检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学报 1994年第1期15卷 90-92页

作者：郭慕平王晴川刘广芬福建医学院蛇毒研究室

用^(131)I按氯胺T法标记眼镜蛇毒细胞毒素14,观察其在大鼠体内的分布,静脉给药后0.5h,分布最多的是肾,每mg组织放射性达5979dpm,为对照组的14倍,肝、脾、胰、肾上腺亦有较高分布,给药后2h,脑组织亦见分布,其每mg组织放射性为50dpm,是对... 详细信息

用^(131)I按氯胺T法标记眼镜蛇毒细胞毒素14,观察其在大鼠体内的分布,静脉给药后0.5h,分布最多的是肾,每mg组织放射性达5979dpm,为对照组的14倍,肝、脾、胰、肾上腺亦有较高分布,给药后2h,脑组织亦见分布,其每mg组织放射性为50dpm,是对照组的3倍。

关键词：眼镜蛇毒蛇毒细胞毒素碘131

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广西眼镜蛇毒细胞毒素的分离及对人鼻咽癌等细胞抑制作用的研究

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中国药理学通报 2002年第1期18卷 61-64页

作者：雷丹青王秋雁刘绵林舒雨雁汤圣希广西医科大学蛇毒研究所南宁530021

目的　探讨广西眼镜蛇毒细胞毒素对人鼻咽癌细胞(CNE)等多种癌细胞株的抑制作用。方法　经SephadexG 5 0 ,CM SepharoseCL 6B层析法从广西眼镜蛇毒中分离纯化获得细胞毒素 (CTX) ,采用MTT检测CTX对癌细胞株体外培养抑制作用 ,探索量效... 详细信息

目的　探讨广西眼镜蛇毒细胞毒素对人鼻咽癌细胞(CNE)等多种癌细胞株的抑制作用。方法　经SephadexG 5 0 ,CM SepharoseCL 6B层析法从广西眼镜蛇毒中分离纯化获得细胞毒素 (CTX) ,采用MTT检测CTX对癌细胞株体外培养抑制作用 ,探索量效时效关系。结果　从广西眼镜蛇毒中分离到一种细胞毒素单一组分 (CTXCM 5 )对体外培养的人鼻咽癌细胞株 (CNE)、淋巴瘤细胞株 (YAC)、人宫颈癌细胞株 (HELA)和卵巢癌细胞株 (Ho8990 )的抑制有明显的剂量依赖关系 ,作用 48h的IC50 分别为 1 84,0 75 ,1 84和 2 5 9mg·L-1;随作用时间的延长 ,CTXCM 5对CNE细胞株作用最为明显 ,作用 3h和 2 4h的IC50 分别为 4 78和1 0 4mg·L-1。结论　CTXCM 5对体外培养的癌细胞株有较强的抑制作用。

关键词：细胞毒素鼻咽癌 MTT 眼镜蛇毒抑癌作用研究

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白眉蝮蛇蛇毒细胞毒素对胃癌细胞的杀伤作用及对细胞超微结构的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第4期25卷 335-337页

作者：鲁珏徐飞鹏广东医学院附属医院胃肠外科广东湛江524000

目的:从白眉蝮蛇蛇毒中提取细胞毒素H1,探讨其对体外培养胃癌细胞的杀伤作用及超微结构的影响。方法:采用DEAE-Sephadex A-50、TSKgel Pheny柱层析从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化出电泳纯细胞毒素H1;采用MTT法检测细胞毒素H1对胃癌细胞用细胞... 详细信息

目的:从白眉蝮蛇蛇毒中提取细胞毒素H1,探讨其对体外培养胃癌细胞的杀伤作用及超微结构的影响。方法:采用DEAE-Sephadex A-50、TSKgel Pheny柱层析从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化出电泳纯细胞毒素H1;采用MTT法检测细胞毒素H1对胃癌细胞用细胞BGC-823的杀伤作用,并用透射电镜观察细胞毒素对癌细胞超微结构的影响。结果:提纯后细胞毒素H1可达到电泳纯,对体外胃癌细胞杀伤力较强,透射电镜观察发现细胞毒素处理癌细胞后其细胞表面微绒毛减少,细胞膜破损,线粒体肿胀并形成空泡,核被膜消失,核浓缩集靠置之脑后呈块状或新月状凋亡小体。结论:从白眉蝮蛇蛇毒中提取的细胞毒素H1可有效地杀伤胃癌细胞。

