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细胞毒性t细胞、巨噬细胞和调节性t细胞在复发性宫颈癌患者中的免疫特征分析

免疫学杂志 2020年第7期36卷 617-622页

作者：丁燕司天斌王雨村崔静甘肃省肿瘤医院妇瘤二科兰州750050

目的探讨毒性t细胞(CtL)、巨噬细胞(tAMs)和调节性t细胞(tregs)在复发性宫颈癌患者中的免疫特征。方法收集复发性宫颈癌细胞及癌旁细胞,利用白细胞分化抗原8(CD8)、簇分化抗原68(CD68)、叉头翼状螺旋转录因子(FoxP3)分别表示CtL、tAMs和... 详细信息

目的探讨毒性t细胞(CtL)、巨噬细胞(tAMs)和调节性t细胞(tregs)在复发性宫颈癌患者中的免疫特征。方法收集复发性宫颈癌细胞及癌旁细胞,利用白细胞分化抗原8(CD8)、簇分化抗原68(CD68)、叉头翼状螺旋转录因子(FoxP3)分别表示CtL、tAMs和tregs在复发性宫颈癌中的免疫特性,程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)和程序性死亡配体1(PD-L1)表示癌细胞自身免疫,通过多重免疫荧光板检测细胞中CD8^+、CD68^+、FoxP3^+表达量,RNA免疫共沉淀法分析其在复发性宫颈癌细胞中的免疫特性。结果在肿瘤及肿周组织中CD8^+、CD68^+、FoxP3^+表达均较高,但肿周组织中FoxP3^+更高;高表达的FoxP3^+与CD8^+、CD68^+有显著相关性,可促进CD8^+、CD68^+凋亡而上调PD-L1、PD1表达。结论tregs可对肿瘤组织中的CtL和tAM进行调节,可提高宫颈癌细胞的免疫应答。

关键词：细胞毒性t细胞巨噬细胞调节性t细胞复发性宫颈癌免疫特征

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细胞毒性t细胞联合PD-L1单抗对肺癌免疫治疗的实验研究

细胞毒性T细胞联合PD-L1单抗对肺癌免疫治疗的实验研究

引用

作者：连增志苏州大学

学位级别：硕士

第一部分细胞毒性t细胞联合PD-L1单抗对肺癌作用的体外研究目的:通过诱导细胞毒性t淋巴细胞(cytotoxic t lymphocyte ,CtL),观察CtL单独或联合PD-L1单抗对肺癌细胞的体外杀伤作用。方法:采用70%Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心法获得... 详细信息

