检索结果-内蒙古大学图书馆

世界科学技术-中医药现代化 2008年第4期10卷 43-47页

作者：陈会丛李澎涛潘彦舒华茜杜欢王筠刘元北京中医药大学北京100029

目的:探讨体外模拟脑缺血再灌注损伤条件下及通络救脑注射液干预下脑微血管内皮细胞条件培养液(CMECs-CM)对体外正常培养神经元的影响。方法:先分别进行大鼠大脑微血管内皮细胞和神经元的分离纯化培养及建立体外模拟脑缺血再灌注损伤模... 详细信息

目的:探讨体外模拟脑缺血再灌注损伤条件下及通络救脑注射液干预下脑微血管内皮细胞条件培养液(CMECs-CM)对体外正常培养神经元的影响。方法:先分别进行大鼠大脑微血管内皮细胞和神经元的分离纯化培养及建立体外模拟脑缺血再灌注损伤模型,然后用收集的CMECs-CM 1:1和1:5的浓度作用于体外培养的神经元,MTT法测定神经元的活性、存活率,western-blot检测NF-κB的表达。结果:脑微血管内皮细胞条件培养液可影响神经元生存活性,应用中药通络救脑注射液作用于脑微血管内皮细胞后收集的条件培养液可明显提高神经元的生存活性,可以提高神经元中NF-κB的表达。

关键词：脑微血管内皮细胞神经元脑缺血再灌注条件培养液

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脑微血管内皮细胞黏附分子表达与缺血性脑损伤研究进展

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中国康复理论与实践 2006年第8期12卷 654-655页

作者：刘子旺王玉来北京中医药大学东方医院神经内科北京市100078

脑微血管内皮表达的细胞黏附分子在生理上参与脑组织正常结构和功能的维持,保证内皮细胞层的连续性、通透血脑屏障等功能,在病理过程中具有介导炎性细胞向正常或炎症组织移动或定位等功能,其中由脑微血管内皮细胞表达的免疫球蛋白超家... 详细信息

脑微血管内皮表达的细胞黏附分子在生理上参与脑组织正常结构和功能的维持,保证内皮细胞层的连续性、通透血脑屏障等功能,在病理过程中具有介导炎性细胞向正常或炎症组织移动或定位等功能,其中由脑微血管内皮细胞表达的免疫球蛋白超家族和选择素家族两类黏附分子与缺血性脑损伤的发生、发展有密切关系。作者对脑微血管内皮细胞表达的黏附分子与缺血性脑损伤的研究进展进行了综述。

关键词：脑微血管内皮细胞黏附分子缺血性脑损伤综述

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丹蒌片对Aβ1-40致脑微血管内皮细胞损伤保护作用的机制研究

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中药新药与临床药理 2021年第2期32卷 234-239页

作者：高爱社杨洒张振强宋军营张鹏飞史占江河南中医药大学基础医学院河南郑州450018 河南中医药大学中医药科学院河南郑州450018

目的研究丹蒌片对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导脑微血管内皮细胞(BMEC)损伤的保护作用。方法(1)将大耳白兔BMEC培养在含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的完全培养基中,用Aβ1-40建立BMEC损伤模型。实验分正常组(C)、模型组(M)和晚期糖... 详细信息

目的研究丹蒌片对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导脑微血管内皮细胞(BMEC)损伤的保护作用。方法(1)将大耳白兔BMEC培养在含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的完全培养基中,用Aβ1-40建立BMEC损伤模型。实验分正常组(C)、模型组(M)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)中和抗体组(RAGE-Ab),24 h后使用Western Blot法检测各组血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)、趋化因子受体-5(CCR5)的表达。(2)用丹蒌片制备含药血清,实验分为正常组(10%空白血清培养)、模型组、低浓度用药组(10%丹蒌片低浓度含药血清+Aβ1-40)、高浓度用药组(10%丹蒌片高浓度含药血清+Aβ1-40),24 h后用Western Blot法测定各组细胞上述因子的表达水平。结果(1)与正常组相比,模型组RAGE、VCAM-1、MIP-1β、CCR5表达显著增加(P<0.01),RAGE-Ab组各因子表达水平显著降低(P<0.01);(2)与空白血清组相比,模型组RAGE、VCAM-1、MIP-1β、CCR5表达增加(P<0.001),与模型组相比,丹蒌片含药血清组各因子的表达显著降低(P<0.01)。结论丹蒌片含药血清具有保护Aβ1-40诱导的BMEC损伤的作用,其机制可能与抑制Aβ和RAGE诱发的BMEC趋化反应有关。

