检索结果-内蒙古大学图书馆

首都医科大学学报 2019年第4期40卷 582-587页

作者：马登磊张旭罗艺黄蕊李雅莉李林张兰首都医科大学宣武医院药学部北京100053 神经变性病教育部重点实验室北京100053 北京市神经药物工程研究中心北京100053 首都医科大学宣武医院中心实验室北京100053

目的构建并表征tau及突变tau蛋白细胞和动物模型,检测模型tau蛋白及磷酸化tau蛋白表达情况及微管的形态,为tau蛋白及相关疾病的研究提供疾病模型。方法将不同的质粒分别转染到HEK293细胞中,构建过表达野生型tau以及P301L/P301S突变tau... 详细信息

目的构建并表征tau及突变tau蛋白细胞和动物模型,检测模型tau蛋白及磷酸化tau蛋白表达情况及微管的形态,为tau蛋白及相关疾病的研究提供疾病模型。方法将不同的质粒分别转染到HEK293细胞中,构建过表达野生型tau以及P301L/P301S突变tau的细胞模型。引进并繁育rTg4510小鼠(P301L突变tau转基因小鼠)以及PS19小鼠(P301S突变tau转基因小鼠)。通过Western blotting法检测总tau及磷酸化tau蛋白的表达,应用免疫组织化学的方法检测转基因小鼠脑内磷酸化tau蛋白的表达情况,应用免疫荧光的方法检测HEK293细胞微管形态的变化。结果本研究成功构建过表达tau蛋白的细胞模型,繁育了两种tau转基因小鼠,在这些模型中tau蛋白表达及tau蛋白的磷酸化水平显著高于对照组。在不同突变类型的细胞和动物模型中,tau蛋白不同位点的磷酸化水平变化以及微管形态变化略有差异。结论本研究成功构建了P301L/P301S突变tau蛋白的细胞和动物模型,这些模型均表现了显著的tau蛋白过度磷酸化的病变,并引起了细胞微管形态或tau蛋白病理的变化,进而为包括AD在内的tau蛋白病变提供了实验模型。

关键词：微管相关蛋白tau 细胞转染模型转基因动物模型微管

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建立研究ERCC1密码子118单核苷酸多态性的细胞转染模型

建立研究ERCC1密码子118单核苷酸多态性的细胞转染模型

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中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议

作者：逯晓波蔡原安春丽靳翠红刘秋芳中国医科大学公共卫生学院卫生毒理教研室中国医科大学基础医学院病原生物学教研室

目的切除修复交叉互补集团1基因(ERCC1)所编码的ERCC1蛋白,是核苷酸切除修复途径NER的重要因子,具有核酸内切酶活性。ERCC1基因一个常见的单核苷酸多态是位于118密码子(ERCC1 codon 118)的19007T>C(rs11615)。尽管这是一种保守的同... 详细信息

目的切除修复交叉互补集团1基因(ERCC1)所编码的ERCC1蛋白,是核苷酸切除修复途径NER的重要因子,具有核酸内切酶活性。ERCC1基因一个常见的单核苷酸多态是位于118密码子(ERCC1 codon 118)的19007T>C(rs11615)。尽管这是一种保守的同义核苷酸突变(AAC→AAT),两者皆编码丝氨酸,但有人认为ERCC1 codon 118 SNP不同基因型通过改变ERCC1蛋白表达水平而影响DNA修复能力。本研究通

关键词：单核苷酸多态性切除修复交叉互补集团1基因ERCC1 GatewayTM定向克隆细胞转染模型

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ERCC1密码子118单核苷酸多态性转染细胞模型建立

引用

中国公共卫生 2011年第10期27卷 1247-1249页

作者：逯晓波于涛刘艳华肖莎靳翠红中国医科大学公共卫生学院卫生毒理教研室辽宁沈阳110001

目的建立切除修复交叉互补集团1(ERCC1)基因单核苷酸多态性(SNP)转染细胞模型,为体外研究基因多态性功能提供平台。方法 Gateway定向克隆技术构建ERCC1表达载体,包含不同ERCC1 codon 118 SNP表达载体转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)缺陷型UV2... 详细信息

目的建立切除修复交叉互补集团1(ERCC1)基因单核苷酸多态性(SNP)转染细胞模型,为体外研究基因多态性功能提供平台。方法 Gateway定向克隆技术构建ERCC1表达载体,包含不同ERCC1 codon 118 SNP表达载体转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)缺陷型UV20细胞,蛋白免疫印迹法(western blot)检测ERCC1蛋白表达,焦磷酸短序列测序PSQ检测ERCC1 118 SNP基因型。结果酶切鉴定及测序分析表明ERCC1表达载体构建正确,各转染细胞表达绿色荧光蛋白并可在G418培养基选择生长;ERCC1在UV20细胞中表达分子量为38 kDa蛋白,ERCC1 SNP基因型正确,2种转染细胞ERCC1的SNP基因型不同,分别为C/C或T/T。结论 ERCC1 codon 118 SNP细胞转染模型构建成功,为体外研究ERCC1 codon 118 SNP不同基因型提供了实验技术平台。

关键词：切除修复叉互补集团1基因ERCC1 单核苷酸多态性 Gateway定向克隆细胞转染模型

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