检索结果-内蒙古大学图书馆

禽白血病病毒J亚群和网状内皮组织增殖病毒共感染的产蛋种鸡的病理学研究及其疫源追溯

中国兽医科学 2018年第8期48卷 1050-1056页

作者：邱波王艳张艳美张海静王凤乾胡建廷山东省药学科学院山东省化学药物重点实验室山东济南250101 山东英才学院山东济南250104

为查明禽白血病病毒J亚群（ALV-J）和网状内皮组织增殖病病毒（REV）共感染临床鸡群的原因,对河北省某鸡场患病的产蛋种鸡进行组织病理学检查、病毒分离和可疑病原的间接免疫荧光检测、PCR和ELISA检测,同时对该鸡群所用疫苗中可疑病毒... 详细信息

为查明禽白血病病毒J亚群（ALV-J）和网状内皮组织增殖病病毒（REV）共感染临床鸡群的原因,对河北省某鸡场患病的产蛋种鸡进行组织病理学检查、病毒分离和可疑病原的间接免疫荧光检测、PCR和ELISA检测,同时对该鸡群所用疫苗中可疑病毒进行病原分离和PCR鉴定。结果,组织病理学检查发现,发病鸡的肝脏、腺胃、肾脏均出现灶状淋巴细胞增殖;用发病鸡肝脏浸液接种DF1细胞后,分别用特异性单抗进行间接免疫荧光检测发现培养物中ALV-J抗原和REV抗原均呈阳性。用ALV-J特异性引物对病鸡肝组织样品进行PCR检测时部分结果呈阳性,产物大小为924 bp;用REV特异性引物对病鸡肝组织样品进行PCR检测时部分结果也呈阳性,产物大小为438 bp。经PCR检测的17份活毒疫苗DNA中,2份为REV核酸阳性,5份为ALV-J核酸阳性,其中有1份疫苗样品呈双阳性,并且PCR阳性产物的序列分别与从蛋鸡体内分离的病毒毒株相一致。系统进化分析表明,分离的疑似REV毒株与中国其他地方分离的REV毒株的同源性高于与REV HA株的同源性,而本研究中分离的ALV-J毒株与ALV-J原型株HPRS-103的亲缘关系最近。以上结果表明,疫苗污染ALV-J和REV与田间ALV-J与REV的高感染率存在着因果关系。

关键词：禽白血病病毒J亚群网状内皮组织增殖病病毒疫苗污染混合感染病毒检测

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禽网状内皮组织增殖病的实验室诊断

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中国家禽 2006年第24期28卷 13-15页

作者：屈哲徐镔蕊王勇睢艳平中国农业大学动物医学院北京100094

经剖检观察到病鸡脏器上的肿瘤结节,病理组织学检查到心、肝、脾、肺、肾、肠等组织中有大量网状细胞增生。免疫组织化学检测到病变组织中有REV抗原。因此,将组织学病理变化和检测禽网状内皮组织增殖病病毒相结合可以作为实验室快速、... 详细信息

经剖检观察到病鸡脏器上的肿瘤结节,病理组织学检查到心、肝、脾、肺、肾、肠等组织中有大量网状细胞增生。免疫组织化学检测到病变组织中有REV抗原。因此,将组织学病理变化和检测禽网状内皮组织增殖病病毒相结合可以作为实验室快速、准确诊断禽网状内皮组织增殖病的方法。

关键词：网状内皮组织增殖病病毒病理组织学免疫组织化学

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禽网状内皮组织增殖病的实验室诊断

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畜牧兽医科技信息 2014年第7期30卷 7-8页

作者：刘霄磊王牟平李艳华东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司哈尔滨150001

禽网状内皮组织增殖病（RE）是由网状内皮组织增殖病病毒（REV）引起的鸡、鸭、鹅、火鸡以及其它禽类以淋巴网状细胞增生为特征的肿瘤性疾病，是包括致死性网状细胞瘤、矮小综合症和慢性淋巴组织瘤等在内的一类病理性综合征。

