检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：王苏日古嘎南开大学

学位级别：硕士

肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Eschericbia coli，ETEC)是引起发展中国家婴幼儿腹泻以及热带或亚热带地区旅游者腹泻的主要病原菌。它通过释放肠毒素，引起人体肠液分泌紊乱，有时导致代谢性酸中毒、高血钾症和心力衰竭等并发症，... 详细信息

肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Eschericbia coli，ETEC)是引起发展中国家婴幼儿腹泻以及热带或亚热带地区旅游者腹泻的主要病原菌。它通过释放肠毒素，引起人体肠液分泌紊乱，有时导致代谢性酸中毒、高血钾症和心力衰竭等并发症，严重危害人们的健康。因此，建立一种快速、准确的。ETEC检测技术是当前肠道感染疾病的诊断、治疗和监控等工作迫在眉捷的需要。　　肠产毒性大肠杆菌的常见的血清群有O6、O8、O11、O15、O25、O27、O78、O85、O114、O115、O126、O128、O139、O148、O149、159、O166、O167、O173等19种;事实上，细菌需表达LT、STp、STh、STb等四种肠毒素的至少一种才可被鉴定为是ETEC。本文通过对以上19个不同O血清群大肠杆菌各自所特异的寡糖单位处理酶基因wzx及wzy(或wzt、wzm基因)、以及对ETEC所特有四种肠毒素编码基因elt、estA(h)、estA(p)、estB基因分别设计寡核苷酸探针，利用基因芯片检测技术对ETEC菌株进行O血清群分群和毒素鉴定。经过反复筛选验证得到的特异探针有48条，荧光定位探针1条，以细菌16S rRNA基因为靶序列设计的的正对照探针1条，以及由多聚T构成的负对照探针1条，共计51条。而在靶基因的扩增环节，本文采用的是全基因组随机引物PCR法，先后只用两条引物便可完成对细菌DNA进行全基因组范围的扩增，有效克服了在Multiplex PCR中不可避免的引物相互干扰问题，成功实现了对多个靶标DNA的同步有效的扩增。　　本研究基于全基因组范围随机引物PCR法和寡核苷酸芯片检测技术，建立了一种快速、准确、特异、灵敏的肠产毒性大肠杆菌检测方法，为今后的医学诊断、水和食品卫生监测、出入境检验检疫等工作提供了新的技术参考。

关键词：肠产毒性大肠杆菌婴幼儿腹泻血清群肠毒素随机引物PCR扩增基因芯片检测

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一起肠产毒性大肠杆菌O128:H45引起的院内新生儿腹泻暴发

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中国人兽共患病学报 2013年第3期29卷 304-308页

作者：王红赵爱兰白向宁张正东许烈英崔敏莉刘祥纪律叶长芸熊衍文李群四川省自贡市疾病预防控制中心自贡643000 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206

目的探讨一起院内新生儿腹泻暴发的病原及其特征。方法常规方法对可疑腹泻暴发住院新生儿患者粪便、医护人员肛拭子、婴儿奶粉和医院环境标本进行病原分离和鉴定,将分离到的病原菌进行毒力基因检测、药敏试验及PFGE和MLST分子分型分析... 详细信息

目的探讨一起院内新生儿腹泻暴发的病原及其特征。方法常规方法对可疑腹泻暴发住院新生儿患者粪便、医护人员肛拭子、婴儿奶粉和医院环境标本进行病原分离和鉴定,将分离到的病原菌进行毒力基因检测、药敏试验及PFGE和MLST分子分型分析。结果从12名住院新生儿腹泻患者黄色水样便和1份新生儿ICU病房配奶间的环境标本中分离出13株大肠杆菌O128∶H45和1株大肠杆菌O55,13株大肠杆菌O128∶H45耐热肠毒素基因st均为阳性、具有高度相似性的PFGE带型、MLST的型别均为ST2332型且具有相似的耐药谱。结论首次报道了由肠产毒性大肠杆菌O128∶H45引起的一起院内新生儿腹泻暴发。

关键词：肠产毒性大肠杆菌大肠杆菌O128∶H45 毒力基因 PFGE MLST

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中国肠产毒性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛的检测

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中国人兽共患病杂志 2003年第1期19卷 78-81页

作者：张冬梅俞守义唐根富安徽医科大学卫生管理学院社会医学与临床流行病学教研室合肥230032 第一军医大学流行病学教研室

目的　了解耶尔森菌强毒力岛在中国肠产毒性大肠杆菌中的分布及插入位点。方法　使用PCR扩增、DNA打点杂交和DNA测序及分析方法。结果　在 94株分离自中国的肠产毒性大肠杆菌中 ,14株耶尔森菌强毒力岛核心区的 8个基因PCR扩增阳性 ,除 ... 详细信息

