检索结果-内蒙古大学图书馆

中国防痨杂志 2002年第5期24卷 245-248页

作者：何秀云庄玉辉中国人民解放军第309医院北京100091

目的　构建能表达结核分支杆菌热休克蛋白 6 5kD的工程菌。方法　设计引物并PCR扩增 ,目的基因克隆并转化 ,重组子经酶切和自动测序鉴定 ,阳性重组子转化表达宿主菌并受化学诱导后表达重组 6 5kD蛋白。结果　 6 5kD蛋白编码基因约 1.6k... 详细信息

目的　构建能表达结核分支杆菌热休克蛋白 6 5kD的工程菌。方法　设计引物并PCR扩增 ,目的基因克隆并转化 ,重组子经酶切和自动测序鉴定 ,阳性重组子转化表达宿主菌并受化学诱导后表达重组 6 5kD蛋白。结果　 6 5kD蛋白编码基因约 1.6kb ,重组子单酶切和双酶切证明目的基因插入载体 ,3个测序反应覆盖 99.1%目的基因 ;大肠杆菌表达重组 6 5kD蛋白。结论　大肠杆菌表达系统是一种快速、简便获得单一结核分支杆菌抗原的途径。

关键词：结核分支杆菌热休克蛋白表达 65kd 大肠杆菌免疫学

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结核分支杆菌依赖链霉素的实验观察

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军医进修学院学报 2006年第3期27卷 212-213页

作者：孟祥红匡铁吉董梅雷红梁艳何菊芳佟爱华肖漓军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 解放军总医院第309临床部检验科北京100091

目的:调查临床结核菌分离株对链霉素的依赖状况。方法:采用双向匡氏琼脂培养基分离痰结核菌和作结核菌依赖性测定,采用匡氏琼脂培养基检测结核菌耐药性。结果:184例临床分离结核菌株链霉素的依赖情况:含药管结核菌的生长较对照管明显粗... 详细信息

目的:调查临床结核菌分离株对链霉素的依赖状况。方法:采用双向匡氏琼脂培养基分离痰结核菌和作结核菌依赖性测定,采用匡氏琼脂培养基检测结核菌耐药性。结果:184例临床分离结核菌株链霉素的依赖情况:含药管结核菌的生长较对照管明显粗大旺盛,且高浓度管菌落数≥低浓度管者占11.41%(21/184);含药管结核菌的生长较对照管明显粗大旺盛,且低浓度管菌落数>高浓度管者占2.72%(5/184);低浓度管结核菌的生长较对照管明显粗大旺盛,而高浓度管菌落数<对照管者占4.35%(8/184);高浓度管结核菌的生长较对照管明显粗大旺盛,而低浓度管菌落数<对照管者占4.35%(8/184)。总计,显示链霉素依赖特征的临床分离株占22.83%(42/184)。结论:约22.8%的结核菌临床分离株显示出链霉素依赖性,并具有不同的依赖特征。

关键词：结核分支杆菌链霉素(S) 物质相关性障碍

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结核分支杆菌临床分离株耐药性调查与耐多药结核病流行特点探讨

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中国实验诊断学 2009年第5期13卷 569-571页

作者：董梅李艳艳匡铁吉孙彬孙敏霞吴纯丁修东解放军总医院第二附属医院北京100091

目的调查结核临床分离株的耐药性,探讨多耐药结核病(MDR-TB)流行特点。方法采用匡氏琼脂培养基按比例法测定287株结核菌(56株来自初治病例)对8种抗痨药物的耐药性。结果初治病例菌株和复治病例菌株对异烟肼、利福平、链霉素、吡嗪酰胺... 详细信息

目的调查结核临床分离株的耐药性,探讨多耐药结核病(MDR-TB)流行特点。方法采用匡氏琼脂培养基按比例法测定287株结核菌(56株来自初治病例)对8种抗痨药物的耐药性。结果初治病例菌株和复治病例菌株对异烟肼、利福平、链霉素、吡嗪酰胺高度耐药率分别为1.8%、3.6%、17.9%、0%和74.9%、58.0%、68.4%、32.0%,差异均极显著(P<0.001)。复治病例MDR株占63.2%,广泛耐药(XDR)株占10%,15.8%的MDR株为XDR株;初治病例无XDR株感染,MDR株占1.8%,极显著低于复治病例MDR株比率(P<0.001)。结论住院结核病患者MDR株和XDR株感染率高,且主要由获得性耐药产生。DOTS策略仍是我国耐药结核病防治重点。