关键词：禽网状内皮组织增殖病实验室诊断网状内皮组织增殖病病毒淋巴组织肿瘤性疾病矮小综合症细胞增生网状细胞

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禽网状内皮组织增殖病

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黑龙江畜牧兽医 1998年第6期 42-45页

作者：阿合买提·买买提,刘忠贵东北农业大学动物医学系

禽网状内皮组织增殖病（Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓｉｓ，ＲＥ）是指由逆转录病毒科禽类Ｃ型逆转录病毒属中的网状内皮组织增殖病病毒（ＲｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓｉｓＶｉｒｕｓ，ＲＥＶ）引起的鸡、鸭、火... 详细信息

禽网状内皮组织增殖病（Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓｉｓ，ＲＥ）是指由逆转录病毒科禽类Ｃ型逆转录病毒属中的网状内皮组织增殖病病毒（ＲｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓｉｓＶｉｒｕｓ，ＲＥＶ）引起的鸡、鸭、火鸡和其他禽类的一群病理综合征。这群...

关键词：火鸡毒株鸡胚禽网状内皮组织增殖病禽类法氏囊腔上囊淋巴组织马立克氏病病毒马雷克病病毒淋巴瘤抗原决定簇完全复制网状内皮组织增殖病病毒马立克氏病疫苗

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肉种鸡MDV和REV人工共感染的动态病理学与抗原定位研究

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中国农业科学 2008年第6期41卷 1838-1844页

作者：刁秀国张利成子强朱国王桂花孟祥凯高婷婷崔治中山东农业大学动物科技学院山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

【目的】深入了解MDV与REV人工共感染肉种鸡后疾病的发生、发展状况,为二者临床复杂的混合感染提供确实的鉴别诊断方法和明确的诊断时间。【方法】MDV和REV强毒株人工共感染1日龄肉种鸡,定期剖检,进行病理组织学、细胞凋亡、免疫组化和... 详细信息

【目的】深入了解MDV与REV人工共感染肉种鸡后疾病的发生、发展状况,为二者临床复杂的混合感染提供确实的鉴别诊断方法和明确的诊断时间。【方法】MDV和REV强毒株人工共感染1日龄肉种鸡,定期剖检,进行病理组织学、细胞凋亡、免疫组化和肿瘤组织的超微结构观察。【结果】肝、胰腺、腺胃、盲肠扁桃体、心肌在感染后1周出现以小淋巴细胞浸润为主的炎症,2～9周时,大部分实质器官出现以幼稚淋巴细胞、大中小淋巴细胞为主的渐进性增生灶,部分增生灶中可见原始网状细胞和马立克氏病细胞;10周后免疫器官实质细胞出现明显的凋亡;免疫组化显示,肝、脾、法氏囊、胸腺等在2周时呈双抗原阳性;电镜下,肝脏肿瘤组织中可见多形态淋巴细胞,核分裂相和细胞凋亡同时存在,同一细胞中可见MDV和REV两种病毒粒子。【结论】MDV与REV共感染对病程起协同和促进作用,发病早,病变明显;免疫酶及荧光方法可用于共感染的早期诊断(2周以前);而后期(4周以后)可通过病理组织学进行鉴别诊断,两种病毒粒子、马立克氏病细胞、原始网状细胞、多形态和幼稚淋巴细胞可作为诊断依据。

关键词：马立克氏病病毒网状内皮组织增殖病病毒共感染动态病理学抗原定位肉种鸡

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REV感染对SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及c-Myc基因表达的影响

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中国兽医科学 2020年第1期50卷 34-41页

作者：周放侯宁高雪丽刘超男张淑君吴乐高海婷边洋吕晓萍郑世民东北农业大学动物医学学院黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室

为探究禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)感染对雏鸡胸腺、脾和法氏囊细胞凋亡及相关基因c-Myc表达、核质比值的影响,并阐述其相互关系。以1日龄SPF雏鸡为研究对象,应用分子生物学和免疫学技术结合病理学检测方法,通过对上述免疫器官c-Myc... 详细信息

