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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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4 篇 医学
- 3 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 药学(可授医学、理...
2 篇 理学
- 1 篇 化学
- 1 篇 生物学
2 篇 工学
- 1 篇 机械工程
- 1 篇 化学工程与技术
1 篇 农学
- 1 篇 作物学

主题

6 篇 细胞生命周期
3 篇 端粒酶逆转录酶
2 篇 细胞分化
2 篇 重组逆转录病毒
2 篇 端粒酶
1 篇 凋亡
1 篇 锌配合物
1 篇 鸡马立克肿瘤病
1 篇 骨髓间充质干细胞
1 篇 铜锌配合物
1 篇 星形胶质细胞
1 篇 差异表达
1 篇 磷酸二酯键
1 篇 运动追踪
1 篇 基因表达
1 篇 切割dna
1 篇 人工核酸酶活性
1 篇 肿瘤抑制基因
1 篇 细胞图像
1 篇 图像序列

机构

2 篇 浙江大学
1 篇 西安交通大学
1 篇 南京大学
1 篇 浙江大学附属第一...
1 篇 天津工业大学
1 篇 云南师范大学
1 篇 沈阳农业大学

作者

2 篇 黄国平
1 篇 潘志军
1 篇 施利民
1 篇 徐玉林
1 篇 刘佳
1 篇 陈景文
1 篇 席咏梅
1 篇 王金福
1 篇 王晓燕
1 篇 杨金凤
1 篇 孙杰
1 篇 郭春娟
1 篇 汉丽梅
1 篇 范铭
1 篇 王全师
1 篇 高润池
1 篇 郑强

语言

7 篇 中文

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排序：

用重组逆转录病毒重建大鼠脑皮质星形胶质细胞端粒酶活性及其功能的研究

用重组逆转录病毒重建大鼠脑皮质星形胶质细胞端粒酶活性及其功能...

引用

作者：王全师西安交通大学

学位级别：博士

该研究的目的是为了阐明使用hTERT作为目的基因治疗中枢退行性疾病或将转导了hTERT的神经细胞作为移植细胞治疗中枢神经退行性疾病的有效性和安全性问题.结论:使用分子生物学方法和重组病毒技术我们成功的构建了表达hTERT和GFP两种重组... 详细信息

该研究的目的是为了阐明使用hTERT作为目的基因治疗中枢退行性疾病或将转导了hTERT的神经细胞作为移植细胞治疗中枢神经退行性疾病的有效性和安全性问题.结论:使用分子生物学方法和重组病毒技术我们成功的构建了表达hTERT和GFP两种重组逆转录病毒.使用差异种植技术分离获得了新生大鼠脑皮质星形胶质细胞.用重组病毒感染分离的大鼠脑皮质星形胶质细胞,再建了细胞的端粒酶活性,保持和延长了端粒,克服了细胞的复制衰老,延伸了细胞生命周期.应激加害实验结果表明过表达端粒酶的细胞能拮抗应激诱导的凋亡和坏死,提高了细胞损伤后恢复增殖的速度,但它没有拮抗应激诱导衰老作用.裸鼠接种实验和细胞集落形成实验表明转导hTERT的大鼠脑星形胶质细胞没有成瘤作用.该文研究结果提示hTERT具有抗复制衰老、抗应激凋亡和坏死、延伸细胞生命周期的生物学作用,可以用来预防和治疗中枢神经退行性疾病,但该基因的生物安全性还需做大量研究来确定.

关键词：端粒端粒酶端粒酶逆转录酶细胞生命周期衰老凋亡星形胶质细胞重组逆转录病毒

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转人端粒酶基因骨髓间充质干细胞的构建及其细胞特征分析

转人端粒酶基因骨髓间充质干细胞的构建及其细胞特征分析

引用

作者：黄国平浙江大学

学位级别：博士

端粒酶是一种由RNA和蛋白质两种组份构成的核糖核蛋白复合体,其中RNA组份是端粒酶复制时用的模板,蛋白质组分主要是端粒酶催化亚单位,又叫做端粒酶逆转录酶（hTERT）,它的功能是利用RNA模板复制端粒的重复片段,延长端粒。端粒的长度和... 详细信息

