检索结果-内蒙古大学图书馆

北京大学学报（医学版） 2001年第2期33卷 97-100页

作者：陈英玉孙荣华韩文玲张颖妹宋泉声狄春辉马大龙北京大学人类疾病基因研究中心北京100083

目的 :探讨凋亡相关分子TFAR19在TF 1细胞凋亡过程中的表达及定位。方法 :以TFAR19的单克隆抗体为工具 ,采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段 ,观察细胞凋亡过程中TFAR19分子的表达水平和细胞内定位 ,分析其与... 详细信息

目的 :探讨凋亡相关分子TFAR19在TF 1细胞凋亡过程中的表达及定位。方法 :以TFAR19的单克隆抗体为工具 ,采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段 ,观察细胞凋亡过程中TFAR19分子的表达水平和细胞内定位 ,分析其与细胞膜磷脂酰丝氨酸 (phosphatidylserine,PS)以及细胞核DNA片段化的关系。结果 :TFAR19蛋白在撤除GM CSF的TF 1细胞中表达水平显著增高 ,伴有明显的核转位现象 ,且早于PS外翻和细胞DNA片段化。结论 :TFAR19蛋白的核转位是细胞凋亡更早期发生的事件之一 ,这一新发现为进一步探讨TFAR19蛋白的生物学效应。

关键词： TFAR19 TF-1细胞细胞凋亡细胞核转位

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乙型肝炎病毒细胞核转位动态监测及HBV cccDNA荧光定量PCR分析研究

乙型肝炎病毒细胞核转位动态监测及HBV cccDNA荧光定量PCR分析研究

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作者：邵俊斌浙江大学

学位级别：博士

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)的生活周期可以分成以下几个阶段：病毒黏附宿主细胞；病毒穿透细胞膜，进入细胞；释放病毒基因组；表达病毒基因产物；复制病毒基因组；组装病毒病毒颗粒；释放病毒。与其它大部分病毒不同，HBV... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)的生活周期可以分成以下几个阶段：病毒黏附宿主细胞；病毒穿透细胞膜，进入细胞；释放病毒基因组；表达病毒基因产物；复制病毒基因组；组装病毒病毒颗粒；释放病毒。与其它大部分病毒不同，HBV基因组还会从细胞浆穿越核膜进入细胞核。HBV细胞核转位机制包括HBV从胞浆进入胞核和从胞核进入胞浆两个方面，有关这方面的研究已有二十余年，但仍未能形成统一见解。主要的焦点是HBV核衣壳是否进入细胞核。Kamimura，Mc Caul TF、Yamaguchi等通过电镜技术，发现HBV核衣壳可以通过细胞核孔从细胞核内移行到细胞浆中，并且发现核衣壳绝大多数定位在细胞核内，在胞浆中极少。核衣壳从细胞核到细胞浆的转位是通过细胞核孔；转位位点位于细胞核孔中心。与上述报道有分歧的研究认为，核孔直径最大只有25nm,而核衣壳直径在30～35nm，因此核衣壳直接通过核孔的可能性不大，Guiddtti LG等报道核心蛋白转基因小鼠肝细胞中，核衣壳绝大部分定位在细胞核中，只有当肝细胞处于有丝分裂期时，核衣壳才能从核内转到胞浆中，他们研究发现无论从胞核到胞浆，还是从胞浆到胞核，HBV核衣壳均不能穿越。HBV基因组核转位进入细胞核是HBV在肝细胞内复制的重要环节。本研究第一部分采用细胞生物学技术和同位素示踪技术分析HBV核衣壳蛋白、基因组在HBV侵入肝细胞过程中的定位及动态变化，并阐明在HBV穿越细胞核膜过程中，核衣壳蛋白是否需要先蜕去这个问题。 HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular，cccDNA)是HBV复制过程中最为关键的中间体形态。HBV基因组在聚合酶作用下将部分双链开环结构补足成完整双链开环结构，然后在细胞核内连接酶作用下把双链中原先存在的缺口补平，形成共价闭合环状DNA结构，也就是cccDNA。HBV cccDNA在细胞核内RNA聚合酶作用下，转录产生多种RNA，其中中间体RNA是形成子代HBV Dane颗粒前提RNA。从病毒生活周期分析，HBV cccDNA是病毒复制以及致病机理的关键所在。此外，HBV cccDNA可与细胞核内的核蛋白结合，形成稳定的微染色体(mini一chromosome)结构，抗病毒药物很难清除它。由于肝细胞往往处在细胞复制周期的G。期，降解HBV cccDNA很难，所以它的自然半衰期就比较长。除HBV基因组整合外，目前临床应用的抗HBV药物和正在研究的治疗乙肝药物的最迫切需要解决的就是消除HBV cccDNA，但是目前没有便捷、准确、灵敏度高的方法可以供临床动态监测HBV cccDNA。Southen blot是检测 HBV cccDNA的经典方法，但是该方法过程比较复杂，操作可控性比较差，而且灵敏度不高。Addison等发展了一种能相对定量DHBV的竞争PCR方法，虽然该方法灵敏度有了提高，但是在整个操作过程中仍需进行凝胶电泳、转膜和32P标记的同位素探针杂交。PCR技术是非常灵敏、便捷的方法，但是由于HBV ccoDNA 与其它HBV DNA形态非常接近，很难设计出仅仅扩增HBV。 ccDNA而不扩增其它HBV DNA的PCR方法。本研究第二部分设计了一条特殊的嵌合引物，在该引物的5’端加入与HBV 基因组无关的序列，在通过一次单链延伸反应和一次实时荧光定量PCR程序，成功把HBV。ccDNA和非cccDNA形态的其它HBV开环DNA结构区分开，并通过荧光探针杂交，实现高灵敏度、实时定量检测。论文一乙型肝炎病毒细胞核转位动态监测一、HBV短期感染细胞制备为研究HBV生活周期中病毒细胞核转位过程，需建立HBV感染细胞模型。HepGZ 细胞是人肝癌细胞株，无HBV基因组污染，生长速度快。根据文献报道，在DMSO 和一些细胞因子存在下，可以增强对HBV易感性，并且更适合HBV在细胞内复制和表达。 HepGZ细胞长至细胞培养瓶80%面积时，进行细胞收集，并