目的　了解耶尔森菌强毒力岛在中国肠产毒性大肠杆菌中的分布及插入位点。方法　使用PCR扩增、DNA打点杂交和DNA测序及分析方法。结果　在 94株分离自中国的肠产毒性大肠杆菌中 ,14株耶尔森菌强毒力岛核心区的 8个基因PCR扩增阳性 ,除 3株菌的整合酶基因外 ,PCR扩增产物长度均与预期一致 ,但天冬酰胺转运RNA(asnTtRNA)位点扩增阴性 ;上述 14株菌进行全菌DNA打点杂交试验 ,均与irp2和 fyuA探针杂交 ;选择上述 3株菌中的 1株 ,对其整合酶基因的PCR产物测序 ,并与鼠疫耶尔森菌强毒力岛的整合酶基因序列比较 ,发现该整合酶基因于 5’端缺失了 347bp的片段。结论　 14 %肠产毒性大肠杆菌携带的耶尔森菌强毒力岛 ,且均插入在天冬酰胺转运RNA位点处 ;部分菌株所携带的耶尔森菌强毒力岛的整合酶基因发生了缺失。

关键词：耶尔森菌强毒力岛肠产毒性大肠杆菌 asnT tRNA基因 int/intB基因

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猪源肠产毒性大肠杆菌及其噬菌体的分离和生物学特性研究

猪源肠产毒性大肠杆菌及其噬菌体的分离和生物学特性研究

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作者：付丽娜大连理工大学

学位级别：硕士

肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一类引起人和初生动物患病的重要病原菌。人或动物被ETEC感染后,常因严重腹泻和脱水而死亡,发病率和死亡率都很高,给养殖业和食品安全领域带来严重的经济损失。本实验从150... 详细信息

肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一类引起人和初生动物患病的重要病原菌。人或动物被ETEC感染后,常因严重腹泻和脱水而死亡,发病率和死亡率都很高,给养殖业和食品安全领域带来严重的经济损失。本实验从150份市售猪肉样品和养殖场猪粪中分离ETEC,通过生理生化指标和分子生物学手段鉴定该菌株,利用特异性引物分离ETEC单菌落并进行纯化,以分离得到的单菌落为宿主菌,筛选裂解性噬菌体,然后考察噬菌体的生物学特性,为噬菌体的应用奠定基础。将猪肉样品用均浆机打碎并稀释,猪粪样品预处理后在脑心浸出液肉汤中增菌,然后涂布于选择性培养基麦康凯中培养,观察菌落形态。分离纯化后的优势菌菌落颜色为桃红色,菌落形态呈表面隆起、边缘整齐、光滑、圆润等特征。然后,提取混合菌液的总DNA,用设计合成的5种引物和探针,进行MRT-PCR反应,对于阳性样品保留作下一步的实验;将PCR扩增获得的16S rDNA片段(1436bp)进行系统发育树分析表明与大肠杆菌属有99%的同源性,可以判定为大肠杆菌属。对阳性混合菌液中的疑似ETEC进行生理生化鉴定,分离的致病菌具有运动性,能够分解代谢鸟氨酸、赖氨酸、色氨酸、尿素、苯丙氨酸、甘露醇、肌醇、蜜二糖、棉子糖,不能分解代谢山梨醇、核糖醇。利用LT基因、ST基因的引物进行特异性PCR反应,从阳性混合菌样品中分离ETEC单菌落并纯化,对分离得到的ETEC进行耐药性分析以及外膜囊泡的分离鉴定,进一步验证其特征。结果表明,150个猪源样品中共分离得到7株ETEC,其中3株只携带LT基因,2株只携带ST基因,2株既携带LT基因又携带ST基因,可以初步判定其中2株既携带LT基因又携带ST基因的ETEC的致病性比其他菌株强。对分离得到的ETEC进行耐药性分析,选择10种常用的抗生素,检测ETEC菌株的耐药性,结果表明,ETEC对环丙沙星、复方新诺明、阿莫西林极度敏感,对链霉素、四环素高度敏感,对氯霉素、多西环素中度敏感,对多粘菌素B和庆大霉素产生抗性。采用超滤离心法分离ETEC产生的外膜囊泡,并用透射电镜进行观察。结果显示,ETEC的外膜囊泡约为100 nm,呈圆形或椭圆形。利用两株既携带LT基因又携带ST基因的ETEC-1和ETEC-2作为宿主菌,采集养殖场和医院的废水,经离心、过滤等处理得到ETEC-1的噬菌体原液;将噬菌体原液接种到对数生长期菌液中培养,过滤除菌,得到高效价噬菌体增殖液。通过双层平板法分离纯化得到两株噬菌体,命名为PES-1和PES-2。透射电镜观察结果显示,分离的两株噬菌体(PES-1和PES-2)属于长尾科噬菌体(Siphoviridae)。通过体外抑菌实验、一步生长曲线、pH、温度稳定性、氯仿敏感性实验,以及噬菌体颗粒浓缩来确定噬菌体的生物学特性。提取噬菌体基因组DNA,进行酶切反应,参与酶切的限制性内切酶:Xho I、EcoR I、Bam H I、HindIII。酶切实验表明,PES-1的基因组为线性DNA,PES-2的基因组DNA为环形。PES-1的裂解能力优于PES-2,PES-1和PES-2共同作用时,可以显著抑制病原菌的生长。将SDS和胆盐按照不同的浓度梯度加入噬菌体与宿主菌中,测定其菌液的OD600的值,与只加噬菌体和只加抗生素的空白对照组作对比,结果表明,SDS和胆盐都使噬菌体的裂解能力有不同程度的下降;如果将噬菌体口服灌胃施用,胆盐作为哺乳动物肠道内分泌物,噬菌体必会受到胆盐的影响,因此,噬菌体口服施用时应包被。噬菌体—抗生素联合应用是控制耐药菌感染、控制菌株抗性进化的有效方法。将不同浓度的阿莫西林,链霉素和庆大霉素与噬菌体共同作用于ETEC,测定菌液OD600的值,结果表明,噬菌体与阿莫西林,链霉素,庆大霉素联合使用的抑菌效果呈协同效应。