端粒酶是一种由RNA和蛋白质两种组份构成的核糖核蛋白复合体,其中RNA组份是端粒酶复制时用的模板,蛋白质组分主要是端粒酶催化亚单位,又叫做端粒酶逆转录酶（hTERT）,它的功能是利用RNA模板复制端粒的重复片段,延长端粒。端粒的长度和细胞分裂时端粒损失的速度决定了不表达端粒酶细胞的衰老和寿命,而在表达端粒酶的细胞中端粒酶能补充端粒长度,使细胞的生命延长甚至永生。骨髓间充质干细胞（hMSCs）在细胞移植,基因治疗,组织工程方面有重要作用,但是骨髓间充质干细胞体外增殖能力弱,传代能力差。延长骨髓间充质干细胞的生命周期能弥补骨髓间充质干细胞来源的不足,具有重要的实际意义。因此,本研究制备了表达hTERT基因的重组逆转录病毒,在分离培养骨髓间充质干细胞的基础上,将hTERT基因导入骨髓间充质干细胞中,并传代290代以上。在传代过程中,对转导hTERT基因的细胞进行了功能和特性的分析。目的:通过重组逆转录病毒技术体外转导hTERT基因,建立过表达端粒酶的hMSCs,经传代培养观察过表达端粒酶的hMSCs分裂和增殖能力以及细胞生命周期变化。阐明使用hTERT作为目的基因能否延长hMSCs的生命周期,并研究过表达端粒酶hMSCs的表面抗原,细胞核型特征与致瘤性,向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞方向分化的潜力以及细胞蛋白组学特征。为将来构建适用于临床的、有较长生命周期和有一定分化能力的骨髓间充质干细胞打下理论基础。方法和结果:使用重组病毒技术构建表达hTERT的重组逆转录病毒,用该病毒感染骨髓间充质干细胞,并使用TRAP-PCR方法证实我们重建了细胞的端粒酶活性。我们将转导了hTERT的细胞接种于免疫缺陷小鼠皮下,未见肿瘤形成。转导细胞的软琼脂细胞克隆形成实验阴性,表明转导hTERT的骨髓间充质干细胞未出现恶性转化,没有成瘤作用。另外,转导了hTERT的骨髓间充质干细胞在相应诱导液的作用下,能够向成骨细胞,软骨细胞,脂肪细胞方向分化,证实了细胞的多向分化潜能。采用双向凝胶电泳加基质辅助的激光解吸/离子化飞行时间质谱方法（2DE-MALDI-TOF-MS）分析转导hTERT与未转导hTERT的hMSCs的蛋白组学差异,我们鉴定了100种蛋白点,发现有20种蛋白质有差异表达。结论:使用表达hTERT的重组逆转录病毒感染的骨髓间充质干细胞能够再建细胞的端粒酶活性,克服细胞的复制衰老,延伸了细胞生命周期。免疫缺陷小鼠皮下接种实验和细胞克隆形成实验表明转导hTERT的骨髓间充质干细胞没有成瘤作用。在相应诱导液的作用下,转导hTERT的骨髓间充质干细胞能够向成骨细胞,软骨细胞,脂肪细胞方向分化。差异蛋白组学分析表明,在过表达端粒酶hMSCs中有11种蛋白表达明显升高,有9种蛋白表达明显下降。本文研究结果提示hTERT具有抗复制衰老、延伸细胞生命周期的生物学作用,转导了hTERT的骨髓间充质干细胞具有向多种细胞分化的潜能,在组织工程,细胞工程,和基因工程方面有很大的应用前景。我们的结果为研究hTERT基因延长细胞生命周期的分子机制提供了重要的线索。

关键词：端粒酶端粒酶逆转录酶细胞生命周期重组逆转录病毒细胞分化致瘤性蛋白组学差异表达

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多核铜、锌配合物的合成及其人工核酸酶活性研究

多核铜、锌配合物的合成及其人工核酸酶活性研究

引用

作者：陈景文南京大学

学位级别：博士

DNA中的磷酸二酯键异常稳定，这种稳定性被认为是维持生命及保持生物遗传信息的基本要求之一。然而，在细胞生命周期中的许多阶段，如：变异基因的切除与修复、整合以及信号转换等都需要高效水解DNA分子中磷酸二酯键。另外，在生物工程... 详细信息

