检索结果-内蒙古大学图书馆

临床与实验病理学杂志 2006年第4期22卷 433-436页

作者：汪露祥丁向东杨枫蒋振吴献忠薛花安徽省黄山市人民医院病理科黄山245000 安徽医科大学病理学教研室合肥230032

目的探讨Ki-67及肿瘤转移密切相关的血管内皮细胞生长因子(VEGF)与胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromaltumors,GIST)生物学行为分级的关系。方法选取70例GIST蜡块构建组织芯片,采用免疫组化法联合检测Ki-67及VEGF,并结合病理形态学... 详细信息

目的探讨Ki-67及肿瘤转移密切相关的血管内皮细胞生长因子(VEGF)与胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromaltumors,GIST)生物学行为分级的关系。方法选取70例GIST蜡块构建组织芯片,采用免疫组化法联合检测Ki-67及VEGF,并结合病理形态学及生物学行为分级进行分析。结果①Ki-67阳性17例(阳性率24·3%),其中,极低度侵袭危险性(VLR)0/6例,低度侵袭(LR)危险性1/16例,中度侵袭危险性(IR)3/21例,高度侵袭危险性(HR)13/27例,HR组Ki-67表达与IR、LR及VLR组之间差异有显著性(χ2=13·61,P<0·01);生物学行为分级与Ki-67表达呈正相关(r=0·435,P<0·01)。②VEGF阳性45例(阳性率64·3%),其中,VLR组(0/6例)的阳性表达率低于HR(22/27例)、LR(10/16例)及IR组(13/21例)(χ2=8·34,P<0·01)。梭形细胞型、混合细胞型和上皮样细胞型GIST的VEGF阳性率分别为51·2%(21/41)、82·4%(14/17)及83·3%(10/12),上皮样细胞型和混合细胞型的VEGF表达较梭形细胞型差异有显著性(χ2=7·40,P<0·01);VEGF的表达不但与生物学行为分级呈正相关(r=0·332,P<0·05),而且与病理形态学分型呈正相关(r=0·263,P<0·05)。结论Ki-67和VEGF的表达与GIST生物学行为关系密切,可作为GIST生物学行为的潜在评价指标。

关键词：胃肠道间质瘤血管内皮细胞生成因子 Ki-67

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RNA干扰iNOS基因对舌鳞癌细胞增殖活性及VEGF表达抑制的实验研究

RNA干扰iNOS基因对舌鳞癌细胞增殖活性及VEGF表达抑制的实验研究

引用

作者：杨岚中山大学

学位级别：硕士

舌鳞状细胞癌(tonguesquamouscellcarcinoma，TSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一。手术、放疗、化疗是目前主要的治疗手段，但总的5年生存率仍只有60％左右，患者的生存质量也不高。因此除现有的治疗方式外，针对造成肿瘤细胞无限... 详细信息

