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目的本研究通过采用职业流行病学和动物实验研究相结合的方法,探讨肌球蛋白轻链2（MLC2）、内皮素-1（ET-1）、5-羟色胺（5-HT）以及纽蛋白（VCL）四种血管损伤因子与局部振动所致血管损伤的相关性,分析其在诊断振动性白指（VWF）中的意义和作用,从而为明确职业性HAVD的发病机制及早期诊断提供科学依据。方法（1）职业流行病学研究:通过问卷调查,采用判断抽样,以61例自述及医生检见有VWF症状的手传振动作业工人为VWF组;以61名未发现VWF症状的手传振动作业工人为振动接触组,以64名非手传振动作业工人为对照组。采集工人血浆后,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中MLC2、ET-1、5-HT以及VCL的表达水平。经相关统计学分析,筛选出与VWF诊断价值最高的指标。（2）动物实验:选取32只雄性SD大鼠作为实验对象,年龄7-8周龄,体重平均为（211.3±11.1）g,随机分为（1）对照组,14只/组;（2）7d振动组:9只/组,连续振动7天;（3）14d振动组:9只/组,连续振动14天。振动条件为每天振动4小时,频率计权加速度为49m/s2,振动方向为单向垂直振动,对照组除不接触振动外其他条件相同。接振完成后,麻醉大鼠,经腹主动脉采血,后解剖鼠腹侧尾中动脉,制作尾部病理切片及超薄切片进行光学及透射电子显微镜下的观察,包括病理形态学及亚细胞结构观察。采用ELISA实验法,检测三组大鼠血浆中MLC2、ET-1、5-HT、以及VCL四种因子的表达水平。利用SPSS 23.0对实验结果进行相关统计学分析。结果（1）3组工人血浆中MLC2的表达水平经多组组间M比较后,发现差异具有统计学意义（χ2=74.920,P<0.05）,经组间两两比较,三组间差异均有统计学意义（P<0.05）,工人血浆中的MLC2表达水平高低依次为VWF组>振动接触组>对照组;3组工人血浆中ET-1的表达水平差异具有统计学意义（χ2=12.62,P<0.05）,经组间两两比较,VWF组工人血浆中ET-1与对照组的表达水平差异具有统计学意义（P<0.05）。5-HT与VCL经多组组间M比较后,发现差异无统计学意义（χ1～2=3.29,χ2～2=4.24,P>0.05）。经单因素及多因素Logistic回归分析在排除年龄、工龄、吸烟和饮酒等混杂因素的影响后发现,MLC2水平升高是VWF发生的危险因素（OR=1.001,P<0.05）;ET-1水平越高,是VWF发生的保护因素（OR=0.975,P<0.05）。进一步绘制ROC曲线,MLC2、ET-1、以及预测概率?三者的AZ从高到低依次为为0.793>0.539>0.765,其中,MLC2与?的AZ比较,差异无统计学意义（P>0.05）,两者的AZ均高于ET-1（P<0.05）。（2）分别将大鼠鼠尾动脉血管做形态学检查后发现:对照组大鼠鼠尾动脉血管在光镜下观察结果形态正常,弹性内膜（IEM）呈连续波浪状,完整光滑,中膜平滑肌细胞排列整齐;电镜下血管平滑肌细胞（VSMC）排列紧密,未见空泡,血管轻微皱缩。7d振动组在光镜下可见部分IEM不连续的现象,在电镜下可见VSMC层空泡化及血管内皮细胞（VEC）肿胀等病理状态。14d振动组在光镜下可见部分IEM不连续甚至消失,电镜下可见VSMC及IEM层出现空泡化并且出现VEC破裂的现象,与7d振动组相比,血管损伤更严重。说明振动暴露时间越长,血管损伤越严重。经ELISA试验发现,三组间MLC2在大鼠血浆中的总体平均表达水平不完全相同,在对照组中表达水平最低,在7d振动组中最高,有差异统计学意义（χ2=3.80,P<0.05）。ET-1与5-HT分别在三组间的总体平均表达水平不全相同,在对照组中总体平均表达水平最高,在14d振动组中最低,且三组间两两比较,表达水平差异具有统计学意义（χ1～2=4.30,χ2～2=17.78,P<0.05）。结论（1）本研究通过职业人群流行病学调查及实验结果分析发现,VWF组工人血浆中MLC2与ET-1水平均与VWF有关联,MLC2作为生物标志物筛查VWF的效果优于ET-1。5-HT与VCL的表达水平与有无VWF的关联有待进一步的研究。（2）通过大鼠鼠尾振动模型的形态学观察结果,发现血管损伤程度随振动暴露时长增加而加重。在大鼠血浆中MLC2、ET-1与5-HT表达水平均与由局部振动引起的血管损伤有关联。未发现VCL的表达水平与有无接触局部振动有关联。