DNA中的磷酸二酯键异常稳定，这种稳定性被认为是维持生命及保持生物遗传信息的基本要求之一。然而，在细胞生命周期中的许多阶段，如：变异基因的切除与修复、整合以及信号转换等都需要高效水解DNA分子中磷酸二酯键。另外，在生物工程或分子生物学研究领域，对DNA进行各种操作以期得到某种符合要求的功能分子也需要利用某种物质高效率地断裂DNA。因此，合成能够在生理条件下高效切割DNA的小分子有望在分子生物学、生物工程以及药物化学研究领域得到广泛应用。据研究，自然界中有许多天然酶能够高效水解DNA分子，其中很多天然酶的活性中心含有多个金属离子，这些金属离子对其活性的发挥起着至关重要的作用。通过对天然酶的作用机理的深入研究，发现具有丰富的结构及反应性变化的金属配合物是最合适的人工模拟这些天然酶的化合物之一。多年来，这方面的研究一直是人们关注的热点之一。本论文设计并合成了三种新型双齿含酚配体及一种已报道的多齿三嗪配体，利用这些配体合成了五种含铜、锌离子的配合物，借助各种手段研究了这些化合物在水溶液介质中与DNA或其模拟物的作用，探讨了它们切割DNA或其模拟物的活性。\n 本论文共分为四章：\n 第一章总结了典型天然核酸酶及磷酸酯酶水解断裂底物的作用机理，阐述了这些天然酶的金属活性中心在酶切反应中可能发挥的作用。简要综述了模拟人工核酸酶及磷酸酯酶的目的、应用前景及其研究进展情况。重点描述了金属配合物作为核酸酶及磷酸酯酶模拟物的设计及其作用机理。归纳了含酚桥联配体及其双核配合物的合成。\n 第二章设计合成了一种新型带有醇羟基侧链的含酚配体2,6-bis｛［（2-pyridylmethyl）（2-hydroxyethyl）amino］methyl｝-4-methylphenol及其不对称双核锌配合物，［Zn<,2>（L<,-2H>）（AcO）（H<,2>O）］（PF<,6>）·2H<,2>O（Zn<,2>L\'）。以DNA的双酯模拟物，\n 二-（4-硝基苯）磷酸酯为底物，在Tris-HCl/NaCl（pH=7.40）水溶液体系及以o-phthalic acid（pK<,a1>=2.89，pK<,a2>=5.51），MES［2-（N-morpholino）ethanesulfonicacid，pK<,a >=6.2］，Tris等为缓冲剂的无水有机体系中详细研究了Zn2L对其断裂的情况。实验表明，无论在含水或无水介质中，Zn<,2>L均能有效地断裂BNPP。在DH=7.20及50℃条件下，其断裂BNPP的催化速率常数为4.60 x10<,-6 >S<,-1>。通过ESMS、Uv-VIs、NMR等手段检测及动力学分析结果可推断出配合物Zn<,2>L中锌离子结合的脱质子醇羟基（zn-OR）为反应活性基团，并据实验结果提出了Zn<,2>L’断裂BNPP的反应机理。这在众多被生物无机化学界公认的以金属离子结合的羟基（M-OH）为活性基团的人工磷酸酯酶或核酸酶中是少有的例子之一。另据研究表明，血蓝蛋白、酪氨酸酶、虫漆酶、抗坏血酸氧化酶等天然酶中均含有铜离子作为活性中心。合成铜配合物作为人工酶的研究有很多报道。含铜配合物具有适中的氧化还原电位，与核酸碱基有很高的亲和性。此外，还发现多核铜的配合物能够选择性地结合具有特殊构型的核酸并导致其断裂。新近研究还发现多核铜的配合物能通过选择性地氧化DNA的脱氧核醣而达到核酸链断裂的目的，其中有机配体在实现结合的选择性方面发挥重要作用。基于诸多铜配合物与DNA作用的研究成果，我们也开展了铜配合物的设计与合成方面的研究。其中在第三章中我们合成了另外两种类似2，6-bis{［（2-pyridylmethyl）（2-hydroxyethyl）amino］methyl}-4-methylphenol（L<\'2>）的新型含酚配体2，6-bis{［（2-aminoethyl）（2-hydroxyethyl）amino］methyl}-4-methylphenol（L<\'1>）和2，6-bis{［（2-hydroxybenzyl）（2_hydroxyethyl）amino］methyl}-4-methylphenol（L<\'3>）及其双核铜配合物。采用ESMS，UV-VIs，电位滴定等方法研究了三种配合物在水溶液中的性质，如配合物的形成，各物种的分布及其光谱行为等。在pH=7.42及室温条件下，双核配合物是主要、甚至是唯一存在的物种。以pBR322 DNA为底物探索了三种配合物在水溶液介质中对其切割的行为

