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中国烟草科学 2020年第4期41卷 33-40页

作者：梁栋刘光亮王永马兴华石屹王树声王程栋中国农业科学院烟草研究所农业部烟草生物学与加工重点实验室中国农业科学院青岛烟草资源与环境野外科学观测试验站青岛266101 中国农业科学院研究生院北京100081 山东中烟工业有限责任公司济南250100

为了解干旱胁迫对烟草不同部位细胞程序化死亡的影响,以中烟100(不耐旱)和农大202(耐旱)为材料,采用2.5%PEG-6000模拟干旱,分析了不同耐旱性材料表型差异,用DNALadder法、TUNEL法测定烟草不同部位细胞程序化死亡发生的时间及程度差异。... 详细信息

为了解干旱胁迫对烟草不同部位细胞程序化死亡的影响,以中烟100(不耐旱)和农大202(耐旱)为材料,采用2.5%PEG-6000模拟干旱,分析了不同耐旱性材料表型差异,用DNALadder法、TUNEL法测定烟草不同部位细胞程序化死亡发生的时间及程度差异。结果表明:(1)干旱胁迫下,农大202和中烟100的生物量、根长、根直径均较对照下降,其中中烟100下降幅度更大且与对照达到极显著差异;(2)中烟100在干旱胁迫第3天,各部位均已发生PCD,但是不同部位对干旱胁迫的响应不同,叶片、侧根的PCD发生程度相近,根尖细胞发生程度明显高于叶片及侧根;(3)根据定位观察可知侧根皮层细胞以及远离叶脉的细胞较早发生PCD;(4)烟草的耐旱性越强,PCD发生较迟,发生程度也越弱。综上所述,干旱胁迫下烟草不同部位细胞发生PCD的时间和特征是有差异的,耐旱性不同的品种发生PCD的时间也是有差异的。

关键词：烟草干旱胁迫细胞程序化死亡

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泛素/26S蛋白酶体系统介导的细胞程序化死亡

引用

生命科学 2011年第1期23卷 26-31页

作者：王国坤田风霞宫江峰王玮山东农业大学生命科学学院作物生物学国家重点实验室泰安271018

在一定的生理或者病理条件下,细胞为了自身发育或者抵御不良刺激,会采取细胞程序化死亡(programmed cell death,PCD)的方式结束生命。泛素/26S蛋白酶体系统(ubiquitin-26S proteasome system,UPS)作为生物体中重要的翻译后蛋白质调节系... 详细信息

在一定的生理或者病理条件下,细胞为了自身发育或者抵御不良刺激,会采取细胞程序化死亡(programmed cell death,PCD)的方式结束生命。泛素/26S蛋白酶体系统(ubiquitin-26S proteasome system,UPS)作为生物体中重要的翻译后蛋白质调节系统,对PCD起着关键的调节作用。该文介绍UPS通过两条细胞凋亡信号转导通路以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶来调控PCD的研究进展。

关键词：细胞程序化死亡泛素/26S蛋白酶体系统天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶凋亡抑制因子

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光合作用过程介导的活性氧发生与赤星病菌诱导的烟草细胞程序化死亡的关系

光合作用过程介导的活性氧发生与赤星病菌诱导的烟草细胞程序化死...

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作者：贾裕娇山东农业大学

学位级别：博士

细胞程序化死亡（PCD）是生物体的一种主动的、有序的、生理性的细胞死亡过程。衰老和过敏反应是植物两种重要的细胞程序化死亡现象。细胞程序化死亡的机制非常复杂，迄今为止对导致PCD的关键因素依然存在较大争议。活性氧被认为在PCD... 详细信息