关键词：结核病结核分支杆菌耐药性耐多药广泛耐药

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结核分支杆菌的耐药性分析

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北京医学 2004年第3期26卷 204-206页

作者：吉彤珍首都医科大学附属北京妇产医院检验科 100006

目前，全世界已有近20亿人口受到结核分支杆菌的感染，结核患者约2000万人，每年新发患者约800～1000万人~([1])。近年来，由于人口流动普遍增加、人类免疫缺陷病毒(HIV)与结核分支杆菌伴发感染以及耐药菌株的出现等原因，使结核杆菌感... 详细信息

目前，全世界已有近20亿人口受到结核分支杆菌的感染，结核患者约2000万人，每年新发患者约800～1000万人~([1])。近年来，由于人口流动普遍增加、人类免疫缺陷病毒(HIV)与结核分支杆菌伴发感染以及耐药菌株的出现等原因，使结核杆菌感染和结核病发生率有上升趋势，给全球结核病防治提出了新的挑战。及时诊断并检测分离株的耐药性对治疗结核非常重要。但结核分支杆菌生长十分缓慢，传统的检测方法往往需要7～10d后才能确定其耐药性。近年来，核酸检测技术被广泛应用于结核杆菌耐药性的分析，综述如下。

关键词：结核分支杆菌耐药性耐药机制错配分析

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结核分支杆菌外排泵蛋白研究进展

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动物医学进展 2022年第12期43卷 99-103页

作者：张蕊于丹李东徐金彪时坤李健明宗颖曾范利吉林农业大学中药材学院吉林长春130118 吉林省梅花鹿高效养殖和产品开发技术工程研究中心吉林长春130118 长春市动物疫病预防控制中心吉林长春130061

结核病(TB)是一种在全球范围内流行的慢性致死性人畜共患传染病,目前在欧美等发达国家野生及家养动物中感染现象普遍存在,而对于饲养动物,欧美等发达国家以扑杀淘汰为主要防控措施,发展中国家采取的是以抗生素联合抗结核药物治疗为主,... 详细信息

结核病(TB)是一种在全球范围内流行的慢性致死性人畜共患传染病,目前在欧美等发达国家野生及家养动物中感染现象普遍存在,而对于饲养动物,欧美等发达国家以扑杀淘汰为主要防控措施,发展中国家采取的是以抗生素联合抗结核药物治疗为主,淘汰为辅的防控措施,但结核分支杆菌在长期的高浓度药物环境中会出现耐药现象,不仅没有有效的防治结核,而且加重结核分支杆菌对社会的危害性。目前已有30%~75%的广泛耐药结核病患者仍未能被治愈,而对于动物耐药性结核分支杆菌的危害更是无法估量。防治耐药性结核杆菌已成为研究分支杆菌主要的研究重点之一。而外排泵作为耐药的主要原因之一,外排泵在参与菌体生理代谢的同时,对保护菌体阻止药物进入也至关重要,深入研究有助于靶向药物和外排泵抑制剂的研发,目前已研究鉴定的外排泵家族主要有4大区域,论文主要围绕外排泵结构功能及其相关的最新研究,阐述外排泵与耐药的相关性,为耐药结核靶向性药物的研发提供思路及参考。

关键词：结核分支杆菌耐药性外排泵抑制剂

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结核分支杆菌Mtb8.4抗原原核表达质粒的构建与鉴定(英文)

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中国现代医学杂志 2005年第7期15卷 966-968页

作者：李素华徐建国钟森李晖温州医学院附属育英儿童医院浙江温州325000 温州市第三人民医院ICU 浙江温州325027 泸州医学院附属医院感染科四川泸州646000

目的构建结核杆菌低分子质量抗原M tb8.4基因的原核表达重组质粒,为其蛋白质的表达及免疫学研究打下基础。方法PC R扩增目的基因,克隆到质粒pET-H is T7启动子的下游,转化大肠杆菌T O P10F',进行重组子的筛选、鉴定。结果M tb8.4基... 详细信息

目的构建结核杆菌低分子质量抗原M tb8.4基因的原核表达重组质粒,为其蛋白质的表达及免疫学研究打下基础。方法PC R扩增目的基因,克隆到质粒pET-H is T7启动子的下游,转化大肠杆菌T O P10F',进行重组子的筛选、鉴定。结果M tb8.4基因正向插入表达载体中,测序证实具有正确的读码框,基因序列与文献报道一致。结论重组原核表达质粒pET-H is-M tb8.4构建成功。

关键词：结核分支杆菌低分子质量抗原克隆原核表达质粒

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结核分支杆菌核酸适配体研究进展

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动物医学进展 2014年第12期35卷 122-126页

