检索结果-内蒙古大学图书馆

中国粮油学报 2013年第12期28卷 52-56页

作者：范乾程谭玲玲王亚乔利仙王晶珊隋炯明青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室青岛266109

油体蛋白(Oleosin)是一类覆盖在油体表面且仅在种子中特异表达的低分子质量蛋白,能维护油体的稳定性。研究利用花生Oleosin基因的启动子替换了pCAMBIA1301的35S启动子,构建了重组表达载体pCAMBIA1301-Oleosin-pro,并利用花粉管通道法导... 详细信息

油体蛋白(Oleosin)是一类覆盖在油体表面且仅在种子中特异表达的低分子质量蛋白,能维护油体的稳定性。研究利用花生Oleosin基因的启动子替换了pCAMBIA1301的35S启动子,构建了重组表达载体pCAMBIA1301-Oleosin-pro,并利用花粉管通道法导入花生。对T0代转基因植株进行了PCR鉴定和GUS组织化学染色,结果显示:50株转基因植株有9株能扩增出目的条带,阳性率为18%,9株阳性转基因植株中有5株的子叶能被GUS染色。对GUS染色成阳性的转基因植株的子叶进行切片观察,结果显示Oleosin基因启动子驱动的GUS基因在油体蛋白中能够表达。

关键词：花生 Oleosin基因特异性表达花粉管通道法遗传转化 GUS染色

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花粉管通道法导入高粱DNA创造优良小麦新品系的分子聚合育种

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干旱地区农业研究 2013年第2期31卷 6-12,22页

作者：欧巧明崔文娟王炜倪建福王红梅杨芳萍罗俊杰甘肃省农业科学院生物技术研究所甘肃兰州730070

采用优化的花粉管通道法将高粱(Sorghum bicolorL.)基因组DNA导入高感条锈病、籽粒粉质的稳定小麦品系,并借助幼胚培养挽救加代、早代变异筛选等技术,经多代连续选择优良变异系,获得2个稳定的优良变异新品系,其中2001502-23-26两年度位... 详细信息

采用优化的花粉管通道法将高粱(Sorghum bicolorL.)基因组DNA导入高感条锈病、籽粒粉质的稳定小麦品系,并借助幼胚培养挽救加代、早代变异筛选等技术,经多代连续选择优良变异系,获得2个稳定的优良变异新品系,其中2001502-23-26两年度位居省区试第一位,已申请生产试验和品种审定。变异新品系与感病受体小麦比较,某些生物学性状发生明显变异,对条锈病免疫,品质指标得到提升,HMW-GS发生明显变异,Gul D1位点基因发生等位变异,过氧化物酶发生明显变化,说明外源高粱基因导入引起了相应基因表达的变化,地区适应性也相应的较受体不同。这说明异源高粱基因组DNA导入小麦可实现高粱抗条锈性和HMW-GS等优良性状的遗传转育和聚合,达到生物学性状、产量、抗条锈性和品质指标等目标性状得到遗传改良的目的。性状改良的原因,推测可能是高粱抗条锈基因转化和HMW-GS基因生物诱变和多基因聚合的结果,而导入后代HMW-GS的GulD1位点基因的等位变异机理可归结为生物诱变所致,条锈病抗性的变异可能属于高粱抗锈基因的定向转移所致。

关键词：小麦高粱DNA 花粉管通道法高分子量谷蛋白亚基抗条锈分子聚合育种

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花粉管通道法介导小麦抗病相关基因的转化和抗锈性鉴定

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麦类作物学报 2013年第1期33卷 29-33页

作者：张立王建锋王晓杰康振生韩德俊西北农林科技大学/旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100 西北农林科技大学农学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学植物保护学院陕西杨凌712100

为了筛选小麦的新抗病基因,进而培育抗病种质材料,以小麦品种小偃22、小偃6和西农1376为受体,利用花粉管通道法将防御素基因alfAFP、脂质转运蛋白基因LTP和抗菌肽基因spCEMA转入栽培品种中,并对转基因植株进行了目的基因和bar基因的PCR... 详细信息

为了筛选小麦的新抗病基因,进而培育抗病种质材料,以小麦品种小偃22、小偃6和西农1376为受体,利用花粉管通道法将防御素基因alfAFP、脂质转运蛋白基因LTP和抗菌肽基因spCEMA转入栽培品种中,并对转基因植株进行了目的基因和bar基因的PCR鉴定,获得了转化alfAFP基因和LTP基因的转基因后代,总体转化率为0.135%。对转基因后代进行的条锈病抗性鉴定,发现alfAFP基因对小麦抗病性提高有一定的作用。

