检索结果-内蒙古大学图书馆

眼镜蛇毒细胞毒素13诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对Bcl-2家族基因表达的影响

中国动脉硬化杂志 2009年第10期17卷 793-796页

作者：张明芳许云禄林默君福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系福建医科大学蛇毒研究所福建省福州市350004

目的研究眼镜蛇毒细胞毒素13诱导人脐静脉内皮细胞凋亡作用及其对Bcl-2家族基因表达的影响。方法CCK-8法测定细胞毒素13对人脐静脉内皮细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析DNA倍体及细胞凋亡... 详细信息

目的研究眼镜蛇毒细胞毒素13诱导人脐静脉内皮细胞凋亡作用及其对Bcl-2家族基因表达的影响。方法CCK-8法测定细胞毒素13对人脐静脉内皮细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析DNA倍体及细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应检测Bcl-2、Bax和Bcl-xL基因表达的变化,Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果细胞毒素13对人脐静脉内皮细胞增殖具有显著的抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其抑制作用呈剂量依赖性。细胞毒素13可上调促凋亡蛋白Bax,而对抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL的表达无明显影响。结论细胞毒素13可能通过上调Bax表达诱导细胞凋亡,抑制人脐静脉内皮细胞增殖。

关键词：眼镜蛇毒细胞毒素人脐静脉内皮细胞细胞凋亡 Bcl-2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

白眉蝮蛇蛇毒细胞毒素H1对实验性大鼠胃癌抑制作用的实验研究

引用

第四军医大学学报 2009年第11期30卷 975-977页

作者：鲁珏徐飞鹏广东医学院附属医院胃肠外科广东湛江524000

目的:从白眉蝮蛇蛇毒中提取细胞毒素H1,观察细胞毒素H1对实验性大鼠胃癌的抑制作用.方法:采用DEAE-Sephadex A-50,TSKgel Pheny柱层析从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化细胞毒素H1.在饮水中添加致癌剂1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG),增溶剂吐... 详细信息

目的:从白眉蝮蛇蛇毒中提取细胞毒素H1,观察细胞毒素H1对实验性大鼠胃癌的抑制作用.方法:采用DEAE-Sephadex A-50,TSKgel Pheny柱层析从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化细胞毒素H1.在饮水中添加致癌剂1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG),增溶剂吐温20及维生素D3饲喂Wistar大鼠,并应用高张盐水间歇辅以刺激,制造大鼠胃癌模型,将存活的大鼠胃癌模型随机分为阴性对照组、5-FU阳性对照组、细胞毒素H1给药组,连续注射3wk.结果:细胞毒素H1给药组原位肿瘤体积、瘤质量较5-FU组明显降低,具有统计学意义(P<0.05).结论:细胞毒素H1确有抑制实验性大鼠胃癌生长和转移的作用.

关键词：细胞毒素白眉蝮蛇毒大鼠胃肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

冠心病与幽门曙杆菌细胞毒素的关系

引用

临床心血管病杂志 1999年第11期15卷 497-498页

目的研究幽门螺杆菌(HP)感染细胞毒素相关蛋白基因A(CAGA)Ⅰ型菌株和Ⅱ型菌株与冠心病(CHD)之间的关系.方法测定54例CHD患者与51例非CHD的对照组的血清HP抗体及CAGA抗体阳性率并进行比较.结果 CHD组HP抗体血清学阳性率同于对照组(48.1... 详细信息

目的研究幽门螺杆菌(HP)感染细胞毒素相关蛋白基因A(CAGA)Ⅰ型菌株和Ⅱ型菌株与冠心病(CHD)之间的关系.方法测定54例CHD患者与51例非CHD的对照组的血清HP抗体及CAGA抗体阳性率并进行比较.结果 CHD组HP抗体血清学阳性率同于对照组(48.15％:41.18％),但两组之间无显著性差异(P〉0.05);CHD组CAGA抗体的血清学阳性率明显高于对照组(31.48％:15.69

关键词：冠心病幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因A

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与Hp相关性胃疾病的关系

引用

中国实用内科杂志 1999年第4期19卷 227-228页

作者：张玲霞张沥刘永国张宁霞阎小君韩锋产侯瑜苏成芝西安市中心医院消化科西安市第一医院第四军医大学

现已确认，幽门螺杆菌（Ｈｐ）是慢性萎缩性胃炎及消化性溃疡的主要致病因素之一，与胃癌的发生有密切关系。人群中Ｈｐ的感染率在５０％以上，其中６０％～８０％的Ｈｐ具有单拷贝的细胞毒素相关蛋白基因Ａ，产生细胞毒素相关蛋白Ａ（... 详细信息

现已确认，幽门螺杆菌（Ｈｐ）是慢性萎缩性胃炎及消化性溃疡的主要致病因素之一，与胃癌的发生有密切关系。人群中Ｈｐ的感染率在５０％以上，其中６０％～８０％的Ｈｐ具有单拷贝的细胞毒素相关蛋白基因Ａ，产生细胞毒素相关蛋白Ａ（ＣａｇＡ）。研究表明，产生ＣａｇＡ...

