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药学学报 2022年第1期57卷 142-149,I0005页

作者：陈杨燕黄瑶胡婉姗杜敏群彭婷婷潘昕吴传斌中山大学药学院广东广州510006 暨南大学药学院广东广州510632 广东省妇幼保健院广东广州511442

疫苗接种是降低传染性疾病患病率及死亡率的有效方法。微针(microneedles,MNs)作为一种无针经皮免疫(needle-free transcutaneous immunization,NF-TCI)接种技术可以克服传统注射接种疫苗存在的免疫效率低、顺应性差和资源浪费等问题。... 详细信息

疫苗接种是降低传染性疾病患病率及死亡率的有效方法。微针(microneedles,MNs)作为一种无针经皮免疫(needle-free transcutaneous immunization,NF-TCI)接种技术可以克服传统注射接种疫苗存在的免疫效率低、顺应性差和资源浪费等问题。微针疫苗能够直接突破皮肤角质层屏障,将疫苗有效地递送到皮肤组织内的免疫细胞而启动机体免疫应答,同时不会伤及真皮层内的神经和血管,具有安全性高、免疫效果佳和实用经济等优势,在传染性疾病的防治和肿瘤治疗中应用前景广阔。本文针对MNs在经皮免疫技术中的发展背景、疫苗递送类型、免疫效果影响因素、未来亟需解决的问题和发展方向等方面进行了综述和展望。

关键词：经皮免疫微针疫苗传染性疾病肿瘤

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经皮免疫的研究进展

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中国药学杂志 2010年第24期45卷 1895-1899页

作者：徐婷韦敏燕邓礼荷徐月红吴传斌中山大学药学院药剂室广州510006

目的综述近年来经皮免疫在改善疫苗传递方面的研究进展。方法以近年来的研究文献为基础,从经皮免疫的概念、优点、皮肤免疫的机制出发,分析了佐剂和各种促渗技术在经皮免疫中的应用,概述了经皮免疫在各种疫苗中的进展,讨论了经皮免疫应... 详细信息

目的综述近年来经皮免疫在改善疫苗传递方面的研究进展。方法以近年来的研究文献为基础,从经皮免疫的概念、优点、皮肤免疫的机制出发,分析了佐剂和各种促渗技术在经皮免疫中的应用,概述了经皮免疫在各种疫苗中的进展,讨论了经皮免疫应用的可行性以及目前需解决的问题。结果与结论经皮免疫将抗原局部应用于皮肤,已经证实可以引起机体系统和黏膜的免疫应答。作为一种新的疫苗接种途径,与传统的注射免疫方式相比,在提高接种安全性、增加患者的依从性、减少注射部位的疼痛、提高疫苗接种效率和降低费用等方面具有很大优势。经皮免疫将成为未来疫苗免疫发展的新方向之一,但其应用还需要更多安全性和有效性的临床实验的验证。

关键词：经皮免疫疫苗朗格汉斯细胞佐剂促渗技术疫苗传递

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基于微针的经皮免疫的应用现状及研究进展

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生物工程学报 2022年第9期38卷 3301-3315页

作者：李月王菁金志颖万伟白雪欣胡宸艺李岩伟辛文文康琳杨浩王景林高姗军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071

微针经皮免疫借助微针刺破皮肤的角质层,使疫苗高效地被抗原提呈细胞识别后引起特异性免疫应答,从而实现疫苗的经皮免疫。由于微针的经皮免疫所具有的高效诱导免疫应答、低痛感、易储存等优点,近年来被广泛应用于多种疫苗免疫接种。本... 详细信息

微针经皮免疫借助微针刺破皮肤的角质层,使疫苗高效地被抗原提呈细胞识别后引起特异性免疫应答,从而实现疫苗的经皮免疫。由于微针的经皮免疫所具有的高效诱导免疫应答、低痛感、易储存等优点,近年来被广泛应用于多种疫苗免疫接种。本综述对用于经皮免疫的各类微针(固体微针、空心微针、涂层微针和可溶性微针)的制备材料、在经皮免疫的应用、领域的研究热点与尚需要解决的问题进行探讨,以期为研究者的制备和应用提供参考和借鉴。

