的研究发现,小鼠内核膜蛋白 Sun1蛋白是染色体端粒定位在核膜上所必须的。Sun1基因敲除小鼠中,端粒无法定位在核膜上, 同源染色体不能正常联会,导致小鼠精子发生和卵子发生停滞于减数分裂前期Ⅰ。SUN1蛋白在染色体端粒核膜定位及其动态变化中的所起的重要作用,对我们深入理解哺乳动物中端粒核膜定位的机制及其对减数分裂的影响有重要意义。

关键词：细胞核定位细胞骨架 Syne/SUN 神经突触滋养细胞染色体运动

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一种宫颈LCT图像的异常细胞核定位方法

一种宫颈LCT图像的异常细胞核定位方法

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作者：张见威朱林张珊珊胡振朋 511458 广东省广州市南沙区环市大道南路25号华工大广州产研院

本发明公开了一种宫颈LCT图像的异常细胞核定位方法，包括如下步骤：S1对宫颈LCT图像采用高斯差分算子进行运算，并进行灰度增强，得到仅含边缘信息的边缘图像；S2确定宫颈LCT图像融合边缘图像的权值；S3宫颈LCT图像与S2中得到权值相乘... 详细信息

标准号: CN103489188A

本发明公开了一种宫颈LCT图像的异常细胞核定位方法，包括如下步骤：S1对宫颈LCT图像采用高斯差分算子进行运算，并进行灰度增强，得到仅含边缘信息的边缘图像；S2确定宫颈LCT图像融合边缘图像的权值；S3宫颈LCT图像与S2中得到权值相乘，再与边缘图像相加，得到边缘淡化图像；S4采用视觉注意的方法处理边缘淡化图像，得到图像的显著区域，所述显著区域为异常细胞核区域。本发明通过原图像以一定权值与边缘图像相加的方法有效地增强了宫颈LCT图像中异常细胞核的显著程度，利用视觉注意模型则保证了可以快速准确地完成对宫颈LCT图像中异常细胞核区域的定位。

关键词：宫颈图像边缘图像细胞核区域淡化图像视觉注意细胞核细胞核定位边缘信息图像融合算子差分灰度运算

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