第一部分细胞毒性t细胞联合PD-L1单抗对肺癌作用的体外研究目的: 通过诱导细胞毒性t淋巴细胞(cytotoxic t lymphocyte ,CtL),观察CtL单独或联合PD-L1单抗对肺癌细胞的体外杀伤作用。方法: 采用70%Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心法获得外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),培养2小时后贴壁细胞采用含GM-CSF(100μg/L)、IL-4(50μg/L)、10%FCS的RPMI1640诱导树突状细胞(dendritic cells ,DCs),培养第6天,采用凋亡的H1299肺癌细胞进行肿瘤抗原负载(DCs:凋亡细胞=5:1),24 h后加入激发型CD40单克隆抗体(5mg/L)继续诱导2d,收集诱导成熟的DCs与自体t细胞按1:50的比例混合共育4天,获得相关抗原特异性的CtL细胞;用流式细胞仪检测CtL细胞表型;四甲基偶氮唑蓝(MMt)法测定CtL及CtL联合PD-L1单抗对肿瘤细胞的细胞毒作用;用Annexin-V、PI双染检测CtL单独及联合PD-L1单抗作用于H1299细胞的凋亡作用,Annexin-V联合CD3-PE单抗检测H1299细胞单独或联合PD-L1单抗对CtL细胞的凋亡作用;ELISA法检测不同组别CtL和H1299共培养上清液中IFN-γ,IL-2浓度。结果: 1.凋亡肿瘤细胞负载并经CD40激发型单抗5C11诱导分化成熟的DCs表面CD1α、CD83、HLA-DR表达上调(P<0.05);2.与单独CtL组相比,CtL联合PD-L1单抗实验组能够更有效杀伤H1299细胞并能有效地诱导H1299细胞凋亡,CtL组及CtL联合PD-L1单抗组H1299凋亡率分别为(41.9±9.8) %、(63.2±11.7) % ,两者差异有统计学意义(P<0.05);进一步研究发现PD-L1单抗联合CtL细胞促进CtL细胞分泌IL-2(162.3±20)pg/ml,与单纯CtL组(115.38±12.23)pg/ml相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论: 1.采用成熟凋亡肿瘤细胞负载的DC获得的CtL可有效杀伤H1299肺癌细胞,联合PD-L1单抗较单独CtL更为有效的杀伤肺癌细胞; 2.通过上述方法获得的CtL在H1299细胞作用下发生凋亡作用,联合PD-L1单抗可抑制H1299诱导的CtL细胞的凋亡; ***联合PD-L1单抗可促进CtL细胞分泌IL-2。第二部分细胞毒性t细胞联合PD-L1单抗对肺癌作用的体内研究目的: 观察细胞毒性t细胞单独或联合PD-L1单抗对裸鼠肺癌移植瘤模型的免疫治疗作用。方法: 建立人肺癌裸鼠异种移植瘤模型,荷瘤裸鼠随机分为4组:1.生理盐水治疗组;2. PD-L1单抗治疗组;3. CtL治疗组;4. CtL联合PD-L1单抗治疗组,观察荷瘤裸鼠体内肿瘤生长情况及体积大小;检测裸鼠血清中IL-10,IL-2水平的变化。结果: 1.在第51天,生理盐水治疗组、PD-L1组、CtL组、CtL+PD-L1单抗联合组荷瘤裸鼠肿瘤体积分别为(1.39±0.63)cm3、(1.53±0.71 )cm3、(0.63±0.26 )cm3和(0.16±0.03)cm3;CtL组、CtL+PD-L1单抗联合组肿瘤生长明显受抑制,与生理盐水组,PD-L1组相比,差异有统计学意义(P<0.05);CtL联合PD-L1单抗组比CtL组肿瘤体积缩小更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。 2.生理盐水治疗组、PD-L1组、CtL组、CtL+PD-L1单抗联合组IL-2水平分别为(160.5±44.9)pg/ml、(133.4±46.2)pg/ml、(321.1±24.1)pg/ml、(469.4±8.5)pg/ml,CtL组和CtL联合PD-L1单抗组IL-2水平明显升高,与生理盐水组,PD-L1组比较,差异有统计学意义(P<0.05);IL-10水平分别为(556.4±94.5)pg/ml、(485.5±33.4)pg/ml、(335.9±27.3)pg/ml、(288.5±33.4)pg/ml,CtL组和CtL联合PD-L1单抗组IL-10水平明显降低,与生理盐水组、PD-L1组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论: CtL联合PD-L1单抗较CtL治疗组能有效抑制荷瘤裸鼠异种移植瘤的生长,肿瘤细胞分泌IL-10可能抑制了CtL的杀伤作用,PD-L1单抗可逆转此效应,促

关键词：树突状细胞肺癌细胞毒性t细胞程序性死亡配体-1 凋亡细胞毒性t细胞程序性死亡配体-1 白细胞介素-2 白细胞介素-10 裸鼠

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细胞毒性t细胞亚群及调节性t细胞在慢性乙型肝炎发病机制中的作用

细胞毒性T细胞亚群及调节性T细胞在慢性乙型肝炎发病机制中的作用

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作者：赵爽徐州医学院

学位级别：硕士

目的: 研究细胞毒性t细胞亚群(tc1/tc2)和调节性t细胞(treg)在慢性乙型肝炎(CHB)发病机制中的作用，寻找治疗的新方法。方法: 取75例CHB、40例肝硬化(LC)患者和20例正常人(NC组)外周血单个核细胞(PBMC)，75例CHB患者中轻... 详细信息