为探究禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)感染对雏鸡胸腺、脾和法氏囊细胞凋亡及相关基因c-Myc表达、核质比值的影响,并阐述其相互关系。以1日龄SPF雏鸡为研究对象,应用分子生物学和免疫学技术结合病理学检测方法,通过对上述免疫器官c-Myc基因m RNA及其蛋白含量、c-Myc阳性细胞数、细胞凋亡率及核质比值的检测,较全面系统地研究了REV感染SPF雏鸡后第1、7、14、21、28和42天上述被检指标的动态变化。结果显示,REV感染雏鸡后,无论中枢免疫器官(胸腺、法氏囊)还是外周免疫器官(脾),其c-Myc基因mRNA表达和蛋白含量及阳性细胞数量均不同程度的高于对照雏鸡,其中21~28 d差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);免疫器官细胞凋亡率在病毒感染后14~28 d极显著(P<0.01)高于对照雏鸡;免疫器官细胞核质比值不同程度的小于对照雏鸡,特别是病毒感染后21~28 d差异显著(P<0.05),以法氏囊细胞凋亡和核质比变化尤为明显;细胞凋亡率和核质比值变化具有较好的相关性(R^2=0.812,P<0.01)。表明REV感染所致免疫器官细胞凋亡与c-Myc基因过表达密切相关,核质比值减小程度可间接反映细胞凋亡程度。

关键词：网状内皮组织增殖病病毒 SPF雏鸡免疫器官 c-Myc基因表达细胞凋亡

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整合进禽反转录病毒长末端重复序列的马立克氏病病毒的分离鉴定

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畜牧与兽医 2007年第8期39卷 22-26页

作者：周祥韦平滕丽琼广西大学养禽与禽病研究所广西南宁530005

应用鸭胚成纤维细胞(DEF)从曾免疫过CVI988/Rispens株疫苗的患马立克氏病(MD)肿瘤的三黄鸡中分离到一株马立克氏病病毒(MDV,命名为GXY2株。用禽肿瘤病聚合酶链式反应(PCR)鉴别诊断技术对患鸡的肿瘤组织病料及克隆纯化毒株的DEF培养物进... 详细信息

应用鸭胚成纤维细胞(DEF)从曾免疫过CVI988/Rispens株疫苗的患马立克氏病(MD)肿瘤的三黄鸡中分离到一株马立克氏病病毒(MDV,命名为GXY2株。用禽肿瘤病聚合酶链式反应(PCR)鉴别诊断技术对患鸡的肿瘤组织病料及克隆纯化毒株的DEF培养物进行检测,结果均扩增到MDV-1强毒株的132-bpr特异性带和网状内皮组织增殖病病毒(REV)的长末端重复序列(LTR)。用基于抗MDV-1的gB蛋白单克隆抗体BA4、MEQ蛋白单克隆抗体3G12E6和抗REV的单克隆抗体11B118分别对毒株的培养物进行间接免疫荧光试验(IFA),结果样品只与抗MDV-1的单克隆抗体呈现阳性反应,而与抗REV的单克隆抗体呈现阴性反应。应用PCR技术扩增并测定了毒株的致瘤相关基因meq的核苷酸序列,并与其他MDV-1参考毒株的序列进行比较分析,结果发现其序列与我们之前分离鉴定的MDV-1野强毒株G2和YL040920高度同源。研究的结果表明,分离株GXY2为整合有REVLTR片段的重组MDV强毒株。

关键词：马立克氏病病毒网状内皮组织增殖病病毒分离鉴定长末端重复序列/LTR 基因重组间接免疫荧光

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实验肉种鸡MDV和REV共感染动态病理学与抗原定位的研究

实验肉种鸡MDV和REV共感染动态病理学与抗原定位的研究

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作者：刁秀国山东农业大学

学位级别：硕士

为研究当前日益复杂的禽病毒性肿瘤病混合感染致病机理和病毒间的相互作用,提供鉴别诊断及早期诊断病理学依据,降低因禽肿瘤病引起的经济损失。本实验通过人工接种马立克氏病病毒(MDV)和网状内皮组织增殖病病毒(REV)强毒株,建立了肉种... 详细信息

