检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2016年第4期32卷 327-331页

作者：江莉莎姚义勇张莉柳岩郭述良重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院第一分院重庆400016

目的比较缺氧模型及多因素模型两种结核休眠菌建模方法的优劣。方法利用缺氧因素构建缺氧模型;利用低氧(5%O2)、高CO2(10%CO2)、弱酸(pH 5.0)及营养缺乏(10%7H9液体培养基)多种因素构建多因素模型。分别在第20d、30d时取样,用金胺O-尼... 详细信息

目的比较缺氧模型及多因素模型两种结核休眠菌建模方法的优劣。方法利用缺氧因素构建缺氧模型;利用低氧(5%O2)、高CO2(10%CO2)、弱酸(pH 5.0)及营养缺乏(10%7H9液体培养基)多种因素构建多因素模型。分别在第20d、30d时取样,用金胺O-尼罗红染色法染色,在共聚焦显微镜下观察结核菌脂质聚集及失去抗酸性的情况;用电镜观察结核菌细胞壁增厚情况;并检测其对利福平的耐药率。在建模30d时,将等量的两种模型分别转入新鲜7H9液体培养基中,观察并比较其复苏情况。结果建模20d时,两模型组细菌均出现脂质聚集及失去抗酸性,无明显差异。两模型组细菌均未出现明显细胞壁增厚。建模30d时,多因素模型组细菌几乎都表现出脂质聚集及失去抗酸性,而缺氧模型组仍有部分细菌未表现出脂质聚集及失去抗酸性。同时,多因素模型组在建模30d还出现了细胞壁增厚的细菌,缺氧模型组则无明显改变。多因素模型组细菌对利福平的耐药率明显高于缺氧模型组,且多因素模型组细菌复苏的菌量远小于缺氧模型组。结论多因素模型较缺氧模型能更快诱导结核菌进入休眠状态,且诱导出的结核休眠菌状态更稳定。

关键词：结核休眠菌缺氧模型多因素模型比较

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大鼠海马神经细胞体外缺糖缺氧模型制备方法的改进

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中国组织工程研究 2007年第15期11卷 2810-2813页

作者：田映红李树基李晓文高天明南方医科大学基础医学院生理教研室南方医科大学基础医学院神经生物学教研室

目的:改进培养大鼠海马神经细胞体外缺糖缺氧模型制备方法,并通过兴奋性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂进行验证。方法:实验于2004-09/2005-06在南方医科大学基础医学院神经生物学教研室进行。实验材料:出生1d内清洁级SD大鼠,由南... 详细信息

目的:改进培养大鼠海马神经细胞体外缺糖缺氧模型制备方法,并通过兴奋性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂进行验证。方法:实验于2004-09/2005-06在南方医科大学基础医学院神经生物学教研室进行。实验材料:出生1d内清洁级SD大鼠,由南方医科大学实验动物中心提供(合格证号为粤证监字2004B023号)。N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸(MK-801)和D-2-氨基-5-磷酰基戊酸(d-APV)购自Sigma公司。实验方法:取新生1dSD大鼠海马组织作神经细胞分散细胞原代培养,培养到13d时进行氧/葡萄糖剥夺模型的制备:将neurobasal培养基更换为不含葡萄糖的BSSo培养基,连续充以50mL/LCO2+950mL/LN2(体积比)混合气体。缺氧30,45,60,90min后取出细胞,更换为正常neurobasal培养基,恢复正常条件继续培养。将神经细胞随机分为正常对照组、单纯缺氧组、无糖缺氧组、MK-801组和d-APV组。将10μmol/LMK-801和500μmol/Ld-APV在通50mL/LCO2+950mL/LN2混合气前加入到BSSo培养基,缺氧结束后随BSSo培养基一起去掉。复氧24h后采用MTT比色法测神经细胞成活率及Hoechst荧光染料法测神经细胞凋亡率。结果:①随着氧/葡萄糖剥夺时间延长,神经细胞存活率下降。氧/葡萄糖剥夺30,45,60,90min再复氧24h,神经细胞存活率分别为(81.48±3.84)%、(63.14±3.14)%、(41.73±2.97)%和(16.78±2.12)%。②N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂MK-801(10μmol/L)和d-APV(500μmol/L)均能明显增加神经细胞存活率(P<0.05),并且两组细胞存活率与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:实验制备的海马神经细胞短时间氧/葡萄糖剥夺模型可对神经细胞造成迟发性死亡,兴奋性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂可保护氧/葡萄糖剥夺诱导的神经细胞损伤,说明本实验建立的缺氧模型有效并简便可靠,并且缩短了缺氧时间。