关键词：丹蒌片脑微血管内皮细胞 β淀粉样蛋白1-40 阿尔茨海默病兔

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小鼠脑微血管内皮细胞的原代培养与纯化

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解剖学杂志 2007年第5期30卷 530-533,630页

作者：朱玉珍武文田野苹杨继庆李润平第四军医大学生物医学工程系第二军医大学免疫学教研室上海200433 第二军医大学海医系潜水医学教研室上海200433

目的:探讨纯度较高的小鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养。方法:取8～14周龄BALB/c或C57/BL6小鼠,无菌分离脑组织,采用改进的两种方法即2次酶消化和1次密度梯度离心法及1次酶消化和1次密度梯度离心法分离小鼠脑微血管段,接种于涂布... 详细信息

目的:探讨纯度较高的小鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养。方法:取8～14周龄BALB/c或C57/BL6小鼠,无菌分离脑组织,采用改进的两种方法即2次酶消化和1次密度梯度离心法及1次酶消化和1次密度梯度离心法分离小鼠脑微血管段,接种于涂布有Ⅳ型胶原的培养皿上进行原代培养,相差显微镜下观察细胞形态,并以免疫荧光法鉴定Ⅷ因子相关抗原。结果:改进的两种方法均可见内皮细胞在接种后12～16 h从微血管段周围爬出,5～7 d时细胞呈"漩涡状"生长,并可见细胞汇合,90%以上培养的细胞Ⅷ因子相关抗原表达阳性。结论:改进后的两种方法均能进行较高纯度的小鼠腑微血管内皮细胞的分离和原代培养。

关键词：脑微血管内皮细胞细胞,培养的小鼠

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左归降糖通脉方含药血清对晚期糖基化终末产物诱导脑微血管内皮细胞损伤的影响

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中医杂志 2019年第3期60卷 237-241页

作者：李钰佳李定祥马钟丹妮周韩邓奕辉湖南中医药大学中西医结合学院

目的探讨左归降糖通脉方治疗糖尿病血管并发症的可能作用机制。方法将30只大鼠随机分为空白组、中药组和西药组,每组10只。中药组给予左归降糖通脉方36 g/(kg·d)灌胃,西药组给予尼莫地平片18. 35 mg/(kg·d)及格列齐特缓释片27... 详细信息

目的探讨左归降糖通脉方治疗糖尿病血管并发症的可能作用机制。方法将30只大鼠随机分为空白组、中药组和西药组,每组10只。中药组给予左归降糖通脉方36 g/(kg·d)灌胃,西药组给予尼莫地平片18. 35 mg/(kg·d)及格列齐特缓释片27. 5 mg/(kg·d)灌胃,空白组予以4 ml蒸馏水灌胃,均每日1次,连续5天,制备含药血清。将晚期糖基化终末产物(AGEs)设为50、100、200、400 mg/L 4个浓度组,分别作用12、24、48 h 3个时间点,观察AGEs对大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)形态结构改变的影响来筛选最佳干预浓度和时间。将左归降糖通脉方含药血清分为2. 5%、5%、10%3个浓度组,作用于BMECs 24 h后,测定BMECs增殖率来确定左归降糖通脉方中药含药血清的最佳作用浓度。再将BMECs分为空白组、模型组、中药组、西药组,中药组和西药组分别加入相应含药血清进行干预。检测各组细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、细胞间黏附分子1 (ICAM-1)、血管细胞黏附分子1 (VCAM-1)的含量。结果AGEs的最佳干预浓度和时间点为200 mg/L作用24 h,中药含药血清的最佳作用浓度为5%。与空白组比较,模型组上清液中IL-1β、ICAM-1、VCAM-1含量明显升高(P <0. 05);与模型组比较,中药组和西药组IL-1β、ICAM-1、VCAM-1明显下调(P <0. 05)。结论左归降糖通脉方能下调IL-1β、ICAM-1、VCAM-1表达,从而抑制炎症反应,可能是其治疗糖尿病血管并发症的作用机制之一。

关键词：糖尿病血管并发症左归降糖通脉方晚期糖基化终末产物脑微血管内皮细胞炎症因子

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布美他尼对大鼠脑微血管内皮细胞缺氧损伤后增殖的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2014年第6期43卷 615-618页

作者：付佩彩喻志源李彩红唐荣华叶茂斌王伟华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉430030