关键词：磷酸二酯键细胞生命周期锌配合物铜锌配合物人工核酸酶活性多齿三嗪配体切割DNA 药物化学

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基于显微图像的活体细胞运动追踪

基于显微图像的活体细胞运动追踪

引用

作者：范铭天津工业大学

学位级别：硕士

细胞运动迁移、形变、分裂等行为的研究在生物医学领域中发挥着重要作用，如胚胎发育、寄生虫侵入、免疫反应、伤口愈合和癌症等。传统的细胞运动研究方法不但需要大量繁琐的人为操作，而且可重复操作性不强;最重要的是传统的研究方法... 详细信息

细胞运动迁移、形变、分裂等行为的研究在生物医学领域中发挥着重要作用，如胚胎发育、寄生虫侵入、免疫反应、伤口愈合和癌症等。传统的细胞运动研究方法不但需要大量繁琐的人为操作，而且可重复操作性不强;最重要的是传统的研究方法由于使用物理化学操作，而使得研究结果不能客观的反映细胞的自然运动，在技术日益革新的现今已不再适用。应用计算机图像视觉技术来研究细胞运动，以其客观准确，容易系统化、集成化逐渐为细胞运动研究领域的科研人员所关注。本文就是基于这样的背景提出的，目的是通过本文的研究建立一套科学的基于细胞显微图像的细胞运动分析方法和技术手段，从而为生物医学研究提供新的技术支持。　　本文基于数字图像处理技术，采用了自适应拓扑变化轮廓模型法(T-Snake)与细胞生命周期信息相结合的方法，对显微细胞序列图像进行追踪，得到了细胞运动的轮廓形态和运动信息。　　本文的主要研究工作包括下面几个方面：　　 1.细胞图像分割理论的研究　　根据细胞显微图像的特点，分析了现有的细胞图像分割理论、数学模型和应用流程的优缺点，为本文选择合适的模型进行细胞轮廓分割奠定了基础。　　 2.基于主成分法(PCA)细胞生命周期识别　　介绍了细胞周期和主成分法(PCA)。根据细胞在不同的周期具有不同形态结构的特点，设计并提出了利用主成分法(PCA)对显微细胞图像中细胞所处的生命周期进行识别。为后文的基于所处周期不同分类追踪细胞提供了理论支持。　　 3.细胞初始轮廓的获得　　提出了一种改进的边缘检测方法，即：一种基于模糊增强的Canny边缘检测新算法。　　 4.细胞追踪新方法的设计与实现　　综合分析了传统的动态轮廓模型及其一些改进模型的优点与不足，对拓扑自适应动态轮廓模型(T-snake)的网格划分、变形过程、各能量函数项作用、拓扑变换能力、目标提取效果和模型使用范围进行了详细研究。　　设计了适合运用于细胞分裂追踪的新模型，既先运用主成分法(PCA)识别细胞所处的生命周期，然后预测下一刻细胞是否会分裂，选择合适的T-Snake模型进行追踪。选择了T24细胞序列图像验证了追踪模型的有效性，并对实验结果进行了分析。