关键词：缺氧模型海马神经元培养凋亡

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淫羊藿总黄酮对缺氧模型小鼠的抗缺氧作用

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中药材 2009年第11期32卷 1736-1738页

作者：张汝学贾正平李富盛李茂星邱建国兰州军区兰州总医院国家中医药管理局临床中药学重点学科甘肃兰州730050 兰州大学生命科学学院甘肃兰州730020

目的:研究淫羊藿总黄酮(total flavone of herba epimediumon,TFE)对缺氧模型小鼠抗缺氧的药理作用。方法:利用实验室常压密闭缺氧装置,建立小鼠缺氧模型,并对TFE不同给药剂量进行对比,通过测定小鼠的存活时间、外周血象、大脑和肺脏含... 详细信息

目的:研究淫羊藿总黄酮(total flavone of herba epimediumon,TFE)对缺氧模型小鼠抗缺氧的药理作用。方法:利用实验室常压密闭缺氧装置,建立小鼠缺氧模型,并对TFE不同给药剂量进行对比,通过测定小鼠的存活时间、外周血象、大脑和肺脏含水率等指标,观察TFE的抗缺氧作用。结果:与模型组比较,TFE可显著延长小鼠在常压密闭缺氧条件下的存活时间,显著提高缺氧小鼠血液中的白细胞和红细胞的数量,减轻脑水肿及肺水肿的程度。TFE给药剂量为900 mg/(kg.d)时,抗急性缺氧的作用最强。结论:TFE对缺氧模型小鼠具有显著的抗缺氧作用。

关键词：淫羊藿总黄酮缺氧模型抗缺氧作用

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两种大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧模型建立方法的比较

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临床心血管病杂志 2014年第9期30卷 815-818页

作者：朱凌倜王时俊丁雪峰付明强邹云增周京敏复旦大学附属中山医院心内科上海200032 川北医学院附属医院心内科上海市心血管病研究所

目的:以对缺氧敏感的转录调控因子——缺氧诱导因子(HIF)-1α作为评价指标,比较物理方法与化学方法建立大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧模型效果。方法:1植块法培养2周龄雄性SD大鼠心肌微血管内皮细胞,鉴定并传代培养。2在不同时间点分别以... 详细信息

目的:以对缺氧敏感的转录调控因子——缺氧诱导因子(HIF)-1α作为评价指标,比较物理方法与化学方法建立大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧模型效果。方法:1植块法培养2周龄雄性SD大鼠心肌微血管内皮细胞,鉴定并传代培养。2在不同时间点分别以缺氧发生装置和氧耗剂Na2S2O4对心肌微血管内皮细胞进行缺氧干预,选择最佳干预时间。3免疫印迹和细胞免疫荧光法检测两种方法建立心肌微血管内皮细胞缺氧模型后,HIF-1α的表达情况。结果:1植块法培养原代心肌微血管内皮细胞纯度较高,可见典型铺路石样形态和管腔样结构;26hHIF-1α表达较其他时间点高,故选择6h作为最佳缺氧干预时间;3物理缺氧法干预心肌微血管内皮细胞后HIF-1α表达较化学缺氧法显著增加(P<0.05)。结论:对构建体外心肌微血管内皮细胞缺氧模型,物理法效果优于化学法。

关键词：心肌微血管内皮细胞缺氧模型缺氧诱导因子

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麻醉大鼠停通气缺氧模型和缺氧预处理模型的建立

麻醉大鼠停通气缺氧模型和缺氧预处理模型的建立

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作者：金海龙首都医科大学

学位级别：博士

第一部分麻醉大鼠停通气缺氧损伤模型的建立目的:通过观察机械通气麻醉大鼠不同时间停通气后死亡率、脑电生理、神经功能和脑组织形态学等的变化,建立适合脑缺氧研究的停通气缺氧损伤模型.方法:雄性Wistar大鼠144只,体重260~290g,随机... 详细信息