关键词：肠产毒性大肠杆菌噬菌体食品安全

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一起由肠产毒性大肠杆菌所致两批就餐者食物中毒的调查

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实用预防医学 2007年第1期14卷 135-136页

作者：陈湘袁小菊陈建安周启发苏向军湖南省怀化市卫生监督所湖南怀化418000

怀化市某酒店发生一起先后两批就餐人员共同食物中毒的事故,通过对分析两批就餐中毒人员的罹患率、潜伏期、临床表现和病原学调查分析,结果显示两批就餐中毒人员除罹患率呈现高度显著性差异之外,其潜伏期(χ2=4.36,P>0.05)、临床症状... 详细信息

怀化市某酒店发生一起先后两批就餐人员共同食物中毒的事故,通过对分析两批就餐中毒人员的罹患率、潜伏期、临床表现和病原学调查分析,结果显示两批就餐中毒人员除罹患率呈现高度显著性差异之外,其潜伏期(χ2=4.36,P>0.05)、临床症状(χ2=0.76,P>0.05)均无明显区别。在剩余食物红扒肘子和患者大便中同时检出肠产毒性大肠杆菌O153血清型。确认两批就餐者均为肠产毒性大肠杆菌所致食物中毒。

关键词：肠产毒性大肠杆菌食物中毒调查

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94株肠产毒性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛的检测

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疾病控制杂志 2002年第2期6卷 130-132页

作者：张冬梅洪倩俞守义安徽医科大学卫生管理学院社会医学与临床流行病学教研室安徽合肥230032 第一军医大学流行病学教研室广东广州510515

目的　检测 94株肠产毒性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛。方法　对分离自中国腹泻病人的肠产毒性大肠杆菌 ,采用 PCR和 DNA打点杂交的方法 ,检测耶尔森菌强毒力岛核心区的 irp8、irp 2、irp 3、irp 4、irp 5及 fyu A基因。结果　分离的肠... 详细信息

目的　检测 94株肠产毒性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛。方法　对分离自中国腹泻病人的肠产毒性大肠杆菌 ,采用 PCR和 DNA打点杂交的方法 ,检测耶尔森菌强毒力岛核心区的 irp8、irp 2、irp 3、irp 4、irp 5及 fyu A基因。结果　分离的肠产毒性大肠杆菌 ,14 % (13/94 )的菌株 irp8、irp 2、irp 3、irp 4、irp 5及 fyu A基因扩增阳性 ,以 irp 2及 fyu A为探针进行 DNA打点杂交 ,上述菌株均为阳性。结论　 14

关键词：肠产毒性大肠杆菌耶尔森菌毒力岛大肠杆菌聚合酶链反应

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SPA协同凝集试验检测肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素的研究

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同济医科大学学报 1986年第2期 98-100页

作者：朱桂宝刘竹菁叶志雄同济医科大学卫生系流行病学教研室

本文报道应用葡萄球菌A蛋白（SPA）协同凝集试验检测55株产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素,结果与Y-1细胞培养法基本一致。此外,以血平板上培养菌用多粘菌素及三硝基甲苯溶解制备不耐热肠毒素,用协同凝集试验进行检测,结果较其它测毒方法敏... 详细信息