关键词：乙型肝炎病毒细胞核转位同位素 2.2.15细胞 HePG2细胞

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神经肽受体PAC1-R别构调节介导受体细胞核转位上调其特异配体PACAP机制的探索

神经肽受体PAC1-R别构调节介导受体细胞核转位上调其特异配体PACA...

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作者：林卓超暨南大学

学位级别：硕士

目的:神经肽垂体腺苷酸环化酶激活多肽受体1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide receptor 1,PAC1-R)作为神经肽垂体腺苷酸环化酶激活多肽(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)的特异受体,介导PACAP显著的抗氧化、抗炎症、抗凋亡、细胞保护等主要生物学功能。已有研究发现:1)PAC1-R正向小分子别构调节剂SPAM1和短肽TAT能模拟PACAP(28-38)结合到PAC1-R的N端胞外域PAC1-EC1的别构调节位点,并可诱导PAC1-R细胞核转位;2)小分子SPAM1和短肽TAT可有效上调PACAP的表达;本研究拟通过研究PAC1-R别构调节诱导PAC1-R细胞核转位和上调PACAP表达水平之间的关系,验证神经肽受体PAC1-R别构调节介导受体细胞核转位上调其特异配体PACAP表达的机制的存在,并尝试探索机制的细节。方法:(1)本研究借助计算机分子对接分析小分子SPAM1和短肽TAT结合到PAC1-R的结合位点,并利用ITC检测它们与PAC1-EC1的亲和力。(2)生物信息学的方法获得编码人PACAP的ADCYAP1基因-2500/+26区域的共2526 bp的启动子序列信息,然后合成PACAP启动子片段并克隆到新型启动子报告载体pYr-Prom Detect,获得PACAP启动子双荧光素酶报告载体pYr-Prom Detect-PACAP;并检测PACAP启动子双荧光素酶报告系统在小鼠视网膜神经节细胞(Retinal ganglion cell 5,RGC-5)和仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO)中的活性。(3)利用高表达C端偶联增强绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescence Protein,e GFP)融合PAC1-R的CHO细胞(PAC1-e GFP-CHO)和天然高表达PAC1-R的RGC-5细胞,检测小分子SPAM1、TAT和PACAP(28-38)诱导PAC1-R细胞核转位,以及对PACAP启动子活性和PACAP表达水平的影响,分析相关性。(4)探究氧化应激抑制剂N-乙酰半胱氨酸(Acetylcysteine,NAC)和棕榈酰化抑制剂2-溴十六烷酸(2-bromopalmitate,2-BP)对PAC1-R细胞核转位以及对PACAP启动子活性的调控和PACAP蛋白表达水平的影响,分析相关性。(5)通过染色质免疫共沉淀法(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)结合PCR技术验证PAC1-R细胞核转位后通过其C端有效结合PACAP启动子相关序列。结果:(1)计算机分子对接结果显示小分子SPAM1和短肽TAT模拟PACAP(28-38)结合PAC1-R胞外域PAC1-EC1的别构调节位点;ITC结果显示小分子SPAM1和短肽TAT与PAC1-EC1亲和力与PACAP(28-38)相似。