检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：吴晓玉武汉大学

学位级别：硕士

第一部分miR-497在角膜新生血管中的表达特性鉴定目的:预测微小RNA 497(micro RNA-497,miR-497)与血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)和成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)的相关性,并鉴定miR-497在小鼠角膜碱烧伤后的表达变化。方法:1.通过生物信息学方法预测可以同时靶向作用于人和小鼠的VEGFA及其受体KDR(VEGFR-2)、FGF2及其受体FGFR1的micro RNAs;2.随后使用雌性C57BL/6野生型小鼠20只,构建小鼠角膜碱烧伤新生血管模型,通过实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q PCR)检测小鼠角膜碱烧伤后0d、2d、4d、7d、14d的miR-497的表达以及VEGFA及其受体KDR(VEGFR-2)、FGF2及其受体的m RNA表达,观察其表达趋势。结果:1.通过基于miRanda、Pic Tar、Target Scan、star Base数据库预测来自miR-15/16/497家族均与人及小鼠的VEGFA及其受体KDR(VEGFR-2)、FGF2及其受体FGFR1存在结合位点;2.q PCR结果显示,在小鼠角膜碱烧伤后,与第0天相比,miR-497在第2天表达升高,于第4天时达到峰值,从第7天到第14天表达逐渐降低,且与第0天相比,角膜碱烧伤后第2、4、7、14天的miR-497 m RNA的相对表达变化具有统计学意义(P<0.05)。同时,VEGFA m RNA、KDR m RNA和FGFR1 m RNA的表达在第4天时达到峰值,第7天到第14天逐渐降低,且与第0天相比具有统计学意义,趋势与miR-497 m RNA的表达趋势一致,而FGF2 m RNA在第4天达到峰值,第7天降至接近基线水平,随后在第14天再次升高。结论:miR-497能同时靶向VEGFA和FGF2,并且在小鼠角膜碱烧伤新生血管模型中,miR-497 m RNA表达升高,在第4天时最高,VEGFA m RNA、KDR m RNA和FGFR1 m RNA的表达趋势与miR-497 m RNA表达趋势一致,FGF2m RNA的表达在第7天有所降低随后再次升高。第二部分miR-497表达变化对人角膜基质细胞和人脐静脉内皮细胞的生物学特性影响目的:验证miR-497能调节VEGFA和FGF2的表达水平,并且能通过VEGFA和FGF2抑制脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的增殖和管腔形成能力。方法:1.构建VEGFA和FGF2的3'UTR野生型和突变型荧光素酶报告质粒,双荧光素酶试验验证miR-497能靶向结合VEGFA和FGF2的3'UTR;2.培养人角膜基质细胞,分别转染空白对照、agomir NC、agomir 497、antagomir NC、antagomir 497、雷珠单抗(Ranibizumab),之后通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测细胞内VEGFA和FGF2的蛋白表达;3.培养HUVECs,分别转染空白对照、agomir NC、agomir 497、antagomir NC、antagomir 497、雷珠单抗(Ranibizumab),之后通过CCK-8细胞增殖实验测定各组的细胞增殖能力,测定各组细胞的管腔形成能力。结果:1.成功构建VEGFA和FGF2的3'UTR野生型和突变型荧光素酶报告质粒,通过双荧光素酶报告基因实验证明miR-497能够靶向结合VEGFA和FGF2的3'UTR,其中对FGF2的活性抑制更为明显;*** Blot检测结果显示,角膜基质细胞中,与空白对照组和agomir NC组对比,antagomir 497组的VEGFA和FGF2的蛋白表达水平升高,agomir 497组的VEGFA和FGF2的蛋白表达水平降低;***的细胞增殖试验结果显示,与空白对照组相比,antagomir 497组的HUVECs的增殖能力增强(3.26±0.61,P<0.01),agomir 497组的HUVECs的增殖能力减弱(0.31±0.08,P<0.01),较雷珠单抗组(0.86±0.22)的抑制效果更好;***的管腔形成实验结果显示,与空白对照组相比,antagomir 497组的管腔形成明显增多,agomir 497组的管腔形成减少,与雷珠单抗组相比,管腔形成更少。结论:***-497能靶向结合VEGFA和FGF2的3'UTR从而抑制他们在RNA水平和蛋白水平的表达;2.过表达miR-497能抑制