舌鳞状细胞癌(tonguesquamouscellcarcinoma，TSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一。手术、放疗、化疗是目前主要的治疗手段，但总的5年生存率仍只有60％左右，患者的生存质量也不高。因此除现有的治疗方式外，针对造成肿瘤细胞无限增殖的特性，在基因水平进行治疗，将不失为一种非常有前途的肿瘤治疗策略。一氧化氮(nitricoxide，NO)是生物体内一种小分子气体，一种结构简单的自由基，具有氧化还原性。它在体内发挥着十分重要的生理功能，参与了调节生物体的循环、神经、免疫等一系列生理、病理过程。大量的临床和实验研究表明，NO对肿瘤发生、发展、转移过程发挥着“双刃剑”的作用。NO在发挥抑瘤作用的同时，还具有促进肿瘤生长、发展、侵袭、转移的作用。而NO最终对肿瘤发挥何种作用，与肿瘤组织局部NO浓度、肿瘤类型、以及肿瘤细胞对NO的敏感性等多种因素有关。近期的研究发现，NO与一些与肿瘤细胞凋亡相关因子相互作用，抑制肿瘤细胞的凋亡，促进肿瘤细胞的增殖。更有研究发现，NO与肿瘤的血管形成密切相关。内源性NO是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)以L-精氨酸为底物氧化合成的。因此了解NOS在体内的表达是衡量内源性NO的重要指标。生物体内的NOS至少有三种类型，分别为神经型(nNOS)、内皮型(eNOS)、诱导型(iNOS)。其中iNOS作用缓慢而持久，其产生的NO量较多。大量的研究表明许多肿瘤细胞中可见iNOS的表达。新生血管的形成是肿瘤的生长和侵袭转移的基础。肿瘤组织必须不断的产生新生血管，才能维持其继续生长。肿瘤血管生成受血管生成促进因子和血管生成抑制因子的共同调控。肿瘤的血管形成则表明二者之间的平衡状态被打破。血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)是肿瘤新生血管形成最重要的细胞因子，通过一系列作用促进肿瘤的发展。近期的研究发现：NO也是促进肿瘤血管形成的细胞因子，并与VEGF相互作用，共同促进肿瘤血管的生成。许多研究都表明，iNOS和VEGF与肿瘤血管生成密切相关。 RNA干扰(RNAinterference，RNAi)是一种由双链RNA(double-strandedRNA，dsRNA)抑制细胞内源性基因表达的现象。它是动植物生物体内普遍存在的一种现象，是生物体在进化上的一种保守的基因组水平的免疫监控机制。自从1998年Fire在对线虫的研究中偶然发现RNAi这一现象以来，RNA干扰技术做为一种新的分子医学研究的手段，由于其高稳定性、高效率性、高特异性、可遗传性和合成简便等特性，很快就成为众多学者进行反向遗传学研究的一种行之有效的分子生物学工具之一。在本课题的研究中，我们采用了RNA干扰技术，通过质粒表达载体的形式，将iNOS基因的特异性短发夹状RNA(shorthairpinRNA，shRNA)片断转染入舌鳞癌Tca8113细胞中。流式细胞仪和MTT法分别检测Tca8113细胞的凋亡和增殖活性的变化情况;通过RT-PCR和Western-blotting等实验检测技术，分别从mRNA水平和蛋白表达水平检测iNOS和VEGF基因的表达改变情况。以进一步探讨iNOS基因是否存在对Tca8113细胞中VEGF基因的表达调控。本研究分两个部分进行：第一部分：RNA干扰iNOS基因对舌鳞癌细胞增殖活性影响的实验研究为研究NO和iNOS对肿瘤细胞凋亡和增殖活性的影响，本实验用脂质体LIPOFECTAMINE2000介导，将由武汉晶赛公司设计并合成的含有iNOS特异性shRNA的pGenesil-1质粒转染入舌鳞癌Tca113细胞株，同时设阴性对照和空白对照。流式细胞仪和MTT法分别检测Tca113细胞的凋亡率和生长曲线的变化情况。免疫组化检测细胞中iNOS的蛋白表达的改变情况。结果发现在脂质体介导的含iNOS特异性shRNA的质粒转染入舌鳞癌细胞后，实验组Tca8113细胞中iNOS蛋白表达显著低于两对照组;而且实验组细胞的凋亡率也明显高于其它两组(P＜0.05);另外通过MTT法绘制生长曲线，发现实验组细胞的增殖活性则受到一定的抑制，肿瘤细胞的增殖要弱于另两对照组。第二部分：iNOS基因沉默抑制Tca8113细胞VEGF表达的实验研究前期实验已证明RNAi能使iNOS基因表达下降，为了能够进一步探讨iNOS基因是否存在对肿瘤细胞VEGF的表达起调控作用，并为后期进行体内和临床实验研究提供理论依据。本实验通过LIPOFECTAMINE2000脂质体介导，将含有iNOS基因的特异性短发夹状RNA(shorthairpinRNA，shRNA)片断的质粒表达

关键词：舌鳞状细胞癌一氧化氮诱导型一氧化氮合酶血管内皮细胞生成因子细胞凋亡细胞增殖活性 RNA干扰基因治疗

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局部应用胰岛素对烫伤创面血管形成影响的研究

局部应用胰岛素对烫伤创面血管形成影响的研究

引用

作者：张宏图山东大学

学位级别：硕士

目的：近年来，胰岛素及血糖调控对烧伤创面的影响日益受到重视。研究资料表明，胰岛素作为体内最重要的合成激素之一，具有促进肝糖原的合成和葡萄糖的转运、增加蛋白质合成和脂肪细胞的脂质贮存的作用。外源性胰岛素对于纠正烧伤后的... 详细信息

