检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：邹辉扬州大学

学位级别：博士

细胞缝隙连接通讯(Gap junctional intercellular communication, GJIC)是哺乳动物细胞间普遍存在的一种通讯方式,在细胞增殖、分化、凋亡、死亡等生理过程中具有重要作用。镉是一种重要的工业和环境污染物,危害人和动物的健康,肝脏是... 详细信息

细胞缝隙连接通讯(Gap junctional intercellular communication, GJIC)是哺乳动物细胞间普遍存在的一种通讯方式,在细胞增殖、分化、凋亡、死亡等生理过程中具有重要作用。镉是一种重要的工业和环境污染物,危害人和动物的健康,肝脏是镉的重要靶器官之一。镉不仅引起肝细胞凋亡,还能抑制肝细胞GJIC,影响细胞缝隙连接蛋白的表达和分布,但GJIC在镉暴露肝脏损伤过程中的作用机制尚不明确。本研究在体外用2.5、10 μmol/L镉和50 μmol/L红景天苷(Salidroside, Sal)单独或联合作用BRL 3A细胞6、12h；并选择80-100g雌性SD大鼠,50 mg/L镉自由饮水,35 mg/kg B.W. Sal每天灌胃一次,单独或联合处理12周,建立动物模型。通过细胞生物学和分子生物学方法,探讨镉致大鼠肝脏损伤过程中GJIC的变化以及其在钙离子通路、MAPK通路以及自噬调控镉致肝细胞毒性损伤中的作用机制,并阐明Sal在上述过程中的保护作用。为揭示镉致肝脏毒性损伤的分子机制提供依据。1、镉致大鼠肝细胞损伤及Sal的保护作用为了研究镉对大鼠肝细胞毒性的影响,本试验通过体内、体外试验检测镉及Sal对SD大鼠细胞活力、细胞形态、细胞指数、肝脏脏器指数、肝脏组织病理学变化和肝细胞超微结构的变化。体外试验结果表明,不同剂量镉(2.5、5、10、20 μmol/L)暴露致BRL 3A细胞皱缩、细胞间隙增大、死细胞增多、细胞核收缩、变形、破裂,核染色质浓缩成点状分布、细胞存活率下降、细胞指数(CI)下降,并且呈明显的时间-剂量效应。不同浓度(25、50、100 μmol/L) Sal对CI无显著影响,提示Sal在所选浓度范围内基本无细胞毒性。染镉组与50 μmol/L Sal联合处理明显减轻镉导致的CI下降速度。这一结果表明,50 μmol/L Sal对2.5 μmol/L Cd和10 μmol/L Cd导致的细胞毒性有保护作用。体内试验结果表明,染镉组(50 mg/kg B.W.)大鼠肝脏脂肪变性,肝细胞排列紊乱,中央静脉淤血。Cd与Sal联合处理组大鼠肝脏脂肪变性相对于染镉组有明显好转。透射电镜观察肝细胞超微结构发现,染镉组的肝细胞核染色质明显收缩,细胞核固缩、浓染；线粒体肿胀,线粒体嵴模糊、断裂甚至崩解,部分形成空泡。Sal可明显减轻Cd对大鼠肝细胞线粒体和细胞核的损伤。2、镉对大鼠GJIC的影响为了研究镉对GJIC的影响,通过染料划痕示踪法检测GJIC,免疫印迹法检测连接蛋白Cx43、Cx32,实时定量PCR检测Cx43、Cx32相关基因表达,RTCA检测细胞指数,免疫荧光观察Cx43在BRL 3A细胞上的分布,免疫电镜观察连接蛋白在肝细胞上的分布,Transwell共培养体系观察镉暴露受损肝细胞通过GJIC对正常肝细胞的影响。结果表明,Cd能下调BRL 3A细胞中Cx43、Cx32的表达水平以及Cx43磷酸化水平(p<0.05或p<0.01),动物试验也证实Cd可下调Cx32的表达。GJIC抑制剂GA与Cd联合处理加剧了Cd致CI的下降,提示GA加剧了Cd的细胞毒性。镉暴露细胞可导致与之相邻的正常细胞损伤,添加Sal以及GJIC抑制剂GA可明显减轻镉暴露受损细胞对正常细胞的毒性损伤作用。Sal可抑制Cd对GJIC的相关影响。提示Cd引起的GJIC抑制具有双重作用,保护正常细胞免受Cd暴露细胞的毒性损伤作用以及进一步加强Cd对镉暴露受损细胞的毒性作用。3、GJIC参与调节钙离子通路介导的镉致大鼠肝脏毒性损伤为了探讨钙离子通路在镉致大鼠肝细胞损伤中的作用以及红景天苷的保护机制,本试验通过体外添加钙离子通路相关抑制剂,用流式细胞术检测BRL 3A细胞内钙离子浓度、免疫印迹法检测BRL 3A细胞钙离子通路相关蛋白、实时定量PCR检测钙离子通路相关基因表达、RTCA检测细胞指数。结果表明,镉能引起BRL 3A细胞[Ca2+]i升高(p<0.01),通过添加细胞内游离钙离子螯合剂BAPTA-AM可抑制镉导致的细胞指数和细胞存活率的下降,添加Sal也有类似的作用。用EGTA螯合细胞外钙离子可抑制镉介导的胞存活率的下降,内质网钙泵抑制剂TG可促进镉介导的细胞存活率的下降(p<0.01或p<0.05)。体内和体外试验都表明镉能下调CaM mRNA的表达,说明CaM参与了重金属镉对肝细胞的毒性损伤过程。GJIC抑制剂GA单独处理可引起细胞[Ca2+]i升高,GA还进一步促进镉致BRL3A细胞钙超载,细胞外钙离子螯合剂EGTA可部分抑制镉诱导的BRL 3A细胞[Ca2+]i升高,但EGTA与GA联合则恶化镉诱导的BRL 3A细胞[Ca2+]i升高,TG单独处理就能引起[Ca2+]i的升高以及细胞成活率下降,与镉