(2)成功构建高效的PACAP启动子新型报告载体pYr-Prom Detect-PACAP;并在神经细胞RGC-5细胞与非神经细胞CHO细胞中验证PACAP启动子双荧光素酶报告系统的活性,确证PACAP启动子双荧光素酶报告系统在RGC-5细胞中有效运作,显示PACAP启动子新型报告系统成功构建。(3)SPAM1(1 u M)、TAT(1 u M)和PACAP(28-38)(1 u M)均可诱导细胞核内PAC1-R信号上调,提示SPAM1、TAT和PACAP(28-38)均可诱导PAC1-R细胞核转位。(4)SPAM1(0.01 u M～100 u M)、TAT(0.01 u M～100 u M)和PACAP(28-38)(0.01 u M～100u M)有效激活PACAP启动子活性,且低浓度(≤1 u M)的激活效果较强,随着作用浓度的增加,激活效果反而减弱;此结果与ELISA检测PACAP蛋白水平表达趋势相吻合,提示SPAM1、TAT和PACAP(28-38)有效上调PACAP启动子活性与PACAP表达水平。(5)细胞核内PAC1-R信号上调可被NAC或2-BP抑制,显示PAC1-R别构调节诱导的PAC1-R细胞核转位可被NAC或2-BP抑制;同时,NAC和2-BP同步有效抑制由SPAM1、TAT和PACAP(28-38)诱导PACAP启动子活性以及PACAP表达水平的上调,提示SPAM1、TAT和PACAP(28-38)诱导细胞核转位和PACAP表达水平上调呈现正相关关系。(6)SPAM1诱导PAC1-R细胞核转位后,采用靶向PAC1-R的C端的抗体进行ChIPPCR,利用靶向PA

关键词：神经肽垂体腺苷酸环化酶激活多肽神经肽垂体腺苷酸环化酶激活多肽受体1 别构调节细胞核转位启动子双荧光素酶报告系统染色质免疫共沉淀

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血管生成素基因组结合序列的筛选与鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2015年第12期31卷 1294-1301页

作者：盛静浩许正平浙江大学医学院环境医学研究所浙江大学医学院分子医学研究中心杭州310058

血管生成素(angiogenin,ANG)调控细胞增殖、迁移、分化等生物学过程,但其作用的分子机制尚未完全明了.目前认为,ANG可结合到r DNA区域促进r RNA转录,也可能与m RNA有结合.为全面鉴定细胞内可结合ANG的基因组序列,我们利用染色质免疫共... 详细信息

血管生成素(angiogenin,ANG)调控细胞增殖、迁移、分化等生物学过程,但其作用的分子机制尚未完全明了.目前认为,ANG可结合到r DNA区域促进r RNA转录,也可能与m RNA有结合.为全面鉴定细胞内可结合ANG的基因组序列,我们利用染色质免疫共沉淀结合DNA芯片技术(Ch IP-chip)对He La细胞的基因组DNA进行了筛选,共获得了1 248个结合片段.我们进一步分析了这些结合片段附近分布的基因,发现有699个可能受ANG结合调控的基因.基因注释和聚类分析显示,这些可能受ANG调控的基因主要与肿瘤发生发展有关(特别是结直肠癌和前列腺癌),并且与TGF-β和Wnt信号通路相关.最后,我们验证了ANG不仅与WNT6、CCNE1、APC2、FZD8和EGFR基因的启动子区域有直接结合,而且调控其表达.以上研究结果为深入研究ANG的功能机制提供了线索.

