检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2000年第5期16卷 541-547页

作者：严绍颐中国科学院发育生物学研究所北京100080

介绍 6 0年代以来主要是中国在鱼类克隆研究中所获得的实验进展和成果 ,包括迄今只能在鱼类中得到的 ,具有发育“全能性”的核质杂种克隆鱼 ,和早在 80年代初中国就已报道过用体细胞核移植所获得的“克隆鱼” ,其记录要比“多莉羊”的... 详细信息

介绍 6 0年代以来主要是中国在鱼类克隆研究中所获得的实验进展和成果 ,包括迄今只能在鱼类中得到的 ,具有发育“全能性”的核质杂种克隆鱼 ,和早在 80年代初中国就已报道过用体细胞核移植所获得的“克隆鱼” ,其记录要比“多莉羊”的报道早 15年之久。本文还对过去 36年中所获得的有关实验结果进行了分析和讨论并试图联系其它“克隆动物“对其发展前景作些探讨。

关键词：鱼类细胞核移植中国继代移植电融合

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用改进的细胞核移植方法构建重构胚

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生物工程学报 2007年第1期23卷 161-165页

作者：吴克良时永香白增亮田海滨张楠刘兰兰刘昌彬山东大学生命科学学院济南250100

为了能够找出一种既容易操作,又不需要特殊设备的核移植方法,对以前的操作进行了改进。首先以预先吸有细胞核或细胞的注射针在固定于持卵针上的卵母细胞透明带上穿刺两个孔,然后一边缓慢地将注射针回拔至卵周隙中,一边逐渐增加持卵针中... 详细信息

为了能够找出一种既容易操作,又不需要特殊设备的核移植方法,对以前的操作进行了改进。首先以预先吸有细胞核或细胞的注射针在固定于持卵针上的卵母细胞透明带上穿刺两个孔,然后一边缓慢地将注射针回拔至卵周隙中,一边逐渐增加持卵针中的负压,直至极体与目标核质被完整吸入持卵针中而完成去核,最后在不拔出注射针的情况下直接注射细胞核或完整细胞进而完成重构胚的构建。用此方法对200个卵母细胞进行注核和注细胞操作,平均完成一个重构胚的构建各自耗时约40s和30s,成功率分别为62·6%和86·0%。用核染料Hoechst33342对卵母细胞的去核效率进行验证,去核成功率达到73·3%。实验证明,用此方法可以在只有倒置显微镜和显微操作仪的条件下一次性快速完成去核和注核,大大提高了细胞核移植的效率和重构胚成活率;更重要的是该方法操作简单,新手可以很快掌握该技术,易于在实际工作中推广应用。

关键词：细胞核移植重构胚去核注核

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鱼类细胞核移植研究进展及前景展望

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中国水产科学 2003年第4期10卷 338-344页

作者：沙珍霞陈松林刘洋唐启升中国水产科学研究院黄海水产研究所山东青岛266071

细胞核移植技术是目前生物技术领域研究的热点之一,其科学意义和应用价值重大。本文介绍了中国和世界上鱼类细胞核移植的研究成果及其最新进展;综述了鱼类细胞核移植的基本程序、方法和影响因素,包括胞质受体的准备、核供体的制备、核... 详细信息

细胞核移植技术是目前生物技术领域研究的热点之一,其科学意义和应用价值重大。本文介绍了中国和世界上鱼类细胞核移植的研究成果及其最新进展;综述了鱼类细胞核移植的基本程序、方法和影响因素,包括胞质受体的准备、核供体的制备、核移植和核质杂种的培养。并对鱼类细胞核移植的应用、现存问题及应用前景进行了讨论。

关键词：鱼类细胞核移植

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斑马鱼体细胞核移植—头肾细胞和尾鳍细胞核移入成熟具核卵子发育能力的初步研究

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青岛海洋大学学报（自然科学版） 2002年第1期32卷 73-78页

作者：李荔张士璀李红岩郭华荣青岛海洋大学海洋生命学院

将经直接消化的斑马鱼头肾细胞或经短暂培养的尾鳍细胞核移植到同种成熟具核卵子中 ,移核卵可发育到原肠晚期 ;将移核卵发育成的囊胚细胞核作供体进行第 2次核移植 ,受体卵可发育到尾芽期或肌肉感应期。流式细胞仪测定 DNA含量表明 ,受... 详细信息

将经直接消化的斑马鱼头肾细胞或经短暂培养的尾鳍细胞核移植到同种成熟具核卵子中 ,移核卵可发育到原肠晚期 ;将移核卵发育成的囊胚细胞核作供体进行第 2次核移植 ,受体卵可发育到尾芽期或肌肉感应期。流式细胞仪测定 DNA含量表明 ,受体卵发育形成的囊胚细胞 DNA含量与正常囊胚细胞 DNA含量相同 ,由此可知 ,移核卵中的雌原核没有参与移核胚胎的发育。

