检索结果-内蒙古大学图书馆

中华眼科杂志 2005年第5期41卷 459-463页

作者：吴志鸿张劲松中国医科大学附属第一医院眼科沈阳110001

目的探讨在紫外线诱导的人晶状体上皮细胞DNA损伤修复过程中端粒酶活性和氧化损伤蛋白的变化和作用.方法采用照射剂量为0.0(对照组)及0.5、1.5、2.5、3.5、5.0、7.5、10.0 mJ/cm2(实验1～7组)的紫外线照射人晶状体上皮细胞,采用端粒酶... 详细信息

目的探讨在紫外线诱导的人晶状体上皮细胞DNA损伤修复过程中端粒酶活性和氧化损伤蛋白的变化和作用.方法采用照射剂量为0.0(对照组)及0.5、1.5、2.5、3.5、5.0、7.5、10.0 mJ/cm2(实验1～7组)的紫外线照射人晶状体上皮细胞,采用端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附测定法检测端粒酶活性,采用免疫印迹法检测p53、DNA损伤诱导生长停顿基因(GADD45)、增殖细胞核抗原(PCNA)及细胞周期依赖激酶抑制剂p16的蛋白表达水平.结果对照组和实验1～7组的端粒酶活性呈上调趋势,8组比较差异有统计学意义(F=45.65,P<0.01);对照组和实验1～7组的p53、GADD45、PCNA、p16的蛋白表达水平均呈上升趋势,8组比较差异均有统计学意义(F=13 015.52,41 241.40,25 084.19,44 331.72;P<0.01).结论在紫外线诱导的人晶状体上皮细胞DNA损伤修复过程中,端粒酶活性上调,氧化损伤蛋白的表达水平上升.端粒酶活性的上调既加强了保护细胞的作用,又增强了增殖作用;氧化损伤蛋白表达水平的提高在紫外线诱导的人晶状体上皮细胞DNA损伤修复过程中挥关键作用;端粒酶活性上调与氧化损伤蛋白表达水平提高有关.

关键词：蛋白表达水平氧化损伤细胞端粒酶活性增殖细胞核抗原(PCNA) 细胞周期依赖激酶抑制剂细胞DNA损伤酶联免疫吸附测定法人晶状体上皮细胞紫外线诱导修复过程重复序列扩增紫外线照射免疫印迹法对照组照射剂量上升趋势

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hTERT-siRNA及hTR-siRNA的合成及对Hut78细胞端粒酶活性的影响

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中华皮肤科杂志 2005年第11期38卷 685-688页

作者：徐秀莲戚金亮陈声利姜祎群曾学思孙建方中国医学科学院中国协和医科大学皮肤病医院病理科南京210042 南京大学生命科学学院

目的探讨合成端粒酶逆转录酶(hTERT)基因及端粒酶RNA(hTR)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞株Hut78端粒酶活性的影响。方法采用体外转录法分别合成两条hTERT—siRNA及hTR—siRNA。采用siRNA直接处... 详细信息

目的探讨合成端粒酶逆转录酶(hTERT)基因及端粒酶RNA(hTR)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞株Hut78端粒酶活性的影响。方法采用体外转录法分别合成两条hTERT—siRNA及hTR—siRNA。采用siRNA直接处理细胞裂解液及磷酸钙共沉淀法将siRNA转染入Hut78细胞两种处理方式,应用端粒酶重复序列扩增聚合酶链反应(TRAP—PCR) 及聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测端粒酶活性的变化。结果体外转录法能高效合成siRNA,产量达 22．4 μg／40μL siRNA合成体系。经250 ng siRNA直接处理细胞裂解液后,可高效降低端粒酶的活性,抑制率达87％左右。30 ng siRNA转染细胞36 h后,可降低端粒酶活性20％左右,而250 ng siRNA可降低 75％左右。结论体外转录法能高效、快速、大量合成siRNA,针对hTERT及hTR基因的siRNA可明显降低Hut78细胞株的端粒酶活性。