关键词：大鼠肝细胞镉细胞缝隙连接通讯钙离子 MAPK 自噬红景天苷

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细胞缝隙连接通讯与重金属毒性的关系研究进展

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中国兽医科学 2021年第6期51卷 798-804页

作者：卞宇生谢伊琳赵玉梦曲华艺刘宗平邹辉扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

细胞缝隙连接通讯(GJIC)是细胞间重要的通讯方式之一,其可以参与细胞间的代谢活动,调节细胞的生长、分化以及病理过程。近年来,环境中重金属污染引起的健康问题越来越被重视。大量研究表明,GJIC的稳定是机体健康生存的基础,而环境中的... 详细信息

细胞缝隙连接通讯(GJIC)是细胞间重要的通讯方式之一,其可以参与细胞间的代谢活动,调节细胞的生长、分化以及病理过程。近年来,环境中重金属污染引起的健康问题越来越被重视。大量研究表明,GJIC的稳定是机体健康生存的基础,而环境中的重金属在对人和动物的肝、肾、睾丸甚至神经等造成损伤的过程中,还能够作用于连接蛋白、缝隙连接等致GJIC功能受到不同程度的影响。现对GJIC与引起环境污染的多种重金属致机体毒性损伤的内在关系进行综述,为进一步研究重金属的毒性机理以及寻找防治重金属中毒潜在靶点提供参考。

关键词：细胞缝隙连接通讯重金属连接蛋白

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喹啉衍生物PQ1联合顺铂对前列腺癌PC3细胞的增殖及细胞缝隙连接通讯的影响

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中华男科学杂志 2016年第2期22卷 116-121页