关键词：细胞毒素白眉蝮蛇毒胃癌BGC-823细胞系超微结构

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细胞毒素处理的同种异体肌腱移植实验研究

细胞毒素处理的同种异体肌腱移植实验研究

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作者：邱波湖北医科大学武汉大学

学位级别：硕士

目的:该实验旨在探讨用细胞毒素处理同种异体肌腱的方法,选择性地破坏其腱细胞成分,以建立一种能显著降低异体肌腱抗原性,而不明显损伤肌腱强度的异体肌腱处理技术.结论:细胞毒素处理的异体肌腱有明显降低组织抗原性的作用,细胞毒素处... 详细信息

目的:该实验旨在探讨用细胞毒素处理同种异体肌腱的方法,选择性地破坏其腱细胞成分,以建立一种能显著降低异体肌腱抗原性,而不明显损伤肌腱强度的异体肌腱处理技术.结论:细胞毒素处理的异体肌腱有明显降低组织抗原性的作用,细胞毒素处理的同种异体肌腱移植可以替代自体肌腱移植.

关键词：肌腱异体移植成纤维细胞细胞毒素

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聚乳酸-羟基乙酸包载眼镜蛇毒细胞毒素缓释微球的表征及体外释放行为(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第3期13卷 575-578页

作者：陈志奎林礼务张志强薛恩生王艳俞丽云福建医科大学附属协和医院超声科福建省福州市350001 福建医科大学医药生物工程中心福建省福州市350001

背景:眼镜蛇毒细胞毒素具有强烈的细胞毒活性,但缺乏特异性,全身用药可导致严重毒副作用,而采用缓释载体包载进行间质化疗可达到提高肿瘤局部治疗效应,并且减轻全身毒性。目的:制备眼镜蛇毒细胞毒素-聚乳酸-羟基乙酸微球,观察其一般性... 详细信息

背景:眼镜蛇毒细胞毒素具有强烈的细胞毒活性,但缺乏特异性,全身用药可导致严重毒副作用,而采用缓释载体包载进行间质化疗可达到提高肿瘤局部治疗效应,并且减轻全身毒性。目的:制备眼镜蛇毒细胞毒素-聚乳酸-羟基乙酸微球,观察其一般性质和体外释药特性。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-12/2008-05在福建医科大学医药生物工程中心完成。材料:聚乳酸-羟基乙酸、聚乙烯醇由中国科学院成都有机化学有限公司提供,广东产中华眼镜蛇毒。方法:采用分子筛、离子交换分离,反相疏水高效液相色谱方法纯化细胞毒素,MTT法检测细胞毒活性,复乳-溶剂挥发法制备载药微球。主要观察指标:扫描电镜观察载药微球的表面形态,激光粒径仪测微球粒径,计算包封率、载药量、体外释放周期。结果:纯化的眼镜蛇细胞毒素具有明显的细胞毒作用,对HepG2细胞12,24h的IC50分别为1.43,1.12mg/L。复乳法制备微球表面光滑圆整,粒径2～8μm,包封率和载药率分别为(74.10±9.92)%和(0.72±0.09)%,21d药物累积释放63.3%,释放细胞毒素保持较好的生物学活性。结论:采用复乳-溶剂挥发法可制备具有较高包封率、良好缓释效果、保持完整生物学活性的眼镜蛇毒细胞毒素-聚乳酸-羟基乙酸微球。

关键词：细胞毒素聚乳酸-羟基乙酸微球缓释

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短尾蝮新突触前毒素和细胞毒素的纯化及部分序列

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中国科学（B辑） 1993年第12期23卷 1259-1266页

作者：吉永华陆丽芳徐科服部宏之寺川进中国科学院上海生理研究所上海200031 日本冈崎国立生理学研究所

用反相高效液相色谱技术对中国产短尾蝮蛇(Agkistrodon blomhoffii brevicaudus)毒中的毒性蛋白重新进行了纯化,结果从中获得了3个由约122个氨基酸残基构成的毒蛋白(AgTx-1,AgTx-2和AgTx-3)。三者对小鼠的LD_(50)分别为0.075,0.51和6.6m... 详细信息