关键词：端粒,末端转移酶 RNA干扰淋巴瘤,T细胞,皮肤细胞端粒酶活性 siRNA hTR基因 hTERT 高效合成 Hut78细胞株聚丙烯酰胺凝胶电泳

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反义T-STAR基因转染降低肺腺癌A549细胞端粒酶活性

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第三军医大学学报 2005年第11期27卷 1127-1129页

作者：张玲郭莲彭勇陈兵第三军医大学西南医院军人门诊部重庆400038 第三军医大学西南医院内分泌科重庆400038

目的　通过反义技术抑制肺腺癌A5 49细胞T STAR (testes signaltransductionandactivatorofRNA)基因内源性表达,观察对细胞端粒酶活性的影响。方法　用阳性脂质体法将T STAR反义基因转染入A5 49细胞,用RT PCR及Westernblot方法检测转染... 详细信息

目的　通过反义技术抑制肺腺癌A5 49细胞T STAR (testes signaltransductionandactivatorofRNA)基因内源性表达,观察对细胞端粒酶活性的影响。方法　用阳性脂质体法将T STAR反义基因转染入A5 49细胞,用RT PCR及Westernblot方法检测转染细胞内源性T STAR基因mRNA和蛋白表达水平,并用PCR ELISA法检测细胞端粒酶活性改变。结果　反义基因可在mRNA及蛋白水平有效抑制肺腺癌A5 49T STAR基因的表达,同时明显降低细胞端粒酶活性。结论　肺腺癌A5 49细胞T STAR基因表达的抑制可能下调端粒酶活性。

关键词：细胞端粒酶活性肺腺癌A549细胞 activator ELISA法检测 T-STAR基因 Western 反义基因转染 RT-PCR 蛋白表达水平基因mRNA 反义技术脂质体法转染细胞 blot 活性改变蛋白水平基因表达内源性抑制 and

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P53对涎腺腺样囊性癌细胞端粒酶活性的抑制作用

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基础医学与临床 2005年第3期25卷 204-208页

作者：闫炳智王洁张波董福生侯琳王旭河北医科大学口腔医学院病理室河北石家庄050017 北京大学医学部病理系北京100083

目的为了探讨P53基因对腺样囊性癌细胞端粒酶活性的抑制作用及机制。方法构建携带人野生型P53基因的腺病毒表达载体,以脂质体法瞬时转染腺样囊性癌SACC83细胞,RT PCR检测转染细胞P53基因mRNA的表达,TRAP PCR ELISA法检测转染细胞端粒酶... 详细信息

目的为了探讨P53基因对腺样囊性癌细胞端粒酶活性的抑制作用及机制。方法构建携带人野生型P53基因的腺病毒表达载体,以脂质体法瞬时转染腺样囊性癌SACC83细胞,RT PCR检测转染细胞P53基因mRNA的表达,TRAP PCR ELISA法检测转染细胞端粒酶活性的改变。并将P53基因与含有hTERT启动子核心调控区的荧光素酶报告基因pGL2630共转染SACC83细胞,测定转染细胞荧光素酶报告基因活性。结果1.瞬时转染含人野生型P53基因的重组腺病毒表达载体pΔE1P53于腺样囊性癌SACC83细胞后,其P53基因mRNA的表达明显增强;2.基因转染后,SACC83细胞内源性端粒酶活性显著降低。3.P53基因与含有hTERT启动子核心调控区的荧光素酶报告基因pGL2630共转染SACC83细胞后,其荧光素酶活性显著下降。结论外源性表达P53基因可以降低腺样囊性癌细胞SACC83细胞端粒酶活性,并可能通过抑制端粒酶hTERT基因启动子的转录活性实现。

关键词：细胞端粒酶活性抑制作用涎腺腺样囊性癌 SACC-83 野生型P53基因荧光素酶报告基因 hTERT启动子腺病毒表达载体 RT-PCR检测 ELISA法检测端粒酶hTERT 基因mRNA 腺样囊性癌细胞荧光素酶活性瞬时转染转染细胞基因启动子脂质体法基因活性基因转染转录活

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大便脱落细胞端粒酶活性与结直肠癌的早期诊断的临床应用前景

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结直肠肛门外科 2008年第6期14卷 428-430页

作者：凌志安陈利生广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科南宁5320021

端粒酶(telomerase)是一种逆转录酶,它以自身RNA为模板,逆转录合成端粒DNA,可以避免因DNA复制时端粒缩短所致的细胞衰亡,使细胞获得无限增殖的能力.

