检索结果-内蒙古大学图书馆

中华整形外科杂志 2012年第2期28卷 122-126页

作者：李力群高建华鲁峰郑君达何秋香倪彬婷潘盛盛南方医科大学南方医院整形外科广州510515 温州医学院附属第一医院

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）复合血管基质片段细胞（stromal vascular fraction cells，SVFs）细胞疗法对移植颗粒脂肪组织血管化的影响，寻找一种安全、有效、简单的细胞辅助脂肪移植术式... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）复合血管基质片段细胞（stromal vascular fraction cells，SVFs）细胞疗法对移植颗粒脂肪组织血管化的影响，寻找一种安全、有效、简单的细胞辅助脂肪移植术式。方法取患者植皮术后废弃的皮下脂肪，提取SVFs。用DiI染色观察SVFs染色标记情况，锥虫蓝染色观察SVFs活性。将0．3ml待移植的脂肪颗粒分别与0．2ml下列细胞混合：①复合有VEGF的SVFs（A组）；②SVFs（B组）；③DMEM完全培养基（c组）。按照随机化原则将3组脂肪组织混合物分别注射移植于裸鼠背部皮下，每只裸鼠背上注射3个点（共12只）。观察移植物外形、成活情况、湿重、直径，HE染色及CD31染色镜下观察并计数毛细血管密度。使用SPSS16．0进行方差分析检验。结果新鲜提取的SVFs可被Dil标记染色，加用VEGF仍能保持较好的细胞活性，移植术后2个月3组移植脂肪的湿重为：A组（191．90±9．81）mg、B组（177：01±10．50）mg、C组（92．05±8．30）mg，A组〉B组〉C组（P〈0．01）。移植物直径为：A组（0．49±0．24）cm、B组（0．40±0．26）cm、C组（0．32±-0．28）cm，A组〉B组〉C组（P〈0．01）。CD31染色镜下，每高倍镜视野微血管密度：A组（14．58±2．06）个、B组（11．55±2．18）个、C组（7．87±1．55）个，与B组和C组比较，A组较少见纤维结缔组织增生及坏死凋亡细胞。结论结合VEGF因子的SVFs辅助脂肪移植是一种临床可操作性强、简便可行的较理想的细胞疗法，比单纯SVFs更能有效地促进移植脂肪血管化。

关键词：血管基质片段细胞脂肪来源干细胞脂肪移植血管形成

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人血管基质片段联合脂肪干细胞促进裸鼠放射性皮肤损伤的愈合

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山东大学学报（医学版） 2017年第9期55卷 66-72页

作者：朱琳李薇薇刘志凯中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院整形外科协和转化医学中心北京100730 清华大学附属北京清华长庚医院整形外科北京102218 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院放疗科协和转化医学中心北京100730

目的评价人血管基质片段(SVF)联合脂肪干细胞(ASCs)移植对裸鼠放射性皮肤损伤愈合的影响。方法从健康成年女性脂肪抽吸物酶解获取SVF及ASCs。制备裸鼠放射性皮肤损伤模型后,随机选取SVF+ASCs、SVF、ASCs、对照组的创面给予干预。术后7、... 详细信息

目的评价人血管基质片段(SVF)联合脂肪干细胞(ASCs)移植对裸鼠放射性皮肤损伤愈合的影响。方法从健康成年女性脂肪抽吸物酶解获取SVF及ASCs。制备裸鼠放射性皮肤损伤模型后,随机选取SVF+ASCs、SVF、ASCs、对照组的创面给予干预。术后7、14 d观察创面愈合情况;术后第14天取材,行HE染色观察创面炎性反应,免疫组织化学染色计数CD31阳性细胞的分布,Masson染色观察胶原排列情况。结果 SVF+ASCs组14 d时创面愈合完全,对照组创面仍有肉芽组织;ASCs、SVF组创面仍有部分区域未愈合。SVF+ASCs组炎性细胞计数较ASCs组、SVF组及对照组明显减少,微血管计数CD31细胞阳性率明显高于其余3组,Masson染色SVF+ASCs组胶原排列较其他3组整齐。结论 SVF+ASCs联合移植,可促进裸鼠放射性皮肤损伤的愈合,具有良好的应用前景。

关键词：血管基质片段细胞脂肪干细胞放射性皮肤损伤血管化裸鼠

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VEGF-PLA纳米缓释微球SVFs对游离移植脂肪颗粒及脂肪组织工程胶原支架血管化的研究

VEGF-PLA纳米缓释微球SVFs对游离移植脂肪颗粒及脂肪组织工程胶原...