为研究当前日益复杂的禽病毒性肿瘤病混合感染致病机理和病毒间的相互作用,提供鉴别诊断及早期诊断病理学依据,降低因禽肿瘤病引起的经济损失。本实验通过人工接种马立克氏病病毒(MDV)和网状内皮组织增殖病病毒(REV)强毒株,建立了肉种鸡肿瘤病毒混合感染的病理模型。通过血液学、免疫学、动态病理学和肿瘤组织超微病理学检测。深入研究了MDV与REV混合感染肉种鸡后疾病的发生、发展状况,比较各种诊断方法的特异性,并明确了最佳鉴别诊断和早期诊断时间。血液学检测显示,混合感染组外周血白细胞数高于单独感染组,明显高于空白对照组,其中淋巴细胞和粒细胞数增加最明显。感染组血清总蛋白(TP)随日龄呈逐渐下降趋势,其中混合感染组最低。混合感染组均在攻毒后1～2周和10～13周与空白对照组差异显著。提示早期和后期,混合感染组机体在病毒的作用下处于炎性反应和体液免疫抑制状态。通过免疫器官指数、细胞凋亡和抗原定位进行免疫学检测。体重和免疫器官指数结果显示,混合感染组体重最低,生长抑制明显,混合感染组脾脏指数最高、胸腺和法氏囊指数最低,表明免疫细胞被侵害后发生变性、坏死,造成急性炎症反应,导致体液免疫和细胞免疫受到抑制。通过原位末端标记进行部分组织细胞凋亡检测结果显示,混合感染组免疫器官淋巴细胞和非免疫器官增生淋巴细胞分别在感染后7周和10周出现凋亡,此现象在单独感染中出现时间稍迟后,表明混合感染可以促进这些细胞的凋亡。采用连续切片进行免疫组织化学抗原定位检测结果显示,两种抗原都在2周时开始检测到,4～7周达到高峰,RE抗原阳性稍强于MD,阳性信号主要出现在免疫器官内淋巴细胞和肝等增生的淋巴细胞内,表明了病毒最先侵噬免疫系统和消化系统,REV首先发挥致病作用,4～7周为最佳抗原定位检测时间。通过临床病理学、病理组织学进行动态病理学研究。发病情况结果显示,混合感染组、攻REV组和攻MDV组分别在2、3、4周开始死亡,总体死亡率分别为43.3%、36.6%和30%。大体病变结果显示,混合感染组2～4周肝、脾、肾稍肿大,并有肝周炎、心包炎等,混合感染组、攻REV组和攻MDV组分别在5、6、6周时肝、脾、肾、心脏呈不同程度的肿大,有大小不等肿瘤结节。病理组织学结果显示,混合感染组肝、胰腺、腺胃、盲肠扁桃体、心肌感染后1周出现以小淋巴细胞为主的炎症,除脑、脊髓以外,所有组织器官在2周时开始出现以幼稚淋巴细胞、大中小淋巴细胞为主的增生灶,有的增生灶中有原始网状细胞和马立克氏病细胞,以4～10周最为明显,混合感染比单独感染发病早1～2周、病变更明显。提示混合感染可加重初期的炎症反应和其它疾病继发感染,加大病死率,加快了病毒致瘤进程。免疫组化抗原弱阳性和病理学变化不明显组织,PCR扩增结果也为阳性,说明了PCR的敏感性,可作为两种病毒感染检测的准确方法。肿瘤组织超微病理学检测结果显示,肝脏肿瘤组织有大小不同的淋巴细胞,并见淋巴细胞的凋亡、核分裂相和坏死。在同一细胞胞浆内有马立克氏病和网状内皮组织增殖病两种病毒粒子。表明了混合感染中淋巴细胞是组成肿瘤的主要细胞成分,两种病毒粒子可以突破相互干扰作用共同促进肿瘤形成。本实验发现MDV与REV混合感染的血液学、免疫学、动态病理学和肿瘤组织超微病理学的结果在反映疾病发生、发展进程上具有一致性。病毒首先侵害免疫系统和消化系统,造成炎症、免疫抑制和肿瘤细胞增生,REV首先发挥作用,随后出现两种病毒明显的协同致病作用。2周时抗原定位检测是免疫学早期诊断和鉴别诊断的准确方法,2周时马立克氏病细胞、原始网状细胞、多形态和幼稚淋巴细胞是早期病理学诊断依据。两种病毒粒子是混合感染的最好证据,PCR为混合感染提供更为便捷的诊断方法。