作者：林云知许宁李晓东薛学义蔡海魏勇郑清水福建医科大学附属第一医院泌尿外科福建福州350005

目的：探讨喹啉衍生物PQ1联合顺铂对前列腺癌PC3细胞的增殖及细胞缝隙连接通讯的影响。方法：体外培养前列腺癌PC3细胞,对比空白对照组、10 mg/ml顺铂对照组及顺铂联合不同浓度（1、2、5、10、15μmol/L）喹啉衍生物PQ1各组PC3细胞增殖... 详细信息

目的：探讨喹啉衍生物PQ1联合顺铂对前列腺癌PC3细胞的增殖及细胞缝隙连接通讯的影响。方法：体外培养前列腺癌PC3细胞,对比空白对照组、10 mg/ml顺铂对照组及顺铂联合不同浓度（1、2、5、10、15μmol/L）喹啉衍生物PQ1各组PC3细胞增殖情况,通过RT-PCR法及Western印迹法检测各组间细胞缝隙连接相关蛋白Cx43 mRNA及蛋白表达情况。结果：喹啉衍生物PQ1浓度在1~10μmol/L联合顺铂能明显抑制PC3细胞的体外增殖,随浓度、时间的增加,抑制率相应升高。不同浓度联合药物处理PC3细胞后,Cx43 mRNA及蛋白表达也有不同程度升高。结论：喹啉衍生物可以通过上调前列腺癌PC3细胞间缝隙连接相关蛋白Cx43 mRNA及蛋白的表达水平来促进前列腺癌PC3细胞的细胞间缝隙连接功能,增强顺铂对前列腺癌PC3细胞的杀伤作用。

关键词：喹啉衍生物前列腺癌 PC3细胞细胞缝隙连接通讯 Cx43 顺铂

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纳秒脉冲诱导肿瘤细胞缝隙连接通讯恢复的实验研究

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中国生物医学工程学报 2011年第6期30卷 925-930页

作者：姚陈果郭飞李成祥肖德友唐丽灵重庆大学输配电装备及系统安全与新技术国家重点实验室重庆400030 重庆大学生物工程学院重庆400030

将纳秒脉冲作用于人肝癌细胞(Hep-G2),通过荧光漂白恢复(FRAP)技术,检测荧光萃灭后肿瘤细胞的荧光强度变化情况,以研究纳秒脉冲对肿瘤细胞缝隙连接通讯(GJIC)功能变化的影响。经纳秒脉冲处理后,与对照组相比,处理组荧光恢复率显著增加,... 详细信息

将纳秒脉冲作用于人肝癌细胞(Hep-G2),通过荧光漂白恢复(FRAP)技术,检测荧光萃灭后肿瘤细胞的荧光强度变化情况,以研究纳秒脉冲对肿瘤细胞缝隙连接通讯(GJIC)功能变化的影响。经纳秒脉冲处理后,与对照组相比,处理组荧光恢复率显著增加,且随着时间的推移,所有处理组的荧光恢复率都达到对照组的3倍以上。此外,处理组肿瘤细胞的荧光漂白恢复率随脉冲个数的增加而升高。实验结果表明,纳秒脉冲促进了肿瘤细胞缝隙连接通讯功能的恢复,且在固定的脉冲宽度和幅值下,GJIC对纳秒脉冲作用的响应程度与施加的脉冲个数呈正相关。研究结果不仅为纳秒脉冲用于GJIC障碍性疾病的治疗提供了一条全新的途径,而且也深化了纳秒脉冲诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究。

关键词：纳秒脉冲人肝癌细胞荧光漂白恢复技术细胞缝隙连接通讯

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脉冲磁场对细胞缝隙连接通讯功能影响的研究

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中国生物医学工程学报 2001年第2期20卷 148-151页

作者：李昌敏姜槐付一提鲁德强浙江大学医学院微波研究室杭州310031

本文用细胞内微注射法对不同强度的脉冲磁场对细胞缝隙连接通讯 (GJIC)功能的效应进行了研究 ,并与正弦磁场的作用以及脉冲磁场所感生的不同电场的作用进行了比较和探索。研究发现 0 .41mT以上强度的脉冲磁场具有抑制GJIC的作用 ,这种... 详细信息

