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胶质细胞谷氨酸转运体-1反义寡核苷酸对脑缺血预处理神经保护效应的抑制作用

生理学报 2008年第4期60卷 497-503页

作者：耿进霞蔡劲松张敏李淑琴孙晓彩羡晓辉胡玉燕李文斌李清君河北医科大学病理生理学教研室石家庄050017

本研究应用胶质细胞谷氨酸转运体-1(glial glutamate transporter-1,GLT-1)的反义寡核苷酸(antisense oligo-deoxynucleotides,AS-ODNs)抑制Wistar大鼠GLT-1蛋白的表达,观察其对脑缺血预处理(cerebral ischemic preconditioning,CIP)增强脑缺血耐受作用的影响,探讨GLT-1在CIP诱导的脑缺血耐受中的作用。将凝闭双侧椎动脉的Wistar大鼠随机分为7组:(1)Sham组:只暴露双侧颈总动脉,不阻断血流;(2)CIP组:夹闭双侧颈总动脉3min;(3)脑缺血打击组:夹闭双侧颈总动脉8min;(4)CIP+脑缺血打击组:夹闭双侧颈总动脉3min作为CIP,再灌注2d后,夹闭双侧颈总动脉8min;(5)双蒸水组:于分离暴露双侧颈总动脉(但不夹闭)前12h、后12h及后36h右侧脑室注射双蒸水,每次5μL,其它同sham组;(6)AS-ODNs组:于分离暴露双侧颈总动脉(但不夹闭)前12h、后12h及后36h右侧脑室注射GLT-1 AS-ODNs溶液,每次5μL,其它同sham组,再根据AS-ODNs的剂量进一步分为9nmol和18nmol2个亚组;(7)AS-ODNs+CIP+脑缺血打击组:于CIP前12h、后12h及后36h右侧脑室注射GLT-1 AS-ODNs溶液,每次5μL,其它同CIP+脑缺血打击组,根据AS-ODNs的剂量进一步分为9nmol和18nmol2个亚组。Western blot分析法观察GLT-1蛋白的表达,硫堇染色观察海马CA1区锥体神经元迟发性死亡(delayed neuronal death,DND)情况。Western blot分析显示,侧脑室注射GLT-1 AS-ODNs可剂量依赖性地抑制大鼠海马CA1区GLT-1蛋白表达。硫堇染色显示,sham组和CIP组海马CA1区未见明显的DND;脑缺血打击组海马CA1区有明显的DND;预先给予CIP可显著对抗脑缺血打击引起的DND,表明CIP可以诱导海马CA1区神经元产生缺血性耐受,对抗脑缺血打击引起的DND;而在GLT-1AS-ODNs+CIP+脑缺血打击组,侧脑室注射GLT-1 AS-ODNs后,大鼠海马CA1区出现了明显的DND,表明GLT-1AS-ODNs通过抑制大鼠GLT-1蛋白表达从而减弱CIP对抗脑缺血打击的神经保护作用。以上结果进一步证实了GLT-1参与CIP诱导的脑缺血耐受。

关键词：脑缺血预处理脑缺血耐受海马胶质细胞谷氨酸转运体-1 反义寡核苷酸大鼠

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舒巴坦对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤的影响

引用

中华神经创伤外科电子杂志 2023年第6期9卷 333-337页

作者：崔鑫张鹏古同男赵艳芝首都医科大学燕京医学院临床医学系北京101300

目的探讨舒巴坦对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤的影响。方法选取雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组和舒巴坦组,每组10只。采用线栓法制备右侧脑缺血再灌注模型。脑缺血后30 min,模型组腹腔注射10μL的生理盐水,舒巴坦组腹... 详细信息

目的探讨舒巴坦对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤的影响。方法选取雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组和舒巴坦组,每组10只。采用线栓法制备右侧脑缺血再灌注模型。脑缺血后30 min,模型组腹腔注射10μL的生理盐水,舒巴坦组腹腔注射10μL的舒巴坦,假手术组不给予任何干预。采用Longa评分评估大鼠的神经功能,Image-ProExpress图像分析脑梗死容积,免疫组化染色检测血清胶质细胞谷氨酸转运体-1(GLT-1)水平。术后30 d接受Morris水迷宫检测学习记忆功能,比较第1、2、3、4、5天的逃避潜伏期。结果假手术组神经功能评分和脑梗死容积为0,舒巴坦组神经功能评分、脑梗死容积明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);3组大鼠的血清GLT-1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中舒巴坦组和模型组的血清GLT-1明显高于假手术组,而舒巴坦组明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。检测第1天,3组大鼠的逃避潜伏期比较,差异无统计学意义(P>0.05);检测第2~5天,3组大鼠的逃避潜伏期比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中舒巴坦组和模型组的逃避潜伏期明显高于假手术组,舒巴坦组明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论舒巴坦可有效改善局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经功能、学习记忆功能,减少脑梗死容积,降低血清GLT-1水平。

关键词：舒巴坦局灶性脑缺血缺血再灌注神经功能脑梗死容积学习记忆功能胶质细胞谷氨酸转运体-1

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