关键词：肉种鸡马立克氏病病毒网状内皮组织增殖病病毒共感染动态病理学抗原定位

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广东REV血清学调查及SNV株感染性克隆构建

广东REV血清学调查及SNV株感染性克隆构建

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作者：史伟伟华南农业大学

学位级别：硕士

为了解广东地区禽网状内皮组织增殖病的流行状况,2008～2011年本研究采用ELISA方法对11个鸡场共1280份血清样品进行调查。结果显示鸡场REV阳性率100%(11/11),个体阳性率为23.05%(295/1280)。各日龄的鸡均检测出了REV抗体,抗体阳性率为8.... 详细信息

为了解广东地区禽网状内皮组织增殖病的流行状况,2008～2011年本研究采用ELISA方法对11个鸡场共1280份血清样品进行调查。结果显示鸡场REV阳性率100%(11/11),个体阳性率为23.05%(295/1280)。各日龄的鸡均检测出了REV抗体,抗体阳性率为8.97%～40.91%,其中检测出REV抗体的最小日龄为1日龄;从14周龄开始,鸡群REV抗体阳性率随着日龄的增加而增高,而在56周龄时阳性率则有所下降。通过对其中的8个鸡场不同性别的鸡进行REV抗体检测,发现不同性别的鸡REV抗体可呈显著的差异;对同一鸡场不同日龄不同鸡舍的鸡群REV抗体进行检测,发现该场不同鸡舍的REV抗体阳性率可呈显著差异,在4.26%～93.33%之间。\n 本研究利用细胞培养、聚合酶链式反应(PCR)以及特异性免疫荧光试验(IFA)从送检的疑似禽网状内皮组织增殖病感染的临床样品中分离鉴定出1株禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)。通过分段扩增的方法,完成了该分离株的前病毒基因组核苷酸序列测定,GD09株的前病毒全基因组长度为8295bp。通过对GD09株前病毒全基因组序列分析,结果表明GD09株的前病毒基因组大体结构为5\'-LTR-gag-pol-env-LTR-3\',符合典型的复制完全型反转录病毒的特点,其核苷酸序列没有原癌基因的插入;将该分离株的群特异性gp90基因序列与国内外各参考株进行相似性和遗传进化分析,结果表明GD09株与参考株REV-T相应的gp90序列相似性最高,为99.9%;与我国分离株HA9901和美国参考株REV-T亲缘关系最近。\n 本实验利用REV SNV株前病毒全基因组cDNA,经PCR扩增获得覆盖该毒株前病毒全基因组的四个片段,成功地构建了SNV株的重组质粒pSNV。然后将重组质粒转染DF-1细胞并连续盲传,用RT-PCR方法可以在转染后盲传的细胞中检查到REV-LTR片段,但利用针对REV特异性单抗的IFA方法进行检测时,发现在前三代细胞中检测到绿色荧光。

关键词：禽网状内皮组织增殖病网状内皮组织增殖病病毒 REV抗体检测血清学诊断分离鉴定感染性克隆聚合酶链式反应

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广西马立克氏病病毒野毒株的分离与鉴定及其与其它病毒共感染的研究

广西马立克氏病病毒野毒株的分离与鉴定及其与其它病毒共感染的研...