关键词：图像序列运动追踪细胞图像细胞生命周期 T-Snake算法

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骨髓间充质干细胞的永生化和细胞生物学特征

骨髓间充质干细胞的永生化和细胞生物学特征

引用

第三届“全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会”第二届“血管外科与组织工程专题研讨会”

作者：黄国平郭春娟杨金凤郑强孙杰徐玉林席咏梅潘志军王金福浙江大学生命科学学院杭州 310058 浙江大学附属第一医院杭州 310009

骨髓间充质干细胞(hMSCs)是细胞治疗和组织工程的重要种子细胞,在细胞移植、基因治疗、组织工程方面有重要作用,但是骨髓间充质干细胞体外增殖能力弱,传代能力差。延长骨髓间充质干细胞的生命周期能弥补骨髓间充质干细胞来源的不足,具... 详细信息

骨髓间充质干细胞(hMSCs)是细胞治疗和组织工程的重要种子细胞,在细胞移植、基因治疗、组织工程方面有重要作用,但是骨髓间充质干细胞体外增殖能力弱,传代能力差。延长骨髓间充质干细胞的生命周期能弥补骨髓间充质干细胞来源的不足,具有重要的实际意义。

关键词：骨髓间充质干细胞端粒酶基因端粒酶逆转录酶细胞生命周期细胞分化

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MDCC-MSB1肿瘤细胞己糖激酶Ⅱ与端粒酶的相关性的研究

MDCC-MSB1肿瘤细胞己糖激酶Ⅱ与端粒酶的相关性的研究

引用

中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：刘佳汉丽梅沈阳农业大学辽宁沈阳 110866

本试验目的在于对不同处理的MDCC-MSB1肿瘤细胞HK活性、端粒酶活性，HKⅡ、chTERT基因mRNA表达量进行测定，分析其变化之间的相关性，为从端粒生物学方向研究肿瘤的发生机制提供研究依据。本试验结果提示云芝多糖对端粒酶活性，chTERT基... 详细信息

本试验目的在于对不同处理的MDCC-MSB1肿瘤细胞HK活性、端粒酶活性，HKⅡ、chTERT基因mRNA表达量进行测定，分析其变化之间的相关性，为从端粒生物学方向研究肿瘤的发生机制提供研究依据。本试验结果提示云芝多糖对端粒酶活性，chTERT基因mRNA表达有明显的抑制作用，进而可以推断云芝多糖在一定程度上能抑制肿瘤。

关键词：鸡马立克肿瘤病云芝多糖基因表达细胞生命周期肿瘤抑制基因

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一种盘基网柄菌细胞同步化方法

一种盘基网柄菌细胞同步化方法

引用

作者：高润池王晓燕施利民 650500 云南省昆明市呈贡区雨花片区1号

本发明公开了一种盘基网柄菌细胞同步化方法，主要包括：S1：盘基网柄菌细胞培养；S2：盘基网柄菌细胞饥饿处理；S3：饥饿处理中细胞分裂情况信息采集；S4：向饥饿处理后的盘基网柄菌细胞重新提供营养物质；本发明综合了人工同步化和自... 详细信息

标准号: CN115433684A

本发明公开了一种盘基网柄菌细胞同步化方法，主要包括：S1：盘基网柄菌细胞培养；S2：盘基网柄菌细胞饥饿处理；S3：饥饿处理中细胞分裂情况信息采集；S4：向饥饿处理后的盘基网柄菌细胞重新提供营养物质；本发明综合了人工同步化和自然同步化的优缺点之后，鉴于盘基网柄菌细胞生命周期的特殊性，选择了除人工同步化和自然同步化之外的另外一种同步化方法，即先饥饿处理盘基网柄菌一段时间后再加入其营养物质克雷伯氏菌，使其在短时间内能够相对快速地进行同步化分裂到某一时期。该研究方法在缩短了同步化时间的同时也可以有效防止药物之间的干扰对实验结果产生影响。

关键词：同步化盘基网柄菌饥饿处理营养物质细胞分裂细胞培养细胞饥饿处理细胞生命周期有效防止药物克雷伯氏菌情况信息菌细胞基网种盘采集细胞分裂研究

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