检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验方剂学杂志 2019年第11期25卷 73-79页

作者：王鹤张广平侯红平高云航高双荣马梦张海静张钟秀陈腾飞苏萍宋玲杨依霏李江叶祖光贵阳中医学院贵阳550002 中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:比较博来霉素(BLM)气管灌注、尾静脉注射及雾化吸入致大鼠肺纤维化模型的优劣,以便筛选出最佳的给药途径。方法:选择SPF级雄性SD大鼠80只,采用体重随机分组法将其分为正常组,单次气管灌注组(10 mg·kg^(-1)),多次气管灌注组(5 ... 详细信息

目的:比较博来霉素(BLM)气管灌注、尾静脉注射及雾化吸入致大鼠肺纤维化模型的优劣,以便筛选出最佳的给药途径。方法:选择SPF级雄性SD大鼠80只,采用体重随机分组法将其分为正常组,单次气管灌注组(10 mg·kg^(-1)),多次气管灌注组(5 mg·kg^(-1)),单次静脉注射组(150 mg·kg^(-1)),多次静脉注射组(50 mg·kg^(-1)),单次雾化吸入模型组(30 min),多次雾化吸入模型组(30 min)。观察给药后7,14,28 d各组大鼠死亡情况及体质量变化。给药后28 d,观察各组大鼠肺系数,取大鼠肺组织制备石蜡切片并进行苏木素-伊红(HE)及马松(Masson)染色,并通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)含量,评价各组大鼠肺泡炎及肺纤维化程度。结果:与正常组比较,气管灌注组的大鼠死亡率在所有药物处理组中最高。大鼠肺系数的测定结果显示,与正常组比较,多次静脉注射组和多次雾化吸入组大鼠的肺系数显著升高(P<0.05,P<0.01)。雾化造模组较高于其他模型组,多次雾化模型组高于单次雾化模型组。大鼠HE及Masson染色结果提示,气管灌注组、静脉注射组和多次雾化吸入组大鼠肺组织中肺间隔增厚和肺间质纤维化程度较高,其中多次雾化模型组较其他组肺纤维化程度最为明显。ELISA结果发现,与正常组比较,雾化吸入组和气管灌注组大鼠肺组织中HYP和PAI-1含量显著升高(P<0.05)。多次雾化吸入组与单次雾化吸入组显著高于其他造模组。结论:多次雾化吸入博来霉素制备肺纤维化模型,造模大鼠的病理损伤和生理指标相对稳定,符合肺纤维化的演变过程,是一种有效的肺纤维化模型制备手段。

关键词：博来霉素肺纤维化模型雾化吸入羟脯氨酸纤溶酶原激活物抑制剂-1

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缬沙坦对肺纤维化模型的干预作用及其对肝细胞生长因子表达的影响

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中华结核和呼吸杂志 2005年第7期28卷 479-483页

作者：刘芳徐启勇叶燕青武汉大学中南医院呼吸科 430071

目的研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对肺纤维化模型的干预作用及其可能的机制。方法60只Wistar大鼠采用随机数字表法随机分成3组,每组20只:(1)缬沙坦组,经气管插管灌注博莱霉素(BLM)诱导肺纤维化,随后每日用缬沙坦16mg/kg灌胃进行干... 详细信息

目的研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对肺纤维化模型的干预作用及其可能的机制。方法60只Wistar大鼠采用随机数字表法随机分成3组,每组20只:(1)缬沙坦组,经气管插管灌注博莱霉素(BLM)诱导肺纤维化,随后每日用缬沙坦16mg/kg灌胃进行干预;(2)模型组,气管内灌注用BLM,灌胃用生理盐水;(3)对照组,气管内灌注和灌胃均用生理盐水。各组动物于气管内灌注后第7、14、28、42天分别处死5只。取肺组织经苏木精-伊红、Masson胶原染色及测定羟脯氨酸浓度来评价治疗效果。用免疫组化及原位杂交方法分别检测转化生长因子β(TGF-β)蛋白和肝细胞生长因子(HGF)mRNA在肺内的表达。用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HGF蛋白在大鼠肺组织的含量。结果缬沙坦组肺泡炎程度在第14、28、42天分别为(0·88±0·12)、(0·79±0·21)、(0·75±0·17)分,低于同期模型组的(2·05±0·25)、(1·38±0·12)、(1·19±0·11)分,差异均有统计学意义(P均<0·01);缬沙坦组肺纤维化程度在第7、28、42天分别为(0·28±0·03)、(1·74±0·18)、(1·91±0·09)分,也低于同期模型组的(0·45±0·10)、(2·08±0·32)、(2·77±0·15)分,差异均有统计学意义(P均<0·05);缬沙坦组肺组织羟脯氨酸含量在第14、42天分别为(1·08±0·13)、(1·39±0·20)μg/mg·pro,低于同期模型组的(1·45±0·19)、(2·19±0·37)μg/mg·pro,差异均有统计学意义(P均<0·01);缬沙坦组肺组织中TGF-β蛋白表达在早、晚期分别为2·27±0·30、2·05±0·18,均低于同期模型组的3·99±0·43、2·71±0·46,差异均有统计学意义(P均<0·05)。缬沙坦组HGFmRNA表达在早、晚期分别为1·61±0·20、0·52±0·19,均高于同期模型组的1·98±0·23、0·28±0·14,差异均有统计学意义(P均<0·05);缬沙坦组蛋白含量在早、晚期分别为(203±18)、(129±20)pg/ml,均高于同期模型组的(260±21)、(100±20)pg/ml,差异均有统计学意义(P均<0·05)。结论缬沙坦能减轻BLM诱导的大鼠肺纤维化,有可能通过抑制TGF-β和促进HGFmRNA的表达而实现。