目的：近年来，胰岛素及血糖调控对烧伤创面的影响日益受到重视。研究资料表明，胰岛素作为体内最重要的合成激素之一，具有促进肝糖原的合成和葡萄糖的转运、增加蛋白质合成和脂肪细胞的脂质贮存的作用。外源性胰岛素对于纠正烧伤后的负氮平衡，促进创面血管形成有一定的作用。本实验研究通过在深二度烫伤大鼠背部创面局部应用小剂量胰岛素，观察其对血糖浓度和创面新生血管形成的影响，探讨其可能的作用机制，为烧伤治疗中安全应用胰岛素提供可靠的理论依据。方法：选用Wistar大鼠64只，制作10％TBSA深二度烫伤模型，动物随机分成四组，A组即0.1U胰岛素局部创面下浸润注射(16只);B组1.0U胰岛素局部创面下浸润注射;C组0.1U胰岛素腹部皮下注射;D组生理盐水对照组。自伤后一天开始注射，隔日一次，直至创面愈合。HE染色观察不同时相创面病理变化;测定血糖浓度，各组取6只大鼠，于首次注射胰岛素或生理盐水前及注射后1、2、3、4、6、8、10、12、24小时取尾部静脉血，应用血糖仪测定血糖浓度;各组动物分别于伤后3、7、14、19天取创面组织标本(大小约为1.0cm×1.0cm×0.2cm)，立即置入10％甲醛中固定24小时，制作石蜡切片，免疫组织化学方法(SP法)检测CD34、

关键词：胰岛素深Ⅱ烫伤新生血管形成血管内皮细胞生成因子 (VEGF)CD34

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骨髓基质干细胞转基因治疗兔股骨头无菌性坏死的研究

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现代医药卫生 2006年第14期22卷 2129-2131页

作者：陈超张彦陵马保安泉州市第180医院骨科福建泉州362000

目的:探讨激素诱导兔股骨头无菌性缺血坏死通过骨髓基质干细胞转染血管内皮细胞生成因子治疗的实验可能性。方法:体外扩增兔骨髓基质干细胞,将hVEGF165质粒转染兔骨髓基质干细胞,然后将此细胞与同种异体冻干松质骨复合构建重组真核表达... 详细信息

目的:探讨激素诱导兔股骨头无菌性缺血坏死通过骨髓基质干细胞转染血管内皮细胞生成因子治疗的实验可能性。方法:体外扩增兔骨髓基质干细胞,将hVEGF165质粒转染兔骨髓基质干细胞,然后将此细胞与同种异体冻干松质骨复合构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/VEGF165,48只新西兰大白兔成功建立股骨头坏死模型后随机分成3组。第一组:用VEGF转染BMSC与冻干松质骨做载体回植于兔股骨头坏死部位。第二组:BMSC与冻干松质骨复合植入。第三组:单纯冻干松质骨植入。在植入后2、4、和8周对植入物进行形态学及组织学观察。结果:pcDNA3/hVEGF165转染BMSC构件成功,第一组:股骨头坏死情况得到改善。第二组:有改善。第三组:改善不明显。第一组与另外几组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:VEGF转染BMSC复合冻干骨治疗兔股骨头坏死可促进局部血管的早期形成,松质骨复合物可增加骨形成。为临床上VEGF转染BMSC结合冻干骨治疗股骨头坏死提供实验和理论基础。

关键词：骨髓基质干细胞血管内皮细胞生成因子股骨头无菌性坏死

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人脑膜瘤血管内皮细胞生长因子表达的临床意义

引用

中华实验外科杂志 2004年第5期21卷 620-621,F003页

作者：彭彪陈凡帆广州市第一人民医院神经外科 510180

目的　探讨脑膜瘤血管内皮生长因子 (VEGF)基因表达与血管生成和脑水肿的关系。方法　应用免疫组织化学方法检测 3 5例脑膜瘤组织中VEGF基因表达 ;Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体组织化学染色显示微血管 ,用微血管记数 (MVC)测定血管生成 ;... 详细信息

目的　探讨脑膜瘤血管内皮生长因子 (VEGF)基因表达与血管生成和脑水肿的关系。方法　应用免疫组织化学方法检测 3 5例脑膜瘤组织中VEGF基因表达 ;Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体组织化学染色显示微血管 ,用微血管记数 (MVC)测定血管生成 ;从脑水肿与肿瘤本身的体积之比估计脑水肿程度。结果　 3 5例脑膜瘤VEGF表达率 77% (2 7/3 5 ) ,4例可疑染色 ,其中恶性脑膜瘤和血管母细胞型脑膜瘤呈现高表达 (10 0 % ) ;VEGF表达与脑膜瘤血管生成 ,瘤周脑水肿呈显著正相关 (r =0 .682 3 ,P <0 .0 1;r =0 .765 3 ,P <0 .0 1)。结论　VEGF存在于脑膜瘤组织中 ,在脑膜瘤血管生成和瘤周水肿中发挥重要作用。

关键词：脑膜瘤血管内皮细胞生成因子基因表达血管生成

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