第一部分麻醉大鼠停通气缺氧损伤模型的建立目的:通过观察机械通气麻醉大鼠不同时间停通气后死亡率、脑电生理、神经功能和脑组织形态学等的变化,建立适合脑缺氧研究的停通气缺氧损伤模型.方法:雄性Wistar大鼠144只,体重260~290g,随机分为对照组和停通气组(根据停通气时间分为停通气1、2、3、4、5、6、7分钟组),共8组,每组18只.水合氯醛腹腔麻醉后行气管插管和机械通气,应用肌松药消除大鼠自主呼吸,以断开呼吸机接头的方式进行停通气,各组到达相应预定的时间后立即恢复通气,并根据血压情况进行心肺复苏,同时记录TCA(循环停止时间:从开始停通气至MAP<25mmHg的时间)和TROSC(自主循环恢复时间:从开始复苏至SBP≥60mmHg的时间),如开始复苏3分钟后自主循环仍未恢复则放弃抢救,复苏成功者继续呼吸机支持60分钟,全程记录脑电图(EEG)变化.实验后继续观察3天,记录各组大鼠死亡率和复苏后24、48和72小时神经功能评分(NDS),72小时后每组选取3只存活大鼠在光镜和电镜下观察海马CA1区结构改变.结论:综合评价各组大鼠死亡率、神经功能评分、神经组织细胞超微结构和脑电生理改变,我们认为停通气4分钟组适合作为脑缺氧损伤动物模型.第二部分麻醉大鼠停通气缺氧预处理模型的建立目的:探讨麻醉大鼠停通气缺氧预处理模型的合适时间组合.方法:雄性Wistar大鼠66只,分别按照停通气1或2分钟,恢复通气1、2、3、5或10分钟,组合出10种停通气缺氧预处理方案:1min-1min组、1min-2min组、1min-3min组、1min-5 min组和1min-10min组、2min-1min组、2min-2min组、2min-3 min组、2min-5 min组、2min-10 min组,同时设置对照组,每组6只.水合氯醛腹腔麻醉后行气管插管和机械通气,预处理各组按方案连续进行4次预处理,对照组不进行预处理,随后各组均停通气4分钟,复苏和复苏后处理同第一部分实验.记录各组大鼠死亡率,进一步比较TCA、TROSC、复苏后24、48和72小时NDS评分和海马CA1区超微结构情况.

关键词：麻醉缺氧模型停通气缺氧预处理恢复通气死亡率脑电生理脑组织形态学

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荭草苷对缺氧模型小鼠的抗缺氧作用研究

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中国药房 2006年第9期17卷 654-656页

作者：付晓春李少鹏邱蔚芬王希广东化工制药职业技术学院广东东莞市人民医院东莞市517000

目的:研究荭草苷对缺氧模型小鼠的抗缺氧作用。方法:通过常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒、氰化钾中毒、利多卡因中毒、夹闭气管及断头等建立小鼠缺氧模型,于造模前20min给予相应药物,观察药物的抗缺氧作用。结果:与生理盐水空白对照组比较,... 详细信息

目的:研究荭草苷对缺氧模型小鼠的抗缺氧作用。方法:通过常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒、氰化钾中毒、利多卡因中毒、夹闭气管及断头等建立小鼠缺氧模型,于造模前20min给予相应药物,观察药物的抗缺氧作用。结果:与生理盐水空白对照组比较,荭草苷可明显延长模型小鼠在常压缺氧、亚硝酸钠中毒、氰化钾中毒、利多卡因中毒时的存活时间,延长夹闭气管后的心电图消失时间及断头后的喘气时间。结论:荭草苷对缺氧模型小鼠具有抗缺氧作用。

关键词：荭草苷小鼠缺氧模型抗缺氧作用

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低氧工作站建立大鼠原代心肌细胞缺氧模型

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解剖学杂志 2016年第3期39卷 372-375页

作者：许瑞陈希蒋易楠祝伟娜王耀辉抗体药物河南省工程实验室河南省抗体药物国际联合实验室河南大学医学院细胞与分子免疫重点实验室开封475004 郑州大学基础医学院郑州450001

心肌梗死、缺血再灌注损伤等多种心血管疾病的发生和发展过程中多伴有细胞缺氧,进而引起细胞损伤,影响心正常生理功能.体外心肌细胞缺氧模型能够较好排除神经、体液等因素及个体差异性的影响,更加有利于对缺氧性心肌损伤发生机制的研究... 详细信息

心肌梗死、缺血再灌注损伤等多种心血管疾病的发生和发展过程中多伴有细胞缺氧,进而引起细胞损伤,影响心正常生理功能.体外心肌细胞缺氧模型能够较好排除神经、体液等因素及个体差异性的影响,更加有利于对缺氧性心肌损伤发生机制的研究,为探讨如何保护缺氧心肌提供重要理论基础.因此,建立体外细胞缺氧模型是从细胞和分子水平研究该类疾病的重要方法,在多种缺血缺氧性疾病中均得到广泛应用.目前,国内外应用较多的心肌细胞缺氧模型包括物理法缺氧模型和化学法缺氧模型.如何更好地模拟体内真实缺氧环境,建立更加稳定、理想的缺氧模型,一直是该领域研究的关键环节之一.