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作者：李力群南方医科大学

学位级别：博士

研究背景: 　　组织工程技术是近来学术界研究热点，细胞疗法和基因疗法是组织工程研究的热点，学术界一直探求一种临床实用性强的安全的辅助组织工程手段。 　　近年来，随着脂肪抽吸术的广泛... 详细信息

研究背景: 　　组织工程技术是近来学术界研究热点，细胞疗法和基因疗法是组织工程研究的热点，学术界一直探求一种临床实用性强的安全的辅助组织工程手段。 　　近年来，随着脂肪抽吸术的广泛开展和应用，自体脂肪颗粒注射移植术已经在国内外得到广泛的重视。自体脂肪颗粒以其无排斥、感染率低、注射后组织相容性好等优点，是目前修复软组织缺损比较理性的填充材料。虽然脂肪组织工程技术理论的发展，为真正实现无损伤修复软组织缺损和真正意义上形态、结构与功能重建开辟了新的途径。但是，脂肪组织工程技术目前还不能实现临床应用，所以目前修复软组织缺损较理想的填充材料是自体脂肪颗粒。 　　自体脂肪颗粒移植在临床上一直备受关注，尤其是负压抽脂术在临床上得到广泛的应用之后，这种移植术被越来越多的临床医生和患者所接受，并在获取、纯化、注射脂肪和提高其存活率等方面不断得到提高。但是，自体脂肪颗粒移植后吸收率可高达30％～50％，这种高吸收率的问题一直不能得到良好的解决，所以移植脂肪成活率较低极大地限制了其在临床上的广泛应用。脂肪组织不仅是储存能量及内分泌器官，还是软组织填充理想的替代物，而且还被认为是成体干细胞的有效来源，因为脂肪组织当中含有多种细胞成分，包括祖细胞成分，这些祖细胞成分可分化成为其他细胞系。脂肪组织当中主要包含脂肪细胞、脂肪干细胞、血管内皮细胞、壁细胞、成纤维细胞、巨噬细胞及细胞外基质成分等，其中脂肪细胞和脂肪干细胞是近年来研究的热点。脂肪干细胞被认为是一种表现脂肪细胞和血管细胞的祖细胞，它位于脂肪细胞之间、血管周围或细胞外基质中，可促进脂肪组织的转归。脂肪干细胞存在于脂肪组织的间质血管碎片中（stromalvascularfraction，SVF），而SVF是干细胞辅助脂肪移植中最重要的组分。通过胶原酶消化，从脂肪组织中分离的多种细胞混合物形成的细胞团就叫做间质血管碎片(SVF)。间质血管碎片中含有丰富的间充质干细胞，可分化为多种谱系，是再生医学、组织工程等最理想的种子细胞。 　　选择合适细胞外基质支架，作为妥当的细胞载体是组织工程的关键，是使SVFs中的ADSCs得以增殖、分化的重要条件。脂肪组织本身含有非常丰富的胶原、蛋白聚糖、纤维粘连蛋白等，这些组织是优秀的细胞外基质。这些年来热门的SVFs细胞辅助脂肪转移技术，既解决了移植脂肪中ADSCs含量低，同时又解决了移植的SVFs缺乏细胞外基质两个问题，并简化了SVFs提取的体外培养、多次离心重悬等步骤，为临床上解决移植脂肪吸收率高的难题提供了一种解决方法。 　　在组织工程材料中加入有活性的生长因子，能够增强工程化组织的血管化，减少吸收率，提高移植组织的成活。血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)又称为血管渗透因子，这种细胞因子具有促进血管渗透的作用，同时还可促进血管内皮细胞增殖和迁移、延长血管内皮细胞寿命、促进血管形成、增强血管通透性和改变细胞外基质等作用。除了对血管的作用，它还与创面愈合、创伤组织修复、炎症和肿瘤发生密切相关。VEGF与VEGF受体之间存在正反馈，VEGF因子局部应用可以诱导血管内皮细胞VEGF及其受体的高表达，导致VEGF效应的放大。但是VEGF在体内应用时因其半衰期短、容易降解等因素使得不能充分发挥其生物学效应。药剂学的缓释技术很好的解决这一难题，它通过微球包埋技术将VEGF包埋于聚乳酸纳米微球中，从而使这种细胞因子能够缓慢的释放，达到对周围环境持续发挥生物学效应的目的。这种缓释技术在脂肪组织工程的研究领域具有很大的研究价值。 　　近年来，组织工程技术的发展迅速，使得很多临床上的难题获得了一种可能性的解决方案。然而，由于组织工程的血管化问题难以解决，大部分的组织工程技术距离临床应用还有很大距离。胶原蛋白是良好的支架材料，其已被美国FDA批准作为人工皮肤材料。对于种子细胞的选择，大部分研究都选择脂肪干细胞。然而由于脂肪干细胞需要培养周期，且操作复杂，临床应用性不强。SVFs作为种子细胞，具有很多优势。以胶原蛋白作为支架材料，以SVFs作为种子细胞构建工程化的脂肪组织，并且以VEGF-PLA缓释微球作为微环境细胞因子，国内外尚未见相关报道。 　　研究目的: 　　 1.临床指导上:希望通过探讨VEGF-PLA纳米缓释微球与SVFs对游离移植脂肪颗粒及脂肪组织工程胶原支架血管化的影响。探索一种临床应用性强的辅助脂肪移植和脂肪组织工程的细胞疗法和基因疗法手段。为下一步将科学研究应用于临床做好理论基础。 　　 2.学术上:基因疗法的细胞因子缓释系统结