关键词：血管生成素染色质免疫共沉淀 DNA芯片转录调控细胞核转位

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重组人血管生成素制备和生物活性鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2015年第12期31卷 1315-1321页

作者：孙德森盛静浩浙江大学医学院环境医学研究所浙江大学医学院分子医学研究中心杭州310058

血管生成素(angiogenin,ANG)是一种很强的促血管生成因子,与肿瘤的发生发展有着密切的关系,拮抗ANG被认为是抗肿瘤血管靶向治疗的一个有效途径.同时,ANG具有促进伤口愈合、保护神经元以及抗细菌感染等活性.但是,开展相关研究所需的最基... 详细信息

血管生成素(angiogenin,ANG)是一种很强的促血管生成因子,与肿瘤的发生发展有着密切的关系,拮抗ANG被认为是抗肿瘤血管靶向治疗的一个有效途径.同时,ANG具有促进伤口愈合、保护神经元以及抗细菌感染等活性.但是,开展相关研究所需的最基本的天然ANG蛋白来源非常有限,大规模表达和纯化有生物活性的重组血管生成素蛋白(r ANG)具有广泛的应用前景.我们可以在大肠杆菌中表达r ANG,但表达产物在胞内聚集形成不溶性的包含体,需经变性、复性、阳离子交换层析和反向C18的HPLC方法纯化后,才能获得高纯度的r ANG.经SDS-PAGE鉴定,纯化蛋白质为单一条带,质谱鉴定蛋白分子量与理论分子量一致.经体外活性检测,证实纯化的蛋白质具有核糖核酸酶活性、促内皮细胞管腔形成和细胞核转位等生物学活性.本文详细描述了r ANG的表达、纯化、活性鉴定等过程和所使用的方法与技术.

关键词：血管生成素原核表达核糖核酸酶活性管腔形成细胞核转位

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pAkt在衰老细胞中的核转位

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第1期25卷 45-49页

作者：赵磊谢步善韩秀丽陈丽婷何维清毛泽斌北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100191

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB,又称为Akt)/叉头转录因子(FOXO)信号通路在从酵母菌到小鼠的寿命以及衰老的调节上都起着非常重要的作用.有研究发现,血清可以激活年轻细胞、衰老细胞胞浆内的Akt,并且年轻细胞核内磷酸化Akt(pAkt... 详细信息

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB,又称为Akt)/叉头转录因子(FOXO)信号通路在从酵母菌到小鼠的寿命以及衰老的调节上都起着非常重要的作用.有研究发现,血清可以激活年轻细胞、衰老细胞胞浆内的Akt,并且年轻细胞核内磷酸化Akt(pAkt)增多,而衰老细胞核内pAkt没有增多.为了研究衰老细胞膜是否发生转位受损,即pAkt能否通过衰老细胞核膜进入核内,通过激光共聚焦显微镜(CLSM)、Western印迹等实验方法,发现衰老细胞胞浆中pAkt可以进入核内,进入核内的pAkt很快被去磷酸化灭活.

关键词： PI3K/Akt通路 Akt 衰老细胞细胞核转位

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氧化应激条件下肺癌细胞中S100A16核转位促进核糖体生成的研究

氧化应激条件下肺癌细胞中S100A16核转位促进核糖体生成的研究

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作者：赫明扬中国医科大学

学位级别：硕士

目的:肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。根据病理分型,肺癌可分为非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)。肺癌的发生与吸烟、职业暴露、空气污染及肺部感染性疾病有关,但确切的机制尚不明确。因此,了解肺癌的发病机制对于疾... 详细信息