用反相高效液相色谱技术对中国产短尾蝮蛇(Agkistrodon blomhoffii brevicaudus)毒中的毒性蛋白重新进行了纯化,结果从中获得了3个由约122个氨基酸残基构成的毒蛋白(AgTx-1,AgTx-2和AgTx-3)。三者对小鼠的LD_(50)分别为0.075,0.51和6.6mg/kg。在小鸡颈二腹肌标本上的毒理分析表明,AgTx-1和AgTx-2均在阻遏接头传递之后,亦不影响肌肉对乙酰胆碱的敏感性。在AgTx-3的作用下,标本的间接收缩则由于舒张不全而逐渐变小,最后停止在挛缩状态。部分氨基酸序列测定结果又表明,AgTx-1和AgTx-2的N-端32肽序列完全相同。考虑到AgTx-1的LD_(50)在粗毒中的含量及其序列等均与前文报道的β-AgTx极为相似,故我们认定它们为同一毒素,并定名为β_1-AgTx。而AgTx-2则应是新的突触前毒素,相应地定名为β_2-AgTx,至于AgTx-3便是新发现的细胞毒素。

关键词：蝮蛇毒突触前毒素细胞毒素

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定量检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因A方法的建立

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中华内科杂志 1998年第11期37卷 739-741页

作者：阎小君张沥韩锋产江梅苏成芝西安全军基因诊断技术应用研究所西安市中心医院消化内科

目的建立定量检测幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白基因Ａ（ｃａｇＡ）的方法。方法以含ＨｐｃａｇＡ片段的质粒（ｐＭＣ３）作为外参照品，在微孔板中对聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ｃａｇＡ的产物进行辣根过氧化物酶标记探针的杂交... 详细信息

目的建立定量检测幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白基因Ａ（ｃａｇＡ）的方法。方法以含ＨｐｃａｇＡ片段的质粒（ｐＭＣ３）作为外参照品，在微孔板中对聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ｃａｇＡ的产物进行辣根过氧化物酶标记探针的杂交及酶促显色以定量检测ｃａｇＡ阳性Ｈｐ。结果当ＰＣＲ反应体系中原始模板为１～１０５拷贝，循环次数小于或等于２５时，原始模板以相对固定的指数形式增加，在该范围内适宜定量分析。通过对２０份已知Ｈｐ菌株ｃａｇＡ的检测，符合率达１００％，观察结果的敏感度较电泳法提高了２００倍。定量检测不同胃黏膜组织中ｃａｇＡ阳性Ｈｐ，检出底线为６拷贝／毫克组织。结论本方法特异性强，敏感度高。

关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因A 胃疾病

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冠心病与幽门螺杆菌细胞毒素的关系

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临床心血管病杂志 1999年第11期15卷 497-498页

作者：蒋雯龙焱华董晓雁胡继军武汉市第三医院内科武汉430060 武汉市第三医院内科实验室

目的：研究幽门螺杆菌（ＨＰ）感染细胞毒素相关蛋白基因Ａ（ＣａｇＡ）Ⅰ型菌株和Ⅱ型菌株与冠心病（ＣＨＤ）之间的关系。方法：测定５４例ＣＨＤ患者与５１例非ＣＨＤ的对照组的血清ＨＰ抗体及ＣａｇＡ抗体阳性率并进行比较。结... 详细信息

目的：研究幽门螺杆菌（ＨＰ）感染细胞毒素相关蛋白基因Ａ（ＣａｇＡ）Ⅰ型菌株和Ⅱ型菌株与冠心病（ＣＨＤ）之间的关系。方法：测定５４例ＣＨＤ患者与５１例非ＣＨＤ的对照组的血清ＨＰ抗体及ＣａｇＡ抗体阳性率并进行比较。结果：ＣＨＤ组ＨＰ抗体血清学阳性率高于对照组（４８．１５％ ∶４１．１８％），但两组之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；ＣＨＤ组ＣａｇＡ抗体的血清学阳性率明显高于对照组（３１．４８％ ∶１５．６９％），两组之间有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：ＣＨＤ组ＨＰＣａｇＡ＋菌株感染的血清学阳性率明显高于对照组，提示ＨＰＣａｇＡ及其细菌毒素有可能在ＣＨＤ的发病中起一定作用。

关键词：冠心病幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因A

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眼镜蛇细胞毒素CTXn、CTX1戒毒作用及其机制的实验研究