本文报道应用葡萄球菌A蛋白（SPA）协同凝集试验检测55株产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素,结果与Y-1细胞培养法基本一致。此外,以血平板上培养菌用多粘菌素及三硝基甲苯溶解制备不耐热肠毒素,用协同凝集试验进行检测,结果较其它测毒方法敏感、特异、简单、经济、是一种检测不耐热肠毒素（LT）可行的方法,特别适用于基层的实验室。

关键词：协同凝集试验不耐热肠毒素肠产毒性大肠杆菌

来源：评论

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一起肠产毒性大肠杆菌腹泻爆发的流行病学调查

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热带病与寄生虫学 2007年第3期5卷 131-133+128+194页

作者：牟瑾马汉武扈庆华王冰孔东峰曹彬余淑苑张顺祥彭朝琼石晓路深圳市疾病预防控制中心

目的对深圳市近期发生的一起不明原因群体性腹泻进行现场流行病学调查和实验室检测,探讨该次群体性腹泻的原因,提出应对类似爆发流行的防制策略。方法描述性流行病学分析爆发过程的三间分布,对采集的18份肛拭子以细菌学培养、分子生物... 详细信息

目的对深圳市近期发生的一起不明原因群体性腹泻进行现场流行病学调查和实验室检测,探讨该次群体性腹泻的原因,提出应对类似爆发流行的防制策略。方法描述性流行病学分析爆发过程的三间分布,对采集的18份肛拭子以细菌学培养、分子生物学分析和脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)分析等方法进行实验室检测。结果18份肛拭子中检出4株肠产毒性大肠杆菌,证实为同一血清型O78:K80,菌株同源性达到96.3%。结论本次在居民小区发生的爆发的群体性腹泻致病菌为产毒性大肠杆菌(ETEC),小区二次供水系统的渗露和连续的暴雨可能是污染的来源,居民个人卫生习惯不良是导致爆发的重要因素。建议对二次供水系统开展季节性检修,并对居民实施有针对性的健康教育,将有利于预防此类疫情的发生。

关键词：肠产毒性大肠杆菌腹泻爆发凝胶脉冲场电泳分型

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用DNA-DNA杂交技术直接检测粪便中肠产毒性大肠杆菌的研究

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国外医学(微生物学分册) 1994年第3期 138-138页

作者：李群

由肠产毒性大肠杆菌(ETEC)引起的疾病,临床症状各不相同,从严重的霍乱样,到表现为更典型的几乎不伴有明显脱水的轻度腹泻。由于高发病率,ETEC引起的腹泻在发展中国家儿重的发病率和死亡率中均占重要地位。此外,ETEC很可能是由工业国至... 详细信息

由肠产毒性大肠杆菌(ETEC)引起的疾病,临床症状各不相同,从严重的霍乱样,到表现为更典型的几乎不伴有明显脱水的轻度腹泻。由于高发病率,ETEC引起的腹泻在发展中国家儿重的发病率和死亡率中均占重要地位。此外,ETEC很可能是由工业国至第三世界的旅游者腹泻的主要病因。 ETEC的诊断有赖于对粪便中分离大肠杆菌产生的耐热和不耐热肠毒[STa Ⅰ、STa Ⅱ和(或)LT]进行生物学或免疫学检测,或通过核酸杂交技术以鉴定肠毒素基因。早先曾用单克隆抗体做酶联免疫吸附试验直

关键词：肠产毒性大肠杆菌 ETEC DNA-DNA 敏感度

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双歧杆菌纯化黏附素对ETEC和EPEC黏附肠上皮细胞的竞争抑制作用

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解放军医学杂志 2004年第3期29卷 243-245页

作者：钟世顺张振书赖卓胜王群英杨玉捷王继德第一军医大学南方医院广州510515

目的　观察双歧杆菌分泌型黏附素对产毒性大肠杆菌 (ETEC)和致病性大肠杆菌 (ETEC)黏附肠上皮Lovo细胞的竞争抑制作用。方法　采用黏附试验计数肠上皮Lovo细胞黏附的细菌数并比较其结果。结果　除黏附素浓度为 1μg/ml和 5 μg/ml时不... 详细信息

目的　观察双歧杆菌分泌型黏附素对产毒性大肠杆菌 (ETEC)和致病性大肠杆菌 (ETEC)黏附肠上皮Lovo细胞的竞争抑制作用。方法　采用黏附试验计数肠上皮Lovo细胞黏附的细菌数并比较其结果。结果　除黏附素浓度为 1μg/ml和 5 μg/ml时不能明显抑制ETEC和EPEC对Lovo细胞的黏附外 ,10 μg/ml、2 0 μg/ml、30 μg/ml浓度组均能明显抑制ETEC和EPEC对Lovo细胞的黏附 ,且随浓度的逐渐增加 ,这种抑制作用也逐渐增强。

关键词：二裂菌属黏附素肠产毒性大肠杆菌肠致病性大肠杆菌细菌黏附肠上皮细胞

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