关键词：细胞端粒酶活性临床应用前景早期诊断结直肠癌大便逆转录酶端粒DNA DNA复制

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紫杉醇对卵巢癌细胞端粒酶活性影响的研究

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实用肿瘤学杂志 2005年第2期19卷 95-97页

作者：余志英杜静张金超李丽文初虹柯玮琳深圳市第二人民医院深圳518000 香港中文大学戚尔斯亲王医院外科实验室香港城市大学深圳研究院

目的观察紫杉醇对卵巢癌HO-8910细胞端粒酶活性的影响,以了解紫杉醇抗癌的可能机理。方法1-100nmol/L.紫杉醇处理HO-8910细胞后,用MTT法测定卵巢癌细胞的生长抑制率,TRAP-银染法测定端粒酶活性变化。结果1-100nmol/L紫杉醇对卵巢癌细胞... 详细信息

目的观察紫杉醇对卵巢癌HO-8910细胞端粒酶活性的影响,以了解紫杉醇抗癌的可能机理。方法1-100nmol/L.紫杉醇处理HO-8910细胞后,用MTT法测定卵巢癌细胞的生长抑制率,TRAP-银染法测定端粒酶活性变化。结果1-100nmol/L紫杉醇对卵巢癌细胞有明显抑制作用,呈时间依赖性及剂量依赖性,紫杉醇处理卵巢癌细胞后,对端粒酶活性的检测结果显示,端粒酶活性下调。结论紫杉醇对卵巢癌细胞具有明显抑制作用,其下调端粒酶活性可能是紫杉醇抗癌作用的重要机理之一。

关键词：细胞端粒酶活性紫杉醇影响的研究 HO-8910细胞卵巢癌细胞 TRAP-银染法 mol/L 抑制作用生长抑制率剂量依赖性时间依赖性活性变化检测结果抗癌作用醇处理 NIT 机理测定下调

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反义人端粒酶RNA组分基因对胃癌细胞端粒酶活性的影响

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消化外科 2002年第3期1卷 185-189页

作者：陈拥军朱正纲冯润华李建芳刘炳亚尹浩然上海第二医科大学附属瑞金医院消化外科研究所 200025

目的克隆人胃癌细胞端粒酶RNA组分（hTR）基因片段并构建其正义和反义真核表达载体,研究反义端粒酶RNA对人胃癌细胞株MKN-45端粒酶活性的影响。方法采用RT-PCH方法从人胃癌细胞株MKN-45中扩增出人hTR部分cDNA序列,将该片段分别正向和... 详细信息

目的克隆人胃癌细胞端粒酶RNA组分（hTR）基因片段并构建其正义和反义真核表达载体,研究反义端粒酶RNA对人胃癌细胞株MKN-45端粒酶活性的影响。方法采用RT-PCH方法从人胃癌细胞株MKN-45中扩增出人hTR部分cDNA序列,将该片段分别正向和反向插入PEF6/V5-His-TOPO载体后构建人端粒酶RNA组分（hTR）基因正、反义真核表达载体,随后采用脂质体转染法将该正、反义载体转染入人胃癌细胞株MKN-45,用TRAP法观察后者端粒酶活性的改变。结果所克隆的基因片段其碱基序列与文献报导完全一致,且插入载体的方向完全正确。与正常对照、转染正义载体、空载体者比较,转染反义载体者端粒酶活性显著下降。结论本实验已成功克隆了人端粒酶RNA组分（hTR）基因的部分序列并成功构建hTR正反义真核表达载体,而且反义端粒酶RNA能有效降低人胃癌细胞株MKN-45端粒酶活性。