关键词：转基因小麦花粉管通道法防御素抗菌肽脂质转运蛋白

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海陆棉遗传重组技术和应用研究进展

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华北农学报 2022年第S01期37卷 59-65页

作者：耿立格孙娟郄彦敏王新栋河北省农林科学院粮油作物研究所河北省作物遗传育种实验室河北石家庄050035

海岛棉纤维品质优良,并具有抗逆性强、抗黄萎病等优点。将海岛棉的优异基因用于陆地棉的遗传改良,实现海陆棉遗传重组,一直是棉花种质资源创新和利用研究的重要课题之一。本研究对海陆棉基因组水平上的常规遗传重组杂交技术、外源海岛棉... 详细信息

海岛棉纤维品质优良,并具有抗逆性强、抗黄萎病等优点。将海岛棉的优异基因用于陆地棉的遗传改良,实现海陆棉遗传重组,一直是棉花种质资源创新和利用研究的重要课题之一。本研究对海陆棉基因组水平上的常规遗传重组杂交技术、外源海岛棉DNA导入的基因枪法和花粉管通道法、利用染色体水平上的置换系技术的方法、特点和应用进行了综述。回顾了在应对种间遗传障碍时,遗传学家及育种家进行的多种遗传重组技术策略上的尝试。通过育种家们建立的携带有海岛棉染色体基因的陆地棉背景的染色体置换系,可望筛选出能被育种家直接利用的、稳定的、综合性状好的、或具有优异特性的种质材料,以期对今后海陆棉优异种质创制和利用研究起到促进作用,进而加快棉花育种进程。

关键词：海陆棉遗传重组常规杂交技术基因枪法花粉管通道法染色体置换系

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利用花粉管通道法将BcWRKY2抗旱基因导入玉米的研究

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作物杂志 2013年第1期 32-36页

作者：曹士亮王成波史桂荣祁永红王巍贺强王明泉林忠平东北农业大学农学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省农业科学院玉米研究所黑龙江哈尔滨150086 北京大学生命科学学院北京100871

利用花粉管通道法将含有PPT抗性筛选标记的BcWRKY2转录因子基因导入优良玉米自交系。采用正交设计对玉米品种、导入时间及DNA浓度等条件进行了优化。对T0代种子进行了除草剂抗性筛选,结果表明玉米品种龙抗11授粉后16h进行导入及DNA导入... 详细信息

利用花粉管通道法将含有PPT抗性筛选标记的BcWRKY2转录因子基因导入优良玉米自交系。采用正交设计对玉米品种、导入时间及DNA浓度等条件进行了优化。对T0代种子进行了除草剂抗性筛选,结果表明玉米品种龙抗11授粉后16h进行导入及DNA导入浓度为200ng/μL时效果最佳。对获得的除草剂抗性植株进行PCR及PCR-Southern检测,得到PCR阳性植株71株,初步证明了外源目的基因已整合到玉米基因组中。

关键词：玉米花粉管通道法 BcWRKY2抗旱基因

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苦瓜功能稻的全基因组重测序及精米营养品质分析

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2021年第4期47卷 378-384页

作者：袁洁何登骥何加太詹庆才周昆何艳阳永建魏颖娟陶湘林唐汉军湖南大学研究生院隆平分院湖南长沙410125 湖南省农业科学院水稻研究所湖南长沙410125 湖南省农业科学院生物技术研究所湖南长沙410125 湖南省农业科学院农产品加工研究所湖南长沙410125

针对花粉管通道法导入苦瓜DNA的籼稻子代D9和受体RT,采用IlluminaHiSeq^(TM)平台进行全基因组重测序,分析了精米的基本营养成分、总皂苷成分以及膨胀势和米饭的食味品质。结果表明:苦瓜的部分DNA片段被整合进了受体水稻的DNA中,使生理... 详细信息

针对花粉管通道法导入苦瓜DNA的籼稻子代D9和受体RT,采用IlluminaHiSeq^(TM)平台进行全基因组重测序,分析了精米的基本营养成分、总皂苷成分以及膨胀势和米饭的食味品质。结果表明:苦瓜的部分DNA片段被整合进了受体水稻的DNA中,使生理活性成分总皂苷含量显著提高;苦瓜基因对水稻的营养成分有改善作用,使脂肪含量增加,膳食纤维与灰分的含量有所减少。

关键词：籼稻苦瓜花粉管通道法碱基序列营养品质

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百合新种质遗传转化体系的建立

百合新种质遗传转化体系的建立

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作者：谭平宇北京林业大学

学位级别：硕士

百合(Lilium spp.)是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生球根花卉。野生百合和大多数品种从播种或小鳞茎移栽至开花需2-3年时间,延长了遗传转化至转基因植株开花的周期。因此,本研究以课题组培育的3个短生育期百合新种质为材料,研... 详细信息