关键词：微针疫苗经皮免疫 citespace

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免疫新策略:经皮免疫

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中国药理学通报 2006年第5期22卷 521-525页

作者：王晶胡晋红朱全刚彭程第二军医大学第一附属医院药学部上海200433

经皮免疫是一种将抗原和佐剂局部应用于皮肤诱导产生全身免疫反应的一种新方法。皮肤不但是组织外源性物质包括病原体进入体内的物理屏障,还是复杂有效的免疫系统,因此皮肤是重要的免疫接种靶标。在人类和多种动物的实验中,经皮免疫的... 详细信息

经皮免疫是一种将抗原和佐剂局部应用于皮肤诱导产生全身免疫反应的一种新方法。皮肤不但是组织外源性物质包括病原体进入体内的物理屏障,还是复杂有效的免疫系统,因此皮肤是重要的免疫接种靶标。在人类和多种动物的实验中,经皮免疫的效果已经得到了证实。经皮免疫是一种免疫的新策略,有着广阔的实际应用前景。

关键词：经皮免疫皮肤免疫系统郎格汉斯细胞疫苗经皮给药系统佐剂

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树突状细胞IL-12表达增强型经皮免疫膜的构建及其抗肿瘤效应研究

树突状细胞IL-12表达增强型经皮免疫膜的构建及其抗肿瘤效应研究

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作者：洪火炎东华大学

学位级别：硕士

新近研究表明,抗程序性细胞死亡蛋白1抗体（aPD-1）疗法有赖于树突状细胞（DCs）表达IL-12。鉴于皮肤组织中含有丰富的DCs,经皮靶向DCs促其表达IL-12可能是增强aPD-1疗法的有效途径。本研究首先采用静电吸附和层层自主装技术依次将透明... 详细信息

新近研究表明,抗程序性细胞死亡蛋白1抗体（aPD-1）疗法有赖于树突状细胞（DCs）表达IL-12。鉴于皮肤组织中含有丰富的DCs,经皮靶向DCs促其表达IL-12可能是增强aPD-1疗法的有效途径。本研究首先采用静电吸附和层层自主装技术依次将透明质酸（HA）和甘露糖化壳聚糖（MC）修饰于醇质体（Eth）表面(所得产物命名为Eth-MC)。体外吞噬实验表明Eth-MC具有靶向DCs的能力,负载IL-12基因表达质粒（pIL-12）的Eth-MC(pIL-12@Eth-MC)可靶向诱导DCs成熟。在此基础上,利用静电喷雾技术将pIL-12@Eth-MC以微球的形式喷敷于具有高比表面积和孔隙率的电纺蚕丝素（SF）-聚乙烯醇（PVA）复合纳米纤维（SF-PVA）表面构建可经皮靶向DCs递送IL-12基因的经皮免疫膜（TCIP）。体外透皮实验显示,TCIP具有良好的透皮释药性能。以小鼠黑素瘤为模型的动物实验结果提示,TCIP具有一定的抗肿瘤活性,可显著增强aPD-1的抗肿瘤效应。本文主要研究内容和结果如下:（1）Eth-MC的制备与表征。成功制备了甘露糖化壳聚糖（MC）并通过静电吸附和层层自组装的方法将其修饰于醇质体表面得到Eth-MC,其粒径为176.7±4.2nm,表面电位+25.9±1.0m V;Eth-MC与pIL-12质粒的最适N/P值为1:10。（2）Eth-MC的细胞毒性及其靶向诱导DCs研究。一定浓度范围（≤30μg/m L）下,Eth-MC具有良好的细胞相容性;Eth-MC的DCs吞噬率显著高于对照组,pIL-12@Eth-MC对DCs的转染效率也明显高于对L929的,表明Eth-MC具有良好的靶向DCs的能力;pIL-12@Eth-MC可诱导DCs表达CD80、CD86和MHC-II等成熟相关标志分子,表明pIL-12@Eth-MC具有诱导DCs成熟的能力。（3）TCIP的制备及其体外透皮性能评价。将Eth-MC与聚乙烯醇（PVP）混合利用静电喷雾技术制备得到负载Eth-MC或pIL-12@Eth-MC的微球,该微球表面光滑、粒径均一（658±175nm）;将载pIL-12@Eth-MC微球(PVP-pIL-12@Eth-MC)喷敷于电纺SF-PVA表面得到的TCIP具有良好的透皮释药性能。（4）TICP抗肿瘤活性评价。动物实验结果显示,TICP的应用可促进IL-12的表达并对肿瘤的生长具有一定的抑制作用。TCIP与aPD-1联合应用则可显著提升IL-12、IFN-γ、TNF-α的表达水平,并通过促进CD4+和CD8+T细胞在肿瘤组织内浸润导致肿瘤细胞的凋亡来抑制肿瘤的生长。

