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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

1 篇 学位论文

馆藏范围

1 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

1 篇 医学
- 1 篇 临床医学

主题

1 篇 血脑屏障渗漏
1 篇 mir-21-5p
1 篇 创伤性脑损伤
1 篇 血管生成修复
1 篇 神经-血管单元
1 篇 继发性脑损伤
1 篇 细胞凋亡

机构

1 篇 天津医科大学

作者

1 篇 葛歆瞳

语言

1 篇 中文

检索条件"主题词=血管生成修复"

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详细简洁

排序：

miR-21-5p对颅脑创伤后神经-血管单元修复的影响及作用机制研究

miR-21-5p对颅脑创伤后神经-血管单元修复的影响及作用机制研究

引用

作者：葛歆瞳天津医科大学

学位级别：博士

研究目的:创伤性颅脑损伤(TBI)致残、致死率高,其所致的继发性脑损伤与TBI预后密切相关。神经-血管单元(NVU)是由神经元、神经胶质细胞、血管内皮细胞及细胞外基质等构成的功能单元,通过其中各种成分的相互作用维持脑组织内环境稳态。促... 详细信息

研究目的:创伤性颅脑损伤(TBI)致残、致死率高,其所致的继发性脑损伤与TBI预后密切相关。神经-血管单元(NVU)是由神经元、神经胶质细胞、血管内皮细胞及细胞外基质等构成的功能单元,通过其中各种成分的相互作用维持脑组织内环境稳态。促进TBI后NVU损伤修复是治疗继发性脑损伤、救治TBI的关键。mi RNAs在TBI领域中的研究报道尚少。我所在课题组的前期研究发现,TBI大鼠创伤侧大脑皮层mi R-21-5p表达量较伤前明显升高。此外,初步证实mi R-21-5p表达水平的升高可以减轻脑组织细胞凋亡,并改善TBI大鼠的神经功能预后。本实验将通过动物实验,进一步阐明mi R-21-5p在NVU损伤修复中的作用及机制,为探索TBI后mi RNAs治疗的新策略提供理论依据。方法:1.应用q RT-PCR及mi RNA原位杂交+免疫荧光双染技术,检测TBI后mi R-21-5p在创伤灶脑组织的表达变化,及其在神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞及脑微血管内皮细胞中的原位表达变化。2.通过改进的神经功能评分及水迷宫实验,评价TBI大鼠神经功能;应用TUNEL法细胞凋亡检测,评价mi R-21-5p对脑组织细胞凋亡的影响;应用免疫荧光法检测脑微血管密度,评价mi R-21-5p对脑组织血管生成修复的影响;通过脑组织干湿重检测、血脑屏障(BBB)Evans Blue渗漏量检测及紧密连接蛋白(Occludin及Claudin-5)定量检测,评价mi R-21-5p对BBB通透性的影响。3.应用Western Blot和q RT-PCR技术,检测mi R-21-5p可能的作用靶点PTEN、AKT信号通路及其下游蛋白(凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3;血管生成及稳定性相关因子Ang-1、Tie-2)的表达变化,探讨mi R-21-5p影响细胞凋亡、血管生成修复及BBB通透性的相关机制。结果:1.(1)TBI后,创伤灶脑组织mi R-21-5p表达量自伤后6h起逐渐升高,于伤后3d达峰,随后逐渐下降,于伤后14d降低至假手术组大鼠水平;且mi R-21-5p在神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞、脑微血管内皮细胞(BMVECs)中的原位表达水平均有不同程度的升高。(2)在TBI前后,mi R-21-5p在脑神经组织中均主要表达于神经元及星形胶质细胞。(3)通过侧脑室注射脂质体携带的mi R-21-5p agomir/antagomir,可以上调/下调创伤灶脑组织于伤后6h、1d及3d的mi R-21-5p表达水平,且同时上调/下调mi R-21-5p在以上细胞中的原位表达水平。2.(1)TBI后,脑组织mi R-21-5p表达水平的升高可以改善神经功能预后。(2)mi R-21-5p的表达可以抑制脑组织细胞凋亡。(3)mi R-21-5p的表达可以促进脑组织血管生成修复。(4)mi R-21-5p的表达可以减轻BBB渗漏。3.(1)TBI后,脑组织mi R-21-5p的表达量可以影响凋亡相关蛋白的表达水平。(2)mi R-21-5p可以在转录后水平靶向抑制脑组织PTEN基因的表达,并促进Akt磷酸化。(3)mi R-21-5p的表达可以促进脑组织血管生成及稳定性相关因子Ang-1及Tie-2的表达。结论:***后,创伤灶脑组织mi R-21-5p表达水平升高,且在神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞、脑微血管内皮细胞中的原位表达水平均有不同程度的升高。***后,mi R-21-5p通过在转录后水平抑制靶基因PTEN的表达,激活Akt通路,从而调控下游凋亡相关蛋白的表达,产生抑制脑组织细胞凋亡的作用。***后,BMVECs表达的mi R-21-5p通过激活Ang-1/Tie-2通路,产生促进脑组织血管生成修复、减轻BBB渗漏的作用。***后,mi R-21-5p可以通过上述作用,保护神经-血管单元,减轻继发性脑损伤,从而改善TBI预后。*** R-21-5p是TBI后继发性脑损伤的潜在治疗靶点。

关键词：创伤性脑损伤 miR-21-5p 神经-血管单元继发性脑损伤细胞凋亡血管生成修复血脑屏障渗漏

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