百合(Lilium spp.)是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生球根花卉。野生百合和大多数品种从播种或小鳞茎移栽至开花需2-3年时间,延长了遗传转化至转基因植株开花的周期。因此,本研究以课题组培育的3个短生育期百合新种质为材料,研究高效的组培再生体系和农杆菌介导的遗传转化方法;以多个短生育期新种质为材料,通过自交或杂交,探究花粉纳米磁珠转化和花粉管通道介导的遗传转化方法的可行性。本研究为后续百合建立高效遗传转化体系打下基础。主要研究结果如下: (1)建立短生育期新种质的高效组培再生体系。‘粉黛’和‘骄阳’试管鳞茎分别在60g/L和80g/L蔗糖浓度下生长较好。以小鳞片为外植体材料,‘粉黛’和‘骄阳’分别在添加2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA和1.5mg/L 6-BA+0.4mg/L NAA的MS培养基中分化效果较好。以新铁炮百合‘白光2号’新种质ZH101为材料,适宜诱导愈伤组织的培养基为MS+0.5mg/L PIC,适宜胚性愈伤组织增殖和愈伤状态维持的培养基为MS+0.5mg/L PIC。 (2)对不同基因型百合进行抗生素的敏感性试验。‘粉黛’和‘骄阳’小鳞片的潮霉素选择压均为14mg/L;‘粉黛’小鳞片、‘骄阳’小鳞片和ZH101胚性愈伤组织的卡纳霉素亚致死浓度分别为75mg/L、100mg/L和75mg/L。 (3)对3个短生育期百合进行农杆菌介导的遗传转化试验。不同基因型和不同类型受体材料的瞬时转化效率有所不同,瞬时转化效率为愈伤组织>小鳞片>不定芽,ZH101百合胚性愈伤组织的瞬时转化率高达80%。3种百合外植体转化后经筛选分化出抗性芽,经PCR检测筛选出阳性植株,转化效率在0.74-1.52%之间。 (4)对2个结实性高的新种质通过自交和杂交,探究了花粉纳米磁珠转化法。试验结果显示,‘矩阵’和‘金色矩阵’的花粉进行纳米磁珠转化后,有GUS蓝色反应,但花粉活性降低。‘甜心’×‘小海星’和‘甜心’自交转化后的子房膨大率低于常规授粉,分别为13.33%和11.11%。 (5)以3个结实性好的材料进行自交和杂交,探究花粉管通道介导的遗传转化。授粉时涂抹菌液处理和用花粉+花粉萌发液+农杆菌重悬液涂抹柱头进行授粉的处理,均会降低结实率;其中‘White Planet’×岷江百合和岷江百合自交的组合中,授时后涂抹菌液效果较其他处理好,子房膨大率分别为90.91%和40.00%。授粉时注射菌液的雷山2号百合自交后的结实性低于常规授粉,处理后的发芽率达57.49%。

关键词：百合新种质组培再生体系遗传转化花粉纳米磁珠转化法花粉管通道法

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bar基因的亚麻花粉管通道法转化

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中国农学通报 2013年第12期29卷 96-100页

作者：李闻娟张建平陈芳苏文杰甘肃省农业科学院作物研究所兰州730070 甘肃省农业大学兰州730070

为鉴定T1代转基因亚麻植株中抗除草剂基因(bar)整合是否成功。通过花粉管通道法将bar基因导入转化植株,以叶片涂抹法对T1代转化植株进行田间草丁膦最低致死浓度筛选;以最低致死浓度草丁膦进行田间喷施后筛选耐受草丁膦药液的抗性植株,并... 详细信息

为鉴定T1代转基因亚麻植株中抗除草剂基因(bar)整合是否成功。通过花粉管通道法将bar基因导入转化植株,以叶片涂抹法对T1代转化植株进行田间草丁膦最低致死浓度筛选;以最低致死浓度草丁膦进行田间喷施后筛选耐受草丁膦药液的抗性植株,并用PCR检测bar基因阳性的抗性植株数目。草丁膦对T1代转化植株的最低致死浓度为100mg/L。得到耐受草丁膦药液的抗性植株44株,PCR检测结果表明,8株为PCR阳性植株,平均转化率为18.2%。花粉管通道法将bar基因成功转入亚麻基因组。

关键词：花粉管通道法草丁膦 bar基因

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高粱DNA导入水稻后代主要性状分析

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分子植物育种 2021年第9期19卷 3046-3052页

作者：李广信王广元于晓慧梅青王国鹏山西农业大学农学院太原030031

本研究利用花粉管通道法,将高粱无融合生殖系SSA-1(Shanxi sorghum apomict-1)的全基因组DNA导入水稻‘辽盐28号’、‘辽盐6号’两个品种,子代的遗传性状发生了明显变化,经过连续自交选择和鉴定,获得了27个表型稳定的D4代株系。通过田... 详细信息