关键词：血管损伤局部振动肌球蛋白轻链2 内皮素-1 5-羟色胺

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在体腹盆腔血管数字化三维模型在预防妇科腹腔镜手术大血管损伤中的价值

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中国实用妇科与产科杂志 2015年第5期31卷 402-407页

作者：陈春林段慧南方医科大学南方医院妇产科广东广州510515

妇科腹腔镜手术中一旦损伤大血管则将导致严重的并发症,术中及时修补挽救固然重要,但预防更为关键。通过分析血管损伤的常见部位及原因,利用在体腹盆腔血管数字化三维模型了解患者个体化血管解剖,并据此在术前制定有针对性的大血管损伤... 详细信息

妇科腹腔镜手术中一旦损伤大血管则将导致严重的并发症,术中及时修补挽救固然重要,但预防更为关键。通过分析血管损伤的常见部位及原因,利用在体腹盆腔血管数字化三维模型了解患者个体化血管解剖,并据此在术前制定有针对性的大血管损伤预防策略,术中实时指导手术操作,规范医师培训。

关键词：在体数字化三维模型血管损伤腹腔镜

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预缺氧对缺氧-复氧引起的离体冠脉血管损伤的保护作用与机理分析

预缺氧对缺氧-复氧引起的离体冠脉血管损伤的保护作用与机理分析

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作者：王英元山西医科大学

学位级别：博士

预缺氧对缺氧--复氧引起的离体冠脉血管损伤的保护作用与机理分析.预缺血(ishemic-preconditeoning, IPC)对心肌缺血一再灌注损伤的保护作用已有大量研究报道.但预缺血的保护效应是仅存在于心肌细胞本身,还是也存大于冠状血管的功能活动... 详细信息

预缺氧对缺氧--复氧引起的离体冠脉血管损伤的保护作用与机理分析.预缺血(ishemic-preconditeoning, IPC)对心肌缺血一再灌注损伤的保护作用已有大量研究报道.但预缺血的保护效应是仅存在于心肌细胞本身,还是也存大于冠状血管的功能活动,目前所知尚少.考虑到缺血性心脏疾患主要与冠状血管功能有关,因此探讨缺血对缺血/再灌注时冠状血能障碍是否有保护效应,直接关系到IPC对冠状血管功能的直接效应,故本工作在离体冠状血管研究了预缺氧(hypoxic-preconditioning,HPC)对缺氧一复氧(hypoxia-reoxygenation,H-R)引起的血管舒张功能障碍的保护作用,并初步分析其作用机理,借以对心肌预缺血的保护作用,从改善冠脉血供角度提供一新的解释.

关键词：预缺氧缺氧--复氧离体冠脉血管损伤预缺血缺血性心脏疾患冠状血管缺血心肌血管舒张功能障碍

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WWC3通过Hippo信号通路抑制血管损伤后内膜增殖

WWC3通过Hippo信号通路抑制血管损伤后内膜增殖

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作者：陈倍佳中国医科大学

学位级别：博士

目的:当今社会经济文化飞速发展，人口老龄化进程加快，动脉粥样硬化、高血压、糖尿病的血管并发症等血管重塑性疾病已经严重地威胁着人类的健康，而经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后的血管再狭窄(restenosis，RS)也同样属于血管重塑性改... 详细信息