作者：杨倩王全凯宋战昀李敏思张健王振国吉林农业大学吉林长春130118 吉林省中韩动物科学研究院吉林长春130600 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062 甘肃农业大学甘肃兰州730070

结核分支杆菌(MTB)是引起多种宿主感染结核病的重要病原菌,由于结核分支杆菌耐药菌株的产生,导致结核病在世界范围内呈高发趋势。由于MTB检出率较低,开发一种简单快速的诊断方法迫在眉睫。指数富集配体系统进化技术(SELEX)的原理是从随... 详细信息

结核分支杆菌(MTB)是引起多种宿主感染结核病的重要病原菌,由于结核分支杆菌耐药菌株的产生,导致结核病在世界范围内呈高发趋势。由于MTB检出率较低,开发一种简单快速的诊断方法迫在眉睫。指数富集配体系统进化技术(SELEX)的原理是从随机寡核苷酸文库中筛选到能特异性结合靶物质的寡核苷酸配体(称为适配体)。论文对近几年国内外通过SELEX技术对结核分支杆菌筛选出的适配体做一综述,适配体的靶物质分别为分泌蛋白MPT64,CFP10-ESAT6蛋白,多磷酸激酶2(PPK2)以及结核分支杆菌(H37Rv株)整个菌体。体外筛选的结核分支杆菌适配体,能对结核病做出早期诊断,并能作为MTB疫苗的免疫佐剂,在临床诊断及药物研究等方面有很大应用前景。

关键词：结核分支杆菌适配体 MPT64蛋白 CFP10-ESAT6 蛋白多磷酸激酶2 H37Rv菌株

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结核分支杆菌耐药性基因芯片研制和耐药基因研究

结核分支杆菌耐药性基因芯片研制和耐药基因研究

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作者：张万江四川大学

学位级别：博士

结核病是严重危害人类健康的传染病,是中国重点控制的重大疾病之一,也是全球关注的公共卫生问题和社会问题.近年来,全球结核病疫情的回升,引起了国际社会的高度重视,世界卫生组织已将结核病作为重点控制的传染病之一,并宣布全球结核病... 详细信息

结核病是严重危害人类健康的传染病,是中国重点控制的重大疾病之一,也是全球关注的公共卫生问题和社会问题.近年来,全球结核病疫情的回升,引起了国际社会的高度重视,世界卫生组织已将结核病作为重点控制的传染病之一,并宣布全球结核病处于紧急状态.目前全世界已有19亿人感染结核分支杆菌,每年新增结核病例1000万例,死亡300万,居各种传染病死亡人数之首,并且结核病多重耐药现象十分严重.中国现有500万肺结核患者,占全球结核患者总数的四分之一,其中传染性肺结核患者有200万.WHO在“全球结核病紧急宣言”中指出,结核病卷土重来的主要原因之一是大量耐药菌株的出现,造成治愈困难而且费用增高,随之而产生的耐多药患者不易治愈,而且还保持着高度的传染性,这也是中国疫情严重的主要原因.耐多药结核病不仅传播快,而且患者病情进展迅速,从诊断到死亡的平均时间仅4～6周.由于结核分支杆菌属缓慢生长菌,而耐药结核分支杆菌生长更为缓慢,常规药敏试验需1-2个月的时间,因而几乎不能为有效药物的选择提供信息,有些患者在药敏结果未出来前已死亡.因此,降低结核病发病率及死亡率的关键是早期诊断,快速耐药性检测,同时对结核分支杆菌的耐药机制进行系统的研究,以指导结核病的防治.该研究利用基因芯片技术,研制一种结核分支杆菌快速鉴定及耐药性筛选、检测的基因芯片,该芯片能够快速、准确、高效地鉴定结核分支杆菌,同时针对结核分支杆菌对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇四种药物产生的耐药性进行一次性的检测和筛选,在一次反应中进行多种信息的平行分析.同时该研究利用所研制的基因芯片对六株临床分离株结核分支杆菌的耐药性进行了检测和分析,并且对一株临床分离的多耐药结核分支杆菌链霉素耐药基因rpsL基因和rrS基因进行了测序、克隆表达、以及基因相关功能的鉴定等系列研究,发现该株多耐药结核分支杆菌耐链霉素是由于rpsL基因的93bp、94bp处的碱基发生了突变,碱基C、C突变为T、T,使得相对应的编码氨基酸由脯氨酸突变为亮氨酸;并且耐链霉素是单基因型的碱基突变,在国内外属首次研究发现.