本研究利用花粉管通道法,将高粱无融合生殖系SSA-1(Shanxi sorghum apomict-1)的全基因组DNA导入水稻‘辽盐28号’、‘辽盐6号’两个品种,子代的遗传性状发生了明显变化,经过连续自交选择和鉴定,获得了27个表型稳定的D4代株系。通过田间种植,对导入株系的抽穗期、分蘖数、株高、千粒重等农艺性状的表型进行了统计分析。结果表明:D4代株系的农艺性状存在广泛变异,部分D4代株系茎秆、穗粒颜色更偏向供体高粱,表明高粱全基因组DNA成功导入受体细胞,并对受体基因的表达产生了影响,与受体亲本相比,导入株系在抽穗期、分蘖数、株高、每穗粒数、每穗粒重、穗长、千粒重等主要性状上都表现出明显变异。进一步对变异株系分析筛选有助于挖掘新种质材料,为选育水稻新品种提供丰富的种质资源。

关键词：高粱无融合生殖系花粉管通道法主要性状遗传变异

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小报春遗传转化体系的建立和花柱二型基因功能验证

小报春遗传转化体系的建立和花柱二型基因功能验证

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作者：付偲僮北京林业大学

学位级别：硕士

花柱二型现象可以促进植物异花授粉,是植物学中的经典范式,是被子植物多样性的核心因素之一,该现象存在于28个科的植物中。小报春（Primula forbesii）是观赏价值较高的报春花科报春花属二年生植物,生长周期短,花量大且花期长,是研究花... 详细信息

花柱二型现象可以促进植物异花授粉,是植物学中的经典范式,是被子植物多样性的核心因素之一,该现象存在于28个科的植物中。小报春（Primula forbesii）是观赏价值较高的报春花科报春花属二年生植物,生长周期短,花量大且花期长,是研究花柱二型现象理想的模式物种。为了研究花柱二型的形成机制,课题组前期对小报春花柱进行转录组测序,经过筛选获得5个在长花柱型植株中高表达的候选基因:PfPIN5、PfPOE1;4、PfGELP10、PfRD21A和PfPGA4。在此基础上,本研究利用VIGS技术分别将5个基因在长花柱和长同型植株中沉默,并对沉默植株的花柱进行转录组测序;构建了小报春花粉管通道法遗传转化技术体系,并将重要候选基因转化小报春。研究结果如下:（1）在长花柱型小报春中沉默PfPIN5、PfGELP10、PfPOE1;4、PfRD21A和PfPGA4五个候选基因,与对照相比,花柱长度显著缩短,分别缩短了37.92%、30.10%、26.63%、18.21%、38.71%,柱头和花药的距离显著缩短,分别缩短了76.60%、84.31%、70.16%、39.56%、90%;在长同型小报春中沉默PfPIN5、PfGELP10、PfPOE1;4、PfRD21A和PfPGA4基因后,与对照相比,花柱长度显著缩短,平均缩短约31-38%。与对照相比,沉默植株的花柱细胞长度显著缩短,平均缩短了36%-70%。沉默PfPIN5、PfPOE1;4、PfRD21A三基因后进行转录组测序,发现差异基因主要富集到核糖体生物合成和细胞壁组织生物合成通路,推测这三个基因可能通过影响小报春花柱细胞的核糖体生物合成和细胞壁组织的生物合成来控制细胞长度;PfRD21A基因还可能通过影响糖代谢控制花柱细胞长度。（2）首次建立了小报春花粉管通道法遗传转化体系:授粉后8-12 h侵染,利用1/2 MS+5%蔗糖（p H=5.6）作为侵染缓冲液,调节农杆菌菌液吸光度值OD值为1.0,侵染前加入浓度为0.02%的Silwet-77,使用无菌注射器在柱头上滴加3滴侵染液是最佳侵染方式,转化率约为5.33%。利用该方法,将4个基因（PfPIN5、PfPOE1;4、PfRD21A、PfGELP10）转入进小报春,获得T0代种子。总之,本研究建立了小报春花粉管通道法遗传转化体系;利用VIGS技术证明PfPIN5、PfPOE1;4、PfGELP10、PfRD21A、PfPGA4通过调控花柱细胞长度来抑制了小报春长花柱型和长同型植株的花柱长度;PfPIN5、PfPOE1;4、PfRD21A可能通过影响小报春花柱细胞的核糖体生物合成和细胞壁组织的生物合成来控制细胞长度。

关键词：小报春 VIGS 花粉管通道法花柱二型基因功能

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