目的: 研究细胞毒性t细胞亚群(tc1/tc2)和调节性t细胞(treg)在慢性乙型肝炎(CHB)发病机制中的作用，寻找治疗的新方法。方法: 取75例CHB、40例肝硬化(LC)患者和20例正常人(NC组)外周血单个核细胞(PBMC)，75例CHB患者中轻度、中度和重度活动分别为20例，重型肝炎患者15例，肝功能中的丙氨酸氨基转移酶(ALt)正常24例，ALt介于正常和3倍正常值(ULN)之间27例，大于3倍ULN 24例。所有患者中CHB病毒载量(HBV DNA)>104 copies/ml 69例，HBV DNA<104 copies/ml 46例。HBV的E抗原(HBeAg)阳性54例和HBeAg阴性61例，分别用流式细胞仪测定tc细胞亚群和treg特异性的细胞表面双标志物tc1(CD8/CCR5)、tc2(CD8/CD30)、treg(CD4/CD25)的方法，检测了 tc1、tc2、treg细胞水平；取其中20例患者外周血淋巴细胞培养，分别用植物血凝素(PHA)、HBV表面抗原(HBsAg)、白介素-2(IL-2)刺激，比较刺激前后treg细胞的变化，分别留培取养前和培养后上清液用ELISA方法测转化生长因子-β(tGF-β)和白介素-10(IL-10)，观察treg细胞功能变化。结果: 1、CHB和LC患者外周血水平tc1明显高于NC组(P<0.01)；LC组tc2小于CHB和NC组(P<0.05)，CHB和NC组之间tc2无明显差别(P>0.05)；CHB组轻度、中度、重度活动患者之间tc1、tC2无明显差别(P>0.05)，CHB中的重型肝炎患者tc1、tc2均明显低于其它CHB患者(P<0.01)。 2、CHB和LC组tc1/tc2明显高于NC组(P<0.01)；CHB、LC组间 tc1/tc2无明显差别(P>0.05)：HBeAg阳性组和HBeAg阴性组，以及不同HBV DNA载量组之间，tc1/tC2无明显差别(P>0.05)。 3、CHB、LC、NC组患者之间treg细胞含量无明显差别(P>0.05)，CHB中的重型肝炎患者treg细胞含量明显低于其它CHB患者、LC和NC组患者(P<0.05)。 4、treg细胞与肝功能中的ALt、天门冬氨酸氨基转移酶(ASt)、总胆红素(tBIL)呈弱负相关(P<0.05)，与HBV DNA无明显相关性(P>0.05)。 5、用PHA和IL-2刺激培养后treg细胞数量增加(P<0.05)，HBsAg刺激培养后treg细胞数量无明显变化(P>0.05)；PHA和HBsAg刺激组tGF-β无明显变化(P>0.05)，IL-2刺激组tGF-β减少(P<0.05)；PHA、HBsAg和IL-2刺激培养后IL-10均明显下降(P<0.05)。结论: 1、tc细胞亚群在CHB、LC及CHB重型肝炎中发生不同方式的偏移，提示tc1/tc2亚群失衡在CHB致病机制中起一定的作用。 2、treg细胞含量与CHB肝功能(ALt、ASt、tBIL)呈弱负相关，在CHB重型肝炎中含量明显减少，提示treg细胞含量与CHB肝功能损伤有一定关系。 3、体外用PHA、IL-2及HBsAg可以调控treg细胞的增殖及其分泌的细胞因子的含量，为临床开展调控treg细胞治疗CHB提供了一定的理论依据。

关键词：乙型肝炎细胞毒性t细胞调节性t细胞肝功能损伤发病机制

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丙型肝炎病毒非结构区5个细胞毒性t细胞表位的鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第1期29卷 41-45页

作者：段志良陈永平孟锐峰姜爱英陈俊郑明华文金生温州医学院第二附属医院检验科 325035 温州医学院第一附属医院感染和肝病中心温州医学院基础医学院微生物学与免疫学教研室 325053 温州医学院基础医学院生命科学学院 325053

目的采用t细胞表位预测软件结合体外实验鉴定丙型肝炎病毒（HCV）特异性细胞毒性t细胞（CtL）表位。方法采用t表位预测软件Rankpep预测HCV特异性CtL表位，选择候选CtL表位加以合成；用候选CtL表位肽分别刺激HCV感染者以及健康志愿者的... 详细信息

目的采用t细胞表位预测软件结合体外实验鉴定丙型肝炎病毒（HCV）特异性细胞毒性t细胞（CtL）表位。方法采用t表位预测软件Rankpep预测HCV特异性CtL表位，选择候选CtL表位加以合成；用候选CtL表位肽分别刺激HCV感染者以及健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC），采用酶联免疫斑点试验（ELISPOt）检测PBMC中肽特异性分泌IFN-γ的斑点形成细胞（spots forming cells，SFC）的水平，采用细胞内细胞因子染色（intracellularcytokinestaining，ICS）检测PBMC中肽特异性IFN-γ＋CD8＋t细胞的水平。结果用5条候选CtL表位肽[NS3450（tVPQ—DAVSR）、NS3594（GPtPLLYRL）、NS4b78（SMMAFSAAL）、NS5a416（SEENVSVVF）和NS5a367（tVSSALAEL）]分别刺激10个HCV感染者和2个健康者的PBMC后，健康者的PBMC不产生IFN-γ，而7个HCV感染者的PBMC产生IFN-γ；HCV感染者的PBMC中肽特异性分泌IFN-γ的细胞的频率为（5～36）SFC／10^5PBMC，肽特异性IFN-γ＋CD8＋t细胞占总CD8＋t细胞的百分比为0．02％～0．25％。结论EL／SPOt结果和ICS结果证实5条肽NS3450、NS3594、NS4b78、NS5a416和NS5a367为全新的HCV特异性CtL表位。