细胞程序化死亡（PCD）是生物体的一种主动的、有序的、生理性的细胞死亡过程。衰老和过敏反应是植物两种重要的细胞程序化死亡现象。细胞程序化死亡的机制非常复杂，迄今为止对导致PCD的关键因素依然存在较大争议。活性氧被认为在PCD中起重要的作用，且衰老和过敏反应过程都伴随有活性氧的产生。植物PCD与动物PCD有许多相似的特征，但是植物细胞产生活性氧的途径与动物细胞不完全相同。与动物细胞相比，光合作用过程介导的活性氧的产生是植物细胞产生活性氧的一个特殊途径。但是到目前为止，尚未有人研究光合作用过程介导的活性氧的发生与植物PCD的关系，尤其是与赤星病菌诱导的烟草PCD的关系。本文以烟草（NC89）和烟草赤星病菌的代谢物为实验材料，通过分析赤星病菌的代谢物对烟草叶片的光合放氧速率、气体交换速率、叶绿素和蛋白质的含量、实际光化学效率、光系统Ⅱ电子传递效率、活性氧的含量、活性氧清除酶的活性及DNA片断化等生理生化过程的影响，探讨了植物光合作用过程介导的活性氧的产生与赤星病菌诱导的烟草PCD的关系。主要结果如下：\n ***营养液与查彼培养液处理离体烟草叶片（这两种处理在本研究中均作为对照）后，随着处理时间的延长，不同叶龄烟草叶片中的蛋白质、叶绿素含量以及光合放氧能力均呈相似的下降趋势，说明这两种处理下，烟草叶片经历了相同的自然衰老过程。但是，用赤星病菌代谢物处理烟草叶片后，导致叶片蛋白质和叶绿素含量以及光合能力大幅度下降，下降程度显著大于Hoagland营养液与查彼培养液处理的叶片，表明赤星病菌代谢物诱导并加剧了烟草叶片的衰老，赤星病菌代谢物对于老叶影响尤为明显。给烟草叶片注射赤星病菌代谢物后，叶片的注射区域的细胞的DNA发生断裂，电泳后可见一条明显的180bp的PCD特征条带，这表明在赤星病菌代谢物作用下，烟草叶片发生了过敏反应引起的细胞程序化死亡。\n 2.给烟草注射赤星病菌代谢物后，烟草叶片的气孔导度和光合速率均大幅度下降，与此同时，胞间隙CO2浓度增加，表明赤星病菌代谢物直接作用于叶肉细胞抑制烟草叶片的光合作用，而不是通过降低气孔导度来影响光合作用。短时间（5min）的赤星病菌代谢物处理就能导致烟草叶片的光合放氧速率明显下降。这说明在赤星病菌代谢物导致叶片衰老之前，就直接抑制了叶片的光合能力。烟草赤星病菌代谢物处理烟草叶片后，严重抑制了烟草叶片的实际光化学效率，导致叶片中过剩光能增加。\n 赤星病菌代谢物处理烟草叶片后，导致光合机构电子传递的量子效率（）E0和捕获的激发子将电子传递到电子传递链QA-下游其它电子受体的效率ψ0明显下降，并显著改变了叶绿素荧光诱导动力学OJIP曲线，导致K点和J点的荧光显著上升，说明赤星病菌代谢物严重的伤害了叶片光合机构放氧复合体（OEC）的活性，抑制了QA到QB间的电子传递过程，最终导致整个电子传递链的电子传递受抑。\n 3.赤星病菌代谢物处理离体烟草叶片4天后，导致烟草叶片的H2O2含量显著增加。赤星病菌代谢物短时间（1 h）处理烟草叶片，也明显导致叶片中的H2O2含量增加，并导致叶片的PSII激发压显著增加。这说明在赤星病菌代谢物诱导叶片衰老之前，就能直接导致叶片中活性氧含量增加。分析表明，烟草叶片光合电子传递速率和光合放氧速率与叶片中H2O2含量呈显著的负相关，此外，叶片H2O2的增加和PSII激发压的增加表现出一致的趋势，这说明赤星病菌代谢物对片光合作用抑制导致PSII过剩激发能的增加，是造成叶片中的H2O2含量增加的一个主要原因。\n 4.赤星病菌代谢物处理叶片后，促进了SOD的活性但却显著抑制了CAT的活性。SOD活性的增加会加速叶片中由于过剩激发能所产生的O2-的分解，生成更多的H2O2，但是由于CAT活性的受抑，导致H2O2不能及时清除，这可能是赤星病菌代谢物导致烟草叶片的H2O2过量积累的一个重要原因。\n 为了排除赤星病菌诱导叶片衰老对CAT的影响，研究了短期赤星病菌代谢物处理对商品CAT的直接作用。体外实验的结果表明，赤星病菌代谢物能够直接抑制商品CAT的活性，这说明赤星病菌代谢物是在蛋白水平上对CAT酶直接抑制。上述结果表明，赤星病菌代谢物通过对烟草叶片光合作用的抑制，导致过剩激发能的产生，进而导致活性氧产生的增加；而赤星病菌代谢物通对CAT活性的抑制则阻碍了H2O2的清除，这两种作用共同导致烟草叶片中H2O2过量积累。过量积累的H2O2会通过抑制D1蛋白的合成，进一步加剧PSII的光抑制，导致更多过剩激发能的产生，进而产生更多的活性氧，造成恶性循环。这可能是赤星病菌代谢物加剧烟草叶片衰老，导致烟草叶片发生PCD的一个主要原因。\n 5.与弱光相比，强光下，给烟草叶片注射烟草赤星病菌代谢物后，烟草叶片的实际光化学效率，线性电