眼镜蛇细胞毒素CTXn、CTX1戒毒作用及其机制的实验研究

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作者：仲维高广州医学院

学位级别：博士

目的:探讨眼镜蛇毒细胞毒素有效组分CTXn、CTX1对抗吗啡依赖作用及机制。方法:(1)建立吗啡依赖CPP模型,观察眼镜蛇毒中分离粗毒细胞毒素Ⅳ低、中、高剂量对吗啡成瘾大鼠CPP影响,及对催促戒断行为学影响。(2)筛选: SD大鼠吗啡(10mg/kg,sc... 详细信息

目的:探讨眼镜蛇毒细胞毒素有效组分CTXn、CTX1对抗吗啡依赖作用及机制。方法: (1)建立吗啡依赖CPP模型,观察眼镜蛇毒中分离粗毒细胞毒素Ⅳ低、中、高剂量对吗啡成瘾大鼠CPP影响,及对催促戒断行为学影响。 (2)筛选: SD大鼠吗啡(10mg/kg,sc)训练8天,形成稳定CPP模型后,大鼠分为粗毒毒素Ⅳ各单体组分高剂量组、吗啡成瘾对照组及0.9%N.S组,实验组给予粗毒毒素Ⅳ不同组分1/10 LD50剂量,观察各组分对吗啡已形成CPP影响。 (3)观察CTXn对吗啡CPP获得和维持影响。①建立吗啡依赖模型后,腹腔给予CTXn不同剂量(0.5、1.0、2.0mg/kg)连续5天,测试CPP及痛觉变化,大脑切片,免疫组化染色,观察TNF-α在齿状回表达;②SD大鼠在施吗啡前30分钟腹腔给予不同剂量CTXn(0.5、1.0、2.0mg/kg),连续8天,观察CTXn预处理对吗啡CPP获得及镇痛影响;③SD大鼠腹腔注射不同剂量CTXn(0.5、1.0、 2.0mg/kg),连续18天,观察其自身是否引起CPP;④SD大鼠分别腹腔给予CTXn(1.0mg/kg)或鞘内给予CTXn(0.025mg/kg),连续用药24天在d0、d2、d4、d6、d8、d10、d12、d14、d16、d18、d20、d22、d24测试大鼠痛阈,观察痛阈变化,同时在d0、d4、d8、d12、d16、d20、d24采用ELISA法检测血清抗体效价。 (4)观察CTX1对吗啡CPP获得和维持影响。①建立吗啡依赖模型后,再腹腔给予不同剂量CTX1(0.1、0.2、0.4mg/kg)连续5天,测试CPP及痛觉变化,大脑切片,免疫组化染色,观察TNF-α在海马的表达;②SD大鼠在施吗啡前30分钟腹腔给予CTX1不同剂量(0.1、0.2、0.4mg/kg),连续8天,观察CTX1预处理对吗啡CPP获得及镇痛影响、TNF-α的含量变化及其在CA区表达、LTP;③SD大鼠腹腔注射不同剂量CTX1(0.1、0.2、0.4mg/kg),连续8天,观察其自身是否引起CPP;④SD大鼠分别腹腔给予CTX1(0.2mg/kg)组或鞘内给予CTX1(10μg/kg),连续用药24天在d0、d2、d4、d6、d8、d10、d12、d14、d16、d18、d20、d22、d24测试大鼠痛阈,观察痛阈变化,在d0、d4、d8、d12、d16、d20、d24采用ELISA法检测血清抗体效价。结果: (1)吗啡可诱导大鼠产生明显CPP,眼镜蛇粗毒细胞毒素Ⅳ高、中、低剂量组自身均不能引起CPP;不同剂量粗毒细胞毒素Ⅳ可抑制吗啡已形成CPP,抑制纳洛酮诱导的戒断症状。 (2)细胞毒素Ⅳ分离纯化得到5个组分,分别为:Ⅳ1、Ⅳ3、Ⅳ4、Ⅳ5、Ⅳ7。其中组分Ⅳ4、Ⅳ5可抑制大鼠引起CPP;抑制纳洛酮诱发戒断症状,与组分Ⅳ1、Ⅳ3、Ⅳ7不同,组分Ⅳ4、Ⅳ5组大鼠体重平均增长分别为:15.5%、17.1与生理盐水组增长相似,Ⅳ1、Ⅳ3、Ⅳ7组大鼠体重平均增长为6.2%、4.9、8.8%与吗啡对照组相似。氨基酸序列测定组分Ⅳ4为CTXn,组分Ⅳ5为CTX1。CTXn序列:LKCNQ LIPPF YKTCA AGKNL CYKMF MVAAP KVPVK RGCID VCPKS SLLVK YVCCN TDRCN CTX1序列:LKCNK LIPIA SKTCP AGKNL CYKMF MMSDL TIPVK RGCID VCPKS NLLVK YVCCN TDRCN (3)CTXn对吗啡CPP获得和维持影响①大鼠吗啡成瘾后CTXn处理可剂量依赖性地抑制吗啡诱导CPP及痛敏。CTXn不同剂量组(0.5、1.0、2.0mg/kg)CPP值分别从成瘾时的451.8s±49.2s、450.8s±72.3s及450.7s±91.2s下降到164s±49.5s、77.4s±41.1s及68.2s±37.2s;大鼠痛阈值分别从成瘾时15.5s±1.6s、15.2s±3.2s及15.6s±2.3s,提高至22.4s±1.7s、27.5s±2.8s及28.6s±3.6s。②吗啡成瘾后,CTXn后处理可明显增加齿状回TNF-α表达,一定程度上恢复齿状回神经元数量。③CTXn预处理后,大鼠CPP值未见显著升高,可剂量依赖性抑制吗啡CPP获得。预处理呈剂量依赖性的增强镇痛作用。④CTXn自身不会产生CPP。CTXn腹腔用药后,血清CTXn抗体效价增高,镇痛效力下降;但CTXn鞘内给药未见CTXn抗体产生及镇痛耐受。 (4)CTX1对吗啡CPP获得和维持影响:①大鼠吗啡成瘾后CTX1后处理可剂量依赖性地抑制吗啡诱导CPP维持及痛觉过敏。大鼠成瘾后,