本文用细胞内微注射法对不同强度的脉冲磁场对细胞缝隙连接通讯 (GJIC)功能的效应进行了研究 ,并与正弦磁场的作用以及脉冲磁场所感生的不同电场的作用进行了比较和探索。研究发现 0 .41mT以上强度的脉冲磁场具有抑制GJIC的作用 ,这种作用与磁场强度有关。其抑制GJIC的效应比正弦磁场为强。经相同磁场不同强度感应电场作用的比较 ,得出 ,GJIC的抑制主要由磁场引起 ,而与感应电场关系不大。

关键词：脉冲磁场细胞缝隙连接通讯 GJIC 创伤愈合治疗

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沙利度胺对前列腺癌PC-3细胞的增殖及细胞缝隙连接通讯的影响

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中国肿瘤临床 2012年第23期29卷 1881-1885页

作者：薛学义李晓东许宁郑清水魏勇江涛黄金杯孙雄林福建医科大学附属第一医院泌尿外科福州市350001

目的:观察沙利度胺对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的作用及对PC-3细胞中Cx43表达水平的影响。方法:将处于对数生长期的前列腺癌PC-3细胞分别给予递增浓度的沙利度胺(0、12.5、25、50、100μg/mL)处理24 h和48 h。采用CCK-8法检测不同浓... 详细信息

目的:观察沙利度胺对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的作用及对PC-3细胞中Cx43表达水平的影响。方法:将处于对数生长期的前列腺癌PC-3细胞分别给予递增浓度的沙利度胺(0、12.5、25、50、100μg/mL)处理24 h和48 h。采用CCK-8法检测不同浓度沙利度胺对PC-3细胞的增殖抑制影响,Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡情况,RT-PCR法检测Cx43mRNA的表达及Westernblot检测Cx43蛋白的表达。结果:沙利度胺浓度在25～100μg/mL能明显抑制PC-3细胞体外增殖,随着时间、浓度增加,抑制率相应升高。不同浓度组沙利度胺处理PC-3细胞24～48 h后,Cx43 mRNA和蛋白有不同程度的升高(P<0.05)。结论:沙利度胺可通过抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖、诱导其凋亡,产生抗肿瘤作用。沙利度胺可上调前列腺癌PC-3细胞Cx43mRNA及蛋白的表达水平,并可能促进前列腺癌PC-3细胞的细胞缝隙连接通讯功能的恢复,从而抑制肿瘤生长。

关键词：沙利度胺前列腺癌细胞缝隙连接通讯缝隙连接蛋白

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亚砷酸钠和氧苯胂对人皮肤成纤维细胞缝隙连接通讯的动态影响及作用特征

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中国药理学与毒理学杂志 2002年第5期16卷 378-381页

作者：邓芙蓉李艳宏张华明郭新彪北京大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系北京100083

目的　了解和比较不同砷化合物对细胞缝隙连接通讯的动态影响及作用特征 ,进一步阐明砷的致癌机理。方法　用激光共聚焦显微镜 ,以细胞漂白后荧光强度的恢复作为评价缝隙连接通讯的指标 ,按激光漂白后荧光恢复实验技术测定亚砷酸钠和氧... 详细信息