目的:当今社会经济文化飞速发展，人口老龄化进程加快，动脉粥样硬化、高血压、糖尿病的血管并发症等血管重塑性疾病已经严重地威胁着人类的健康，而经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后的血管再狭窄(restenosis，RS)也同样属于血管重塑性改变范畴。目前认为，血管重塑的主要病理基础之一是血管壁平滑肌细胞从中膜层向内膜下迁移与增殖。由于这类疾病的发病率高，危害大，并且RS的发生严重影响患者的远期治疗效果，因此备受社会关注。尽管已有大量文献报道血管损伤后引起血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)增殖、迁移及细胞外基质产生的相关机制，然而至今尚未完全明确。因此，继续研究和阐明损伤因素引起的VSMC增殖、迁移及细胞外基质产生的相关机制，为预防和治疗这类疾病提供理论基础，具有重要意义。　　科学家在对果蝇基因进行功能筛选时，第一次发现了Hippo-YAP信号通路。它主要由一些蛋白激酶组成，可以产生磷酸化级联反应，此过程还受到其他调节因子调控，以及转录共激活因子的参与，共同调节器官体积、细胞生长和凋亡。研究发现一些肿瘤发生涉及的分子生物学机制，在血管平滑肌有关的疾病（如动脉损伤后或动脉粥样硬化形成过程中的新生内膜形成）的发病机制中同样存在。近期研究表明，在心血管系统的发生、发育调节中Hippo-YAP通路起着不容忽视的作用，尤其是核心分子YAP不仅对心脏发育有着至关重要的作用，对血管发生以及平滑肌细胞增殖、迁移能力也有重要的调控作用。　　WWC3是人类WWCs蛋白家族(WWC1，WWC2，WWC3)之一，仅有的研究结果显示WWC1能够通过其WW结构域与LATS1结合而影响其磷酸化从而调控Hippo通路，而WWC1，2，3均含有保守的WW，C2，ADDV结构域。因此我们猜想WWC3也可能通过WW结构域与LATS1形成复合体进而调节Hippo信号通路。　　本文目的是探讨血管损伤后血管平滑肌细胞中WWC3的表达变化对Hippo-YAP信号通路的影响及可能的作用机制。　　研究方法:选取体重350-400 g的健康雄性Wistar大鼠，采用颈动脉球囊损伤制备血管狭窄的动物模型。损伤后14天处死动物，分离并取出颈动脉。HE染色观察动物模型的建立，免疫组织化学染色、Western blot检测血管损伤对WWC3及Hippo通路相关因子表达的影响。　　对VSMC（大鼠A10主动脉平滑肌细胞）给予PDGF-BB（10 ng/ml）处理模拟损伤。采用Western blot检测处理前后WWC3及Hippo通路相关因子的表达水平，荧光素酶报告基因检测Hippo信号通路活性，MTT、Transwell、划痕实验等方法分别检测细胞增殖和迁移能力的改变。　　转染WWC3过表达质粒，检测WWC3对Hippo通路的影响。另外上调WWC3表达后再次给予PDGF-BB处理，采用荧光素酶报告基因检测诱导后VSMC中Hippo信号通路活性，Western blot检测LATS1和YAP磷酸化水平、下游靶基因CTGF、和Cyclin E的表达水平，采用MTT、Transwell等方法分别检测细胞增殖和迁移能力的改变。　　为揭示WWC3激活Hippo通路活性的分子机制，验证WWC3影响Hippo通路活性依赖LATS1的存在，并通过与LATS1结合激活LATS活性，我们采用Westernblot、核浆蛋白分离、免疫荧光等方法检测Hippo通路中的关键因子YAP的表达和入核水平，免疫荧光检测VSMC中WWC3与LATS1是否存在共定位，免疫共沉淀检测WWC3与LATS1是否相互作用。构建和转染WWC3-△WW突变体，应用Western blot、免疫共沉淀的方法检测VSMC中WWC3与LATSl的结合情况及对Hippo通路的影响。　　结果:1、大鼠颈总动脉球囊损伤后14天，可见管腔明显狭窄，内膜增生，与对照组比较有显著差异。免疫组化及Western blot结果显示WWC3表达下降，YAP、CTGF和Cyclin E的表达则升高。　　2、应用PDGF-BB处理A10细胞4h后，WWC3的蛋白表达水平逐渐下调，而YAP、p-YAP、CTGF和Cyclin E则表达升高，24h达到峰值水平。荧光素酶报告基因检测显示Hippo信号通路转录子TEAD的转录活性明显增强，MTT、Transwell等检测显示细胞的增殖能力及迁移能力增加。　　3、转染WWC3表达质粒后，与对照组相比Hippo信号通路主要成分p-LATS1和p-YAP表达上调，YAP下调，CTGF和Cyclin E等Hippo信号通路下游靶基因蛋白表达也受到抑制，此时Hippo信号通路转录子TEAD的转录活性则明显下降，细胞的增殖能力降低，迁移能力也受到了抑制。另外，我们在过表达WWC3后同样给予