关键词：胃疾病幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小儿急性腹泻空肠弯曲菌细胞毒素,粘附与侵袭力检测以及临床特征

引用

中华医学杂志 1989年第9期69卷 489-490页

作者：孙自捷段恕诚上海医科大学儿科医院

体外检测了空肠弯曲菌产生细胞毒素、粘附和侵袭力,并比较了不同来源菌株这些毒力上的差异。结果急性腹泻菌株的产毒率(85.71%)明显高于其它来源菌株(P<0.05);同时来自急性腹泻菌株的粘附指数和侵袭率均高于其它来源菌株。2株来自健... 详细信息

体外检测了空肠弯曲菌产生细胞毒素、粘附和侵袭力,并比较了不同来源菌株这些毒力上的差异。结果急性腹泻菌株的产毒率(85.71%)明显高于其它来源菌株(P<0.05);同时来自急性腹泻菌株的粘附指数和侵袭率均高于其它来源菌株。2株来自健康儿童的细菌其细胞毒素、粘附与侵袭力均为阴性。表现较强毒力的菌株造成的感染较为严重,反之临床表现也相应缓和。

关键词：弯曲杆菌属细胞毒素腹泻

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中华眼镜蛇细胞毒素基因克隆、表达及对肿瘤细胞作用机理的研究

中华眼镜蛇细胞毒素基因克隆、表达及对肿瘤细胞作用机理的研究

引用

作者：陈兴勇中国科学技术大学

学位级别：博士

蛇毒主成份为具有多种生物活性的蛋白和肽类的混合物。一些蛋白作为神经毒素、细胞毒素和组织坏死性诱导剂而具有致死效应,另外一些可引起多种不同的药理学反应,且毒性较低。所有这些蛋白毒素均可攻击细胞上某些特定的位点而影响生理进... 详细信息

蛇毒主成份为具有多种生物活性的蛋白和肽类的混合物。一些蛋白作为神经毒素、细胞毒素和组织坏死性诱导剂而具有致死效应,另外一些可引起多种不同的药理学反应,且毒性较低。所有这些蛋白毒素均可攻击细胞上某些特定的位点而影响生理进程。中华眼镜蛇细胞毒素(Cardiotoxin,CTXs)为一类可与细胞膜作用的碱性多肽,主要通过结合于细胞膜表面磷脂或膜蛋白引发多种药理效应。近年来,纯化的各种眼镜蛇细胞毒组分已广泛用于实体瘤和血液病的治疗研究。本论文旨在研究细胞毒素组分三(CTXⅢ)的克隆、表达和纯化,重组细胞毒素活性分析以及细胞毒素作为临床抗肿瘤药物的可行性研究。主要包括以下三部分内容: 1、研究了CTXⅢ的理化性质,并测定了N端15个氨基酸残基序列,克隆得到CTXⅢ基因。将其分别装入两种原核***表达载体和真核酵母表达载体中进行表达。CTXⅢ在pET30a载体中表达时,在胞内形成包涵体,以不可溶的形式存在。CTXⅢ基因插入pThioHis B载体中,与硫氧还蛋白(Trx)融合表达,通过肠激酶位点裂解可将融合蛋白释放出来。在实验室规模,每升培养液可表达7mg重组心脏毒素,经Histrap柱纯化回收,得率可达75%,肠激酶裂解后凝胶柱回收率为70%,总回收率达37%左右。CTXⅢ基因插入真核酵母分泌型表达载体(PIC9K),经诱导重组蛋白表达量为9.5mg/L,培养液经离心后直接凝胶柱回收重组目的蛋白,得率可达65%。与天然毒素相比,重组蛋白N端冗余三个氨基酸(Gly-Tyr-Thr),RP-HPLC分析重组蛋白纯度大于95%。利用溶血活力和对K562肿瘤细胞增殖抑制检测重组细胞毒素与天然细胞毒素的活性,溶血分数50%时所对应的质量浓度(HU50)分别为6.53μg/ml和7.4μg/ml,12小时IC50分别为3.56μg/ml和2.63μg/ml,表明重组蛋白活性接近天然蛋白,推测分泌表达时重组蛋白折叠正确。选择真核酵母分泌型表达载体为最佳表达方式。 2、采用不同生物学方法分析细胞毒素体外作用于血液病细胞K562的杀伤效果,通过细胞增殖抑制、Annexin V/PI双染实验、Caspase活性检测和DNA片段化等观察CTXⅢ诱导下K562细胞凋亡的情况。结果显示,CTXⅢ作用于K562细胞可使细胞停滞于G2/M期,并且活化Caspase-8和细胞色素C双重信号途径,诱导下游Bid分子切割,促使K562细胞发生凋亡。MAPK特异性阻断剂和免疫印迹分析发现,CTXⅢ诱导K562细胞凋亡的过程中,通过磷酸化p38和JNK蛋白,激活MAPK信号通路。建立鸡胚尿囊膜(CAM)体内K562肿瘤模型实验,高剂量CTXⅢ不影响鸡胚发育,表明CTXⅢ基本无毒副作用,CTXⅢ亦可有效抑制CAM上K562细胞形成肿瘤结节的增长,这一过程与Caspase-8和细胞色素C途径相关。通过分析K562血液病的形成机制,认为CTXⅢ可能是通过竞争性结合ATP,从而阻断K562细胞中异常酪氨酸激酶活性。 3、本论文同时分析了CTXⅢ作用于实体瘤肝癌的应用效果,在较低剂量下,CTXⅢ可有效抑制HepG2细胞增殖(24小时的IC