关键词：丙型肝炎病毒细胞毒性t细胞表位

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抗HIV-1细胞毒性t细胞克隆的体外功能研究

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病毒学报 2016年第3期32卷 331-341页

作者：金聪涂婷牟丹蕾李群辉宋杏张海霞汤涛李涛吴昊陈华标中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京102206 江苏省检验医学重点实验室江苏大学医学院镇江212013 佑安医院感染中心北京100069 河北疾病预防控制中心石家庄050024 青岛大学附属医院青岛266003

人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)特异细胞毒性t细胞(Cytotoxic t-lymphocytes,CtL)是产生保护性免疫应答反应的重要宿主细胞。由于HIV-1特异性CtL免疫应答反应的异质性,CtL有效抗HIV-1病毒反应的功能机制仍然不明确。为了研究HIV-1特异性Ct... 详细信息

人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)特异细胞毒性t细胞(Cytotoxic t-lymphocytes,CtL)是产生保护性免疫应答反应的重要宿主细胞。由于HIV-1特异性CtL免疫应答反应的异质性,CtL有效抗HIV-1病毒反应的功能机制仍然不明确。为了研究HIV-1特异性CtL抗病毒反应的功能特性,本研究应用分离培养的HIV-1特异性CtL克隆细胞株在细胞水平直接测定抗原肽刺激CtL产生的多种功能反应。选取12株具有不同HLA分子和抗原识别表位的HIV-1特异性CtL克隆细胞平行进行多种体外功能实验,包括杀伤活性实验、脱颗粒功能实验、胞内多重细胞因子测定实验,并对CtL的细胞毒性颗粒成分和耗竭分子表达进行定量分析。本研究发现HIV-1特异性CtL克隆细胞的杀伤活性与脱颗粒功能紧密相关,杀伤活性和脱颗粒功能又与多种细胞因子的生成水平和多重功能性相关。这些发现提示HIV-1特异性CtL克隆细胞的多种功能反应之间具有协同调节的机制特点。

关键词：人类免疫缺陷病毒1型细胞毒性t细胞免疫应答反应功能实验

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HIV-1附属蛋白特异性细胞毒性t细胞应答研究

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中国病毒学 2006年第6期21卷 529-535页

作者：黄德东孙永涛翟嵩赵曙光王少扬庄严李新红康文臻余旭 Marcus Altfeld Bruce D.Walker 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 Partners AIDS Research Center Massachusetts General HospitalHarvard Medical SchoolBostonMA02129USA

人类免疫缺陷病毒(Humanimmunodeficiencyvirus,HIV)附属蛋白Nef、Vpu、Vpr和Vif在病毒复制中起着关键作用,并能被细胞毒性t细胞(CytotoxictLymphocyte,CtL)识别。然而,对我国HIV感染者体内附属蛋白特异性的CtL应答研究比较少。本研究... 详细信息

人类免疫缺陷病毒(Humanimmunodeficiencyvirus,HIV)附属蛋白Nef、Vpu、Vpr和Vif在病毒复制中起着关键作用,并能被细胞毒性t细胞(CytotoxictLymphocyte,CtL)识别。然而,对我国HIV感染者体内附属蛋白特异性的CtL应答研究比较少。本研究应用覆盖HIV-1B、C亚型附属蛋白(Nef、Vpu、Vpr和Vif)的142个肽段作为抗原,通过酶联免疫斑点实验(Enzyme-LinkedImmunospot,ELISPOt)检测61例中国HIV/AIDS患者和10例HIV-1血清阴性对照的HIV-1附属蛋白特异性CtL应答。无论对HIV-1B亚型还是HIV-1C亚型附属蛋白都能产生特异性CtL应答,特别是Nef区蛋白的反应频率和累积应答强度都较高(P<0.001),B、C亚型间的应答频率和累积应答强度都无显著差别(P>0.05),其免疫优势区也大致相同。附属蛋白特异性的累积CtL应答强度将近达到总应答的21%。这些结果表明尽管HIV-1附属蛋白的体积小,但它们在诱导特异性的CtL应答中发挥了重要作用,对评价HIV-1免疫应答的幅度和特异性以及研发针对中国人群的HIV疫苗有重要的意义。