关键词：赤星病菌代谢物细胞程序化死亡烟草衰老过敏反应活性氧光合作用

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细胞程序化死亡的线粒体调控

引用

国外医学（免疫学分册） 1998年第2期21卷 100-103页

作者：马驰于永利白求恩医科大学基础医学院免疫教研室

线粒体对细胞程序化死亡有调控作用。程序化死亡细胞可观察到线粒体转膜电位的下降,线粒体通透性改变很可能是细胞程序化死亡链条中的关键,由此导致程序化死亡诱导因子的释放。Bcl-2基因也与线粒体的调控密切相关。对于线粒体功能和细... 详细信息

线粒体对细胞程序化死亡有调控作用。程序化死亡细胞可观察到线粒体转膜电位的下降,线粒体通透性改变很可能是细胞程序化死亡链条中的关键,由此导致程序化死亡诱导因子的释放。Bcl-2基因也与线粒体的调控密切相关。对于线粒体功能和细胞程序化死亡关系的研究,深化了对细胞程序化死亡的认识。

关键词：细胞程序化死亡线粒体调控

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细胞程序化死亡参与了化橘红果实分泌囊的形成

细胞程序化死亡参与了化橘红果实分泌囊的形成

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广东省植物学会2010学术研讨会(2010年广东省植物学会青年学者学术研讨会)

作者：刘培卫吴鸿华南农业大学生命科学学院药用植物研究中心广州510642

分泌囊是芸香科(Rutaceae)柑橘属(Citrus)植物普遍具有的分泌组织，其结构特征是柑橘属非常重要的分类学标准。对于分泌囊的起源和分泌囊腔的形成方式历来争议较大。有关分泌囊的起源，主要有两大类观点，一类认为起源于有确定数目的几... 详细信息

分泌囊是芸香科(Rutaceae)柑橘属(Citrus)植物普遍具有的分泌组织，其结构特征是柑橘属非常重要的分类学标准。对于分泌囊的起源和分泌囊腔的形成方式历来争议较大。有关分泌囊的起源，主要有两大类观点，一类认为起源于有确定数目的几个细胞;一类认为起源于没有确定数目的一团细胞。对于分泌囊腔的形成方式，主要有三种观点，分别是以溶生方式形成，以裂生方式形成和以裂溶生方式形成。近年来，通过电镜酶化学技术和原位末端标记等新技术揭示了柑橘属分泌囊腔普遍是以裂溶生方式形成的。为了证明分泌囊腔以裂溶生方式形成的普遍性，本文首先运用半薄和超薄切片技术，观察了柑橘属化橘红果实分泌囊在起源、形成和发育过程中的形态学和细胞学特征;其后运用DAPI荧光染色、原位末端标记技术对化橘红分泌囊发育过程中的细胞程序化死亡进行了检测和观察。

关键词：化橘红分泌囊细胞程序化死亡

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细胞程序化死亡因子10(PDCD10)的表达、纯化和初步结晶

细胞程序化死亡因子10(PDCD10)的表达、纯化和初步结晶

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第十次中国生物物理学术大会

作者：丁璟珒李德峰张英王大成中国科学院生物物理研究所中国科学院生物物理研究所中国科学院生物物理研究所中国科学院生物物理研究所

PDCD10最早是在TF-1前骨髓瘤细胞的凋亡诱导实验中表达水平显著上调而被鉴别到的,实验表明,PDCD10在肝脏和其它组织中均有显著的表达。近来在诱导纤维原细胞凋亡以鉴别特异的凋亡相关基因的研究中也发现该基因的表达水平显著上调。这些... 详细信息

PDCD10最早是在TF-1前骨髓瘤细胞的凋亡诱导实验中表达水平显著上调而被鉴别到的,实验表明,PDCD10在肝脏和其它组织中均有显著的表达。近来在诱导纤维原细胞凋亡以鉴别特异的凋亡相关基因的研究中也发现该基因的表达水平显著上调。这些初始的研究表明PDCD10这个从线虫到人高度保守的基因在细胞凋亡的途径中发挥着作用,