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作者：周祥广西大学

学位级别：硕士

马立克氏病(Marek's disease，MD)是由鸡马立克氏病病毒(Marek's disease virus，MDV)引起的一种鸡的高度接触性恶性淋巴肿瘤性疾病，在内脏器官、皮肤等处诱发肿瘤。近年来，由于MD毒株毒力不断增强，疫苗免疫效果明显降低，... 详细信息

马立克氏病(Marek's disease，MD)是由鸡马立克氏病病毒(Marek's disease virus，MDV)引起的一种鸡的高度接触性恶性淋巴肿瘤性疾病，在内脏器官、皮肤等处诱发肿瘤。近年来，由于MD毒株毒力不断增强，疫苗免疫效果明显降低，即使在一些已用CVI988/Rispens株疫苗免疫的鸡群，在其生长后期仍有肿瘤的发生，给目前的养禽业带来巨大的损失。为了研究广西近年来MDV毒株的流行、分布、毒力变化及其分子衍化规律，本文采用细胞培养、间接荧光抗体试验和PCR扩增的方法，从曾免疫过CVI988/Rispens疫苗株的患MD肿瘤的三黄鸡的外周血淋巴细胞(PBLs)和羽囊液中分离到三株MDV野毒株(分别命名为GXY1、GXY2、GXYL1)。三株MDV野毒株的细胞培养中，GXYL1感染的细胞还能与抗网状内皮组织增殖病病毒(Reticuloendotheliosis virus，REV)的单抗11B118反应，也可以用PCR扩增出REV LTR的特异性片段，说明这株MDV感染的细胞中含有传染性的REV，此病例为MDV和REV共感染；GXY1感染的细胞不能与单抗11B118反应，说明样品中不含有游离的REV，但能扩增出REV的LTR和env基因片段，同时也能扩增出禽痘病毒(Fowl poxvirus，FPV)的核蛋白4b基因片段，将细胞培养物上清再接种到DEF单层，然后再用单抗11B118进行IFA，结果为阴性，说明分离的毒株中不含有游离的REV，而再进行LTR、env和4b基因片段的PCR扩增，结果均为阳性，说明样品中的LTR和env基因片段是来源于细胞培养物上清中游离的FPV，也就是说在野毒GXY1的细胞培养中含有整合了REV基因组片段的FPV野毒；GXY2感染的细胞不与单抗11B118反应，但是能扩增出REV的LTR片段，而作为阴性对照的正常细胞却不能扩增出REV的LTR片段，说明该株MDV的基因组中已整合了REV的LTR片段。 MDV-1 meq基因具有fos/jun群类转录激活因子的特征，被认为是一种转录激活因子，是MDV主要的致瘤基因。通过对三株广西分离的MDV野毒株的meq基因序列与参考株GA和RB1B株及之前我们先前研究的广西分离株的meq基因序列进行比较分析。结果表明，MDV毒株的meq基因序列相对比较保守，三株分离株的meq基因在第77、80、115、139、176、217位氨基酸分别存在一致的突变，且氨基酸第80、115、217位所有的广西分离株都因为同一个碱基的改变而分别突变为Y、A、A，与两个参考株及疫苗株不同，表现出一定的规律性。同时第139位氨基酸突变为A，国外发表的仅只有一株野毒株的meq基因序列在此位点存在突变，我们国内分离株基本上都发生了突变，这个位置的突变国外还未见报道，可能与MDV的毒力有关；而位于脯氨酸重复区的与毒力相关的第176位氨基酸突变为R，与国外发表的MDV的meq基因序列在此位置的变化(A/H)不同，是我们国内分离株所特有的。这些变化对于我们研究国内的MDV-1毒株很有意义。本研究结果表明，广西目前流行的MDV野毒株中，存在着其它病毒的共感染，不同科属病毒间存在遗传重组，并且存在整合进了REV基因组片段的天然重组MDV病毒；对MDV的致瘤基因meq基因的序列分析发现，中国内分离株中存在一个特有氨基酸的突变，国内外还未见报道。这些研究结果对于我们进一步了解和掌握MDV的毒力进化的机制以及病毒的生物学特性提供了有用的资料。

关键词：马立克氏病病毒网状内皮组织增殖病病毒间接免疫荧光长末端重复序列/LTR 共感染基因重组 meq基因突变

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