关键词：人类免疫缺陷病毒1型细胞毒性t细胞酶联免疫斑点实验

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纳米微粒偶联抗OX40/抗AFP抗体在细胞毒性t细胞抗肝癌中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第4期30卷 337-341页

作者：陈明水欧阳海超周山勇李洁羽叶韵斌福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室福建福州350014 福建省肿瘤转化医学重点实验室福建福州350014 中国科学院福建物质结构研究所

目的探讨乳酸-羧基乙酸共聚物(PLGA)制备的纳米微粒偶联抗OX40及抗AFP抗体(抗OX40/抗AFP-NP)对甲胎蛋白AFP158-166抗原肽特异性细胞毒性t细胞(CtL/AFP158-166)体外杀伤肝癌细胞的影响。方法用溶剂蒸发法制备纳米微粒(NP),并与抗OX40和抗... 详细信息

目的探讨乳酸-羧基乙酸共聚物(PLGA)制备的纳米微粒偶联抗OX40及抗AFP抗体(抗OX40/抗AFP-NP)对甲胎蛋白AFP158-166抗原肽特异性细胞毒性t细胞(CtL/AFP158-166)体外杀伤肝癌细胞的影响。方法用溶剂蒸发法制备纳米微粒(NP),并与抗OX40和抗AFP共价偶联。用扫描电镜观察所制得PLGA-NP纳米颗粒的形态;ZetaPlustM粒度测定仪检测纳米微粒的粒径及电荷;用BCA蛋白定量方法检测纳米微粒偶联抗体的效率;用人外周血单核细胞诱导形成树突状细胞(DC),用AFP158-166抗原肽负载DC诱导AFP特异性的CtL/AFP158-166;分别用2-(4-碘苯)-3-(4硝基苯)-5-(2,4-磺苯基四氮唑)-2H-四唑单钠盐-1法(WSt-1)法、ELISA及乳酸脱氢酶(LDH)法分别检测抗OX40/抗AFP-NP对CtL/AFP158-166细胞增殖能力、分泌IL-2和IFN-γ及杀瘤活性的影响。结果所制得的PLGA-NP为圆形,大小较均一,粒径约为(300±42)nm,带负电荷,约为-(25.12±5.34)mV。蛋白定量显示每mg的PLGA-NP偶联约100μg抗体,偶联效率为25%;增殖和活化实验显示偶联有抗OX40的纳米微粒能显著刺激CtL的增殖、IL-2和IFN-γ的分泌;杀伤实验显示,抗OX40/抗AFP-NP能显著增强AFP特异性CtL/AFP158-166细胞对HepG2细胞特异性杀伤作用,而对SMMC-7721杀伤作用无明显效果。结论抗OX40/抗AFP-NP能刺激CtL/AFP158-166细胞的增殖、细胞因子的分泌并增强CtL/AFP158-166细胞对AFP阳性肝癌细胞的特异性杀伤作用。

关键词：纳米微粒肝癌细胞毒性t细胞 HepG2 OX40

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HIV/AIDS患者特异性细胞毒性t细胞功能的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第9期23卷 696-699页

作者：尚红韩晓旭王亚男周立平张子宁姜拥军张民于旭 Bruce Walker 中国医科大学附属第一医院艾滋病研究室沈阳110001 Partners AIDS Research Center and Infectious Disease Unit Massachusetts General Hospital and Harvard Medical School

目的　了解中国HIV AIDS患者HIV特异性细胞毒性t细胞 (CtL)功能。方法　将覆盖HIV 1P15、P17和P2 4Gag全长的 94个重叠多肽作为抗原 ,用IFN γELISPOt方法检测HIV AIDS患者HIV 1特异性CtL功能。结果　HIV 1抗原多肽P17 15、P17 16、P2 4... 详细信息

目的　了解中国HIV AIDS患者HIV特异性细胞毒性t细胞 (CtL)功能。方法　将覆盖HIV 1P15、P17和P2 4Gag全长的 94个重叠多肽作为抗原 ,用IFN γELISPOt方法检测HIV AIDS患者HIV 1特异性CtL功能。结果　HIV 1抗原多肽P17 15、P17 16、P2 4 7、P17 8,P2 4 2 8最易被HIV AIDS患者特异性CtL识别。HIV感染者识别HIV 1多肽的数量和强度均高于AIDS患者。结论　我国HIV AIDS患者体内存在识别不同HIV 1Gag多肽的特异性CtL ,且HIV特异性CtL功能与疾病进展相关。