关键词：细胞程序化死亡 PDCD10

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细胞程序化死亡参与了化橘红果实分泌囊的形成

细胞程序化死亡参与了化橘红果实分泌囊的形成

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广东省植物学会第十九期学术研讨会

作者：刘培卫吴鸿华南农业大学生命科学学院药用植物研究中心

分泌囊是芸香科(Rutaceae)柑橘属(Citrus)植物普遍具有的分泌组织,其结构特征是柑橘属非常重要的分类学标准。对于分泌囊的起源和分泌囊腔的形成方式历来争议较大。有关分泌囊的起源,主要有两大类观点,一类认为起源于有确定数目的几个细... 详细信息

分泌囊是芸香科(Rutaceae)柑橘属(Citrus)植物普遍具有的分泌组织,其结构特征是柑橘属非常重要的分类学标准。对于分泌囊的起源和分泌囊腔的形成方式历来争议较大。有关分泌囊的起源,主要有两大类观点,一类认为起源于有确定数目的几个细胞;一类认为起源于没有确定数目的一团细胞。对于分泌囊腔的形成方式,主要有三种观点,分别是以溶生方式形成,以裂生方式形成和以裂溶生方式形成。近年来,通过电镜酶化学技术和原位末端标记等新技术揭示了柑橘属分泌囊腔普遍是以裂溶生方式形成的。为了证明分泌囊腔以裂溶生方式形成的普遍性,本文首先运用半薄和超薄切片技术,观察了柑橘属化橘红果实分泌囊在起源、形成和发育过程中的形态学和细胞学特征;其后运用DAPI荧光染色、原位末端标记技术对化橘红分泌囊发育过程中的细胞程序化死亡进行了检测和观察。主要结果如下:1、化橘红果实分泌囊起源于外果皮的一对分生组织细胞(一个表皮细胞和与其相对应的表皮下细胞)。2、分泌囊腔是通过裂溶生方式形成的,即在分泌囊的早期,球区中央的细胞壁中层溶解,细胞之间形成小腔隙;至发育后期时,上皮细胞由内向外破毁,导致分泌囊腔迅速扩大。3、通过DAPI荧光染色和原位末端标记技术证明细胞程序化死亡确实存在于分泌囊的发育过程中。细胞程序化死亡在原始细胞团时期开始启动,到空腔扩大阶段达到顶峰。这些研究为确定柑橘属分泌囊腔以裂溶生方式发生提供了丰富的试验依据,同时为进一步从分子水平研究植物细胞程序化死亡提供了研究材料。

关键词：化橘红分泌囊细胞程序化死亡

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云杉和油松花粉发育及其原叶细胞程序化死亡的研究

云杉和油松花粉发育及其原叶细胞程序化死亡的研究

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作者：吕世友中国人民解放军军需大学

学位级别：硕士

本文采用光学显微镜，并结合荧光显微技术，对云杉和油松花粉的发育过程及淀粉粒和胼胝质壁的动态变化进行观察，同时还应用电子显微镜技术、琼脂糖凝胶电泳和原位末端标记，对云杉和油松花粉发育过程中原叶细胞的退化现象作了进一步的... 详细信息