关键词：肝细胞生长因子肺纤维化模型缬沙坦干预作用酶联免疫吸附测定(ELISA) 血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂转化生长因子β(TGF Wistar大鼠 TGF-β Masson 原位杂交方法 mRNA表达生理盐水统计学大鼠肺组织纤维化程度气管内

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结缔组织生长因子在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化模型中的表达及意义

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中华结核和呼吸杂志 2004年第6期27卷 407-409页

作者：叶旭军徐启勇叶燕青王耀勇龙翔武汉大学中南医院呼吸内科 430071

结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是肺纤维化(PF)发病过程中细胞因子网络中的关键因子之一.本研究拟观察CTGF及其相关因子在博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化肺组织中的表达状况,探讨它们在肺纤维化形成中的作用.

关键词：结缔组织生长因子博莱霉素诱导大鼠肺纤维化模型表达

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钌红染色在大鼠肺纤维化模型中的应用

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解剖学杂志 2010年第6期33卷 843-844页

作者：杨美娟段斐牛建昭李银生北京中医药大学组织学与胚胎学教研室北京100029 河北职工医学院保定071000 新乡医学院组织学与胚胎学教研室新乡453003

钌红能与细胞表面及活性层下项的黏多糖成分反应，还原四氧化锇成锇黑，形成电子致密沉淀物，在电镜下以高电子致密物形式存在。本实验采用博莱霉素诱导大鼠肺问质纤维化模型，钌红染色，观察肺纤维化表面活性物质及胶原纤维超微结构的... 详细信息

钌红能与细胞表面及活性层下项的黏多糖成分反应，还原四氧化锇成锇黑，形成电子致密沉淀物，在电镜下以高电子致密物形式存在。本实验采用博莱霉素诱导大鼠肺问质纤维化模型，钌红染色，观察肺纤维化表面活性物质及胶原纤维超微结构的变化。

关键词：肺纤维化模型钌红染色表面活性物质电子致密物应用大鼠多糖成分细胞表面

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不同剂量博莱霉素诱导 KM 小鼠肺纤维化模型的比较

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广东医学 2016年第S1期37卷 15-18页

作者：徐昌君万安霞朱星欧江琴陈云志林昶黄高耿晓照邓颖刘杨杨长福贵阳中医学院基础医学院生化教研室贵阳550002

目的：研究不同剂量博莱霉素（ BLM）诱导KM小鼠肺纤维化模型的病理变化，系统性分析KM小鼠肺组织不同时间点炎症反应、死亡率、转化生长因子－β1（ TGF－β1）和诱导型一氧化氮合酶（ iNOS）表达水平与肺纤维化的关系。方法 KM小鼠随... 详细信息