关键词： HIV/AIDS患者特异性细胞毒性t细胞功能研究艾滋病

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树突状细胞负载甲胎蛋白、细胞毒性t细胞表位肽后的免疫应答

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中华肝脏病杂志 2002年第3期10卷 178-180页

作者：郭建巍蔡美英魏大鹏黄健王霞秦力维华西医科大学基础医学院免疫教研室成都610041 兰州军区兰州总医院

目的用负载hAFP 218-226位LLNQHACAV九肽的树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导自身淋巴细胞,使之话化为肝细胞癌(HCC)特异性细胞毒性t细胞(cytotoxic t lymphocyte,CtL),并特异性杀伤HCC细胞。方法在体外用GM-CSF和IL-4诱导HLA-A2~＋健康志愿者外周血单核细胞,使其分化为高纯度DC。用负载hAFP 218-226位LLNQHACAV九肽的DC诱导自身淋巴细胞,使之成为HCC特异性CtL。结果诱导的DC分泌较高水平的IL-12(17.6~21.5pg/ml),其中以第7天为最高(21.5pg/ml),经DC和DC负载AFP表位肽后活化的淋巴细胞培养上清液中tNF水平均比在IL-2条件下培养的未活化淋巴细胞高,L929细胞死亡百分率分别为80.6%和11.6%;经DC和DC负载AFP表位肽后活化的淋巴细胞培养上清液中IL-12水平分别为20.5 pg/ml和46.9 pg/ml,经DC活化后淋巴细胞增殖指数大于3。活化后的淋巴细胞不但特异性杀伤HLA-A2^+的HCC细胞HenG2和负载AFP表位肽的t2细胞,而且还不同程度杀伤HLA-A3^+HCC细胞Alexander和其它表型HCC细胞,对NK细胞敏感的靶细胞慢性髓原白血病细胞K562 也有较强的杀伤作用。结论负载hAFPHLA-A2限制性CtL九肽的DC对表达AFP HCC的研究和治疗有潜在的应用价值。

关键词：细胞毒性t细胞免疫应答树突状细胞 DC CtL 甲胎蛋白特异性杀伤肝细胞癌 HCC 免疫学

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树突状细胞诱导的细胞毒性t细胞对黑色素瘤的抑制作用

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中华实验外科杂志 2014年第4期31卷 771-773页

作者：张燕谭延伟蔡建辉胡玲玲河北医科大学第三医院肛肠外科石家庄050051 河北省血液中心河北省人民医院外科肿瘤生物治疗科河北奕康生物科技有限公司

目的探讨CIM^＋CD25^＋treg细胞对树突状细胞（DC）诱导的细胞毒性t细胞（CtL）对B16黑色素瘤抑瘤作用的影响及其机制。方法制备C57BL/6小鼠B16黑色素瘤动物模型，行全身放疗达非髓性淋巴细胞删除（NMLD）状态。随机将80只小鼠分为4组。... 详细信息

目的探讨CIM^＋CD25^＋treg细胞对树突状细胞（DC）诱导的细胞毒性t细胞（CtL）对B16黑色素瘤抑瘤作用的影响及其机制。方法制备C57BL/6小鼠B16黑色素瘤动物模型，行全身放疗达非髓性淋巴细胞删除（NMLD）状态。随机将80只小鼠分为4组。A组：在DC与t细胞共同培养前应用免疫磁珠法（MACS）删除CIM^＋CD25^＋treg细胞；B组：DC与t细胞共同培养后删除CIM^＋CD25^＋treg细胞；C组：DC与t细胞共同培养时不删除CIM^＋CD25^＋treg细胞。D组：对照组。体外应用DC诱导t细胞产生效应细胞CtL，将CtL经鼠尾静脉回输小鼠体内，观察对黑色素瘤的抑瘤效果。结果A、B、c3组对B16黑色素瘤抑瘤率分别为90．89％、92．52％、60．02％，均明显高于对照组（P〈0．05）。删除CIM^＋CD25^＋treg细胞的A、B两组抑瘤率优于C组（P〈0．05）。但A、B两组问抑瘤率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论删除CIM^＋CD25^＋treg细胞可明显提高CtL对B16黑色素瘤的抑瘤效果。

关键词：树突状细胞细胞毒性t细胞黑色素瘤抑瘤率

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