本文采用光学显微镜，并结合荧光显微技术，对云杉和油松花粉的发育过程及淀粉粒和胼胝质壁的动态变化进行观察，同时还应用电子显微镜技术、琼脂糖凝胶电泳和原位末端标记，对云杉和油松花粉发育过程中原叶细胞的退化现象作了进一步的研究。云杉和油松花粉的发育过程与松科其它一些植物花粉的发育模式相似。在减数分裂过程中，淀粉粒和胼胝质均呈现有规律的变化。在二分体时期，淀粉粒位于赤道板，四分体时主要集中于细胞壁和胞质的分裂面。胼胝质首先在减数母细胞的赤道区沉积，形成环状胼胝质带，并逐渐向中央延伸，直至将母细胞均等的分隔成两部分，随后在两部分细胞质的中部再次出现胼胝质带，并与减数分裂Ⅰ时所形成的胼胝质带相连，再向中心部位逐渐伸展，最终将孢母细胞分隔为四个小孢子。原叶细胞形成后，其与中央细胞或精子器原始细胞之间的壁逐渐沉积胼胝质，随着原叶细胞的退化，胼胝质壁消失。减数分裂中的胞质分裂为同时型，四分体为四面体型。小孢子刚从四分体释放出来时，气囊已开始形成，细胞中含有大量淀粉粒。随着小孢子的发育，其体积不断增大，并开始出现液泡，细胞核移向一侧。小孢子第一次不对称分裂，产生一个大的中央细胞和一个小的原叶细胞。中央细胞不久就进行第二次分裂，产生精子器原始细胞和第二原叶细胞。精子器原始细胞分裂形成管细胞和生殖细胞。本文通过对云杉和油松的原叶细胞的退化过程的透射电镜研究，发现线粒体、质体等细胞器处于解体状态，染色质浓缩、趋边化，最后细胞核和液胞完全消失。这一特征与其它发生PCD的细胞中超微结构变化相一致。花粉发育不同时期的基因组DNA琼脂糖凝胶电泳，结果产生典型的DNA ladder 现象。原位末端标记结果表明，在花粉中的所有细胞中，仅原叶细胞内被检测到反应产物。上述结果进一步证明，云杉和油松花粉发育过程中，原叶细胞的退化是一种典型的PCD。同时我们还认为，具原叶细胞的松杉类植物花粉，是研究植物PCD较为理想的天然模式系统。

关键词：松杉类植物花粉发育超微结构细胞程序化死亡

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维甲酸诱导早幼粒细胞程序化死亡的研究

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上海交通大学学报（医学版） 1999年第S1期23卷 19-21页

作者：钟华李先根缪金明方智雯欧阳仁荣石学耕上海第二医科大学附属仁济医院血液科上海血液学研究所白血病研究室 200001 上海第二医科大学细胞生物学教研室 200025

目的研究全反式维甲酸（ATRA）在体外对人类急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞株NB4和HL-60细胞增殖分化和程序化死亡的作用。方法细胞形态学、流式细胞仪、核酸琼脂糖电泳等多参数进行研究。结果ATRA有诱导以上两种细胞分化、抑制细胞... 详细信息

目的研究全反式维甲酸（ATRA）在体外对人类急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞株NB4和HL-60细胞增殖分化和程序化死亡的作用。方法细胞形态学、流式细胞仪、核酸琼脂糖电泳等多参数进行研究。结果ATRA有诱导以上两种细胞分化、抑制细胞增殖的作用；维甲酸有诱导HL-60细胞在分化成熟后迅速产生程序化死亡的作用。结哈PML／RARα（早幼粒白血病／维甲酸α受体）融合蛋白的存在阻碍了NB4细胞在分化成熟后迅速发生程序化死亡。对阐明线甲酸的作用机理指导临床制订合理治疗方案有一定价值。

关键词： APL 全反式维甲酸细胞程序化死亡 PML/RARα融合蛋白

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黑麦小孢子母细胞发育过程中胼胝质合成的变化及其与细胞程序化死亡的关系

黑麦小孢子母细胞发育过程中胼胝质合成的变化及其与细胞程序化死...

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作者：李兆勇兰州大学

学位级别：硕士

该文主要以黑麦花药为材料,通过普通光学显微镜及荧光显微镜,观察了黑麦小孢子母细胞的发育过程及其胼胝质合成的变化;通过普通电镜观察了黑麦花药发育过程中小孢子母细胞的胼胝质壁及其形态结构的变化.通过普通电镜观察发现,在早前期I... 详细信息

该文主要以黑麦花药为材料,通过普通光学显微镜及荧光显微镜,观察了黑麦小孢子母细胞的发育过程及其胼胝质合成的变化;通过普通电镜观察了黑麦花药发育过程中小孢子母细胞的胼胝质壁及其形态结构的变化.通过普通电镜观察发现,在早前期I,药室中央位置的小孢子母细胞与紧靠绒毡层的小孢子母细胞形态相似,小孢子母细胞间通过胞间连丝保持原生质的连续性.通过荧光显微镜观察还发现,苯胺兰、DAPI、吖啶橙分别诱导胼胝质发绿色、蓝色和黄色荧光.最后对黑麦花药中胼胝质壁合成的变化与药室中央位置的小孢子母细胞的程序化死亡的关系及其生物学意义进行了讨论.

关键词：黑麦小孢母细胞胼胝质细胞程序化死亡自噬泡同心内质网环

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