目的：研究不同剂量博莱霉素（ BLM）诱导KM小鼠肺纤维化模型的病理变化，系统性分析KM小鼠肺组织不同时间点炎症反应、死亡率、转化生长因子－β1（ TGF－β1）和诱导型一氧化氮合酶（ iNOS）表达水平与肺纤维化的关系。方法 KM小鼠随机分为假手术组和模型低（2.5 mg／kg）、中（5 mg／kg）、高剂量（10 mg／kg）组。模型组小鼠气管内一次性滴注BLM，假手术组予等量生理盐水，分别于第7、14、28天取材，做肺组织HE、Masson染色，免疫组化法测TGF－β1，硝酸酶还原法测iNOs。结果各组均在手术过程中出现死亡，小鼠死亡高峰出现在8～14 d，总死亡率高剂量组明显高于中、低剂量组。 HE和Masson染色结果显示，模型低、中、高剂量组均导致了肺组织炎症反应，14 d炎症反应最强烈，中、高剂量比低剂量更明显，且两组在14 d开始出现肺纤维组织增生，高剂量比中剂量明显，28 d均出现典型肺纤维化，而低剂量组始终未见明显纤维化。模型组TGF－β1和iNOS均高表达，且中、高剂量组明显高于低剂量组。结论2.5 mg／kg BLM不能有效诱导KM小鼠肺纤维化，5 mg／kg和10 mg／kg均可诱导肺纤维化，但是10 mg／kg造模小鼠死亡率高，适合于短期造模，若需要典型的肺纤维化模型以5 mg／kg 28 d天取材较好；TGF－β1和iNOS水平与肺纤维程度有关。

关键词：博来霉素肺纤维化模型死亡率转化生长因子-β1 诱导型一氧化氮合酶

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来氟米特对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响/利用蛋白质组学技术研究Z24对大鼠给药肝脏蛋白质表达的改变/氯化钆保护细菌脂多糖引发肝脏损伤及其可能机制

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毒理学杂志 2007年第4期21卷 336-337页

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氨基胍对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞影响的研究

氨基胍对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞影响的研究

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作者：孙玉敏河北医科大学

学位级别：硕士

本实验目的是观察AG对TGF-β1诱导体外肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF、α-SMA的影响，为AG治疗肺纤维化机制的研究提供实验资料。研究方法： 1.动物处理：选用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，一次性气管内滴注BLMA5(5mg/... 详细信息

本实验目的是观察AG对TGF-β1诱导体外肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF、α-SMA的影响，为AG治疗肺纤维化机制的研究提供实验资料。研究方法： 1.动物处理：选用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，一次性气管内滴注BLMA5(5mg/kg)复制大鼠肺纤维化模型，于给药后第14天处死动物。 2.细胞培养：采用组织块法培养大鼠肺成纤维细胞，培养条件：RPMI1640培养液(含10％小牛血清)10ml、5％CO2、37℃，第4代细胞用于实验。 ***法选择TGF-β1和AG的适宜浓度：将细胞悬液(细胞浓度为2×105个/ml)滴注于96孔板中，培养24小时后，分别加入不同浓度的TGF-β1(1、10、20ng/ml)和AG(20、100、500μM)，刺激24小时后测定细胞MTT活力，根据以上结果及参考文献选择TGF-β1和AG的适宜浓度。 4.细胞分组：成纤维细胞分为4个组：①Sham组、②TGF-β1组(浓度10ng/ml)、③AG+TGF-β1组(AG浓度500μM、TGF-β1浓度10ng/ml)、④AG组(浓度500μM)。 5.细胞免疫化学染色：将细胞悬液滴种于24孔板中，细胞浓度为2×105个/ml，每孔加液1ml，进行细胞爬片。加入各组药物24小时后，用免疫细胞化学染色技术检测CTGF、α-SMA阳性细胞。 6.流式细胞仪检测肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达α-SMA。 7.统计学处理：实验数据用均数±标准差((-x)±SD)表示，采用SPSS-11.5统计软件包，多个样本均数比较用单因素方差分析(One-WayANOVA)，多个样本均数间的两两比较用最小显著差法(leastsignificantdifference，LSD)；以P＜0.05作为判断差异显著性的标准。研究结果： ***法选择药物浓度。TGF-β1(1、10、20ng/ml)及AG(20μM、100μM、500μM)各药物浓度组与不加药组相比，其差异均无统计学意义(P＞0.05)，说明所选药物浓度对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞无药物毒性。 2.肺成纤维细胞CTGF免疫细胞化学染色结果。TGF-β1诱导成纤维细胞表达CTGF的阳性细胞百分率(62.6±2.4％)、平均光密度值(平均OD值)(0.37±0.02)与Sham组(20.1±3.8％、0.29±0.02)比较，显著性增加(P＜0.01)。AG+TGF-β1组与TGF-β1组相比，CTGF阳性细胞百分率(57.4±3.8％)、平均OD值(0.35±0.02)均显著性降低(P＜0.05)；而与Sham组相比，仍然较高(P＜0.01)。AG组CTGF阳性细胞百分率(21.3±3.2％)、平均OD值(0.30±0.02)与Sham组相比，均无显著性差异(P＞0.05)。 3.肺成纤维细胞α-SMA免疫细胞化学染色结果。TGF-β1诱导成纤维细胞表达α-SMA的阳性细胞百分率(63.1±3.6％)、平均OD值(0.38±0.02)与Sham组(21.3±4.3％、0.30±0.01)比较，显著性增加(P＜0.01)。AG+TGF-β1组与TGF-β1组相比，α-SMA阳性细胞百分率(58.3±4.5％)、平均OD值(0.35±0.01)均显著性降低(P＜0.05)；而与Sham组相比，仍然较高(P＜0.01)。AG组α-SMA阳性细胞百分率(22.7±4.5％)、平均OD值(0.30±0.01)与Sham组相比，均无统计学意义(P＞0.05)。以上免疫细胞化学结果综合分析：AG单独作用不影响成纤维细胞表达CTGF、α-SMA，但是AG能够减弱TGF-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF、α-SMA的作用。 4.流式细胞仪检测肺成纤维细胞表达α-SMA(以均道值表示)。Sham组均道值为516±5.6，TGF-β1组均道值(580±13.0)明显高于Sham组(P＜0.01)。AG+TGF-β1组均道值(544±10.6)与Sham组相比，呈显著性增加(P＜0.05)；与TGF-β1组相比，呈显著性降低(P＜0.05)。AG组(526±19.3)与Sham组相比，无显著性差异(P＞0.05)。研究结论： ***-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF；促进肺成纤维细胞向MF的分化。 2