关键词： WWC3蛋白 Hippo信号通路平滑肌细胞血管损伤

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骨盆骨折血管损伤的解剖学基础

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中国临床解剖学杂志 2004年第2期22卷 116-119页

作者：张奉琪潘进社张英泽彭阿钦河北医科大学第三医院创伤急救中心石家庄050051

目的 :探讨骨盆骨折血管损伤的机制。方法 :2 0具新鲜成年国人骨盆标本 ,采用前后双侧入路解剖 ,观察髂内外血管的走行特点、分型与骨盆韧带、骶丛神经的关系 ,观察血管在骨盆壁上的投影位置 ,测量每一根血管到骨壁的垂直距离 ,观察各... 详细信息

目的 :探讨骨盆骨折血管损伤的机制。方法 :2 0具新鲜成年国人骨盆标本 ,采用前后双侧入路解剖 ,观察髂内外血管的走行特点、分型与骨盆韧带、骶丛神经的关系 ,观察血管在骨盆壁上的投影位置 ,测量每一根血管到骨壁的垂直距离 ,观察各动脉间的侧支吻合情况。结果 :骨盆动脉血管根据口径可分为 3类 :(1)小口径动脉 ,直径小于 3 .0mm。 (2 )中等口径动脉 ,直径 3 .0～ 5 .0mm。 (3 )大口径动脉 ,直径大于 5 .0mm。据血管距骨壁的距离可分为靠近骨壁的血管 (平均距离小于 10 .0mm)及远离骨壁的血管 (平均距离大于 10 .0mm)。阴部内动脉与骨壁关系不明显。骨盆动脉分支间有广泛的吻合支。结论 :骨盆动脉解剖学特点决定了在骨盆骨折中损伤的机率 ,骨盆动脉有广泛吻合支是骨盆动脉出血止血困难的原因。

关键词：骨盆骨折血管损伤动脉解剖学

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动脉临时性桥接技术在四肢骨折合并血管损伤中的应用

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中华创伤杂志 2004年第9期20卷 566-567页

作者：孙如泉刘泽张远林韩广普刘国强吴文元吴新涛沧州中西医结合医院创伤骨科 061001 秦皇岛市石门医院

我院自2000年10月～2003年8月采用临时性桥接技术治疗四肢骨折合并血管损伤12例,取得满意效果.现报告如下.　　1 临床资料　　1.1 一般资料　　本组男11例,女1例;年龄18～68岁,平均34岁.开放性损伤7例,闭合性损伤5例.致伤原因:交通伤8例... 详细信息

我院自2000年10月～2003年8月采用临时性桥接技术治疗四肢骨折合并血管损伤12例,取得满意效果.现报告如下.　　1 临床资料　　1.1 一般资料　　本组男11例,女1例;年龄18～68岁,平均34岁.开放性损伤7例,闭合性损伤5例.致伤原因:交通伤8例,坠落伤4例.致伤部位:股骨干骨折合并股动脉损伤3例,胫骨平台骨折合并?N动脉损伤6例,膝关节脱位合并?N动脉损伤1例,肱骨骨折合并肱动脉损伤2例.血管损伤类型均为动脉完全性断裂.合并伤:深静脉损伤6例,神经损伤4例,失血性休克4例.本组患者伤后至手术时间:5～6 h 1例,6～8 h 2例,8～10 h 7例,10～12 h 2例.