关键词：中华眼镜蛇细胞毒素融合蛋白 pPIC9K HepG2细胞 K562细胞凋亡鸡胚尿囊膜

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小儿结节性胃炎与幽门螺杆菌的细胞毒素:附30例报告

引用

临床儿科杂志 2000年第6期18卷 355-357页

作者：梁世山刘思赵白剑鹏许春娣福建省泉州市第一医院儿科 362000 上海第二医科大学附属瑞金医院内镜室

为探讨小儿结节性胃炎的病理改变与HP的CagA、VacA的关系。对胃镜检查发现胃粘膜呈小颗粒状或结节状改变的30例患儿作快速尿素酶试验、切片吉姆氏染色作HP及病理组织学检查，同时采血2ml作血清HP的CagA、VacA免疫印迹检测并设对照。结果... 详细信息

为探讨小儿结节性胃炎的病理改变与HP的CagA、VacA的关系。对胃镜检查发现胃粘膜呈小颗粒状或结节状改变的30例患儿作快速尿素酶试验、切片吉姆氏染色作HP及病理组织学检查，同时采血2ml作血清HP的CagA、VacA免疫印迹检测并设对照。结果:结节性胃炎多由HP感染所致，感染率为80%，与感染产毒素的HP菌株有关，且以活动性胃炎为主，在所感染的HP菌株中CagA抗体全部为阳性，在CagA^+、vacA^+菌株中病变的炎症反应较CagA^+、VacA一菌株严重，HP感染后的结节性胃炎全部有淋巴细胞浸润。提示小儿结节性胃炎应考虑根除疗法。

关键词：幽门螺杆菌结节性胃炎儿童细胞毒素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

舟山眼镜蛇细胞毒素CTX1诱导MCF-7细胞溶酶体膜通透与死亡机制研究

舟山眼镜蛇细胞毒素CTX1诱导MCF-7细胞溶酶体膜通透与死亡机制研究

引用

作者：王菡广州医科大学

学位级别：博士

背景与目的：　　在发展中国家，乳腺癌是死亡率最高的女性恶性肿瘤。手术、化疗和放疗一直是乳腺癌主要治疗方法，但放、化疗严重的毒副作用是临床应用的主要障碍。舟山眼镜蛇细胞毒素1（Cytotoxin1，CTX1）是舟山眼镜蛇毒中分离出的... 详细信息

