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基于AMPK/mTOR/ULK1通路探讨醒脑开窍针刺法治疗脑缺血再灌注损伤的机制

针刺研究 2025年

作者：王茸李家正孔庆杰刘腾飞许军峰天津中医药大学研究生院天津中医药大学第一附属医院/国家中医针灸临床医学研究中心针灸科

目的：观察醒脑开窍针刺法治疗脑缺血再灌注损伤的效应并从自噬及腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）/unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)信号通路探讨醒脑开窍针刺法治疗脑缺血再灌注损伤的可能机制。方法：SD大鼠... 详细信息

目的：观察醒脑开窍针刺法治疗脑缺血再灌注损伤的效应并从自噬及腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）/unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)信号通路探讨醒脑开窍针刺法治疗脑缺血再灌注损伤的可能机制。方法：SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组，每组10只。采用线栓法复制脑缺血再灌注大鼠模型。针刺组大鼠按照醒脑开窍针刺法针刺，取“水沟”“内关”“三阴交”，每次20 min，连续干预3 d。Zausinger 6分法评估大鼠的神经功能缺损情况；TTC染色检测大鼠脑梗死体积；HE染色观察大鼠梗死区脑组织的病理形态学变化；透射电镜观察海马组织中神经元超微结构和自噬小体的形成情况。Western blot法检测海马组织微管轻链Ⅰ蛋白3(LC3)-Ⅱ、AMPK、磷酸化（p）-AMPK、mTOR、p-mTOR、p-ULK1和ULK1等相关蛋白的表达水平。结果：与假手术组相比，模型组大鼠神经功能评分降低（P<0.001），脑梗死体积明显增加（P<0.001），梗死区神经元数量减少，排列松散，神经元呈明显病理变化，细胞器数量减少，可见个别自噬小体，LC3-Ⅱ蛋白表达降低（P<0.001）,p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1比值降低（P<0.001）、p-mTOR/mTOR比值升高（P<0.001）。与模型组相比，针刺组大鼠神经功能评分升高（P<0.001），脑梗死体积降低（P<0.001），梗死区神经元数量增多，排列较规整，神经元核膜相对完整，线粒体、内质网等细胞器数量增多，可见部分正常细胞器，可见典型自噬小体的形成，且数量增多，LC3-Ⅱ表达升高（P<0.001）,p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1比值升高（P<0.001,P<0.05）、p-mTOR/mTOR比值降低（P<0.001）。结论：醒脑开窍针刺法可能是通过调控AMPK/mTOR/ULK1轴，诱导并促进细胞自噬，从而改善缺血性脑卒中的神经功能损伤，达到修复脑缺血再灌注损伤的作用。

关键词：脑缺血再灌注损伤醒脑开窍针刺法自噬腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/unc-51样自噬激活激酶1信号通路

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