关键词：成熟具核卵子发育能力斑马鱼头肾细胞尾鳍细胞细胞核移植

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电激活对完全体外化牛细胞核移植的影响

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畜牧兽医学报 1996年第6期27卷 495-500页

作者：李雪峰谭丽玲石德顺谭世俭华南师范大学激光生命科学研究所广西农业大学动物繁殖研究室

牛卵母细胞在体外成熟２３～２４ｈ时去核，去核卵用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲激活（Ⅰ组）或不激活（Ⅱ组），然后将体外受精、发育的８～３２细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙，用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲诱导卵裂球与... 详细信息

牛卵母细胞在体外成熟２３～２４ｈ时去核，去核卵用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲激活（Ⅰ组）或不激活（Ⅱ组），然后将体外受精、发育的８～３２细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙，用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲诱导卵裂球与去核卵母细胞融合。Ⅰ组操作后存活率和融合率（８８．４％和５５．０％）显著低于Ⅱ组（９５．９％和６５．１％，Ｐ＜０．０５）。融合卵体外培养２４ｈ和５～８ｄ后，Ⅰ组核移植胚胎的卵裂率和桑椹／囊胚发育率（６３．０％和１５．２％）与Ⅱ组（５０．５％和７．８％）无显著差异，但Ⅰ组结果均好于Ⅱ组。将来自两组的２５枚桑椹和囊胚移植到１６头同期受体，在已检查过的８头受体中２头受体妊娠，其中１头于妊娠后４个多月流产，１头于妊娠期满后产出一雄性牛犊。研究结果表明：去核卵母细胞的电激活尽管对重组卵的存活与融合不利，但可改善核移植胚的卵裂和发育。本研究在我国首次获得牛细胞核移植的成功，证明用ＩＶＭ卵母细胞和ＩＶＦ胚胎进行完全体外化的牛细胞核移植是可行的。

关键词：电激活体外成熟体外受精细胞核移植牛

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家兔胚胎细胞核移植的研究

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中国农业科学 1993年第3期26卷 1-6+96页

作者：黄少华靳瞻群高昌恒赵晓霞蒙文柱朱裕鼎中国农业科学院畜牧研究所动物生物工程室中国农业科学院畜牧研究所动物生物工程室北京 100094

以兔8-16细胞的新鲜胚胎或冷冻-解冻胚胎的卵裂球作为细胞核供体,成熟的去核卵母细胞作为细胞核受体。经显微操作,将分离的单个卵裂球移入去核卵母细胞透明带内,制成322枚组合卵。对组合卵施加一个1200伏/cm(V/cm)和80微秒(μs)的直流... 详细信息

以兔8-16细胞的新鲜胚胎或冷冻-解冻胚胎的卵裂球作为细胞核供体,成熟的去核卵母细胞作为细胞核受体。经显微操作,将分离的单个卵裂球移入去核卵母细胞透明带内,制成322枚组合卵。对组合卵施加一个1200伏/cm(V/cm)和80微秒(μs)的直流电脉冲,使卵裂球的细胞核导入去核卵母细胞之中。由新鲜供体胚胎或冷冻-解冻供体胚胎与去核卵母细胞构成的组合卵的融合率分別为87.2%(251/288)和73.5%(25/34)。将部分已融合的细胞核移植(Nticlear Transplantation,NT)卵置于含10%胎犊血清(FCS)的TCM199培养液中,在充以5%CO2+空气的培养箱内,于39℃下培养20小时,新鲜供体胚胎和冷冻-解冻供体胚胎的NT卵发育至2-4细胞的分裂率分别为58.0%(47/81)和53.8%(7/13)。将53枚NT卵移入同步发情的5只受体母兔的输卵管内,结果一只母兔于妊娠笫33天经剖腹手术产出1只体重为70克雌性核移植仔兔。实验结果表明兔8-16细胞阶段的新鲜胚胎和冷冻-解冻胚胎均可在细胞核移植中用作细胞核供体。

关键词：兔胚胎显微操作电融合细胞核移植

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不同品系间斑马鱼的细胞核移植

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科学通报 2001年第24期46卷 2062-2065页

作者：胡炜汪亚平陈尚萍朱作言中国科学院水生生物研究所

以斑马鱼AB品系囊胚晚期胚胎细胞为细胞核供体,以斑马鱼长鳍品系未受精的去核卵为受体,进行不同品系间斑马鱼的细胞核移植.采用显微注射法,操作胚胎1119枚,获得克隆鱼14尾.RAPD分析显示,克隆鱼与细胞核供体鱼的DNA扩增带纹一致而与受体... 详细信息

以斑马鱼AB品系囊胚晚期胚胎细胞为细胞核供体,以斑马鱼长鳍品系未受精的去核卵为受体,进行不同品系间斑马鱼的细胞核移植.采用显微注射法,操作胚胎1119枚,获得克隆鱼14尾.RAPD分析显示,克隆鱼与细胞核供体鱼的DNA扩增带纹一致而与受体鱼不同,表明克隆鱼的遗传物质来源于供体细胞核.模式动物斑马鱼的细胞核移植技术的建立,有望在研究动物发育过程的基因功能、细胞核的发育潜能及核质关系等重要问题上发挥作用.