目的　了解和比较不同砷化合物对细胞缝隙连接通讯的动态影响及作用特征 ,进一步阐明砷的致癌机理。方法　用激光共聚焦显微镜 ,以细胞漂白后荧光强度的恢复作为评价缝隙连接通讯的指标 ,按激光漂白后荧光恢复实验技术测定亚砷酸钠和氧苯胂对人皮肤成纤维细胞缝隙连接通讯的影响。结果　亚砷酸钠和氧苯胂均可明显抑制激光漂白后细胞荧光强度的恢复 ,其作用有明显的剂量反应关系 ;进一步的研究发现 ,在去除亚砷酸钠作用后的不同时间 ,实验组细胞荧光强度恢复增加值显著低于对照组 ,表明细胞缝隙连接通讯功能没有恢复 ;而在去除氧苯胂作用 4h后 ,实验组荧光强度恢复增加值与对照组无显著性差异 ,表明细胞缝隙连接通讯有所恢复。结论　无机砷和有机砷均可明显抑制细胞缝隙连接通讯 ,但二者的作用特征有所不同。

关键词：皮肤成纤维细胞亚砷酸钠氧苯胂细胞缝隙连接通讯砷化合物致癌机理

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脑蛋白水解液对大鼠胶质细胞缝隙连接通讯的影响

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中华创伤杂志 2006年第9期22卷 705-707页

作者：刘锐黄慧玲闫华张文治苏心只达石天津医科大学 300070 天津市环湖医院神经外科研究所

细胞通讯足多细胞生物的一个基本需要，在复杂的细胞信号传导网络中，缝隙连接是动物细胞间最普遍存在的细胞连接方式，通过电、化学偶联对细胞的生长、分化和增殖发挥调控作用，在神经系统疾病的诊治中越来越发挥重要作用。

关键词：细胞缝隙连接通讯蛋白水解液胶质大鼠细胞信号传导神经系统疾病基本需要细胞生物

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人骨髓间充质干细胞缝隙连接通讯功能的研究

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第三军医大学学报 2005年第16期27卷 1648-1651页

作者：宋晋刚许建中王序全周强罗飞何清义孙玮第三军医大学西南医院骨科全军矫形外科中心重庆400038 第三军医大学高原军事医学系中心实验室重庆400038

目的研究人骨随间充质干细胞(hum an m esenchym al stem cells,hMSCs)的细胞间缝隙连接通讯(gap junc-tional intercellu lar commun ication,G JIC)功能。方法透射电镜观察细胞缝隙连接结构,应用荧光光漂白恢复(fluorescencered istribution after photob leach ing,FRAP)技术,5,6-CFDA荧光负载hMSCs,激光淬灭细胞内荧光,通过激光共聚焦显微镜测定体外培养的hMSCs的G JIC功能。结果细胞内荧光被淬灭后可通过缝隙连接通道恢复,hMSCs平均荧光漂白恢复率为(35.26±0.76)%。结论缝隙连接是间充质干细胞间的重要通讯方式。

关键词：细胞缝隙连接通讯荧光光漂白恢复间充质干细胞

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极低频磁场对细胞缝隙连接通讯功能影响的超微结构观察

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中华劳动卫生职业病杂志 2002年第4期20卷 308-309页

作者：沈永浩付一提姜槐浙江大学医学院病理学与法医学研究所杭州310031 浙江大学医学院微波研究所杭州310031

50Hz连续或脉冲磁场对培养细胞的细胞缝隙连接通讯(gap junctional intercellular communication, GJIC)功能影响的研究表明，0.4mT以上强度的磁场具有抑制GJIC功能的作用，该作用与磁场强度及辐照时间相关，具有剂量-效应关系，脉冲磁... 详细信息

50Hz连续或脉冲磁场对培养细胞的细胞缝隙连接通讯(gap junctional intercellular communication, GJIC)功能影响的研究表明，0.4mT以上强度的磁场具有抑制GJIC功能的作用，该作用与磁场强度及辐照时间相关，具有剂量-效应关系，脉冲磁场抑制效应较正弦磁场强。我们在已往实验的基础上，应用透射电子显微镜(TEM)及计算机图像分析系统进一步观察在0.8mT、50Hz脉冲磁场辐射24h的条件下，极低频磁场对GJIC功能影响的超微结构变化。

关键词：极低频磁场细胞缝隙连接通讯生物学效应透射电子显微镜超微结构

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