关键词：经皮免疫树突状细胞醇质体 pIL-12 aPD-1 肿瘤治疗

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可溶微针贴片经皮免疫给药系统的研究

可溶微针贴片经皮免疫给药系统的研究

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作者：胡霞蚌埠医学院

学位级别：硕士

目的:制备以可溶微针贴片为释药载体的卵清蛋白经皮免疫制剂。通过体外各项表征技术证实其经皮给药的可行性;通过动物实验探究其经皮免疫效应;通过皮肤刺激性试验等考察其经皮给药的安全性。以期能为可溶微针贴片经皮免疫的研究和疫苗... 详细信息

目的:制备以可溶微针贴片为释药载体的卵清蛋白经皮免疫制剂。通过体外各项表征技术证实其经皮给药的可行性;通过动物实验探究其经皮免疫效应;通过皮肤刺激性试验等考察其经皮给药的安全性。以期能为可溶微针贴片经皮免疫的研究和疫苗的开发提供科学指导和理论依据。方法:1.采用精密机械制造技术和计算机辅助设计技术,设计和制备微针模具。2.应用两步注模干燥法制备载卵清蛋白的可溶微针贴片,并利用光学显微镜、扫描电子显微镜、离体皮肤穿刺实验建立可溶微针贴片体外评价方法,用来证实其经皮释药的可行性。3.建立可溶微针贴片中卵清蛋白含量测定方法,且通过可溶微针贴片的机械性能和载药量确定适用于本实验的最优处方,接着对最优处方制得的可溶微针贴片进行表面规整度、载药量、机械性能等表征。4.通过SDS-PAGE凝胶电泳实验对载卵清蛋白可溶微针贴片的稳定性进行考察。5.以SPF级SD大鼠为实验对象,以卵清蛋白(OVA)为模型抗原,通过测定接种后血清中抗OVA免疫球蛋白G(IgG)含量,对可溶微针贴片的经皮免疫效果进行评价。6.通过皮肤刺激性试验,溶血性试验,材料细胞毒性试验等研究可溶微针贴片的安全性,初步建立可溶微针安全性评价方法。结果:1.采用计算机辅助技术,制得可溶微针贴片的金属主模,再通过聚二甲基硅氧烷(PDMS)制备出可溶微针贴片阴模。模具含100个圆锥形微针,外观排列为10×10的方形矩阵。2.采用两步注模干燥法制备卵清蛋白可溶微针贴片,通过显微镜得出其针形完整,排列规整,离体皮肤穿刺结果可见:离体皮肤表面形成排列整齐的微孔,表明制备的可溶微针贴片具有足够的机械性能,可以成功穿透皮肤释放药物。3.通过机械性能和载药量两方面最终确定适用于本实验的最佳处方为:针部材料选择浓度为300 mg/mL的右旋糖酐(Dex)水溶液,基层选择浓度为333 mg/mL的聚乙烯吡咯烷酮(PVP K90)水溶液,模型抗原选择卵清蛋白(OVA)。***-PAGE凝胶电泳结果可见:在卵清蛋白水溶液特征条带出现的相应位置,可溶微针贴片水溶液出现相似的蛋白条带,且没有其他条带出现,空白可溶微针贴片水溶液无任何条带出现。5.可溶微针大鼠体内药效学实验结果表明,载OVA可溶微针贴片经皮免疫能成功引发大鼠体内免疫应答;与皮下注射免疫相比,减半剂量的可溶微针贴片可引发相当的抗体水平,而相同剂量的可溶微针贴片可以引发更高的抗体水平。6.经过皮肤刺激性试验,溶血性试验,材料毒性试验得出可溶微针贴片使用安全,对皮肤无刺激性。结论:本课题制备的可溶微针贴片具有良好的机械性能及经皮免疫优势,并且使用安全,无皮肤刺激性,能为可溶微针贴片经皮免疫的研究和疫苗的开发提供科学指导和理论依据。