关键词：血管基质片段细胞脂肪颗粒移植胶原支架 VEGF-PLA纳米微球缓释系统脂肪组织工程血管化

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脂肪抽吸物中纤维结缔组织的成分分析

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组织工程与重建外科杂志 2020年第1期16卷 30-33页

作者：黄奔蔡磊尹博张心瑜李发成韩雪峰中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院18科北京市100010

目的测定脂肪抽吸物中纤维结缔组织(以下简称"纤维")的蛋白成分及其含量和血管基质片段细胞(Stromal vascular fraction cells,SVFs)的数量。方法获取6名志愿者的脂肪抽吸物,于肉眼下拣选其中的纤维结缔组织并行HE染色观察,We... 详细信息

目的测定脂肪抽吸物中纤维结缔组织(以下简称"纤维")的蛋白成分及其含量和血管基质片段细胞(Stromal vascular fraction cells,SVFs)的数量。方法获取6名志愿者的脂肪抽吸物,于肉眼下拣选其中的纤维结缔组织并行HE染色观察,Western blot检测蛋白成分,ELISA测定蛋白含量,同时测定纤维中和剔除纤维后的脂肪中的SVFs细胞数量。结果HE染色观察显示纤维中含极少量脂肪;Western blot结果显示纤维中含有CollagenⅠ、Laminin、CollagenⅣ和Fibronectin;ELISA结果显示纤维中CollagenⅠ的含量为(5.122±4.581)μg/L、Laminin为(15.876±0.385)μg/L、CollagenⅣ为(4.488±4.822)μg/L、Fibronectin为(10.55±8.403)μg/L,纤维和剔除纤维后的脂肪中的SVFs细胞含量分别为(3.42±1.34)×10^4cells/mL和(1.27±0.45)×10^5cells/mL。结论纤维中主要为细胞外基质,相同体积的剔除纤维的脂肪比纤维中的SVFs含量更多。

关键词：脂肪抽吸物纤维结缔组织蛋白血管基质片段细胞

来源：评论

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细胞疗法优秀种子细胞SVFs的实验研究

细胞疗法优秀种子细胞SVFs的实验研究

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2014年全国中西医结合医学美容学术会议暨第二届中国中西医结合抗衰老微创技术研讨会、第十二届海峡两岸微整形学术研讨会

作者：李力群温州医科大学附属第一医院整形外科

目的：系统探讨血管基质片段(SVF)细胞作为理想的组织工程种子细胞的优势. 方法：0.125％Ⅰ型胶原酶分离消化脂肪组织,获得血管基质片段细胞,用DII染色进行观察.观察其Po代细胞成脂、成骨、成软骨分化情况.观察SVF和Dil标记SVF细胞... 详细信息

目的：系统探讨血管基质片段(SVF)细胞作为理想的组织工程种子细胞的优势. 方法：0.125％Ⅰ型胶原酶分离消化脂肪组织,获得血管基质片段细胞,用DII染色进行观察.观察其Po代细胞成脂、成骨、成软骨分化情况.观察SVF和Dil标记SVF细胞与Ⅰ型胶原支架相容性. 结果：0.125％Ⅰ型胶原酶可快速大量获得血管基质片段细胞,其Po代细胞能成脂、成骨、成软骨分化,这种细胞可用Dil染色标记,与Ⅰ型胶原支架能相容性好,Dil标记前后粘附率分别为SVF组细胞粘附率为:(92.596±2.268)％和(92.488±2.262)％.两组独立样本T检验,t=0.096,P=0.964,差异不具有统计学意义. 结论：SVF细胞可用0.125％Ⅰ型胶原酶消化法,快速大量获得,经培养可成脂、成骨、成软骨分化.并可用Dil标记,与Ⅰ型胶原支架具有良好的生物相容性,是理想的组织工程种子细胞.

关键词：组织工程种子细胞血管基质片段细胞 Ⅰ型胶原支架

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