关键词：斑马鱼细胞核移植 DNA指纹发育生物学核质关系 PAPD分析克隆

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我国的鱼类细胞核移植

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海洋科学 2001年第3期25卷 25-27页

作者：李荔张士璀王洪海张福玲青岛海洋大学海洋生命学院 266003 威海市海珍品养殖总公司 264201

鱼类作为水产养殖业的一大支柱品种，其良种培育对提高鱼类产量至关重要。我国是鱼类养殖历史最悠久的国家之一，向来重视应用生物技术对养殖品种进行改良，其中最好的例子之一就是利用细胞核移植技术来创造鱼类优良品种。即使在生物技... 详细信息

鱼类作为水产养殖业的一大支柱品种，其良种培育对提高鱼类产量至关重要。我国是鱼类养殖历史最悠久的国家之一，向来重视应用生物技术对养殖品种进行改良，其中最好的例子之一就是利用细胞核移植技术来创造鱼类优良品种。即使在生物技术不断发展的今天，这一细胞核移植技术在鱼类新品种培育方面仍是一项很有潜在应用价值的技术。特别是把细胞核移植技术与现代生物技术相结合，有望创造出具有巨大经济价值的鱼类新品种。1　我国鱼类细胞核移植的成果　　细胞核移植是一种应用精细的显微操作，将一种动物的细胞核移植到同种或异种动物的去核成熟卵子胞质中的技术。该技术起初是为了通过对细胞核移植胚胎或后代各种性状的分析，来研究细胞核和细胞质的作用、两者间的相互关系以及细胞分化和全能性方面的理论问题。

关键词：鱼类细胞核移植生物技术育种

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兔胚胎细胞核移植重组胚的发育力

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中国兽医学报 2002年第2期22卷 194-197页

作者：桑润滋韩建永常万存仲跻峰河北农业大学动物科技学院河北保定071001 山东农业科学院生物技术中心山东济南250100

以兔为模型 ,对影响胚胎细胞核移植重组胚发育力的电融合与激活参数、体外培养系统进行了探索性研究。结果表明 ,有利于重组胚发育力的适宜电融合与激活参数为 2 0 0 V/ m m的电场强度、10 0μs的脉冲宽度 ;在不同的体外培养系统中 ,TCM... 详细信息

以兔为模型 ,对影响胚胎细胞核移植重组胚发育力的电融合与激活参数、体外培养系统进行了探索性研究。结果表明 ,有利于重组胚发育力的适宜电融合与激活参数为 2 0 0 V/ m m的电场强度、10 0μs的脉冲宽度 ;在不同的体外培养系统中 ,TCM- 199培养液内于兔胎儿成纤维细胞饲养层 (REF feeder)上共同培养的重组胚获得了最高的 2～ 4-细胞发育率和桑椹胚或囊胚的发育率 ,分别为 6 5 .7%和 2 2 .9%;移植 111枚重组胚给 9只假孕母兔 ,其中 2只妊娠 ,1只完成足月妊娠产出 2只克隆仔兔 ,另 1只在妊娠 2 2 d流产 1只克隆死胎。

关键词：兔胚胎细胞核移植克隆体外发育发育力重组胚

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不同纲动物间的细胞核移植——将小鼠细胞核移到泥鳅细胞质中

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生物工程学报 1998年第3期14卷 345-347页

作者：李书鸿毛钟荣韩文陈惠萍严绍颐夏仕铃戴世行中国科学院发育生物学研究所中国水产科学院珠江水产研究所四川省水产学校

我们以前的细胞核移植工作［１，２］表明：移核卵早期胚胎发育模式（主要指卵裂速度及卵裂模式）与受体卵相同，而与供体核种类无关；供体与受体之间亲缘关系的远近及染色体数目的差异程度，对移核卵囊胚以后的发育有重要影响，但对不... 详细信息

我们以前的细胞核移植工作［１，２］表明：移核卵早期胚胎发育模式（主要指卵裂速度及卵裂模式）与受体卵相同，而与供体核种类无关；供体与受体之间亲缘关系的远近及染色体数目的差异程度，对移核卵囊胚以后的发育有重要影响，但对不同组合间细胞核移植所得囊胚比例影响...

关键词：细胞核移植不同纲动物间小鼠泥鳅

来源：评论

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