关键词：结核分支杆菌耐药性基因芯片耐药基因

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结核分支杆菌蛋白抗原及其单克隆抗体的初步研究

结核分支杆菌蛋白抗原及其单克隆抗体的初步研究

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作者：魏云芳中国疾病预防控制中心

学位级别：硕士

据世界卫生组织(WHO)调查估计，全球1／3的人口感染过结核分支杆菌，每年引起约800万新感染患者和300万患者的死亡，死于TB的人数是其它传染病死亡人数的总和，占人类致死病因第7位。因此，WHO曾两度发出警告，要求各国采取有效措施控... 详细信息

据世界卫生组织(WHO)调查估计，全球1／3的人口感染过结核分支杆菌，每年引起约800万新感染患者和300万患者的死亡，死于TB的人数是其它传染病死亡人数的总和，占人类致死病因第7位。因此，WHO曾两度发出警告，要求各国采取有效措施控制这一严重传染病。在我国，据2000年全国结核病流行病学抽样调查结果显示，人群结核分支杆菌感染率为44.5％，结核病死亡人数是因各种传染病和寄生虫病死亡总数的2倍。当前我国TB流行趋势和特点存在“五多一高”，即MTB感染人数多、现患结核病人多、死亡结核病人多、耐药结核病人多、农村结核病人多和传染性肺结核疫情居高不下。此外，青壮年患者占很大比重，15-45岁青壮年占发病患者总数的67.2％。因TB每年导致的经济损失达70多亿元，直接影响了国民经济的发展。结核病再度成为严重危害我国人民健康的传染病之一，除了WHO总结的大量耐药菌株的产生、卡介苗效果欠佳、艾滋病的流行、人口结构和行为因素、工业和技术因素、国际贸易与旅游业的发展等诸多因素外，重要的是防治措施上有待研究、改进。尤其是我国缺乏对结核病的防治措施，包括病原学、诊断方法的方面的深入研究，缺乏快速、特异、灵敏的诊断方法。因此，我们采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白免疫印迹(Western Blot)等方法，开展了结核分支杆菌蛋白抗原的初步研究，为进一步研制结核病的特异诊断试剂和开展新疫苗的研制提供基础。用蛋白免疫印迹(Western Blot)技术分析抗原抗体反应的高度特异性应用于结核分支杆菌的特异性、保护性抗原的筛选，获得分子量为30KD、3lKD的抗原。这两种抗原与结核病人的血清均发生阳性反应，而与正常小鼠血清和健康人血清呈阴性反应。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法对从我国安徽、江苏和湖北省结核病人分离的结核分支杆菌敏感株和耐药株的菌体蛋白和滤液蛋白的蛋白多态性进行了分析。结果显示本次分析的结核分支杆菌菌株的菌体蛋白和滤液蛋白的主要蛋白抗原分布相似，但个别蛋白在不同菌株间的表达量及表达与否存有差异；菌体蛋白的主要条带的分子量为88KD、71KD、65KD、31KD、28KD、25KD、16KD、14KD、12KD。滤液蛋白的主要条带的分子量为65KD、60KD、31KD、27KD、23KD、18KD、10KD和6KD。

关键词：结核分支杆菌 SDS-丙烯酰胺凝胶电泳蛋白免疫印迹蛋白抗原单克隆抗体

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结核分支杆菌H<,37>Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆及酶学性质研究

结核分支杆菌H<,37>Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆及酶学性质研究

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作者：于海东河南工业大学

学位级别：硕士

本文利用基因工程技术,以结核分支杆菌HRv基因组为模板,扩增了该菌株的莽草酸脱氢酶基因aroE,通过在大肠杆菌BL21(DE3)pLYS中表达,首次纯化出可溶性重组结核分支杆菌莽草酸脱氢酶(SD),在辅酶NADPH作用下该酶催化还原3-脱氢莽草酸生成莽... 详细信息

本文利用基因工程技术,以结核分支杆菌H<,37>Rv基因组为模板,扩增了该菌株的莽草酸脱氢酶基因aroE,通过在大肠杆菌BL21(DE3)pLYS中表达,首次纯化出可溶性重组结核分支杆菌莽草酸脱氢酶(SD),在辅酶NADPH作用下该酶催化还原3-脱氢莽草酸生成莽草酸.实验中还对重组SD的包涵体进行了复性研究.重组SD经谷胱甘肽氧化还原梯度透析后无可见沉淀析出,离心后蛋白质回收率为70.7%.结核分支杆菌H<,37>Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆,为该酶的晶体结构分析、免疫学研究及抗结核药物靶点的筛选打下了基础.

关键词：结核分支杆菌莽草酸莽草酸脱氢酶重组蛋白分离纯化抗结核病药物

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