目的观察钠-钾-氯共转运体1(Na+-K+-2Cl-cotransporter 1,NKCC1)抑制剂布美他尼(Bumetanide)对脑微血管内皮细胞(BMEC)缺氧损伤后增殖的影响。方法将原代培养的大鼠BMEC分为3组:对照组、氧糖剥夺/复氧(OGD/Reo)组和OGD/Reo+Bumetanide(10μmol/L)组。在氧糖剥夺/复氧6、12、24和48h时,用MTT法检测细胞活力,Edu染色以及流式细胞术检测细胞增殖及细胞周期情况。结果氧糖剥夺/复氧6、12、24h,BMEC活力下降,Edu染色阳性率减少且S期细胞减少。而与OGD/Reo组相比,OGD/Reo+Bumetanide组BMEC活力增加[复氧6h:(0.497±0.039)vs.(0.612±0.044)],Edu染色阳性率增加[6h时:(5.742±0.195)%vs.(7.125±0.144)%],且S期细胞增多[6h时:(5.845±0.389)%vs.(7.124±0.542)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论布美他尼可促进缺氧损伤后BMEC的活力及细胞增殖,提示NKCC1通路在BMEC缺氧损伤后的细胞增殖中发挥了重要作用。

关键词：布美他尼钠-钾-氯共转运体1 脑微血管内皮细胞细胞增殖

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小鼠脑微血管内皮细胞的原代培养与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第4期36卷 325-329页

作者：刘昭德马华根唐元瑜福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122 福建中医药大学中医学院福建福州350122

目的探索和建立一种纯度高、操作简单且重复性强的小鼠脑微血管内皮细胞原代培养方法。方法通过剪碎、过细胞筛网等物理方法,结合白蛋白密度梯度离心及化学酶消化法,并以严格控制1 g/LⅡ型胶原蛋白酶消化作用时间15~20 min为首要,从2~3... 详细信息

目的探索和建立一种纯度高、操作简单且重复性强的小鼠脑微血管内皮细胞原代培养方法。方法通过剪碎、过细胞筛网等物理方法,结合白蛋白密度梯度离心及化学酶消化法,并以严格控制1 g/LⅡ型胶原蛋白酶消化作用时间15~20 min为首要,从2~3周龄ICR小鼠脑组织中分离培养出小鼠脑微血管内皮细胞。通过细胞形态学观察和免疫细胞化学染色检测Ⅷ因子相关抗原鉴定所培养的细胞。结果接种24 h,贴壁的血管段周围爬出多角形或短梭状细胞,并逐渐扩散成团簇状;7 d后细胞融合,呈典型的单层、"铺路石样"镶嵌式排列。Ⅷ因子相关抗原细胞免疫化学染色鉴定为阳性,胞质呈棕红色,内皮细胞纯度达95%以上。结论成功建立了一种操作简单、重复性强、目的细胞纯度高的小鼠脑微血管内皮细胞原代培养方法。

关键词：脑微血管内皮细胞原代培养 Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色法

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苏合香对脑微血管内皮细胞氧糖剥夺/复氧损伤的影响

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中国临床药理学杂志 2016年第9期32卷 847-849页

作者：赵培岳少乾马妍朱金墙梁钰彬李霖张萌天津中医药大学中医药研究院天津市中药药理学重点实验室

目的研究苏合香对小鼠脑微血管内皮细胞(b End.3)的保护作用。方法空白对照组给予DMEM培养基于孵箱中正常培养24 h;模型组予以氧糖剥夺8 h/复氧16 h;实验A、B、C、D组分别予以10,50,100,200μg·mL苏合香培养24 h后,再予以氧糖剥夺8... 详细信息

目的研究苏合香对小鼠脑微血管内皮细胞(b End.3)的保护作用。方法空白对照组给予DMEM培养基于孵箱中正常培养24 h;模型组予以氧糖剥夺8 h/复氧16 h;实验A、B、C、D组分别予以10,50,100,200μg·mL苏合香培养24 h后,再予以氧糖剥夺8 h/复氧16 h。用细胞增殖与活性检测试剂盒和均质膜完整性检测试剂盒检测细胞活力和乳酸脱氢酶(LDH)释放量,用酶联免疫吸附法检测b End.3上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量。结果与空白对照组比较,模型组细胞活力明显降低,LDH释放量和细胞上清液中TNF-α和ICAM-1的含量均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,实验A、B、C、D组细胞活力明显升高,LDH释放量明显减少,细胞上清液中TNF-α和ICAM-1的含量不同程度地降低(P<0.05)。结论苏合香能够改善氧糖剥夺/复氧诱导的脑微血管内皮细胞的损伤,其机制可能是通过降低相关炎症因子的表达而发挥脑保护作用。

关键词：苏合香脑微血管内皮细胞氧糖剥夺/复氧损伤炎症炎性因子

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Alpha-黑素细胞刺激素及其新型类似物对小鼠脑微血管内皮细胞产生组织因子的抑制作用

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中国脑血管病杂志 2014年第6期11卷 311-316页