背景与目的：　　在发展中国家，乳腺癌是死亡率最高的女性恶性肿瘤。手术、化疗和放疗一直是乳腺癌主要治疗方法，但放、化疗严重的毒副作用是临床应用的主要障碍。舟山眼镜蛇细胞毒素1（Cytotoxin1，CTX1）是舟山眼镜蛇毒中分离出的小分子碱性多肽，以往的研究表明，CTX1对多种肿瘤细胞具有选择性杀伤作用，对人乳腺癌细胞MCF-7的杀伤作用尤为明显，并提示CTX1诱导MCF-7细胞死亡的作用与溶酶体膜通透(Lysosome membrane permeabilition，LMP)有关。本实验采用MCF-7细胞进一步研究CTX1诱导LMP以及细胞死亡的机制。主要研究内容有：1）体内体外实验检测CTX1对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞和裸鼠移植瘤的抑制作用;2）CTX1对LMP的影响和程度以及与毒性作用的关系;3）各种抑制剂在CTX1诱导MCF-7细胞死亡中的作用;4)促凋亡蛋白Bid在CTX1诱导MCF-7细胞死亡中的作用。研究结果提示，CTX1引起的细胞死亡是溶酶体介导的细胞死亡。　　方法：　　***1对MCF-7细胞作用的抑制作用　　1.1 MTS法检测CTX1对MCF-7相对活力的影响;1.2 流式细胞术检测Annexin V-FITC、PI双染后细胞死亡情况;1.3 制备裸鼠MCF-7移植瘤模型，监测瘤重、肿瘤生长曲线和体重等指标，HE染色和透射电镜观察移植瘤形态学变化;***1对MCF-7细胞溶酶体通透性的检测　　2.1 激光共聚焦显微镜下观察LysoTracker Red溶酶体特异性染色;2.2 荧光显微下观察溶酶体荧光右旋糖苷释放实验;2.3 荧光显微下观察Cathepsin L免疫荧光染色;2.4 荧光显微下观察Galectin-3免疫荧光染色;2.5 流式细胞术检测溶酶体吖啶橙染色;2.6 胞浆及全细胞组织蛋白酶B（Cathepin B）活性检测;2.7 Western blotting检测Cathepsin L的表达。　　*** blotting检测Bid在CTX1诱导MCF-7细胞死亡中的作用。　　4.流式细胞术检测各抑制剂对CTX1诱导MCF-7细胞死亡的逆转作用。　　结果：　　***1对MCF-7细胞生长和裸鼠移植瘤的影响　　1.1 CTX1对MCF-7细胞生长的影响：CTX1对MCF-7的细胞活力具有抑制作用，不同浓度的CTX1（0.625、1.25、2.5μg/ml）作用于MCF-7细胞24h，细胞相对活力分别为(93.7±2.0)%、(58.9±4.5)%、(16.7±3.5)%;用CTX11.25μg/ml处理细胞12h、24h和36h，MCF-7细胞相对活力分别为(78.3±6.2)%、(58.9±4.5)%、(31.8±5.0)%，CTX1对MCF-7细胞的抑制作用呈剂量依赖和时间依赖。CTX1诱导MCF-7细胞死亡以晚期凋亡和坏死为主，早期凋亡不明显。用CTX11.25μg/ml处理细胞24h，细胞坏死率为(32.20±2.406)%，晚期凋亡率为(14.467±2.013)%，而早期凋亡率仅为(3.11±1.04)%。　　1.2 CTX1抑制MCF-7裸鼠移植瘤的生长：CTX10.42mg/kg组能够抑制MCF-7移植瘤的生长，瘤重与阴性对照组相比有统计学差异（p＜0.05）;与阳性对照阿霉素组相比，CTX10.42mg/kg组对裸鼠体重影响较小，有统计学差异（p＜0.05）。CTX10.42mg/kg组MCF-7肿瘤坏死面积明显增加，残留肿瘤细胞灶更少，可见大片状坏死;超微病理显示该组肿瘤细胞中溶酶体数量减少，周围线粒体肿胀，嵴断裂消失，可见凋亡细胞。　　***1对MCF-7细胞溶酶体通透性的影响　　2.1 利用LysoTracker Red、荧光右旋糖苷和Cathepsin L标记溶酶体，CTX1作用MCF-7细胞3h后，显微镜下即可观察到荧光强度明显减弱，荧光右旋糖苷和Cathepsin L标记还可观察到荧光状态的改变，即由对照组颗粒样荧光变为细胞浆内弥漫性着色。CTX1作用MCF-71h起，即可见到Galectin-3在细胞胞浆内少量聚集，随着处理时间的延长，绿色荧光颗粒逐渐增多，体积增大，亮度增加，呈粗颗粒点灶状。　　2.2 流式细胞术检测吖啶橙染色后MCF-7细胞荧光强度变化，结果显示：CTX11.25μg/ml处理细胞6h、12h和24h，FL3通道低荧光强度的细胞所占比率分别(7.79±0.50)%、(14.33±1.00)%、（74.17±2.67)%，而溶剂对照组为(3.08±0.71)%。随着CTX1处理时间的延长，MCF-7低荧光强度细胞所占比率不断增加，荧光强度较对照组明显减弱，差异具有统计学意义（p＜0.05）。　　2.3 胞浆、全细胞C