关键词：可溶微针贴片经皮免疫机械性能药效学安全性

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多价mRNA经皮免疫疫苗的构建及其抗肿瘤应用研究

多价mRNA经皮免疫疫苗的构建及其抗肿瘤应用研究

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作者：王哲东华大学

学位级别：硕士

经皮免疫（Transcutaneous immunization,TCI）具有安全、无创伤、易于应用和移除的优点,克服了传统给药方式的诸多弊端,是医学领域的重要发展趋势之一。随着莫德纳等公司的新冠mRNA疫苗的问世,mRNA疫苗因其具有研发周期短、设计灵活、... 详细信息

经皮免疫（Transcutaneous immunization,TCI）具有安全、无创伤、易于应用和移除的优点,克服了传统给药方式的诸多弊端,是医学领域的重要发展趋势之一。随着莫德纳等公司的新冠mRNA疫苗的问世,mRNA疫苗因其具有研发周期短、设计灵活、无污染宿主基因组的风险和规模化生产成本低等优势,受到的关注与日俱增。肿瘤疫苗研发的难点之一在于难以获取真正具有特异性的肿瘤抗原,多价抗原被认为有助于提升肿瘤疫苗的活性。利用RNA的可编程性,可以较便利地设计并制备含有多价肿瘤抗原表位信息的mRNA疫苗。将多价肿瘤抗原mRNA与siRNA纳入TCI体系,有望构建高效安全且便捷无创的肿瘤免疫治疗平台。基于该设想,本研究以小鼠黑色素瘤为模型,构建了含有三种黑色素瘤新抗原表位信息的mRNA疫苗,探讨经皮递送该疫苗与可敲低PDL1表达的siRNA(siRNAPdl1)的抗肿瘤效应,主要研究内容和结果如下: （1）三价新抗原mRNA的制备与表征。设计构建包含特定5’UTR和3’UTR以及三种目的抗原编码序列的质粒DNA模板,测序鉴定后通过体外转录与修饰得到具有5’端加“帽”（m7GTP）和3’端加“尾”（poly A）修饰的mRNA产物,凝胶电泳证明该产物大小符合预期。（2）mRNA疫苗的制备及免疫原性检测。将甘露糖化壳聚糖（MC）修饰于醇质体（Eths）表面得到具有靶向树突细胞（DCs）性能的载体EthsMC;将三价新抗原mRNA(mRNAT-M-M)负载于EthsMC内得到可经皮递送的三价mRNA疫苗(mRNAT-M-M@EthsMC);体外细胞转染实验表明,mRNAT-M-M@EthsMC可有效靶向转染DCs并诱导其成熟,且效果优于单价抗原mRNA。（3）TCI膜的制备与表征。利用静电喷雾法将载药EthsMC以微球的形式喷覆于丝素纤维膜（SFM）上得到两种TCI膜,即MVV(载mRNAT-M-M@EthsMC和Cp G@EthsMC)和siRNAPdl1(载siRNAPdl1@EthsMC)。体外实验证明,TCI膜可有效递送核酸分子至皮肤深层组织。（4）动物实验。以小鼠黑色素瘤为模型的荷瘤实验显示,siRNAPdl1组可有效激发细胞和体液免疫应答。MVV或siRNAPdl1可促进CD4+和CD8+T细胞在肿瘤组织内浸润并诱导大量肿瘤细胞凋亡。MVV与siRNAPdl1联合应用可产生协同抗肿瘤效应,显著抑制肿瘤生长。病理切片分析显示,MVV或/和siRNAPdl1不会造成重要脏器的损害,表明该治疗方案具有良好的生物安全性。综上所述,我们成功构建了一种基于经皮递送的多价新抗原mRNA疫苗,该疫苗可显著抑制肿瘤的生长,且与敲低PDL1的siRNAPdl1联用可产生协同抗肿瘤效应。本研究为肿瘤治疗提供了一种安全高效且便捷无创的新方法。

