检索结果-内蒙古大学图书馆

南京中医药大学学报 2024年第9期40卷 932-940页

作者：黄菲仝佳祥刘伟刘梦秋陈婷刘元君张明英吴雨辰魏微赵雨婷田列朱悦南京中医药大学附属苏州市中医医院江苏苏州215007 南京中医药大学药学院江苏省方剂研究重点实验室/江苏省方剂高技术研究重点实验室/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

目的评价蠲痹通络口服液对2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的改善效应。方法小鼠给予高脂高糖饲料联合链脲霉素(STZ)腹腔注射构建2型糖尿病小鼠模型,分别给予阳性药二甲双胍(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))、蠲痹通络口服液低剂... 详细信息

目的评价蠲痹通络口服液对2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的改善效应。方法小鼠给予高脂高糖饲料联合链脲霉素(STZ)腹腔注射构建2型糖尿病小鼠模型,分别给予阳性药二甲双胍(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))、蠲痹通络口服液低剂量(3.9 g·kg^(-1)·d^(-1))与高剂量(7.8 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药35 d。采用热板法检测动物疼痛潜伏期;测定受试动物空腹血糖值、胰岛素值、糖化血红蛋白值;采用生化试剂盒检测小鼠血清总胆固醇(T-CHO)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与氧化应激标志物超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及氧化产物丙二醛(MDA)表达;采用ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6与IL-10水平;采用HE染色考察模型小鼠坐骨神经损伤情况;采用TUNEL法检测小鼠坐骨神经凋亡情况;采用Western blot法检测小鼠坐骨神经凋亡信号通路蛋白cleaved Caspase-3、Caspase-3,神经丝蛋白NF-L、NF-H与氧化应激信号通路蛋白Nrf2、HO-1表达。结果高剂量蠲痹通络口服液缩短模型小鼠热痛反应潜伏期(P<0.01);下调模型小鼠空腹血糖与糖化血红蛋白(P<0.01),上调空腹血浆胰岛素(P<0.01);下调血清T-CHO、TG、LDL-C水平(P<0.01),上调HDL-C水平(P<0.01);下调血清中促炎因子TNF-α、IL-1β与IL-6水平(P<0.05),上调抗炎细胞因子IL-10水平(P<0.01);抑制坐骨神经结构破坏与凋亡(P<0.05);下调凋亡通路蛋白cleaved Caspase-3与Caspase-3的比值(P<0.01);上调坐骨神经组织神经丝蛋白NF-L与NF-H表达(P<0.05,P<0.01);上调抗氧化应激蛋白Nrf2与HO-1的表达(P<0.01)。结论蠲痹通络口服液具有改善2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的作用,可能与其改善氧化应激与炎性应激作用相关。

关键词：蠲痹通络口服液糖尿病周围神经病变坐骨神经凋亡

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蠲痹通络口服液防治糖尿病周围神经病变的临床疗效与作用机制研究

蠲痹通络口服液防治糖尿病周围神经病变的临床疗效与作用机制研究

引用

作者：欧阳晨蕾南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察吴门医派经验方（苏州市中医医院院内制剂）蠲痹通络口服液对糖尿病周围神经病变患者的临床疗效,研究其对血管内皮细胞多因素损伤及人神经母细胞瘤细胞氧化损伤的保护作用。方法:1.临床研究随机选取符合纳入标准的气虚血瘀型... 详细信息

