检索结果-内蒙古大学图书馆

林业科学 2016年第8期52卷 68-75页

作者：王银翠周国娜张斌陈明叶高宝嘉河北农业大学林学院保定071000 河北省林木种质资源与森林保护重点实验室保定071000

【目的】研究自然环境条件下剪叶和油松毛虫不同取食刺激程度双重诱导对油松体内蛋白质表达的影响,揭示油松诱导防御反应的蛋白质基础。【方法】在河北省平泉县的油松-山杏混交林中,选取15年生左右生长势一致的油松,进行树上套笼饲养10... 详细信息

【目的】研究自然环境条件下剪叶和油松毛虫不同取食刺激程度双重诱导对油松体内蛋白质表达的影响,揭示油松诱导防御反应的蛋白质基础。【方法】在河北省平泉县的油松-山杏混交林中,选取15年生左右生长势一致的油松,进行树上套笼饲养10头、30头油松毛虫和剪叶处理,以未处理油松为对照,采用双向电泳法测定油松体内蛋白质表达差异。【结果】通过蛋白质点表达量的计算,与对照相比,油松毛虫取食及剪叶刺激后,均有特异表达蛋白点、消失蛋白点、上调蛋白点及下调蛋白点,但不同处理间蛋白点的表达差异不同。对差异蛋白点进行质谱鉴定,数据库检索结果表明,油松毛虫取食后特异表达的蛋白点是叶绿体ATP合酶CF0β亚基、抗坏血酸过氧化物酶、噻唑生物合成酶、Lhcb5蛋白、ATP合酶β亚基以及蛋白类谷胱甘肽S-转移酶,下调表达的蛋白点是蛋白酶亚基和假定蛋白CL304Contig1_01;剪叶刺激后特异表达的蛋白点是tau蛋白类谷胱甘肽S-转移酶和Rubisco加氧酶,下调表达的蛋白点是磷酸甘油酸激酶Ⅰ和核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基。进一步分析表明,取食刺激处理后,胁迫和防御相关蛋白高度表达,并且30头松毛虫取食后,与蛋白合成相关的蛋白质也特异表达;剪叶处理后,胁迫和防御相关蛋白也有特异表达,而且能量代谢相关蛋白下调。说明取食和创伤刺激可明显诱导油松防御有关蛋白的表达、光合作用的增强、蛋白质的合成和能量代谢的降低等防御反应。【结论】取食和剪叶刺激可明显诱导油松防御有关蛋白的高表达、促进光合作用的增强和蛋白质的合成,降低能量代谢等,这些变化应是构成油松防御反应的蛋白质基础。

关键词：油松油松毛虫诱导防御反应取食剪叶蛋白质表达差异

来源：评论

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雏鸡冷应激前后血清中差异蛋白质组学研究

引用

动物营养学报 2017年第5期29卷 1567-1573页

作者：杨玉英刘鹏贺军刘洋姚睿智史宏昭甄莉唐德江李士泽黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319

本试验旨在比较分析雏鸡冷应激前后血清中蛋白质的表达差异,并对重点差异蛋白质进行鉴定。将30只雏鸡随机分为3组,分别为冷应激组、冷适应组和常温对照组,收集各组雏鸡的血液制备血清后进行双向凝胶电泳(2-DE),以获得血清蛋白质表达的2... 详细信息

本试验旨在比较分析雏鸡冷应激前后血清中蛋白质的表达差异,并对重点差异蛋白质进行鉴定。将30只雏鸡随机分为3组,分别为冷应激组、冷适应组和常温对照组,收集各组雏鸡的血液制备血清后进行双向凝胶电泳(2-DE),以获得血清蛋白质表达的2-DE图谱,对2-DE图谱进行差异分析(利用PDQuest 8.0软件),随后采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对差异表达蛋白质进行鉴定,并利用蛋白质印迹(Western blot)方法进行验证。结果显示:通过2-DE对常温对照组、冷应激组和冷适应组雏鸡血清进行分析,得到了比较完整的差异蛋白质数据,共找到差异蛋白质点23个。采用MALDI-TOF-MS技术分析其中几个重复性好且较为明显的蛋白质点,成功鉴定出4个差异蛋白质,其中2个为果糖二磷酸醛缩酶C(ALDOC),是参与葡萄糖、能量代谢通路供能的相关蛋白;随后,对差异蛋白质ALDOC进行Western blot验证,所得结果与2-DE的结果相一致。结果表明,雏鸡冷应激前后血清中蛋白质的表达具有明显的差异,这些蛋白质的表达差异可能与冷应激有关。

关键词：双向电泳冷应激蛋白质组蛋白质表达差异差异蛋白质点

来源：评论

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蛋白质组学技术下人皮肤鳞状细胞癌细胞和基底细胞癌细胞中差异蛋白质分析

引用

实用癌症杂志 2019年第1期34卷 38-41页

作者：王成良青海省交通医院 810000

目的研究分析蛋白质组学技术下人皮肤鳞状细胞癌细胞和基底细胞癌细胞中的差异蛋白质。方法选取购自美国菌种保藏中心的皮肤鳞状的细胞癌的细胞系A-431和皮肤基底的细胞癌的细胞系TE354.T,首先对细胞进行培养,等到细胞生长到培养瓶面的... 详细信息

目的研究分析蛋白质组学技术下人皮肤鳞状细胞癌细胞和基底细胞癌细胞中的差异蛋白质。方法选取购自美国菌种保藏中心的皮肤鳞状的细胞癌的细胞系A-431和皮肤基底的细胞癌的细胞系TE354.T,首先对细胞进行培养,等到细胞生长到培养瓶面的面积91%时候,提取样品的蛋白,使用Bradford方法检测样品蛋白蛋白质的浓度;通过IPG预制的干胶条重水化,进行等电聚焦电泳,并制作11%聚丙烯酰胺凝胶,而后平衡IPG的胶条,随后进行第二向的垂直板的SDS-PAGE电泳,使用考马斯亮兰的染色法对交替进行染色,使用扫描仪对图像进行扫描,得到样品蛋白的双向凝胶点用的图谱,分析图谱找到蛋白质点的差异。结果鳞状细胞系(A-431)的蛋白液在595 nm波长内吸光度为1.104,带入方程计算得出蛋白质的浓度是1150.7μg/ml;基底细胞系(TE.354.T)在595 nm波长内吸光度为0.898,带入方程计算得出蛋白质的浓度是936.1μg/ml。对2种细胞系蛋白双向凝胶电泳的图谱对比分析,在2组凝胶内共有19个蛋白质的斑点表达,差异显著,具有统计学意义(P <0.05),其中在鳞状癌细胞内表达下降有2个蛋白,在鳞状癌细胞内表达上升有13个蛋白,基底的癌细胞内没有检测出有4个蛋白。结论基底细胞系与鳞状细胞系内提取蛋白样品进行的双向电泳图谱内有差异存在,这些差异的蛋白质是影响2种肿瘤在转移方面存在差异的主要因素。

关键词：皮肤鳞状细胞癌皮肤基底细胞癌蛋白质表达差异

来源：评论

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