关键词：微小RNA-497 角膜新生血管血管内皮生长因子A 成纤维细胞生长因子2 微小RNA-497 双荧光素酶实验人角膜基质细胞人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子A 成纤维细胞生长因子2 微小RNA-497 缺氧诱导因子1α 血管内皮细胞生长因子a 成纤维细胞生长因子2

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体内外观察DHA抑制结肠癌的作用及相关蛋白的表达

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南通大学学报（医学版） 2014年第2期34卷 81-85页

作者：孟优俞士尤周俊东陶敏苏州大学附属第一医院肿瘤内科苏州215006 南京医科大学附属苏州医院肿瘤外科南京医科大学附属苏州医院肿瘤中心

目的:探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)在抑制结肠癌发生、发展中的分子机制,为DHA新型抗癌药物的应用提供理论基础。方法:首先,建立人结肠癌裸鼠动物模型,观察DHA对裸鼠结肠癌移植瘤生长的影响;其次,应用半定量逆转录酶... 详细信息

目的:探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)在抑制结肠癌发生、发展中的分子机制,为DHA新型抗癌药物的应用提供理论基础。方法:首先,建立人结肠癌裸鼠动物模型,观察DHA对裸鼠结肠癌移植瘤生长的影响;其次,应用半定量逆转录酶聚合酶链反应方法,检测环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX2)、低氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子a(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)、软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、固醇携带蛋白2(sterol carrier protein 2,SCP2)、多配体蛋白聚糖3(syndecan 3,SDC3)等多个与肿瘤发生发展密切相关基因的表达情况;最后,通过细胞水平实验对动物体内基因表达实验结果进行验证。结果:与对照组相比,DHA组裸鼠结肠癌移植瘤瘤块体积明显降低,证明DHA可以抑制结肠癌的发生发展;不管是在体内动物水平还是在体外细胞水平,DHA均可导致COX2、HIF-1α、VEGF-A、COMP、MMP-1、MMP-9、SCP2、SDC3基因表达水平明显降低。结论:DHA的抗癌作用涉及多方面、多层次的分子生物学机制。

关键词：结肠癌二十二碳六烯酸环氧合酶2 血管内皮细胞生长因子a 基质金属蛋白酶

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应用黄芪注射液预防子宫肌瘤术后腹部切口脂肪液化的研究

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妇产与遗传（电子版） 2018年第4期8卷 33-36页

作者：王芬余景芳游爱平鄂东医疗集团黄石市妇幼保健院妇产科黄石435000

目的探究黄芪注射液在预防子宫肌瘤术后腹部切口脂肪液化的价值。方法选取2016年6月至2017年3月于鄂东医疗集团黄石市妇幼保健院妇产科行开腹手术的34例子宫肌瘤患者作为研究对象进行前瞻性研究分析,随机分成两组后,对照组采用碘伏常规... 详细信息

目的探究黄芪注射液在预防子宫肌瘤术后腹部切口脂肪液化的价值。方法选取2016年6月至2017年3月于鄂东医疗集团黄石市妇幼保健院妇产科行开腹手术的34例子宫肌瘤患者作为研究对象进行前瞻性研究分析,随机分成两组后,对照组采用碘伏常规处理术后伤口,研究组加用黄芪注射液外敷伤口。Logistic多因素回归分析可能影响切口脂肪液化的因素,包括年龄、体重指数及外敷药物。培养人脐静脉内皮细胞,不同浓度(0、25、50、100 mg/L)黄芪注射液处理细胞,检测细胞增殖及血管内皮细胞生长因子a的mRNA表达。结果研究组的切口脂肪液化发生率显著降低; Logistic多因素回归分析显示年龄及体重指数对切口脂肪液化的发生无显著影响,而黄芪使用则有显著影响(r=0. 456,P=0. 0156);黄芪注射液可显著促进人脐静脉内皮细胞的增殖(P <0. 001)及血管内皮细胞生长因子a mRNA的表达(P <0. 001)。结论术后切口护理中加用黄芪注射液外用后可显著减少切口脂肪液化的发生率,可能与黄芪能够促进血管内皮细胞增殖及血管内皮细胞生长因子a的表达有关。

关键词：脂肪液化黄芪 Logistic回归血管内皮细胞生长因子a

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Alamandine对肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用

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现代消化及介入诊疗 2020年第12期25卷 1566-1570页

作者：宁佐伟李秀梅王亚东李洋南方医科大学南方医院消化科 510515

目的探讨Alamandine对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用及相应的分子机制。方法选取18只Wistar雄性大鼠,随机分为对照(Contorl)组、CCL4组和CCL4+Alamandine组。对照组Wistar雄性大鼠腹腔内以2 ml/kg的剂量注射橄榄油,每... 详细信息