目的:肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。根据病理分型,肺癌可分为非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)。肺癌的发生与吸烟、职业暴露、空气污染及肺部感染性疾病有关,但确切的机制尚不明确。因此,了解肺癌的发病机制对于疾病的早期诊断具有重要意义。研究表明在肺癌发生发展过程中,肺癌细胞对于氧化应激呈现出“两面性”,一方面在肺癌发生的早期,氧化应激可以诱导肺癌的发生,促进细胞的增殖;另一方面在肺癌的进展期,肺癌细胞则表现出很强的抗氧化应激能力,进而抵抗细胞凋亡及对化疗药物产生耐药性。因此探讨肺癌细胞对氧化应激刺激的抵抗效应有助于了解肺癌的恶性进程以及对放化疗抵抗的机制。前期工作中发现,肺癌细胞高表达S100家族蛋白——S100A16,且与肺癌细胞转移入脑后的生存活力相关。S100家族蛋白是应激蛋白,有文献报道其参与急性及慢性炎症应激反应,而且与诸多肿瘤的发生、发展密切相关。作为S100家族的一员,有关S100A16的研究是有限的,有研究表明,在乳腺癌细胞中,S100A16可以上调Notch1,ZEB1,ZEB2的表达,诱导乳腺癌细胞发生上皮细胞间质化改变,促进乳腺癌的侵袭和转移;在胶质瘤细胞的细胞质中S100A16可以感知细胞内Ca信号的变化,从细胞核内进入细胞质参与细胞骨架结构的重构;S100A16可以在肺腺癌细胞膜上表达,其表达水平与肺腺癌的预后相关。这些研究结果提示S100A16具有功能的多样性,其功能的发挥与其在细胞内的定位密切相关。本研究以S100A16为研究对象,探讨在氧化应激条件下S100A16在肺癌细胞内的表达及细胞内蛋白质定位的转变,以及这种转变对肺癌细胞生物学表型的影响。我们试图探明S100A16介导的保护性机制如何帮助肺癌细胞抵抗氧化应激的损伤及可能的机制,为阐明肺癌的发生发展机制具有一定的研究价值。研究方法:*** blot检测不同病理类型的肿瘤细胞中S100A16蛋白表达情况。2.给予过氧化氢(HO)刺激,分析氧化应激条件下肺癌细胞NCI-H446及A549细胞内S100A16表达变化情况。3.利用细胞组分分离试剂盒,对NCI-H446细胞及A549细胞进行不同细胞组分分离(细胞质和细胞核)利用western blot分析不同组分中S100A16的表达情况;免疫荧光后用激光共聚焦显微镜观察氧化应激条件下S100A16在细胞内定位情况;利用双重免疫荧光染色,观察S100A16与细胞核仁标志分子FBL共定位情况。4.构建表达GST-S100A16融合蛋白的原核表达系统,利用亲和层析分离的方法纯化GST-S100A16融合蛋白,利用GST Pull Down结合免疫共沉淀方法(Co-IP)捕获能够与S100A16结合蛋白,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后选取差异电泳条带,进行蛋白质谱分析,获得在氧化应激条件下能够与S100A16互作并且与之发生核转位有关的候选蛋白P95。5.利用GST Pull Down和Co-IP技术验证S100A16与P95蛋白互作;免疫荧光实验验证二者在氧化应激条件发生互作。6.利用RNAi技术下调P95表达,观察氧化应激条件下S100A16是否发生细胞内定位改变。7.实时荧光定量PCR分析S100A16进入细胞核后对核糖体合成的影响,实时荧光定量PCR分析47s表达变化情况。实验结果:*** blot结果表明S100A16在肺腺癌A549和小细胞肺癌细胞NCI-H446及NCI-H1688中表达明显,而在其他肿瘤细胞(大细胞肺癌细胞NCI-H460,小细胞肺癌细胞NCI-H209及卵巢癌细胞CAVO3)中几乎无表达;为此,本研究选取A549细胞和NCI-H446细胞作为进一步的研究对象。2.以脑微血管内细胞(HBMEC)为对照,给予HO(50uM)2小时处理,western blot结果表明,给予HO处理的NCI-H171细胞与A549细胞内S100A16的表达水平明显增加,而在正常HBMEC组S100A16表达无明显改变。3.分离HO刺激前后的肺癌细胞NCI-H446和A549不同的细胞组分,利用western blot方法检测细胞质和细胞核中S100A16的含量,结果表明HO刺激可以减少S100A16在细胞质中的含量,增加细胞核内的含量,这提示S100A16发生了细胞内位置的转变,可能由细胞质进入到细胞核内;进一步利用免疫荧光的方法观察在HO刺激条件下S100A16在肺癌细胞内的分布情况,结果表明HO可以诱导S100A16由细胞质转位进入细胞核;并且入核的S100A16明显定位于核仁区。4.成功地构建了GST-S100A16融合蛋白的原核表达系统,利用亲和层析分离的方法获得了GST-S100A16融合蛋白,GST Pull Down在肺癌细胞内寻找在

关键词： S100A16 肺癌细胞氧化应激细胞核转位核糖体

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黄连素抗食管癌EC109细胞的作用及其机制

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临床与病理杂志 2017年第12期37卷 2524-2529页