关键词：经皮免疫 RNA疗法 PDL1 树突细胞抗肿瘤黑色素瘤

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经皮免疫：疫苗局部投递的潜在作用

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生物制品快讯 2004年第3期 7-8页

作者：班建荣江丽君

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经皮免疫机制的研究进展及在过敏性疾病中的防治应用

经皮免疫机制的研究进展及在过敏性疾病中的防治应用

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：刘笑纯姚煦中国医学科学院皮肤病医院

经皮免疫作为一种新型免疫治疗途径,是将抗原和佐剂局部应用于皮肤,诱导机体产生系统性免疫应答的接种方式,该方法安全有效,有望成为具有吸引力的传统疫苗替代途径。经皮免疫诱导不同方向免疫反应,但是皮肤免疫耐受方面的具体机制尚未... 详细信息

经皮免疫作为一种新型免疫治疗途径,是将抗原和佐剂局部应用于皮肤,诱导机体产生系统性免疫应答的接种方式,该方法安全有效,有望成为具有吸引力的传统疫苗替代途径。经皮免疫诱导不同方向免疫反应,但是皮肤免疫耐受方面的具体机制尚未完全明确。大多数研究基于动物模型,动物与人类皮肤存在结构差异,需建立更多研究实现动物模型向人体的转化。并非所有的疫苗都适于皮肤接种,实验研究中必须评估其安全性和有效性。各种改良的疫苗递送系统及其在相关疾病上的临床应用尚待进一步发掘。

关键词：皮肤朗格汉斯细胞经皮免疫疫苗过敏原

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微针促渗仪经皮免疫部位对免疫应答的影响

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华西药学杂志 2017年第5期32卷 518-520页

作者：彭珂郑涛张志荣孙逊四川大学华西药学院靶向药物及释药系统教育部重点实验室四川成都610041

目的利用微针的促渗作用对小鼠进行经皮免疫,探讨不同免疫部位所引起免疫应答的特点。方法用染色法和组织切片法考察微针促渗仪的穿刺能力和穿刺效果;采用微针促渗仪,对小鼠的后背皮肤和耳部皮肤进行处理,涂抹模型抗原卵清蛋白(OVA)和佐... 详细信息

目的利用微针的促渗作用对小鼠进行经皮免疫,探讨不同免疫部位所引起免疫应答的特点。方法用染色法和组织切片法考察微针促渗仪的穿刺能力和穿刺效果;采用微针促渗仪,对小鼠的后背皮肤和耳部皮肤进行处理,涂抹模型抗原卵清蛋白(OVA)和佐剂Cp G ODN 1826后,采用ELISA法测定血清中的抗OVA特异性抗体。结果微针促渗仪可成功穿刺皮肤角质层,将抗原OVA和佐剂Cp G ODN 1826同时递送至皮肤表皮层。与经后背皮肤免疫比较,经耳部免疫会产生更强效的Ig G、Ig G 1和Ig G 2a特异性抗体水平。结论经皮免疫在耳部皮肤引起了比后背皮肤更强的免疫效果。

关键词：微针促渗穿刺能力经皮免疫免疫应答耳部给药抗原佐剂抗体

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