关键词：原代心肌细胞缺氧模型工作站缺血再灌注损伤缺氧性心肌损伤缺血缺氧性疾病心血管疾病大鼠

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用亚硫酸钠制造新的肺动脉平滑肌细胞化学缺氧模型

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中国细胞生物学学报 2015年第4期37卷 529-534页

作者：包财盈叶玉柱朱成武薛彬彬袁培根金立达王万铁林丽娜温州医科大学附属第一医院麻醉科温州325000 温州医科大学病理生理学教研室温州325000

该文应用1.5,2.0,3.0 g/L亚硫酸钠制造新的肺动脉平滑肌细胞化学缺氧模型,并与三气培养箱制造的物理缺氧模型进行对比,采用hematoxylin-eosin staining(HE染色)、Cell Counting Kit-8(CCK-8)来观察亚硫酸钠对细胞的影响,检测细胞体内的... 详细信息

该文应用1.5,2.0,3.0 g/L亚硫酸钠制造新的肺动脉平滑肌细胞化学缺氧模型,并与三气培养箱制造的物理缺氧模型进行对比,采用hematoxylin-eosin staining(HE染色)、Cell Counting Kit-8(CCK-8)来观察亚硫酸钠对细胞的影响,检测细胞体内的活性氧和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的基因及蛋白表达量来判断模型的缺氧程度。细胞体内活性氧和HIF-1α的检测结果提示,亚硫酸钠所制造的缺氧模型的缺氧程度随其浓度的升高而升高,虽然2.0 g/L和3.0 g/L亚硫酸钠组对细胞有一定程度的毒性作用,但是1.5 g/L亚硫酸钠组对细胞的损害程度与物理缺氧组相比无明显差异。该研究表明,1.5 g/L亚硫酸钠所制造的肺动脉平滑肌细胞化学缺氧模型较符合肺动脉平滑肌细胞缺氧模型的要求。

关键词：缺氧模型亚硫酸钠肺动脉平滑肌细胞

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NSCs缺氧模型的建立以及锂对缺氧NSCs的修复作用

NSCs缺氧模型的建立以及锂对缺氧NSCs的修复作用

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作者：王钰安徽医科大学

学位级别：硕士

目的体外建立新生鼠NSCs缺氧模型，探讨锂对缺氧NSCs的修复作用，为临床应用锂治疗HIE提供实验依据。方法1.鼠NSCs分离培养及鉴定：生后24小时内SD大鼠脱颈处死，75%乙醇消毒，分离新生SD大鼠海马组织，投入冰浴的盛有D-hank's液的... 详细信息