关键词： CTX1 CTXn 细胞毒素吗啡阿片类药物 CPP 条件位置偏爱海马齿状回蛇毒眼镜蛇肿瘤坏死因子

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一种酸性海葵细胞毒素基因Src I的克隆、重组表达、纯化和生理活性研究

一种酸性海葵细胞毒素基因Src I的克隆、重组表达、纯化和生理活...

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作者：姜孝玉中山大学

学位级别：博士

该文应用SMART<\'TM> cDNA Library Construction kit的方法,以玫瑰红绿海葵触手为研究材料,构建以真核表达载体pcDNA3为基础的cDNA表达文库.对文库克隆进行序列测定和生物信息学分析,已经获得了73个海葵新表达序列标... 详细信息

该文应用SMART<\'TM> cDNA Library Construction kit的方法,以玫瑰红绿海葵触手为研究材料,构建以真核表达载体pcDNA3为基础的cDNA表达文库.对文库克隆进行序列测定和生物信息学分析,已经获得了73个海葵新表达序列标签(ESTs),有24个全长cDNA,其中包括海葵细胞毒素、海葵神经毒素、绿色荧光蛋白等具有开发应用价值的新基因.根据文库的EST序列设计引物,从玫瑰红绿海葵克隆到一全长cDNA序列,命名为Src I,利用生物信息学方法对其进行了分析. 该文利用基因工程手段,将Src I基因进行原核重组表达,然后分离重组蛋白,研究重组蛋白Src I的性质、功能和可能的作用机制.首先构建了Src I基因的非融合蛋白表达质粒pBV220-Src I,并成功地在原核细胞***进行了重组表达,筛选出稳定表达的工程菌株DH5α,摸索了稳定表达的条件,摸索了包涵体的洗涤、变性和复性条件,摸索出了复性蛋白Src I的纯化工艺,纯化过程简单,经QSepharose Fast Flow阴离子交换层析和Phenyl Sepharose疏水层析两步纯化,就可获得了高纯度的重组蛋白样品(纯度达99%以上),该纯化方法适合重组蛋白的大量纯化,为Src I的性质、结构和功能研究奠定了良好的基础.在获得重组蛋白Src I的基础上,对其性质、生理活性和作用机理进行了研究.

关键词：玫瑰红绿海葵细胞毒素 Src I 重组表达重组蛋白纯化作用机制

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