关键词：动脉临时性桥接技术四肢骨折合并症血管损伤桥接材料

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转VEGF基因对血管损伤后修复过程中基质金属蛋白酶表达的影响

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中国病理生理杂志 2003年第1期19卷 64-67页

作者：韦方耿庆山冯建章林华欢蒋祖勋余细勇周钢广东省心血管病研究所心内科广东省人民医院病理科广东省心血管病研究所分子药理室广东广州510100

目的 :观察局部转染血管内皮生长因子 (VEGF)基因对血管球囊拉伤后修复过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子 (TIMPs)表达的影响。方法 :90只新西兰大白兔随机分为 3组 ,Ⅰ组单纯拉伤右髂动脉 ;Ⅱ组拉伤后局部转染真核表达质粒Ad... 详细信息

目的 :观察局部转染血管内皮生长因子 (VEGF)基因对血管球囊拉伤后修复过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子 (TIMPs)表达的影响。方法 :90只新西兰大白兔随机分为 3组 ,Ⅰ组单纯拉伤右髂动脉 ;Ⅱ组拉伤后局部转染真核表达质粒AdtrackCMV ;Ⅲ组拉伤后局部转染pAdtrackCMV -VEGF1 65 ;每组按实验终点随机分为 5个亚组 ,术前一周开始给予高脂饮食至实验终点。取拉伤段髂动脉用于总RNA提取、组织病理和免疫组化检测。结果 :3组动物血脂水平保持在正常的 5 - 1 0倍 ,组间血管损伤程度评分相似 (P >0 .0 5)。Ⅰ、Ⅱ组整个观察过程中均可检测到MMP2、TIMP1 ,2持续表达 ;而转VEGF基因组术后 3d时可检测到MMP1 ,2 ,9、TIMP1 ,2表达 ,1周时达到高峰 ,8周时无表达。结论 :血管损伤后修复过程中存在MMPs和TIMPs表达失衡 ,致使基质堆积 ,并发生病理性重塑 ,而局部转染VEGF基因选择性改变局部MMPs表达。

关键词：血管损伤修复基质金属蛋白酶内皮生长因子

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糖尿病心脏中血管损伤病理特征的研究

引用

西北大学学报（自然科学版） 2018年第6期48卷 776-782页

作者：李凯峰翟蒙恩宋凡江丽青李捷何萌杉梁宏亮金振晓段维勋王四旺空军军医大学药学院陕西西安710032 空军军医大学第一附属医院心血管外科陕西西安710032 西北大学生命科学医学部陕西西安710069

探讨糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)中各级血管的病理改变,对炎症、纤维化、凋亡等病理因素在其中的作用和特点进行深入的研究,以确定更为有效相关的血管损伤与保护病理评价指标。选用雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为正常对照... 详细信息

探讨糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)中各级血管的病理改变,对炎症、纤维化、凋亡等病理因素在其中的作用和特点进行深入的研究,以确定更为有效相关的血管损伤与保护病理评价指标。选用雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为正常对照(Control)组、DCM组。采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素构建DCM小鼠模型,模型建立成功12周后通过HE染色、Masson染色、免疫组织化学法、免疫荧光法、TUNEL染色法,EVG染色法等方法观察血管的结构病变、纤维化及胶原纤维collagen I,collagen III堆积情况、巨噬细胞和中性粒细胞炎性浸润程度,检测心脏组织中的细胞凋亡及血管壁弹力纤维环的破坏情况。DCM各级血管结构病变显著,血管壁增厚(P <0. 01),纤维化显著加重(P <0. 01),炎性细胞聚集浸润。胶原纤维中collagen I,collagen III均在血管壁明显增加,其中以collagen III更为显著;炎性细胞巨噬细胞特异性标记分子CD68、中性粒细胞特异性标记分子Ly6G显示两种炎性细胞均明显增多(P <0. 01),其中巨噬细胞增加更为明显且在血管壁大量浸润(P <0. 01); DCM血管弹力纤维环紊乱,不连续,DCM中细胞的凋亡显著增加(P <0. 01),但特异性发生于血管上的细胞凋亡并不明显。结论DCM中血管病变严重,是病变心脏组织中纤维化最明显、炎性细胞浸润为最严重的部位。血管壁结构紊乱,但与特异性发生于血管的细胞凋亡相关性不大,炎症反应和纤维化是其主要的损伤因素。其中,纤维化以collagen III增加最为显著,炎性细胞对血管的直接浸润以巨噬细胞为主。因此,胶原纤维collagen III和巨噬细胞浸润强度可作为DCM血管损伤与保护的有效评价指标。

关键词：糖尿病心肌病血管损伤炎症纤维化凋亡病理特征

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