目的探讨Alamandine对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用及相应的分子机制。方法选取18只Wistar雄性大鼠,随机分为对照(Contorl)组、CCL4组和CCL4+Alamandine组。对照组Wistar雄性大鼠腹腔内以2 ml/kg的剂量注射橄榄油,每两周注射一次;CCL4组Wistar雄性大鼠腹腔内以2 ml/kg的剂量注射浓度为40%溶于橄榄油的CCL4,每两周注射一次;CCL4+Alamandine组:CCL4制作肝纤维化模型,在腹腔埋入注射泵并以25μg·kg^-1·h^-1的速度持续注射Alamandine。4周后处死大鼠,取肝组织,行HE染色,进行肝纤维化评分;Masson胶原染色,测定胶原的表达;通过免疫组织化学染色、免疫印迹(Western blot)、组织免疫荧光染色检测血管生成的指标:血管性血友病因子(von Willebrand Factor,vWF),血管内皮细胞生长因子a(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)。结果与Contorl组相比,CCL4组肝纤维化评分,胶原面积,免疫组织化学检测vWF、VEGFA的表达,Western blot检测vWF、VEGFA的表达均明显增高(P均<0.01);免疫荧光检测CCL4组肝组织vWF、VEGFA阳性表达细胞较Contorl组明显增多。与CCL4组相比,CCL4+Alamandine组肝纤维化评分,胶原面积,免疫组织化学检测vWF的表达、VEGFA的表达,Western blot检测vWF的表达、VEGFA的表达均显著下降(P均<0.05);免疫荧光检测CCL4+Alamandine组vWF、VEGFA阳性表达的细胞较CCL4组明显减少。结论Alamandine可抑制肝纤维化大鼠肝窦血管生成。

关键词： Alamandine 肝纤维化肝窦血管生成血管内皮细胞生长因子a 血管性血友病因子

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膀胱尿路上皮癌血管内皮生长因子的表达与微血管密度相关性研究

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中国基层医药 2011年第23期18卷 3173-3174页

作者：李旭东滨州市人民医院泌尿外科山东省滨州256610

目的探讨膀胱尿路上皮癌血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）及临床病理特征的关系。方法采用免疫组化sP法对54例原发性膀胱尿路上皮癌组织中VEGF进行染色，同时计数肿瘤内的MVD，观察VEGF的表达与MVD的关系。结果54例... 详细信息

目的探讨膀胱尿路上皮癌血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）及临床病理特征的关系。方法采用免疫组化sP法对54例原发性膀胱尿路上皮癌组织中VEGF进行染色，同时计数肿瘤内的MVD，观察VEGF的表达与MVD的关系。结果54例原发性膀胱尿路上皮癌组织中VEGF阳性表达率为61．1％（33例），在正常膀胱黏膜组织中未见表达。VEGF阳性组的MVD计数显著高于VEGF阴性组（P〈0．05），而且随着VEGF阳性表达的增强，MVD计数显著增加（P〈0．05）；VEGF在癌组织中的表达随着肿瘤病理分级、TNM分期的增加和淋巴结转移的出现而显著增强（P〈O．05）。结论VEGF的异常表达与膀胱尿路上皮癌MVD增加及恶性进程有关，是判断膀胱癌预后有价值的指标。

关键词：膀胱肿瘤血管内皮细胞生长因子a 微血管密度

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VEGF在缺血性脑血管病中的运用及面临的问题

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中国误诊学杂志 2004年第10期4卷 1620-1622页

作者：周友龙周六合河南中医学院第三附属医院三病区河南郑州450008 河南中医学院第三附属医院

VEGF(vascular endothelial growth factor)是一种高度特异的促内皮细胞生长因子,对生理性血管生成和病理性血管再生都有重要的调节作用,具有促进血管再生,增加血管的通透性及保护神经元等多项功能,基础研究的成果为在缺血性脑血管病临... 详细信息

VEGF(vascular endothelial growth factor)是一种高度特异的促内皮细胞生长因子,对生理性血管生成和病理性血管再生都有重要的调节作用,具有促进血管再生,增加血管的通透性及保护神经元等多项功能,基础研究的成果为在缺血性脑血管病临床运用展现良好的前景,使VEGF正面临临床应用的过渡.

关键词：血管内皮细胞生长因子a 脑缺血脑血管意外

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