作者：刘红岗赖远阳朱以芳同李平董小平许娟张勇郭海华李小飞闫小龙第四军医大学唐都医院胸外科西安710038

目的:研究黄连素(berberine,BBR)的抗食管癌作用及其机制。方法:给予50,100,200μmol/L BBR处理EC109细胞24 h,检测EC109细胞的活力及迁移能力。Western印迹检测pAkt,蛋白激酶B(protein kinase B,Akt),叉头转录因子O3(forkhead Class box O3,FOXO3),B淋巴细胞瘤-2(B-cel l lymphoma-2,bcl-2)及Bax的表达水平,特别是FOXO3的细胞核转位情况。建立裸鼠皮下肿瘤模型,腹腔注射BBR,明确BBR的抗食管癌作用。结果:BBR处理EC109细胞后,细胞活力下降,划痕实验检测细胞间距增大(P<0.05)。BBR降低了Akt的磷酸化水平,pAkt/总Akt下降;细胞质内的FOXO3下降;细胞核内的FOXO3升高;bcl-2表达水平下降;Bax则显著升高。在体研究发现BBR剂量依赖地抑制了肿瘤生长。结论:BBR能显著抑制食管癌EC109细胞的增殖、迁移以及在体增殖能力,该作用可能是通过抑制Akt磷酸化水平、增加FOXO3细胞核转位进而促进细胞凋亡来实现的。

关键词：黄连素食管癌蛋白激酶B 叉头蛋白转录因子3 细胞核转位细胞凋亡

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嗜铬颗粒蛋白B与热休克同源蛋白70相互作用的研究

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首都医科大学学报 2005年第6期26卷 699-702页

作者：油红捷王泽生首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系

目的分离和鉴别在肾上腺髓质嗜铬颗粒细胞分泌囊泡中,与嗜铬颗粒蛋白B(CgB)相互作用的蛋白质。方法采用蛋白质捕获、免疫共沉淀和质谱等技术进行研究。结果在嗜铬颗粒细胞内,CgB与热休克同源蛋白70(Hsc70)相互作用。一个Hsc70结合序列... 详细信息

目的分离和鉴别在肾上腺髓质嗜铬颗粒细胞分泌囊泡中,与嗜铬颗粒蛋白B(CgB)相互作用的蛋白质。方法采用蛋白质捕获、免疫共沉淀和质谱等技术进行研究。结果在嗜铬颗粒细胞内,CgB与热休克同源蛋白70(Hsc70)相互作用。一个Hsc70结合序列定位在CgB的羧基末端区(Ser586-Arg602,SR-17),而且SR-17内的Ser595磷酸化可增强其与Hsc70结合。磷酸化修饰的SR-17可从ATP-Sepharose上洗脱Hsc70。用免疫印迹和免疫组化方法可证实CgB和Hsc70均存在于嗜铬颗粒细胞的胞质和细胞核中。结论Hsc70可能参与CgB的细胞核转位过程。

关键词：嗜铬颗粒蛋白B 热休克同源蛋白70 磷酸化修饰细胞核转位

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谷氨酸作用下神经元凋亡诱导因子核转移

谷氨酸作用下神经元凋亡诱导因子核转移

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第六次全国中西医结合神经科学术会议

作者：许康柯贤军郭珍立湖北省新华医院湖北省脑科中心神经内科(湖北 430015)

目的：研究体外培养的皮质神经元在谷氨酸作用下,其凋亡诱导因子向细胞核转位的情况。方法：用谷氨酸诱导体外培养的皮质神经元凋亡,用免疫荧光指示热休克蛋白60和AIF的亚细胞分布,4',6-二脒-2-苯基吲哚显示细胞核,并根据DAPI... 详细信息

目的：研究体外培养的皮质神经元在谷氨酸作用下,其凋亡诱导因子向细胞核转位的情况。方法：用谷氨酸诱导体外培养的皮质神经元凋亡,用免疫荧光指示热休克蛋白60和AIF的亚细胞分布,4',6-二脒-2-苯基吲哚显示细胞核,并根据DAPI显示的细胞核形态及其位置判断细胞凋亡。结果：所有神经元都表达AIF,正常情况下,AIF分布在线粒体,谷氨酸处理后,AIF从线粒体释放,并可转位到细胞核,部分细胞可能发生凋亡。结论：谷氨酸可引起凋亡诱导因子从线粒体释放并向细胞核转位,同时可诱导体外培养的原代皮质神经元凋亡。

关键词：凋亡诱导因子谷氨酸神经元细胞核转位线粒体释放免疫荧光

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