目的体外建立新生鼠NSCs缺氧模型，探讨锂对缺氧NSCs的修复作用，为临床应用锂治疗HIE提供实验依据。方法 1.鼠NSCs分离培养及鉴定：生后24小时内SD大鼠脱颈处死，75%乙醇消毒，分离新生SD大鼠海马组织，投入冰浴的盛有D-hank's液的平皿中，去除脑膜和血管，用眼科剪将组织尽可能剪碎，0.25%胰蛋白酶水浴箱消化，玻璃管吹打成细胞悬液，200目筛网过滤，离心，获得单细胞悬液，用无血清培养技术培养神经干细胞。免疫组织化学技术检测其巢蛋白（Nestin）的表达；并用-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入试验，免疫荧光双标技术观测神经干细胞的增殖状况；诱导神经干细胞分化，分别用神经元特异性稀醇化酶（NSE）抗体和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）抗体进行免疫组织化学技术鉴定分化细胞。 2.体外NSCs缺氧模型的建立：即无糖培养基+低氧环境。无糖培养基采用与基础培养基成分相似的无糖DMEM培养基，低氧环境采用体积分数为5%CO2和95%N2的混合气体。细胞形态学观察、台盼蓝染色及cck-8检测法作为判断缺氧模型成功与否的标准。 3.锂对缺氧NSCs的修复作用：缺氧后的NSCs中加入不同浓度的氯化锂共同培养，通过细胞形态学观察和cck-8检测法探讨氯化锂对缺氧NSCs的修复作用。结果 1.鼠NSCs分离培养及鉴定：原代培养第1天可见分离的细胞呈圆形，遮光性强。原代培养3d，可见近球形的细胞团，结构松散，大小不均，5-7d可见细胞连接紧密，呈球形增大。传代后神经球生长较快，球体较均匀，背景干净。通过免疫细胞化学检测Nestin阳性表达证实为NSCs，BrdU阳性表达证实NSCs处于增殖状态。血清培养基诱导NSCs3d后，可见NSE染色阳性的神经元，胞体呈三角形，有1-2个突起。GFAP染色阳性的星形胶质细胞，胞体呈星形，突起粗短、较多分支。 ***缺氧模型的建立：在DMEM无糖培养基和95%N2和5%CO2混合气体中培养1h后，缺氧组与正常组比较，细胞形态学改变：缺氧组NSCs数量减少，形态不规则，甚至出现破裂，形成絮状物或碎片；台盼蓝计数：缺氧组死亡细胞数量明显增多（P<0.05）；cck-8检测法：缺氧组NSCs活性明显降低（P<0.05），且与缺氧时间呈正相关。 3．锂对缺氧后NSCs的修复作用：缺氧NSCs加入不同浓度的氯化锂后，同一时相点下锂干预组与缺氧组相比，细胞形态学观察：锂干预组NSCs数量多，折光性强；cck-8检测法：锂干预组NSCs活性明显高于缺氧组，3mM锂干预组NSCs活性高于1mM锂干预组（P<0.05）；免疫细胞化学检测：锂干预组NSCs增殖明显高于缺氧组。结论 1.生后1d正常SD鼠海马在体外可以培养出NSCs。 2.在无糖培养基和95%N2+5%CO2条件下缺氧1h可以建立NSCs缺氧模型。 3.氯化锂增加缺氧后NSCs细胞活力。 4.氯化锂促进缺氧后NSCs的增殖。 5.氯化锂对缺氧后NSCs的修复作用在一定范围内呈剂量依赖性。 6.氯化锂有希望成为临床治疗HIE的新药。

关键词：新生鼠 NSCs 细胞培养氯化锂缺氧模型

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胎羊缺氧模型的血流动力学改变

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中国应用生理学杂志 1999年第1期15卷 50-54页

作者：吴国强李笑天赵耐青沈霖霖周光兴庄依亮上海医科大学生物医学工程教研室

目的和方法：健康妊娠绵羊７只，体重２０～３０ｋｇ。于妊娠１１６～１２５ｄ行胎儿外科手术。经胎儿股动脉插管引出腹主动脉血压，放置脐动脉电磁流量计探头记录血流信号。术后恢复１ｈ。从胎儿动脉导管注入明胶微球悬浮液（≈５０μ... 详细信息

目的和方法：健康妊娠绵羊７只，体重２０～３０ｋｇ。于妊娠１１６～１２５ｄ行胎儿外科手术。经胎儿股动脉插管引出腹主动脉血压，放置脐动脉电磁流量计探头记录血流信号。术后恢复１ｈ。从胎儿动脉导管注入明胶微球悬浮液（≈５０μｍ）造成胎盘微血管阻塞，每隔１５～２０ｍｉｎ注射一次，构成胎儿缺氧动物模型。采集胎儿动脉血样。分析ｐＨ、ＰａＣＯ２和ＰａＯ２值。分析脐动脉输入阻抗。结果：１、外周阻力Ｒ与血管阻塞程度呈指数关系（ｒ＝０．９７，Ｐ＜０．００１），但脐动脉特征阻抗基本不变；２、胎儿动脉血氧分压随血管阻塞程度增加而下降（ｒ＝０．８７，Ｐ＜０．００１）；ｐＨ值随血管阻塞程度的增加而减小（ｒ＝０．８５，Ｐ＜０．０１）；二氧化碳分压随血管阻塞程度增加而上升（ｒ＝０．７１，Ｐ＜０．０５）；３、脐动脉血流量与外周阻力呈幂函数关系（ｒ＝０．９９，Ｐ＜０．００１）。

关键词：血流动力学血气分析胎儿窘迫缺氧模型绵羊

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