关键词：乳腺癌舟山眼镜蛇细胞毒素溶酶体细胞死亡药理作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

米氏凯伦藻溶血毒素和细胞毒素的分离纯化与毒性研究

米氏凯伦藻溶血毒素和细胞毒素的分离纯化与毒性研究

引用

作者：郭辉革厦门大学

学位级别：硕士

进入21世纪以来,米氏凯伦藻已成为我国近海,特别是福建省近海域赤潮爆发的主要优势藻种,米氏凯伦藻溶血性毒素(hemolytic toxin)和细胞毒素(cytotoxin)对海洋生物有强烈的毒害作用,严重破坏海洋渔业、水产养殖业的发展,造成了重大的经... 详细信息

进入21世纪以来,米氏凯伦藻已成为我国近海,特别是福建省近海域赤潮爆发的主要优势藻种,米氏凯伦藻溶血性毒素(hemolytic toxin)和细胞毒素(cytotoxin)对海洋生物有强烈的毒害作用,严重破坏海洋渔业、水产养殖业的发展,造成了重大的经济损失。为加深对米氏凯伦藻赤潮的认识,了解米氏凯伦藻相关毒素对海洋生物的毒害作用,本研究人工大量培养米氏凯伦藻,在实验室模拟试验米氏凯伦藻对鲍鱼的致死；有机萃取法获得米氏凯伦藻甲醇粗提物,用斑马鱼胚胎的毒性试验,模拟赤潮后期,藻体死亡后,细胞内溶物对海洋生物胚胎和幼体的毒性作用；运用正相硅胶柱、TLC、HPLC等分离纯化方法获得米氏凯伦藻的毒素,研究溶血性毒素的物质结构和溶血活性；通过细胞试验研究米氏凯伦藻细胞毒素对人类肿瘤细胞和鱼类细胞的毒性作用和毒害机制。希望为更加深入研究米氏凯伦藻及赤潮奠定基础。研究结果显示,在实验室模拟自然环境培养米氏凯伦藻,人工培养的密度最高可达5.1×107个/L,超过自然环境下米氏凯伦藻赤潮爆发的最大密度。米氏凯伦藻的鲍鱼喂食实验证明,在藻密度1.0×106个/L及以上时鲍鱼全部死亡。实验证明低浓度米氏凯伦藻甲醇粗提物即抑制斑马鱼胚胎出膜率,半数出膜抑制率浓度为216μg/mL,同时观察到斑马鱼胚胎出现发育迟缓,体节缩短等各种畸形现象。在粗提物浓度超过2.16mg/mL,时,斑马鱼胚胎24小时内致死率达到100%。分离纯化出米氏凯伦藻溶血性毒素化合物MS-2-17,通过质谱和核磁解析,获得溶血性毒素化合物的结构证明它是一种油脂酰胺类化合物,分子量为281.用大白兔的血红细胞做溶血试验验,当化合物浓度在12μ g/mL时的溶血活性就能达到80%以上。本研究还分离纯化出米氏凯伦藻细胞毒素的混合物,通过细胞抑制实验、细胞凋亡检测和细胞周期流式检测实验,证明该毒素能够有效抑制HeLa细胞等肿瘤细胞的分裂增殖,当浓度在80ng/mL以内时就能将细胞抑制在G。期内,使细胞不能够进入S期。总之,本研究第一次在实验室模拟米氏凯伦藻赤潮发生前期和后期,证明了鲍鱼摄食米氏凯伦藻细胞可导致死亡,以斑马鱼胚胎为实验对象,率先证明了后期藻体外死亡,低浓度的细胞内溶物对海洋生物胚胎和幼体有很强的生物毒性。成功分离纯化出溶血毒素和鉴定该化合物结构,并进行了溶血活性试验。最先证明米氏凯伦藻细胞毒素能够有效抑制细胞周期的机制。

关键词：米氏凯伦藻溶血性毒素细胞毒素斑马鱼胚胎细胞周期

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中华眼镜蛇(Naja naja atra)细胞毒素14-1(cytotoxin XIV-1)的分离、纯化及其抗肿瘤作用

中华眼镜蛇(Naja naja atra)细胞毒素14-1(cytotoxin XIV-1)的分...

引用

作者：仲晓燕福建医学院

学位级别：硕士

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：