关键词：反义人端粒酶RNA组分胃癌细胞端粒酶活性真核表达载体反义核酸

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甲状腺结节细针抽吸细胞端粒酶活性的定量检测及其意义

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中国医师杂志 2005年第5期7卷 688-689页

作者：李雪锋谢勇孙明谨郧阳医学院附属太和医院内分泌科湖北十堰442000 郧阳医学院病理教研室

本文探讨细针抽吸细胞(FNAC)端粒酶活性检测对甲状腺良恶性结节的诊断价值。用端粒重复序列扩增法测定28例甲状腺癌、18例甲状腺腺瘤及7例结节性甲状腺肿术前FNAC及术后甲状腺组织端粒酶的活性。结果提示,FNAC标本端粒酶活性测定可作为... 详细信息

本文探讨细针抽吸细胞(FNAC)端粒酶活性检测对甲状腺良恶性结节的诊断价值。用端粒重复序列扩增法测定28例甲状腺癌、18例甲状腺腺瘤及7例结节性甲状腺肿术前FNAC及术后甲状腺组织端粒酶的活性。结果提示,FNAC标本端粒酶活性测定可作为术前鉴别甲状腺结节良恶性的一种检测方法。

关键词：甲状腺结节细胞端粒酶活性定量检测其意义端粒重复序列扩增法甲状腺良恶性结节端粒酶活性检测结节性甲状腺肿细针抽吸细胞 FNAC 甲状腺组织甲状腺腺瘤酶活性测定诊断价值甲状腺癌检测方法术前

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经纤支镜刷脱细胞端粒酶活性、涮洗液CEA浓度测定对肺癌的临床价值研究

经纤支镜刷脱细胞端粒酶活性、涮洗液CEA浓度测定对肺癌的临床价...

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作者：朱国民甄永强潍坊市人民医院

采用经纤支镜毛刷取样,用TRAP法测定毛刷细胞端粒酶活性,结果显示肺癌端粒酶活性96/120(80%)与肺良性病变端粒酶活性3/30(10%)比较有显著差异(P＜0.01),与病理阳性率91/120(75.8%)或细胞学检测的阳性率67/120(56%)比较无显著差异。可避... 详细信息

标准号: hg06003666

采用经纤支镜毛刷取样,用TRAP法测定毛刷细胞端粒酶活性,结果显示肺癌端粒酶活性96/120(80%)与肺良性病变端粒酶活性3/30(10%)比较有显著差异(P＜0.01),与病理阳性率91/120(75.8%)或细胞学检测的阳性率67/120(56%)比较无显著差异。可避免反复多次活检损伤造成大出血的可能和肺泡灌洗的危险性较大、灌洗液的回收量不一致、所含的细胞数差别大、结果误差大等缺陷。避免测定涮洗液CEA浓度较肺泡灌洗液CEA、血CEA的阳性率高,两者比较有显著意义;联合检测纤支镜涮洗液端粒酶、CEA可提高肺癌的诊肺癌的诊断率。

关键词：经纤支镜刷脱细胞端粒酶活性涮洗液CEA浓度测定肺癌临床价值研究

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丙型肝炎病毒核心区蛋白和细胞凋亡对细胞端粒酶活性的影响

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中华肝脏病杂志 2004年第7期12卷 424-424页

作者：全俊范学工胡国龄李宁谭德明中南大学湘稚医院传染科湖南长沙410083

丙型肝炎病毒(HCV)核心区编码的HCV-C蛋白维持病毒外形,还有较强的免疫调节功能,是细胞免疫的主要识别位点,在HCV致病过程中起着重要作用.端粒酶活性上调被认为是肿瘤发生的一种机制,HCV引发肝细胞癌(HCC)是否与上调肝细胞端粒酶活性有... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)核心区编码的HCV-C蛋白维持病毒外形,还有较强的免疫调节功能,是细胞免疫的主要识别位点,在HCV致病过程中起着重要作用.端粒酶活性上调被认为是肿瘤发生的一种机制,HCV引发肝细胞癌(HCC)是否与上调肝细胞端粒酶活性有关?本实验拟对上述问题进行初步探讨,以部分阐明HCV导致HCC发生的机制.

关键词：丙型肝炎病毒核心区蛋白细胞凋亡细胞端粒酶活性 HCV-C蛋白肝细胞癌

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