关键词：肺纤维化模型氨基胍转化生长因子肺成纤维细胞

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肺纤维化模型制作方法

肺纤维化模型制作方法

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中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班

作者：胡娱新马忠森吉林大学第二医院呼吸内科吉林大学第二医院呼吸内科

通过对各种模型制作的优缺点进行比较,探讨及比较几种常见的肺纤维化模型的制作方法,选择更加贴近肺纤维化发病机制的模型制作方法。结果表明,进行科学研究应根据具体情况选择合适的模型制作方法,对于不同的疾病发展过程应选择对应的模... 详细信息

通过对各种模型制作的优缺点进行比较,探讨及比较几种常见的肺纤维化模型的制作方法,选择更加贴近肺纤维化发病机制的模型制作方法。结果表明,进行科学研究应根据具体情况选择合适的模型制作方法,对于不同的疾病发展过程应选择对应的模型制作方法。

关键词：肺纤维化模型制作方法

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PDTC对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞影响的研究

PDTC对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞影响的研究

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作者：张丽萍河北医科大学

学位级别：硕士

本文通过观察NF-κB抑制剂-二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrodlidinedithiocarbamate，PDTC)对TGF-β1诱导的肺成纤维细胞表达CTGF、α-SMA的影响，探讨NF-κB在TGF-β1诱导肺成纤维细胞表达CTGF及肺成纤维细胞向MF分化中的作用。研究... 详细信息