作者：朱玉珍武文田野苹第二军医大学免疫学教研室上海200433 宝鸡职业技术学院检验教研室 721013

目的：研究Alpha-黑素细胞刺激素（α-MSH）及其新型类似物（STY39）对原代小鼠脑微血管内皮细胞（ MBMEC）在脂多糖（ LPS）刺激下产生组织因子（ TF）和组织因子途径抑制物（ TFPI）的影响。方法选用雌性BALB/c小鼠,纯化并原代培养MBM... 详细信息

目的：研究Alpha-黑素细胞刺激素（α-MSH）及其新型类似物（STY39）对原代小鼠脑微血管内皮细胞（ MBMEC）在脂多糖（ LPS）刺激下产生组织因子（ TF）和组织因子途径抑制物（ TFPI）的影响。方法选用雌性BALB/c小鼠,纯化并原代培养MBMEC,培养至57 d,采用免疫荧光法检测Ⅷ因子相关抗原,鉴定MBMEC模型。将MBMEC分为PBS对照组,LPS刺激组,LPS刺激后1、2、3 h加入10-7mol/L的α-MSH或STY39组（LPS＋α-MSH,LPS＋STY39）,共8组,每组4孔。分别在LPS刺激后6 h和8 h收集细胞培养上清液和细胞,应用酶联免疫吸附法检测细胞上清液的TF和TFPI浓度,RT-PCR检测细胞TF mRNA表达水平。结果（1） LPS 可诱导 MBMEC 产生 TF 和TFPI蛋白,细胞培养上清液中TF水平于6 h达到高峰, TFPI水平于8 h达到高峰。（2） LPS刺激 MBMEC后1、2、3 h给予10-7mol/L的α-MSH或 STY39,均可显著降低细胞上清液中 TF蛋白含量（P〈0.01）,尤其在 LPS刺激后1 h给予α-MSH 或 STY39的效果最显著（P 〈0.05）, STY39降低TF含量的作用较α-MSH明显（P〈0.05）；但α-MSH和STY39对LPS诱导MBMEC产生TFPI均没有显著的上调作用。（3）在LPS刺激后不同时间点给予10-7mol/L的α-MSH 或STY39,均可显著下调MBMEC TF mRNA的表达水平（P〈0.01）,其中1 h时间点作用最显著（P〈0.05）,但α-MSH与STY39的作用差异无统计学意义。结论α-MSH和 STY39均能抑制LPS诱导原代 MBMEC 产生 TF 蛋白和表达 TF mRNA,且 LPS 刺激1 h 后给药效果较好；STY39对MBMEC产生TF蛋白的抑制作用优于α-MSH。

关键词： Alpha-黑素细胞刺激素类似物组织因子组织因子途径抑制物脑微血管内皮细胞小鼠

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脑溢安对脑出血大鼠脑及过氧化氢损伤脑微血管内皮细胞NF-κB、ICAM-1表达的影响

脑溢安对脑出血大鼠脑及过氧化氢损伤脑微血管内皮细胞NF-κB、IC...

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作者：智屹惠中南大学

学位级别：博士

目的:观察脑溢安对炎症反应的关键调节因子核因子-κB(nuclearfactor-kappa B,NF-κB)、κB抑制蛋白(inhibitor κB,IκB)及细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在实验性脑出血大鼠脑内及大鼠脑微血管内皮细胞(rat cerebral microvascular endothelial cells,RCMECs)过氧化氢损伤模型中的表达的影响,以期探讨脑溢安治疗脑出血的可能机制及NF-κB与ICAM-1表达的关系.结论:1脑出血后大鼠脑内NF-κB p65、ICAM-1及IκBα表达均上调,脑溢安能下调NF-κB及ICAM-1表达,上调IκBα表达.2脑出血大鼠脑内ICAM-1活化先于NF-κB,与在脑缺血再灌中观察到的现象不同.3过氧化氢损伤RCMECs后,NF-κB p65、ICAM-1及IκBα表达均上调,伴随细胞形态学改变及活力的下降,含脑溢安血清可下调NF-κB p65及ICAM-1表达,上调IκBα表达,并能减轻细胞的损伤改变,提高细胞活力.4在活性氧损伤RCMECs的模型中,NF-κB p65的表达先于ICAM-1,NF-κB抑制剂PDTC能抑制ICAM-1活化,提示在活性氧损伤的条件下,NF-κB作为活化因子参与ICAM-1的调控.5抑制NF-κB及ICAM-1的活性,改善炎症反应,可能是脑溢安治疗脑出血的保护机制.

关键词：脑出血大鼠核因子-κB 抑制蛋白κB 细胞间粘附分子-1 脑微血管内皮细胞脑溢安过氧化氢

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