目的:观察吴门医派经验方（苏州市中医医院院内制剂）蠲痹通络口服液对糖尿病周围神经病变患者的临床疗效,研究其对血管内皮细胞多因素损伤及人神经母细胞瘤细胞氧化损伤的保护作用。方法:1.临床研究随机选取符合纳入标准的气虚血瘀型糖尿病周围神经病变患者60例,依据随机对照的原则分为中药治疗组和对照组,每组各30例。对照组予基础治疗和口服依帕司他片、甲钴胺片,中药治疗组在对照组的基础上加予口服蠲痹通络口服液,两组均治疗12周。观察两组治疗前后血糖、血脂、凝血相关指标、中医证候积分、多伦多临床（TCSS）评分的变化情况。2.细胞实验2.1蠲痹通络口服液对血管内皮细胞（HUVEC）多因素损伤的保护作用30只模型大鼠随机分为空白对照组和蠲痹通络口服液给药组,分别灌胃生理盐水和蠲痹通络口服液制成空白血清与含药血清。MTT法先明确合适的过氧化氢（H202）、葡萄糖损伤HUVEC的作用浓度,再检测损伤后各组细胞的存活率以探究不同浓度蠲痹通络含药血清对血管内皮细胞氧化损伤、高糖损伤的保护作用。TUNEL法检测各组高糖损伤HUVEC的凋亡情况,Western Blotting法检测凋亡相关蛋白的表达情况。2.2蠲痹通络口服液对人神经母细胞瘤细胞（SHSY5Y）氧化损伤的保护作用同前实验方法制备空白血清和含药血清。MTT法先明确合适的H2O2损伤SHSY5Y的作用浓度,再检测损伤后各组细胞的存活率以探究不同浓度蠲痹通络含药血清对SHSY5Y细胞氧化损伤的保护作用。TUNEL法检测SHSY5Y在H202损伤条件下的凋亡情况,Western Blotting法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:1.临床研究结果血糖相关指标:两组治疗前后均有显著差异（P＜0.01）:组间对比,中药治疗组治疗后的空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）指标改善程度优于对照组（P＜0.05）;中药治疗组的餐后两小时血糖（2hPG）治疗效果明显优于对照组（P＜0.01）。血脂相关指标:组内对比,中药治疗组治疗前后除高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）无差异,其余均明显改善（P＜0.01）,对照组治疗后低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）指标优于治疗前（P＜0.01）,总胆固醇（TC）较治疗前有所改善（P＜0.05）;组间对比,中药治疗组TC的下降程度优于对照组（P＜0.05）。凝血相关指标:中药治疗组较治疗前明显改善（P＜0.01）,对照组除部分凝血活酶时间（APTT）外,其余指标改善较治疗前差异显著（P＜0.01）;组间对比,中药治疗组的APTT、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）改善优于对照组,（P＜0.01）。中医证候积分:中药治疗组和对照组患者的中医证候积分较治疗前显著下降（P＜0.01）;组间比较,中药治疗组的治疗效果明显优于对照组（P＜0.01）。TCSS评分:两组治疗后TCSS评分较治疗前均明显降低（P＜0.01）;组间比较,中药治疗组的积分下降程度优于对照组（P＜0.05）。中医证候疗效:中药治疗组患者的治疗总有效率为90.00%,对照组患者的治疗总有效率63.33%,中药治疗组的中医证候疗效优于对照组（P＜0.05）。疾病疗效:中药治疗组患者的临床总有效率为90.00%,对照组患者的临床总有效率为56.67%,中药治疗组疾病疗效优于对照组（P＜0.05）。2.细胞实验结果蠲痹通络含药血清具有对抗HUVEC细胞氧化损伤、高糖损伤的作用趋势（与模型组相比,P＜0.05）;TUNEL法检测发现给以不同浓度的蠲痹通络含药血清后,凋亡小体的绿色荧光显著减弱,以高浓度的效应最强。WB法检测发现给以蠲痹通络含药血清后,凋亡相关蛋白的表达显著下降（与模型组相比,P＜0.05）,其中浓度为3%时下降趋势最强。蠲痹通络含药血清具有对抗SHSY5Y细胞氧化损伤的作用趋势（与模型组相比,P＜0.05）;TUNEL法检测发现给以不同浓度的蠲痹通络含药血清后,凋亡小体的绿色荧光显著减弱,以高浓度的效应最强。WB法检测发现给以蠲痹通络含药血清后,凋亡相关蛋白的表达显著下降（与模型组相比,P＜0.05）,其中高浓度的下降趋势最强。结论:蠲痹通络口服液能改善患者的症状体征,调节其糖脂代谢,降低血液粘稠度。细胞实验表明蠲痹通络口服液能改善血管内皮功能、改善血液流变学以减轻缺血性神经细胞损伤,并抗氧化应激修复神经损伤。

关键词：糖尿病周围神经病变蠲痹通络口服液临床疗效作用机制

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