本文通过观察NF-κB抑制剂-二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrodlidinedithiocarbamate，PDTC)对TGF-β1诱导的肺成纤维细胞表达CTGF、α-SMA的影响，探讨NF-κB在TGF-β1诱导肺成纤维细胞表达CTGF及肺成纤维细胞向MF分化中的作用。研究方法： 1.实验动物和细胞来源选用170-200g雄性SD大鼠，一次性气管内滴注博莱霉素-A5(bleomycin-A5，BLM-A5，5mg/kg)，第14天取肺组织培养肺成纤维细胞，第4代细胞用于实验。 2.细胞培养采用组织块法培养肺成纤维细胞，37℃，浓度5％的CO2，含10％小牛血清的RPMI1640培养基条件下培养。 ***法选择TGF-β1和PDTC的适宜浓度将细胞悬液(细胞浓度为2×105个/ml)接种于96孔板中，培养24小时后，分别加入不同浓度的TGF-β1(1、10、20ng/ml)和PDTC(20、100、500uM)，培养24小时后测定细胞MTT活力，根据MTT结果及参考文献选择TGF-β1和PDTC的适宜浓度。 ***和α-SMA的细胞免疫化学染色将细胞悬液接种于24孔板中，细胞浓度为2×105/ml，每孔加液1ml，进行细胞爬片。实验分别分为以下几组：sham组，TGF-β1组(浓度为10ng/ml)，PDTC+TGF-β1组(PDTC浓度为500uM，TGF-β1浓度为10ng/ml)，PDTC组(浓度为500uM)，各组药物作用24小时。采用细胞免疫化学染色技术，观察CTGF和α-SMA阳性细胞。 5.流式细胞仪检测肺成纤维细胞表达α-SMA 6.统计学分析数据均用均数±标准差((x)±SD)表示，采用SPSS-11.5统计软件包，多个样本均数比较用单因素方差分析(One-WayANOVA)，多个样本均数间的两两比较用最小显著差法(leastsignificantdifference，LSD)，P＜0.05作为判断有显著性差异的标准。研究结果： ***结果。浓度为1、10、20ng/ml的TGF-β1的MTT活力和浓度为20、100、500uM的PDTC的MTT活力与sham组比较没有统计学差异(P＞0.05)，对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞的活性均没有影响。 2.肺成纤维细胞表达CTGF的免疫化学染色结果。TGF-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF，CTGF染色阳性细胞百分率(51.93±4.93％)和平均光密度值(0.413±0.016)与sham组(29.49±2.28％)(0.312±0.017)比较，明显增加(P＜0.05)。PDTC+TGF-β1组的CTGF免疫染色阳性细胞百分率(30.36±2.66％)与TGF-β1组比较，明显减少(P＜0.05)。单独应用PDTC，不能抑制肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF，PDTC组CTGF免疫染色阳性细胞百分率(30.97±2.55％)与sham组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 3.肺成纤维细胞表达α-SMA的免疫化学染色结果。TGF-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达α-SMA的阳性细胞百分率(44.71±2.57％)与sham组(31.6±2.10％)比较，明显增加(P＜0.05)。PDTC明显抑制了TGF-β1诱导的肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达α-SMA，PDTC+TGF-β1组的α-SMA免疫染色阳性细胞百分率(27.10±2.74％)与TGF-β1组比较，明显减少(P＜0.05)。单独应用PDTC，不能抑制成纤维细胞表达α-SMA，PDTC组α-SMA免疫染色阳性细胞百分率(31.85±3.17％)与sham组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 4.流式细胞仪检测成纤维细胞表达α-SMA的结果。TGF-β1组肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达α-SMA的X-Mode(42.45±2.75)与sham组(32.9±1.21)比较，明显增加(P＜0.05)。PDTC+TGF-β1的X-Mode(26.35±7.28)和TGF-β1比较，明显减少(P＜0.05)。单独应用PDTC(30.67±3.04)，与sham组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。研究结论： ***-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF，诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化。 ***抑制肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表

关键词：肺纤维化模型转化生长因子二硫代氨基甲酸吡咯烷肺成纤维细胞

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姜黄素对BLM诱导的肺纤维化模型大鼠CTGF表达的影响

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菏泽医学专科学校学报 2012年第3期24卷 1-3页

作者：薛爱芹王稳李银生菏泽医学专科学校山东菏泽274000 菏泽开发区中心医院新乡医学院

目的观察博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化模型中肺内结缔组织生长因子表达的变化,探讨姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织内结缔组织生长因子表达的影响及姜黄素对肺间质纤维化的干预作用及其可能的机制。方法建立博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤... 详细信息

目的观察博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化模型中肺内结缔组织生长因子表达的变化,探讨姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织内结缔组织生长因子表达的影响及姜黄素对肺间质纤维化的干预作用及其可能的机制。方法建立博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化模型。将健康雄性昆明大鼠96只,随机分为4组,每组24只,分别为空白对照组、模型组、阳性药物对照组和姜黄素干预组。模型组、阳性对照组和姜黄素干预组均一次性滴入博莱霉素(气管内给予5 mg/kg)制作肺纤维化动物模型,空白对照组以同样方法一次性气管内注入等体积的生理盐水。造模后第1天,姜黄素干预组给予姜黄素200 mg/kg/d,阳性对照组给予醋酸泼尼松0.56 mg/kg/d,空白对照组和模型组每天分别灌服等体积的生理盐水。各组大鼠分三批分别在造模7 d、14 d、28 d时随机处死8只,取肺组织:1)行病理切片进行HE染色,观察肺组织肺泡炎程度和肺纤维化情况。2)进行免疫组织化学技术,结合图像分析来检测各组肺组织中结缔组织生长因子蛋白的表达情况。结果空白对照组大鼠结缔组织生长因子表达低微,模型组大鼠结缔组织生长因子的表达水平较空白对照组的正常肺组织明显上升(P<0.01),且与肺纤维化的程度显著相关。姜黄素干预组大鼠和阳性对照组大鼠肺组织中的结缔组织生长因子的表达与模型组大鼠相比明显降低,其差异有统计学意义(P<0.01),但仍高于空白对照组。结论证明了姜黄素对博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化具有明显的防治作用,其机制可能是通过抑制结缔组织生长因子在肺组织中的表达来实现的。

关键词：姜黄素治疗作用肺纤维化模型结缔组织生长因子

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